على غرار الخلايا الجذعية المكونة للدم (HSCs) ، توجد الخلايا الجذعية المكونة للدم داخل البيئة المكروية للعظام. ومع ذلك ، على عكس الخلايا الجذعية السرطانية ، يوجد حاليا نقص في علامات سطح الخلية المقبولة عالميا والتي يمكن استخدامها لتحديد SSCs1،2،3 بشكل مستقبلي. ومع ذلك ، تظهر أنظمة الثقافة المختبرية وفحوصات إعادة التكوين في الجسم الحي أن نسبة من BMSCs لديها القدرة على دعم تكون الدم ، فضلا عن القدرة على التمايز إلى جميع خلايا السلالات الوسيطة4،5. وبالتالي ، في حين أن BMSCs تمثل مجموعة غير متجانسة للغاية ، فإن نسبة من هذه الخلايا لها سمات الخلايا الجذعية الحسنة النية ، كما هو محدد من خلال قدرتها على التجديد الذاتي وإعادة تكوين جميع خلايا أنسجتها الأصلية. علاوة على ذلك ، على عكس استخدام علامات سطح الخلية ، يمكن عزل BMSCs بسرعة بناء على التزامها السريع ببلاستيك زراعة الأنسجة6،7. لهذه الأسباب ، غالبا ما تستخدم BMSCs كبديل لSSCs 5.
بينما تم استخدام الالتزام التفضيلي ببلاستيك زراعة الأنسجة (TC) لعزل BMSCs بنجاح من الأنسجة البشرية ، فإن نماذج الفئران تمثل تحديات إضافية لهذه الطريقة. والجدير بالذكر أنه نظرا لأن الخلايا المكونة للدم في الفئران لديها القدرة على الالتصاق بكل من بلاستيك TC و BMSCs ، يحدث تلوث عالي المكونة للدم في هذا النظام النموذجي ، مما يعيق تفسير البيانات التي تم إنشاؤها باستخدام طريقة العزلهذه 6.
والجدير بالذكر أن BMSCs موجودة في البيئة المكروية للعظام حيث تتراوح توترات الأكسجين من 1٪ -4٪ 8. ومع ذلك ، في ظل ظروف زراعة الأنسجة القياسية ، يتم الحفاظ على حاضنات زراعة الخلايا عند مستويات الأكسجين في الغلاف الجوي بنسبة 21٪ ، وهو ما يمثل مستويات فوق الفيزيولوجية. لتسليط الضوء على الأهمية الوظيفية لهذه الاختلافات ، يرتبط زراعة الخلايا ذات الأصول الوسيطة بنسبة 21٪ من الأكسجين بزيادة موت الخلايا9،10. علاوة على ذلك ، فقد أظهرنا مؤخرا أن خلايا الدم والخلايا الوسيطة تستجيب بشكل تفاضلي لتوترات الأكسجين المنخفضة. على وجه التحديد ، هناك انخفاض كبير في أعداد الخلايا المكونة للدم CD45 + عندما يتم الحفاظ على ثقافات BMSCs في توترات منخفضة من الأكسجين. في الواقع ، لاحظنا انخفاضا بنسبة 90٪ في الخلايا المكونة للدم CD45 + باستخدام هذه التقنية11.
هنا ، نشارك بروتوكولا يمكن تنفيذه بسهولة للمختبرات لتقليل التلوث المكونة للدم بشكل كبير وتحسين نقاء الخلايا الوسيطة أثناء الزراعة الروتينية ل BMSCs.