تقنيات التشريح وأخذ العينات النسيجية للقلب في النماذج الحيوانية الكبيرة لأمراض القلب والأوعية الدموية

ملخص

نظرا للتشريح المعقد ، يمكن أن يكون من الصعب تنفيذ بروتوكول تشريح وحصاد قابل للتكرار باستمرار لعينات القلب. تعرض هذه المخطوطة العناصر الرئيسية لبعض بروتوكولات تشريح القلب القياسية، مع تسليط الضوء على كل من نهج الفحص الإجمالي ومواقع أخذ العينات المستخدمة عادة للفحص النسيجي المرضي.

الملخص

يعد الفحص الإجمالي القياسي وأخذ العينات عنصرين رئيسيين في إمكانية تكرار ونجاح الدراسات التجريبية لأمراض القلب والأوعية الدموية التي أجريت على الحيوانات الكبيرة. بالنظر إلى التشريح المعقد للقلب ، والاختلافات بين الأنواع ، وأنواع التفاعلات التعويضية والمرضية ، فإن البروتوكولات المتسقة يصعب تنفيذها. عادة ما يتم تكييف استخدام بروتوكولات التشريح المتعددة لتناسب تجربة القطاع الأولي ، ولا يزال التفضيل الشخصي مصدرا للتباين التجريبي وبين المراقبين. هنا ، الهدف هو تقديم السمات والمعالم التشريحية الرئيسية ، وبروتوكولات التشريح ، ومعايير أخذ العينات النسيجية للقلب في بعض الأنواع شائعة الاستخدام (بما في ذلك الكلاب والخنازير والمجترات والقطط) كنماذج لأمراض القلب والأوعية الدموية.

يتم عرض بروتوكولين قياسيين للفحص الإجمالي هنا. أولا ، طريقة التدفق الداخلي والخارجي ، والتي تتبع اتجاه تدفق الدم الفسيولوجي عبر القلب والأوعية الكبيرة (تستخدم بشكل متكرر في الكلاب والمجترات والخنازير) ، وثانيا ، تقنية التشريح المكونة من أربع غرف (تتمثل في القطط). يمكن تكييف كلتا التقنيتين مع أي نوع في ظروف تجريبية معينة. تشمل بروتوكولات أخذ العينات جميع مجالات الاهتمام (العقدة الجيبية الأذينية ، البطينين ، الحاجز بين البطينين ، الأذينين ، الصمامات ، والشريان الأورطي) ، وإذا تم تنفيذها بشكل صحيح ، فقم بتحسين كل من قابلية التكرار والموثوقية للدراسات التجريبية.

المقدمة

نظرا للتشريح المعقد والصرامة المبكرة ، والتي يمكن أن تتداخل مع تقييم سمك جدار القلب ، فإن الفحص الإجمالي للقلب يمثل تحديا وعرضة للعديد من الأخطاء المتعلقة بالتقنية أو التفسير. يتم تضخيم ذلك من خلال الاختلافات المورفولوجية بين الأنواع وحقيقة أن العديد من أمراض القلب السريرية الرئيسية (بما في ذلك الحالات المبكرة من أمراض القلب التاجية والتليف والتهاب الشرايين والداء النشواني) لا ترتبط بأي تغييرات جسيمة ، كونها ، في جوهرها ، أمراض نسيجية. يمكن لبروتوكول التشريح الموحد وحصاد العينات النسيجية أن يحقق الاتساق بين المراقبين ، وفي الوقت نفسه ، قابلية المقارنة والتكرار للدراسات التجريبية لأمراض القلب والأوعية الدموية.

تم جمع العينات من كلبين (Ca....

البروتوكول

حصل البروتوكول التجريبي على اتفاقية أخلاقيات بيولوجية (رقم 311 من عام 2022) وتمت الموافقة عليه من قبل لجنة أخلاقيات البيولوجيا بجامعة العلوم الزراعية والطب البيطري كلوج نابوكا ، وفقا لكل من التشريعات الوطنية (القانون رقم 43 لعام 2014) والأوروبية (توجيه الاتحاد الأوروبي رقم 63 من عام 2010). انظر جدول المواد للحصول على تفاصيل حول جميع المواد والأدوات المستخدمة في هذا البروتوكول.

1. بروتوكول Necropsy

ملاحظة: يوصى باستخدام نفس بروتوكول النخر لجميع الأنواع المعروضة بسبب سهولة الوصول إليه عند تنفيذه ^2,12. تمثل الخطوات التالية الن....

النتائج

تم استخدام هذا البروتوكول لتصور السمات التشريحية وجمع عينات للفحص النسيجي للقلب في أربعة أنواع مختلفة (الكلب والقط والخنزير والبقرة). تم تكرار بروتوكول النخر في كل نوع من الأنواع المذكورة أعلاه ولكن تم توضيحه فقط في الكلاب. يبدأ بروتوكول النخر بفحص خارجي شامل للجسم (الشكل 1A) (بما في ذلك الجلد والغدد الليمفاوية القابلة للاستكشاف والغشاء المخاطي الخارجي) ، وقياس الوزن الكلي ، وتسجيل الحالة العامة للحيوان. بعد الفحص الخارجي ، يستمر النخر مع سلخ جزئي للجسم (موجه لفحص العضلات تحت الجلد والعضلات .......

المناقشة

عند تنفيذ البروتوكول الحالي ، يجب النظر بعناية في العديد من الخطوات الحاسمة لتحقيق نتائج متسقة. في الحيوانات الصغيرة ، تختلف قياسات القلب عن تلك الموجودة لدى البالغين (بما في ذلك سمك جدار البطين) ، وبشكل عام ، يمثل القلب نسبة أكبر من وزن الجسم^11,12. يمكن قياس درجة تضخم البطين كميا من خلال تطبيق صيغة وزن عامة ، وهي النسبة بين البطين الأيسر بالإضافة إلى الحاجز مقسوما على وزن البطين الأيمن الحر ، والذي ، في ظل الظروف العادية ، يجب أن يكون 2.8-4.0 في الحيوانات الناضج.......

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
محلول ملحي 0.9٪	ب. براون ميلسونجن AG		لغسل كل الدم والجلطات الدموية من القلب.
10٪ الفورمالين المحايد المخزن المؤقت (NBF)	؛ Q Path	11699404	مواد لجمع عينات الأنسجة المرضية.
ملقط قطع العظام	HELEN SRL	LS109HV	أداة متينة لقطع العظام.
طموح لوح التقطيع		86304	لتسهيل التلاعب وقطع الأعضاء.
محلول إزالة الكلس	Thermo Scientific TBD-2	6764004	خليط 1: 1 من حمض الفورميك 8٪ وحمض الهيدروكلوريك.
الكاميرا الرقمية	كانون	PowerShot SX540 HS	لتوثيق التصوير الفوتوغرافي والفيديو.
ملقط	MKD-Medicale	15-430	أدوات التشريح.
أشرطة نسيجية	Q Path	720-2215	مواد لجمع عينات علم الأنسجة المرضية. الأبعاد: 3 & مرات ؛ 2.5 & مرات ؛ 0.4 سم
سكين	TEHNO FOOD COM SERV SRL	D2006 / 15	شفرة حادة لقطع الأنسجة الرخوة.
قفازات اللاتكس	MKD-Medicale	SANTEX-S	معدات الحماية.
قناع	MKD-Medicale	21221	معدات الحماية.
أطباق بتري	MKD-Medicale	0598-1V	مواد لجمع عينات الاختبار المساعدة.
متلقي البلاستيك Corning	Gosselin	TP200-02	مواد لجمع عينات الأنسجة المرضية.
مقياس	ESPERANZA	MEEKS008	لوزن الأعضاء.
ميزان	الصفقات البيضاء	72	لوزن المواضيع.
مشرط	MKD-Medicale	10322E	شارب لقطع الأنسجة الرخوة.
مقص	MKD-Medicale	13-260	أدوات التشريح.
فرك	MKD-Medicale	410100-52	معدات الحماية.
محاقن	MKD-Medicale	10573EU	مواد لجمع عينات الاختبار المساعدة.

W04479004 شفرة