مقالة منهجية

مؤشرات الحث والتقييم المتنوعة لالتهاب الدماغ والنخاع المناعي الذاتي التجريبي

DOI:

10.3791/63866

⸱

سبتمبر 9, 2022

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Putuo People's Hospital, Shanghai Key Laboratory of Signaling and Disease Research, School of Life Sciences and Technology, Tongji University, 2National Laboratory of Biomacromolecules, CAS Center for Excellence in Biomacromolecules, Institute of Biophysics, Chinese Academy of Sciences, 3Department of Infectious Diseases, Shanghai Key Laboratory of Infectious Diseases and Biosafety Emergency Response, National Medical Center for Infectious Diseases, Huashan Hospital, Fudan University

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يصف البروتوكول الحالي تحريض التهاب الدماغ والنخاع المناعي الذاتي التجريبي في نموذج فأر باستخدام بروتين سكري قليل التغصن المايلين ومراقبة عملية المرض باستخدام نظام تسجيل سريري. يتم تحليل الأعراض التجريبية المرتبطة بالتهاب الدماغ والنخاع المناعي الذاتي باستخدام تحليل التصوير المقطعي المحوسب الدقيق لعظم الفخذ واختبار المجال المفتوح لتقييم عملية المرض بشكل شامل.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

التصلب المتعدد (MS) هو مرض مناعي ذاتي نموذجي يصيب الجهاز العصبي المركزي (CNS) ويتميز بالتسلل الالتهابي وإزالة الميالين وتلف المحور العصبي. في الوقت الحالي، لا توجد تدابير لعلاج مرض التصلب العصبي المتعدد تماما، ولكن تتوفر علاجات متعددة معدلة للمرض (DMT) للسيطرة على تطور المرض والتخفيف من حدته. هناك أوجه تشابه كبيرة بين السمات المرضية للجهاز العصبي المركزي لمرضى التهاب الدماغ والنخاع المناعي الذاتي التجريبي (EAE) ومرضى التصلب العصبي المتعدد. تم استخدام EAE على نطاق واسع كنموذج تمثيلي لتحديد فعالية أدوية التصلب المتعدد واستكشاف تطوير علاجات جديدة لمرض التصلب العصبي المتعدد. الحث النشط ل EAE في الفئران له تأثير مستقر وقابل للتكرار وهو مناسب بشكل خاص لدراسة آثار الأدوية أو الجينات على التهاب الأعصاب المناعي الذاتي. تتم مشاركة طريقة تحصين الفئران C57BL / 6J ببروتين سكري قليل التغصن المايلين (MOG35-55) والتقييم اليومي لأعراض المرض باستخدام نظام التسجيل السريري بشكل أساسي. نظرا للمسببات المعقدة لمرض التصلب العصبي المتعدد مع المظاهر السريرية المتنوعة ، فإن نظام التسجيل السريري الحالي لا يمكن أن يفي بتقييم علاج المرض. لتجنب أوجه القصور في تدخل واحد ، يتم إنشاء مؤشرات جديدة لتقييم EAE بناء على المظاهر السريرية للمزاج الشبيه بالقلق وهشاشة العظام لدى مرضى التصلب العصبي المتعدد لتوفير تقييم أكثر شمولا لعلاج مرض التصلب العصبي المتعدد.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

أمراض المناعة الذاتية هي مجموعة من الاضطرابات التي تسببها الاستجابة المناعية للجهاز المناعي لمستضدات خاصة به مما يؤدي إلى تلف الأنسجة أو اختلال وظيفي1. التصلب المتعدد (MS) هو مرض مناعي ذاتي مزمن من اعتلال الأعصاب في الجهاز العصبي المركزي (CNS) ، ويتميز بالتسلل الالتهابي ، وإزالة الميالين ، والتنكس العصبيالمحوري 2,3. في الوقت الحاضر، أثر مرض التصلب العصبي المتعدد على ما يصل إلى 2.5 مليون شخص في جميع أنحاء العالم، معظمهم من الشباب ومتوسطي العمر الذين تتراوح أعمارهم بين 20 و 40 عاما، والذين غالبا ما يكونون العمود الفقري لأسرهم ومجتمعهم. وقد تسبب هذا في تأثير كبير وضرر للأسر والمجتمع 2,4.

مرض التصلب العصبي المتعدد هو مرض متعدد العوامل مع مظاهر سريرية متنوعة ومعقدة. بالإضافة إلى الاضطرابات العصبية الكلاسيكية التي تتميز بالتسلل الالتهابي وإزالة الميالين ، غالبا ما يظهر مرض التصلب العصبي المتعدد ضعف البصر وخلل الحركة في الأطراف والاضطرابات المعرفية والعاطفية5،6،7. إذا لم يحصل مرضى التصلب العصبي المتعدد على العلاج المناسب والصحيح ، فسيعيش نصفهم على كراسي متحركة بعد 20 عاما ، وسيعاني نصفهم تقريبا من أعراض الاكتئاب والقلق ، مما يؤدي إلى مستويات أعلى بكثير من التفكير في الانتحار من عامة السكان 8,9.

على الرغم من فترة البحث الطويلة ، لا تزال مسببات مرض التصلب العصبي المتعدد بعيدة المنال ، ولم يتم بعد توضيح التسبب في مرض التصلب العصبي المتعدد. سمحت النماذج الحيوانية لمرض التصلب العصبي المتعدد بالعمل كأدوات اختبار لاستكشاف تطور المرض والأساليب العلاجية الجديدة ، على الرغم من الاختلافات الكبيرة بين القوارض وأجهزة المناعة البشرية ، مع مشاركة بعض المبادئ الأساسية في نفس الوقت. يعد التهاب الدماغ والنخاع المناعي الذاتي التجريبي (EAE) حاليا النموذج الحيواني المثالي لدراسة مرض التصلب العصبي المتعدد ، والذي يستخدم مناعة المستضد الذاتي من بروتينات المايلين للحث على المناعة الذاتية لمكونات الجهاز العصبي المركزي في الفئران الحساسة ، مع إضافة مساعد فرويند الكامل (CFA) وسم السعال الديكي (PTX) لتعزيز الاستجابة المناعية الخلطية. اعتمادا على الخلفية الجينية والمستضدات المناعية ، يتم الحصول على عمليات مرضية مختلفة ، بما في ذلك الحادة أو الانتكاسية أو المزمنة ، لتقليد الأشكال السريرية المختلفة لمرض التصلب العصبي المتعدد10،11،12. تأتي المستمنات ذات الصلة المستخدمة بشكل شائع في بناء نماذج EAE من بروتينات الجهاز العصبي المركزي الذاتية ، مثل بروتين المايلين الأساسي (MBP) أو بروتين البروتين البروتيني (PLP) أو البروتين السكري قليل التغصن المياليني (MOG). تطور فئران SJL / L المحصنة ضد MBP أو PLP مسارا للانتكاس والتحويل ، ويؤدي MOG إلى تحفيز EAE التدريجي المزمن في C57BL / 6 الفئران11،12،13.

الغرض الرئيسي من العلاج المعدل للمرض (DMT) هو تقليل أعراض المرض وتحسين الوظيفة6. يتم استخدام العديد من الأدوية سريريا للتخفيف من مرض التصلب العصبي المتعدد ، ولكن لم يتم استخدام أي دواء حتى الآن لعلاجه تماما ، مما يكشف عن ضرورة العلاج التآزري. تعد الفئران C57BL / 6 حاليا الأكثر استخداما لبناء الفئران المعدلة وراثيا ، وفي هذا العمل ، تم استخدام نموذج EAE الناجم عن MOG35-55 في الفئران C57BL / 6J بمقياس من 5 نقاط لمراقبة تطور المرض. تعاني نماذج EAE أيضا من حالات مزاجية تشبه القلق وفقدان العظام ، والآفات المزيلة للميالين المعروفة على نطاق واسع. هنا ، يتم أيضا وصف طريقة تقييم أعراض EAE من وجهات نظر متعددة باستخدام اختبار المجال المفتوح وتحليل التصوير المقطعي المحوسب الدقيق (Micro-CT).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وافقت لجنة رعاية الحيوان بجامعة تونغجي على العمل الحالي ، وتم اتباع جميع إرشادات رعاية الحيوان. تم استخدام ذكور أو إناث الفئران C57BL / 6J بين 8-12 أسبوعا من العمر للتجارب. تم التأكد من أن العمر والجنس متماثلان في المجموعات التجريبية. خلاف ذلك ، تأثرت القابلية للمرض. تم إيواء الفئران في بيئة محددة خالية من مسببات الأمراض مع تناوب دورات الضوء والظلام لمدة 12 ساعة في ظل ظروف ثابتة (درجة حرارة الغرفة 23 ± 1 درجة مئوية ، الرطوبة 50٪ ± 10٪) ، مع حرية الوصول إلى طعام وماء الفئران.

1. إعداد مستحلب MOG35-55

  1. أضف المتفطرة السلية المجففة بالتجميد المعطلة بالحرارة (MTB ، H37Ra) لإكمال مساعد فرويند (يحتوي نفسه على 1 مجم / مل من MTB المعطل بالحرارة ، H37Ra) ، مما يؤدي إلى تركيز MTB النهائي بمقدار 5 مجم / مل (انظر جدول المواد).
    ملاحظة: يجب إكمال العملية بأكملها في خزانة السلامة الأحيائية ؛ لا تفتح الهواء الذي ينفخ.
  2. قم بإذابة الببتيد MOG35-55 المجفف بالتجميد (انظر جدول المواد) بمحلول ملحي معقم مبرد مسبقا بالفوسفات (PBS) (بدون أيونات الكالسيوم والمغنيسيوم ، درجة الحموضة 7.4) لتحضير محلول المستضد بتركيز 2 مجم / مل.
  3. خذ أنبوب طرد مركزي دقيق نظيف سعة 2 مل وأضف كرة فولاذية معقمة مقاس 5 مم (انظر جدول المواد) إلى كل أنبوب.
  4. أضف 500 ميكرولتر من مساعد فرويند الكامل الذي يحتوي على 5 مجم / مل من MTB و 500 ميكرولتر من محلول مستضد MOG35-55 إلى أنبوب الطرد المركزي الدقيق أعلاه الذي يحتوي على كرة فولاذية واحدة.
  5. تذبذب الأنبوب أعلاه على TissueLyser (انظر جدول المواد) لمدة 10 دقائق ، تبرد على الثلج لمدة 10 دقائق ، وكرر أربع مرات لخلطه جيدا وأخيرا تشكيل محلول لزج أبيض.
    ملاحظة: الاستحلاب الجيد هو خطوة أساسية في تحضير مستحلب MOG35-55 ، لذلك يلزم الخلط الشامل. تم ضبط TissueLyser على سرعة 28 هرتز.

2. إعداد سم السعال الديكي (PTX)

  1. قم بإعداد PTX مع ddH2O بتركيز 100 ميكروغرام / مل وتخزينه في 4 درجات مئوية.
  2. قم بتخفيف محلول مخزون PTX 50 مرة باستخدام 1x PBS المعقم (بدون أيونات الكالسيوم والمغنيسيوم ، درجة الحموضة 7.4) لعمل محلول 200 نانوغرام / 100 ميكرولتر للاستخدام.

3. إنشاء نموذج حيواني EAE

  1. قم ببناء نموذج EAE باستخدام الفئران C57BL / 6J البالغة من العمر 8-12 أسبوعا. تأكد من تأقلم الفئران بشكل كاف مع بيئة التغذية قبل التحصين.
  2. قم بالطرد المركزي لمستحلب MOG35-55 المحضر (الخطوة 1) عند 4 درجات مئوية لمدة 2-3 ثوان عن طريق الضغط على زر النبض الخاص بالجهاز (انظر جدول المواد) لترسيب جميع المستحلبات في قاع الأنبوب.
    ملاحظة: يمكن تخزين مستحلب MOG35-55 عند - 20 درجة مئوية لعدة أيام. لتجنب فشل الدواء ، يوصى باستخدامه في أسرع وقت ممكن.
  3. قم بتوصيل إبرة 22 جم ببرميل حقنة سعة 1 مل ، واستنشاق مستحلب MOG 35-55 ، ونقل مستحلب MOG35-55 إلى برميل حقنة جديد سعة 1 مل. قم بتأمين الاتصال بين برميل حقنة سعة 1 مل وإبرة 26 جم مع فيلم مانع للتسرب (انظر جدول المواد).
    ملاحظة: تجنب فقاعات الهواء عند تحميل مستحلب MOG35-55 في براميل حقنة سعة 1 مل.
  4. امسح وتطهير موقع الحقن بنسبة 70٪ إيثانول.
  5. حقن مستحلب MOG35-55 تحت الجلد على كل جانب من العمود الفقري الظهري للفئران ، 100 ميكرولتر على كل جانب. مراقبة التكوين التلقائي للكتل منتفخة تحت جلد ظهر الفئران بعد اكتمال عملية الحقن.
    ملاحظة: تأكد من أن المجربين ذوي الخبرة يقومون بعملية التحصين وأن الحقن يتم بلطف وببطء لتقليل الضغط على الفئران.
  6. حقن الفئران المذكورة أعلاه داخل الصفاق مع 100 ميكرولتر من PTX (الخطوة 2).
    ملاحظة: يوم التحصين هو اليوم 0. تأكد أيضا من إمكانية تحديد الفئران بدقة للتقييم اليومي اللاحق ، مثل استخدام علامة ملونة على ذيل الفئران.
  7. حقن نفس الجرعة من PTX في اليوم 2 بعد التحصين.
  8. تحضير مجموعة من الفئران غير المحصنة كفئران من النوع البري (WT).

4. المراقبة السريرية للفئران

  1. سجل وزن جسم الفئران EAE و WT يوميا.
    ملاحظة: ترتبط شدة EAE بشكل إيجابي بفقدان وزن الفئران ، لذا فإن وزن الجسم هو أيضا مؤشر مراقبة مهم جدا.
  2. مراقبة حالة الفئران من 0-21 يوما بعد التحصين باستخدام نظام التسجيل 0-5 المدرج في الجدول 1.
    ملاحظة: يتم احتساب الأعراض بينهما على أنها زائد أو ناقص 0.5 نقطة.

5. اختبار المجال المفتوح

ملاحظة: التجارب المختارة لهذه الخطوة هي فئران EAE في فترات البداية المبكرة والذروة والمغفرة. بالإضافة إلى ذلك ، تم استخدام الفئران WT كعنصر تحكم. تجدر الإشارة إلى أنه تم اختبار جميع الفئران للسلوك الشبيه بالقلق قبل النمذجة لاستبعاد الفئران التي تعاني من اضطرابات القلق لنمذجة EAE. بالإضافة إلى ذلك ، تم استبعاد الفئران EAE في فترات الذروة ومغفرة مع العجز الحركي الكامل من الاختبار.

  1. قم بإعداد غرفة تفاعل المجال المفتوح 40 × 40 × 40 سم3 ونظام تحليل فيديو نشاط الحركة (المجال المفتوح) (انظر جدول المواد).
    ملاحظة: يتم تثبيت الكاميرا في وضع يغطي الصندوق بالكامل ، وتكون غرفة التفاعل مضاءة بالتساوي ، ويجب أن تكون غرفة الاختبار منطقة هادئة.
  2. ضع فئران الاختبار في غرفة الاختبار للتعود 1 ساعة قبل بدء التجربة.
  3. رش المنطقة بأكملها بنسبة 70٪ من الإيثانول وامسحها بمنشفة ورقية نظيفة للتأكد من نظافة غرفة التفاعل قبل بدء الاختبار.
  4. قم بإزالة كل فأر على حدة من قفصه وضعه في نفس الزاوية من الساحة قبل البدء في الاستكشاف.
    ملاحظة: ينقسم الجزء السفلي من الصندوق إلى 16 شبكة ، منها منطقة الشبكات الأربعة الوسطى هي المنطقة المركزية والمنطقة المحيطة بها هي المنطقة الطرفية.
  5. انقر فوق الزر Start Capture في شريط القائمة بنظام تحليل الفيديو ، وسجل الوقت ، وابدأ التصوير.
  6. حافظ على الهدوء في غرفة الاختبار.
  7. دع الماوس يتحرك بحرية لمدة 5 دقائق أثناء عملية التسجيل.
  8. أوقف نظام الاستحواذ واحفظ الفيديو.
  9. أخرج الماوس من الساحة ، وأعده إلى القفص ، وانتقل إلى الماوس التالي.
    ملاحظة: نظف منطقة الاختبار بنسبة 70٪ من الإيثانول بين الأشواط لإزالة الروائح والمواد الأخرى.
  10. تحليل النتائج باستخدام نظام تحليل الفيديو.

6. تحليل النمط الظاهري للعظام

  1. القتل الرحيم للفئران EAE و WT عن طريق خلع عنق الرحم في اليوم 21.
    ملاحظة: يجب أن يكون الأفراد الذين يقومون بعمليات خلع عنق الرحم مدربين تدريبا جيدا لتقليل الألم الذي يتحملونه أثناء موت الحيوان.
  2. اجعل الماوس مسطحا في صينية تشريح وقم بإصلاح الأطراف.
  3. امسك جلد الطرف الخلفي للفأر بالملقط وافتح جلد الفأر والأنسجة العضلية بالمقص.
  4. افصل عظم الفخذ عن عظم الساق والورك بعناية بالمقص.
  5. قم بإزالة العضلات الملتصقة بعظم الفخذ بالمقص وضع عظم الفخذ في 70٪ إيثانول في درجة حرارة الغرفة.
  6. امسح عظم الفخذ البعيد باستخدام نظام التصوير المقطعي المحوسب الدقيق (انظر جدول المواد) بحجم فوكسل متناحي الخواص يبلغ 10 ميكرومتر ، مع ذروة جهد أنبوب الأشعة السينية 70 كيلو فولت وشدة الأشعة السينية 0.114 مللي أمبير.
    ملاحظة: يسمح مرشح 3D Gaussian بتقليل التشويش لصور عتبة 2D.
  7. تحليل 100 شريحة تم مسحها ضوئيا من عمود الفخذ الأوسط لقياس معلمات عظم الفخذ ، بما في ذلك حجم العظام وحجم الأنسجة وكثافة المعادن في العظام والفصل التربيقي والرقم التربيقي وكثافة التوصيل التربيقي وسمك التربيق والقشرة.
    ملاحظة: بدءا من الطرف القريب من صفيحة نمو عظم الفخذ البعيد في الفئران ، تم العثور على أقسام خالية تماما من هياكل غطاء المشاش واستمرت في تمديد 100 شريحة نحو عظم الفخذ القريب ، والتي تم تحديدها يدويا في عدة فوكسل بعيدا عن السطح القشري الداخلي لتحديد الترابيق المشاش.
  8. إنشاء إعادة البناء 3D عن طريق تكديس صور عتبة 2D من المناطق الكنتورية في نظام micro-CT.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

بعد تحصين الفئران ، يتم تسجيل وزن جسم الفئران يوميا ، ويتم تقييم أعراضها السريرية وفقا للبروتوكول الموضح أعلاه (الخطوة 4). في الفئران C57BL / 6J المحصنة بببتيد MOG ، لأن موقع الآفة يقتصر بشكل أساسي على الحبل الشوكي ، ينتشر التسبب في فئران EAE من نهاية الذيل إلى الرأس. في بداية المرض ، تظهر فئران EAE ضعفا وتدليا في الذيل ، يليه ضعف في الأطراف الخلفية ، وحركة غير منسقة ، وشلل. مع تفاقم المرض ، يتطور تدريجيا إلى ضعف الأطراف الأمامية ، والشلل ، وفي الحالات الشديدة ، يسبب صعوبة في تحريك الفئران وحتى بالقرب من الموت. كما هو مو...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

مرض التصلب العصبي المتعدد هو مرض التهابي مزيل للميالين في الجهاز العصبي المركزي وهو أحد أكثر الاضطرابات العصبية شيوعا التي تسبب إعاقة مزمنة لدى الشباب ، مما يفرض عبئا كبيرا على العائلات والمجتمع 3,4. لطالما تم تصنيف مرض التصلب العصبي المتعدد على أنه مرض مناعي ذاتي خاص بالخلايا التائية ، مما يحفز جهاز المناعة الذاتية على تآكل الجهاز العصبي المركزي ببطء ، والذي سيشمل أنظمة متعددة في جميع أنحاء الجسم27. تشمل الأعراض السريرية النموذجية ضعف الب...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يقر المؤلفون بالدعم المقدم من المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (32070768 ، 31871404 ، 31900658 ، 32270754) ومختبر الدولة الرئيسي لأبحاث الأدوية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
حقنة 1 مل (مع إبرة 26 جم)شنغهاي تفضل الأدوات الطبية المحدودة60017031
2 مل أنبوب الطرد المركزيالصغير HAIKELASIKY-LXG2A
22 جرام إبرةشنغهاي اللطيفة الأدوات الطبية المحدودة60017208
فرايند الكامل s مساعدسيجماF5881مخزنة في 4 درجة ؛ C ، 1 مجم من MTB المعطلة بالحرارة (H37Ra) لكل مل
نظام تفضيل المكان المكيفشنغهاي Jiliang Software Technology Co.، Ltdسلوك
الإيثانولSinopharm Chemical Reagent Co.، Ltd10009218المخزنة في RT
نشاط الحركة (المجال المفتوح) نظام تحليل الفيديوشنغهاي Jiliang Software Technology Co.، LtdDigBehv-002سلوك
MOG35-55< / sub> الببتيدجيل الكيمياء الحيوية المحدودةGLS-Y-M-03590المخزنة في -20 درجة ؛ C
المتفطرة السلية H37RaBD231141مخزنة في 4 & درجة; ج
غرفة رد فعل المجال المفتوحShanghai Jiliang Software Technology Co.، Ltdسلوك
سمع السعال الديكيCalbiochem516560مخزنة في 4 درجة ؛ C
فوسفات مخزن محلولملحي مصنوع في مختبرنا
مقصشنغهاي للأداة الطبية (مجموعة) المحدودةJ21010
فيلم الختمهيثرو العلميHS 234526B
سورفال ليجند مايكرو 21R الطرد المركزيالحراري العلمي75002447
الكرة الفولاذيةQIAGEN69975
TissueLyser IIQIAGEN85300
ملاقطشنغهاي أداة طبية (مجموعة) المحدودةJD1060
& mu ؛ CT 35 الماسح الضوئي microCT لسطح المكتبScanco Medical AG ، Bassersdorf ، سويسرا

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Zhernakova, A., Withoff, S., Wijmenga, C. Clinical implications of shared genetics and pathogenesis in autoimmune diseases. Nature Reviews Endocrinology. 9 (11), 646-659 (2013).
  2. Filippi, M., et al. Multiple sclerosis. Nature Reviews Disease Primers. 4 (1), 43(2018).
  3. Dobson, R., Giovannoni, G. Multiple sclerosis - a review. Europen Journal of Neurology. 26 (1), 27-40 (2019).
  4. Rietberg, M. B., Veerbeek, J. M., Gosselink, R., Kwakkel, G., van Wegen, E. E. Respiratory muscle training for multiple sclerosis. Cochrane Database of Systematic Reviews. 12 (12), (2017).
  5. O'Brien, K., Gran, B., Rostami, A. T-cell based immunotherapy in experimental autoimmune encephalomyelitis and multiple sclerosis. Immunotherapy. 2 (1), 99-115 (2010).
  6. Feinstein, A., Freeman, J., Lo, A. C. Treatment of progressive multiple sclerosis: what works, what does not, and what is needed. Lancet Neurology. 14 (2), 194-207 (2015).
  7. Li, H., Lian, G., Wang, G., Yin, Q., Su, Z. A review of possible therapies for multiple sclerosis. Molecular and Cellular Biochemistry. 476 (9), 3261-3270 (2021).
  8. Lewis, V. M., et al. depression and suicide ideation in people with multiple sclerosis. Journal of Affective Disorders. 208, 662-669 (2017).
  9. Boeschoten, R. E., et al. Prevalence of depression and anxiety in Multiple Sclerosis: A systematic review and meta-analysis. Journal of the Neurological Sciences. 372, 331-341 (2017).
  10. Constantinescu, C. S., Farooqi, N., O'Brien, K., Gran, B. Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) as a model for multiple sclerosis (MS). British Journal of Pharmacology. 164, 1079-1106 (2011).
  11. Glatigny, S., Bettelli, E. Experimental Autoimmune Encephalomyelitis (EAE) as Animal Models of Multiple Sclerosis (MS). Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine. 8 (11), 028977(2018).
  12. Procaccini, C., De Rosa, V., Pucino, V., Formisano, L., Matarese, G. Animal models of Multiple Sclerosis. European Journal of Pharmacology. 759, 182-191 (2015).
  13. Mix, E., Meyer-Rienecker, H., Hartung, H. P., Zettl, U. K. Animal models of multiple sclerosis-potentials and limitations. Progress in Neurobiology. 92 (3), 386-404 (2010).
  14. DiToro, D., et al. Insulin-like growth factors are key regulators of T helper 17 regulatory T cell balance in autoimmunity. Immunity. 52 (4), 650-667 (2020).
  15. Jain, R., et al. Interleukin-23-induced transcription factor Blimp-1 promotes pathogenicity of T helper 17 cells. Immunity. 44 (1), 131-142 (2016).
  16. Du, C., et al. Kappa opioid receptor activation alleviates experimental autoimmune encephalomyelitis and promotes oligodendrocyte-mediated remyelination. Nature Communications. 7, 11120(2016).
  17. Yang, C., et al. Betaine Ameliorates Experimental Autoimmune Encephalomyelitis by Inhibiting Dendritic Cell-Derived IL-6 Production and Th17 Differentiation. The Journal of Immunology. 200 (4), 1316-1324 (2018).
  18. McGinley, A. M., et al. Interleukin-17A serves a priming role in autoimmunity by recruiting IL-1β-producing myeloid cells that promote pathogenic T cells. Immunity. 52 (2), 342-356 (2020).
  19. Kocovski, P., et al. Differential anxiety-like responses in NOD/ShiLtJ and C57BL/6J mice following experimental autoimmune encephalomyelitis induction and oral gavage. Laboratory Animals. 52 (5), 470-478 (2018).
  20. Seibenhener, M. L., Wooten, M. C. Use of the Open Field Maze to measure locomotor and anxiety-like behavior in mice. Journal of Visualized Experiments. (96), e52434(2015).
  21. Walsh, R. N., Cummins, R. A. The Open-Field Test: a critical review. Psychological Bulletin. 83 (3), 482-504 (1976).
  22. Tauil, C. B., et al. Depression and anxiety disorders in patients with multiple sclerosis: association with neurodegeneration and neurofilaments. Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 54 (3), 10428(2021).
  23. Gentile, A., et al. Interaction between interleukin-1beta and type-1 cannabinoid receptor is involved in anxiety-like behavior in experimental autoimmune encephalomyelitis. Journal of Neuroinflammation. 13, 231(2016).
  24. Hearn, A. P., Silber, E. Osteoporosis in multiple sclerosis. Multiple Sclerosis. 16, 1031-1043 (2010).
  25. Gibson, J. C., Summers, G. D. Bone health in multiple sclerosis. Osteoporosis International. 22, 2935-2949 (2011).
  26. Ye, S., Wu, R., Wu, J. Multiple sclerosis and fracture. The International Journal of Neuroscience. 123, 609-616 (2013).
  27. Zamvil, S. S., et al. Lupus-prone' mice are susceptible to organ-specific autoimmune disease, experimental allergic encephalomyelitis. Pathobiology. 62 (3), 113-119 (1994).
  28. Oh, J., Vidal-Jordana, A., Montalban, X. Multiple sclerosis: clinical aspects. Current Opinion in Neurology. 31 (6), 752-759 (2018).
  29. Smith, P. Animal models of multiple sclerosis. Current Protocols. 1 (6), 185(2021).
  30. Aharoni, R., Globerman, R., Eilam, R., Brenner, O., Arnon, R. Titration of myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG)-Induced experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) model. Journal of Neuroscience Methods. 351, 108999(2021).
  31. Lassmann, H., Bradl, M. Multiple sclerosis: experimental models and reality. Acta Neuropathological. 133 (2), 223-244 (2017).
  32. Goverman, J., Perchellet, A., Huseby, E. S. The role of CD8(+) T cells in multiple sclerosis and its animal models. Current Drug Targets. Inflammation and Allergy. 4 (2), 239-245 (2005).
  33. Schultz, V., et al. Acutely damaged axons are remyelinated in multiple sclerosis and experimental models of demyelination. Glia. 65 (8), 1350-1360 (2017).
  34. McRae, B. L., et al. Induction of active and adoptive relapsing experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) using an encephalitogenic epitope of proteolipid protein. Journal of Neuroimmunology. 38 (3), 229-240 (1992).
  35. Zamvil, S., et al. T-cell clones specific for myelin basic protein induce chronic relapsing paralysis and demyelination. Nature. 317 (6035), 355-358 (1985).
  36. Jackson, S. J., Lee, J., Nikodemova, M., Fabry, Z., Duncan, I. D. Quantification of myelin and axon pathology during relapsing progressive experimental autoimmune encephalomyelitis in the Biozzi ABH mouse. Journal of Neuropathology and Experimental Neurology. 68 (6), 616-625 (2009).
  37. Gudi, V., Gingele, S., Skripuletz, T., Stangel, M. Glial response during cuprizone-induced de- and remyelination in the CNS: lessons learned. Frontiers in Cellular Neuroscience. 8, 73(2014).
  38. Yu, Q., et al. Strain differences in cuprizone induced demyelination. Cell & Bioscience. 7, 59(2017).
  39. Dehghan, S., Aref, E., Raoufy, M. R., Javan, M. An optimized animal model of lysolecithin induced demyelination in optic nerve; more feasible, more reproducible, promising for studying the progressive forms of multiple sclerosis. Journal of Neuroscience Methods. 352, 109088(2021).
  40. Kuypers, N. J., James, K. T., Enzmann, G. U., Magnuson, D. S., Whittemore, S. R. Functional consequences of ethidium bromide demyelination of the mouse ventral spinal cord. Experimental Neurology. 247, 615-622 (2013).
  41. Haji, N., et al. TNF-alpha-mediated anxiety in a mouse model of multiple sclerosis. Experimental Neurology. 237, 296-303 (2012).
  42. Butler, E., Matcham, F., Chalder, T. A systematic review of anxiety amongst people with Multiple Sclerosis. Multiple Sclerosis and Related Disorders. 10, 145-168 (2016).
  43. Peres, D. S., et al. TRPA1 involvement in depression- and anxiety-like behaviors in a progressive multiple sclerosis model in mice. Brain Research Bulletin. 175, 1-15 (2021).
  44. Bouxsein, M. L., et al. Guidelines for assessment of bone microstructure in rodents using micro-computed tomography. Journal of Bone and Mineral Research. 25 (7), 1468-1486 (2010).
  45. Chappard, D., Retailleau-Gaborit, N., Legrand, E., Baslé, M. F., Audran, M. Comparison insight bone measurements by histomorphometry and microCT. Journal of Bone and Mineral Research. 20 (7), 1177-1184 (2005).
  46. Akhter, M. P., Lappe, J. M., Davies, K. M., Recker, R. R. Transmenopausal changes in the trabecular bone structure. Bone. 41 (1), 111-116 (2007).
  47. Wei, H., et al. Identification of Fibroblast Activation Protein as an Osteogenic Suppressor and Anti-osteoporosis Drug Target. Cell Reports. 33 (2), 108252(2020).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة