مقالة منهجية

حقنة ثابتة من نقطتين لنموذج إزالة الميالين البؤري الناجم عن الليسوفوسفاتيديل كولين في الفئران

DOI:

10.3791/64059

⸱

مايو 11, 2022

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Neurology, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يصف هذا البروتوكول حقنة من نقطتين من الليسوفوسفاتيديل كولين عبر إطار مجسمة لتوليد نموذج إزالة الميالين مستقر وقابل للتكرار في الفئران.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تساهم إشارات الليزوفوسفوليبيد بوساطة المستقبلات في الفيزيولوجيا المرضية للأمراض العصبية المتنوعة ، وخاصة التصلب المتعدد (MS). Lysophosphatidylcholine (LPC) هو ليسوفوسفوليبيد داخلي المنشأ مرتبط بالالتهاب ، ويمكن أن يسبب ضررا سريعا مع سمية دهون المايلين ، مما يؤدي إلى إزالة الميالين البؤري. هنا ، يتم تقديم بروتوكول مفصل لحقن LPC التجسيمي المكون من نقطتين والذي يمكن أن يسبب مباشرة إزالة الميالين الشديدة ويكرر إصابة إزالة الميالين التجريبية بسرعة وثبات في الفئران عن طريق الإجراء الجراحي. وبالتالي ، فإن هذا النموذج وثيق الصلة بأمراض إزالة الميالين ، وخاصة مرض التصلب العصبي المتعدد ، ويمكن أن يساهم في الأبحاث ذات الصلة ذات الصلة ذات الصلة سريريا. أيضا ، تم استخدام طرق التلطيخ الأزرق السريع Luxol و Luxol لتصوير المسار الزمني لإزالة الميالين في الجسم الثفني للفئران التي تم حقنها باستخدام LPC. بالإضافة إلى ذلك ، تم استخدام الطريقة السلوكية لتقييم الوظيفة الإدراكية للفئران بعد النمذجة. بشكل عام ، يعد الحقن ثنائي النقطة للليسوفوسفاتيديل كولين عبر إطار مجسمة طريقة مستقرة وقابلة للتكرار لتوليد نموذج إزالة الميالين في الفئران لمزيد من الدراسة.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تتضمن إشارات الليزوفوسفوليبيد بوساطة المستقبلات عمليات فسيولوجية متنوعة لجميع أنظمة الأعضاء تقريبا1. في الجهاز العصبي المركزي (CNS) ، تلعب هذه الإشارات دورا حاسما في مسببات الأمراض العصبية المناعية الذاتية مثل التصلب المتعدد (MS). التصلب المتعدد هو اضطراب مزمن بوساطة المناعة يتميز بإزالة الميالين المرضية والاستجابة الالتهابية ، مما يسبب اختلالا وظيفيا عصبيا وضعفا إدراكيا 2,3. بعد الانتكاس المستمر والتحويل أثناء المرض المبكر ، يتقدم معظم المرضى في النهاية إلى المرحلة الثانوية التقدمية ، والتي يمكن أن تسبب ضررا لا رجعة فيه للدماغ والعجز الناتج4. ويعتقد أن السمة المميزة المرضية للمسار الثانوي التقدمي هي إزالة الميالين من اللويحات الناجمة عن الآفات الالتهابية5. يمكن أن تقلل العلاجات الحالية للتصلب المتعدد بشكل كبير من خطر الانتكاس. ومع ذلك، لا يوجد حتى الآن علاج فعال للضرر المزيل للميالين على المدى الطويل الناجم عن التصلب المتعددالتدريجي 6. وبالتالي ، هناك حاجة إلى نموذج ثابت وقابل للتكرار بسهولة لدراسة العلاجات قبل السريرية التي تركز على تنكس المادة البيضاء.

إزالة الميالين وإعادة الميالين هما عمليتان مرضيتان رئيسيتان في تطوير التصلب المتعدد. إزالة الميالين هي فقدان غمد المايلين حول المحاور العصبية التي تسببها الخلايا الدبقية الصغيرة ذات الأنماط الظاهرية المؤيدة للالتهابات7 ، وتؤدي إلى بطء توصيل النبضات العصبية وتؤدي إلى فقدان الخلايا العصبية والاضطرابات العصبية. Remyelination هي استجابة إصلاح داخلية المنشأ بوساطة الخلايا قليلة التغصن ، حيث يمكن أن تؤدي الاضطرابات إلى تنكس عصبي وضعف إدراكي8. الاستجابة الالتهابية أمر بالغ الأهمية للعملية برمتها ، مما يؤثر على كل من درجة تلف المايلين وإصلاحه.

لذلك ، فإن النموذج الحيواني المستقر لإزالة الميالين الالتهابية المستمرة له معنى لمزيد من الاستكشاف للاستراتيجيات العلاجية للتصلب المتعدد. نظرا لتعقيد مرض التصلب العصبي المتعدد ، تم إنشاء أنواع مختلفة من النماذج الحيوانية لمحاكاة الآفات المزيلة للميالين في الجسم الحي ، بما في ذلك التهاب الدماغ المناعي الذاتي التجريبي (EAE) ، ونماذج إزالة الميالين السامة ، و cuprizone (CPZ) ، و lysophosphatidylcholine (LPC)9 . LPC هو ليسوفوسفوليبيد داخلي المنشأ مرتبط بالالتهاب ، ويمكن أن يؤدي إلى تلف سريع مع سمية دهون المايلين ، مما يؤدي إلى إزالة الميالين البؤري. استنادا إلى التقارير السابقة والأبحاث10,11 ، يتم توفير بروتوكول مفصل للحقن من نقطتين مع بعض التعديلات. بشكل عام ، ينتج نموذج حقن LPC الكلاسيكي المكون من نقطة واحدة فقط إزالة الميالين المحلية في موقع الحقن وغالبا ما يكون مصحوبا بإعادة الميالين التلقائي12,13. ومع ذلك ، يمكن لنموذج LPC للحقن المكون من نقطتين أن LPC يمكن أن يحفز مباشرة إزالة الميالين في جسم الفأر الثفني ويسبب إزالة الميالين بشكل أكثر دواما مع القليل من تجديد المايلين.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت الموافقة على جميع الإجراءات الحيوانية من قبل لجنة معهد رعاية الحيوان التابعة لكلية تونغجي الطبية ، جامعة هواتشونغ للعلوم والتكنولوجيا ، الصين. تم استخدام الفئران البالغة C57BL/6 من الذكور والإناث (النوع البري ، WT ؛ 20-25 جم ؛ 8-10 أسابيع من العمر) لهذه الدراسة. تم الحصول على الفئران من مصادر تجارية (انظر جدول المواد). تم إيواء الفئران في منشأة حيوانية محددة خالية من مسببات الأمراض (SPF) مع توفير المياه والغذاء بشكل مخصص. تم الاحتفاظ بها في فترة 12 ساعة بالتناوب من دورة الضوء والظلام في الظروف القياسية لدرجة حرارة 22 درجة مئوية والرطوبة النسبية من 55٪ -60٪.

1. إعداد حل LPC

  1. قم بإذابة 25 ملغ من مسحوق LPC (انظر جدول المواد) مع 250 ميكرولتر من محلول الكلوروفورم والميثانول المختلط (1: 1) لصنع محلول LPC بنسبة 10٪ ونقله إلى أنبوب طرد مركزي 500 ميكرولتر.
    ملاحظة: إذا لم يتم إذابة LPC بالكامل ، فضع أنبوب الطرد المركزي في منظف بالموجات فوق الصوتية والموجات فوق الصوتية عند 40 كيلو هرتز لمدة ~ 1 ساعة للحصول على حل موحد.
  2. قسم المحلول إلى 3 ميكرولتر / أنبوب وخزنه عند -80 درجة مئوية.
    ملاحظة: يمكن تخزين الحل لمدة ~ 2 سنوات.
  3. قبل الجراحة ، قم بتخفيف المحلول (الخطوة 1.2.) باستخدام 27 ميكرولتر من محلول كلوريد الصوديوم بنسبة 0.9٪ ، واحتفظ بالمحلول في حمام مائي بدرجة حرارة ثابتة عند 37 درجة مئوية.
    ملاحظة: قم بإعداد المحلول قبل بدء الحقن مباشرة.

2. التحضير الجراحي

  1. استخدم إبرة 32 جم ، 2 بوصة للاتصال بحقنة 5 ميكرولتر (انظر جدول المواد). تأكد من أن حقنة الميكرولتر دون عائق. سحب 5 ميكرولتر من محلول LPC لإعداد الحقن.
  2. تخدير الماوس في غرفة تحريض متصلة بمبخر الأيزوفلوران مع 3٪ أيسوفلوران ممزوج بأكسجين 100٪ بمعدل حوالي 0.3 لتر / دقيقة.
  3. تأكد من عمق التخدير من خلال عدم وجود منعكس قرصة إصبع القدم بينما يكون التنفس سلسا.
  4. حلق رأس الماوس بين الأذنين باستخدام ماكينة حلاقة كهربائية. ضع قطرات العين المشحمة لمنع جفاف القرنية أثناء العملية.
  5. بعد ذلك ، ضع الماوس في إطار مجسمة (انظر جدول المواد) مع الجانب الظهري لأعلى ، وقم بتأمين الرأس باستخدام مخروط الأنف ومشبك الأسنان. الحفاظ على التخدير مع 1.2 ٪ -1.6 ٪ isoflurane من خلال أنفه.
    ملاحظة: يمكن تعديل تركيز الأيزوفلوران وفقا للحالة التنفسية للفئران.

3. الإجراء الجراحي

ملاحظة: يتم وضع الحيوانات على وسادة التدفئة أثناء جميع الإجراءات.

  1. قم بإصلاح الماوس على الجهاز المجسمي باستخدام قضبان الأذن الثنائية. تأكد من أن قضبان الأذن مستوية والرأس أفقي ومستقر.
  2. تطهير الجلد على الرأس عن طريق مسح عدة مرات مع اليود تليها الكحول في حركة دائرية. ثم استخدم مشرطا لقطع شق صغير يبلغ حوالي 1.5 سم على طول خط الوسط لفروة الرأس لفضح الجمجمة.
  3. امسح الجمجمة بقطعة قطن مغموسة في 1٪ من بيروكسيد الهيدروجين حتى يتم الكشف عن البريجما واللامدا واليافوخ الخلفي. ضع المحقنة على الجهاز المجسم.
    ملاحظة: استخدم بيروكسيد الهيدروجين بعناية وتجنب لمس الأنسجة المحيطة.
  4. ضمان الوضع الأفقي لرأس الحيوان (الأمامي والخلفي واليسار واليمين).
    1. اضبط مقبض المحور Z للإطار المجسمة بحيث يلمس طرف الإبرة والجمجمة فقط دون الانحناء، ثم قم بقياس إحداثيات المحور Z. تحقق من إحداثيات Z للبريجما واليافوخ الخلفي.
    2. اضبط شريط الأذن بحيث لا يزيد الفرق بين إحداثيات Z للبريجما واليافوخ الخلفي عن 0.02 مم. ثم اتبع نفس الطريقة لقياس إحداثيات Z للمواضع المقابلة على الجانبين الأيسر والأيمن من خط الوسط. اضبط شريط الأذن للتأكد من أن اليسار واليمين في نفس المستوى.
  5. حدد موقع الجسم الثفني. اضبط أصل XYZ على bregma.
    ملاحظة: موقع الحقن الأول هو 1.0 مم جانبي للبريجما، وعمق 2.4 مم، وأمامي 1.1 مم. موقع الحقن الثاني هو 1.0 مم جانبي إلى bregma ، وعمق 2.1 مم ، و 0.6 مم أمامي. على سبيل المثال، إحداثيات البريجما هي (0,0,0). قم بقياس إحداثيات Z للموقع المقابل الذي تم وضع علامة عليه على أنه (-1 ، 1.1 ، X) و (-1 ، 0.6 ، Y). يمكن تحديد إحداثيات موقع الحقن الأولى للجسم الثفني هي (-1 ، 1.1 ، −[X + 2.4]) ، وموقع الحقن الثاني هو (-1 ، 0.6 ، − [Y + 2.1]).
  6. بمجرد تحديد موقع الحقن ، ضع علامة بعلامة معقمة على الجمجمة وسجل الإحداثيات.
  7. قم بحفر الموقع المحدد برفق باستخدام مثقاب الجمجمة (انظر جدول المواد). احرص على تجنب أي نزيف.
  8. حرك الإبرة ببطء إلى الإحداثيات المعطاة وابدأ الحقن. للحث على إزالة الميالين من الجسم الثفني ، حقن 2 ميكرولتر من محلول LPC (الخطوة 1.) في كل موقع حقن (الخطوة 3.5) بمعدل 0.4 ميكرولتر / دقيقة.
  9. بعد الحقن ، احتفظ بالإبرة في كل موقع لمدة 10 دقائق إضافية.
    ملاحظة: تأكد من أن الفاصل الزمني لحقنتين لا يزيد عن 20 دقيقة.
  10. خياطة الجلد مع خياطة 4-0 وانتظر حتى يستيقظ الحيوان في غضون 10 دقائق. إدارة المسكنات بعد العملية الجراحية وفقا للوائح المؤسسية لرعاية الحيوانات.
    ملاحظة: يمكن تحديد الوقت الموصى به للقتل الرحيم وفقا لغرض التجربة.

4. استخراج عينة لإزالة الميالين البؤري

ملاحظة: للحصول على تفاصيل حول هذه الخطوة، يرجى الاطلاع على التقريرالمنشور سابقا 14.

  1. قم بإذابة صبغة حمراء محايدة (انظر جدول المواد) في محلول 1٪ في محلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS).
  2. قبل ساعات من التضحية بالفئران (لمزيد من التفاصيل ، انظر المرجع السابق10) ، حقن 500 ميكرولتر من صبغة حمراء محايدة بنسبة 1٪ في PBS عن طريق الحقن داخل الصفاق لكل فأر.
  3. قم بإجراء تروية القلب12 مع 30 مل من 0.1٪ PBS المبردة مسبقا عند 4 درجات مئوية.
  4. قم بتقطيع الدماغ إلى 1 مم باستخدام قالب دماغي (انظر جدول المواد).
  5. تصور الآفة الملطخة باللون الأحمر المحايد تحت المجهر وفصل الآفة.
    ملاحظة: قم بإزالة أكبر قدر ممكن من الأنسجة الطبيعية المحيطة لتحسين دقة التحليل اللاحق. يمكن فحص أنسجة الآفة باستخدام RT-PCR والمجهر الإلكتروني وتحليلات اللطخة الغربية.

5. تلطيخ الأنسجة والتألق المناعي

  1. للتلطيخ النسيجي والتألق المناعي12 ، بعد تروية القلب (الخطوة 4.3) ، قم بإزالة الدماغ10 ، وإصلاح 4٪ PFA بين عشية وضحاها (عند 4 درجات مئوية) ، وجفاف تماما في 30٪ السكروز.
  2. مقطعة إلى أقسام الدماغ الإكليلي 20 مم باستخدام قطاعة مجمدة 10 عند درجة حرارة ثابتة (-20 درجة مئوية).
  3. استخدم الشرائح لتلطيخ Luxol fast Blue (LFB) ، والتألق المناعي ، واللطخة الغربية10.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

أدى الحقن المكون من نقطتين من LPC إلى إزالة الميالين بشكل أكثر متانة
LPC يؤدي أساسا إلى تلف سريع مع سمية المايلين وانقسام سلامة المحور العصبي15. كان يوم الحقن يعتبر اليوم 0. تم الاحتفاظ بالفئران لمدة 10-28 يوما (10 نقطة في البوصة و 28 نقطة في البوصة). تم استخدام تلطيخ Luxol fast Blue (LFB)10 لتقييم منطقة إزالة الميالين في الفئران في هذه النقاط الزمنية. في نموذج الحقن المكون من نقطتين ، كان هناك إزالة ميالين كبيرة على 10 نقطة في البوصة مقارنة بمجموعة صوري...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

مرض التصلب العصبي المتعدد، وهو مرض مزيل للميالين مزيل للجهاز العصبي المركزي، هو أحد الأسباب الأكثر شيوعا للخلل العصبي لدى الشباب20 عاما. سريريا، ما يقرب من 60٪ -80٪ من مرضى التصلب المتعدد يعانون من دورة الانتكاسات والمغفرة قبل تطوير MS الثانوي التدريجي 21,22، ويؤدي في نهاية المطاف إلى ضعف الحركة التراكمي والعجز المعرفي مع مرور الوقت23. حاليا ، لا يوجد نموذج تجريبي واحد يغطي مجموعة كاملة من السمات السريرية أو المرضية...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (المنح: 82071380 ، 81873743).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
L- & alpha ؛ - Lysophosphatidylcholine من صفار البيضSigma-AldrichL4129-25MG
32 قياس إبرةهاميلتون7762-05
10 & ل حقنةهاميلتون80014
عالية السرعة الجمجمة حفرقوية ، كورياstrong204
حفرهاجر & Meisinger, Germany المرجع 500 104 001 001 005
جهاز التنفس الصناعي Matrx Animal AneathesiaMIDMARKVMR
أداة تجسيمية محمولة للماوسمكافأة68507
حقنة صغيرةKDS LEGATO 130
Isoflurane VETEASY
ParaformaldehydeServicebioG1101
عازلة الفوسفاتBOSTERPYG0021
LuxoL سريع bLueServicebioG1030-100ML
خياطةFUSUNPHARMA20152021225
قالب الدماغمكافأة68707
مثبت المجهرالإلكترونيServicebioG1102-100ML
أحمر محايد (CI 50040) ، للفحص المجهري CertistainSigma-Aldrich1.01376
الأجسام المضادة للبروتين الأساسي المضاد للمايلين   ؛Millipore#AB5864
Anti-GST-P pAbMBL# 311
Ki-67 الأجسام المضادة أحادية النسيلة (SolA15) ThermoFisher   ؛ علمي14-5698-95
بيتا أكتين أحادي النسيلة الأجسام المضادةProteintech66009-1-IG 
بروتين المايلين الأساسي متعدد النسيلة الأجسام المضادةProteintech10458-1-AP
OLIG2 الأجسام المضادة متعددة النسيلةProteintech13999-1-AP
Alexa Fluor 488   ؛ AffiniPure  الحمار المضاد للأرانب   IgG (H+L)YEASEN34206ES60
Alexa Fluor 594 AffiniPure Donkey Anti-Rat IgG (H+L) YEASEN34412ES60
Alexa Fluor 594  AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG (H+L) YEASEN34212ES60
HRP الماعز المضاد للأرانب IgG (H + L)ABCLONALAS014
HRP الماعز المضاد للفأر IgG (H + L)  abclonalAS003
الكبار C57BL / 6 ذكور وإناث الفئرانهونان SJA مختبر المحدودة
مكافأة

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Gaire, B. P., Choi, J. W. Critical roles of lysophospholipid receptors in activation of neuroglia and their neuroinflammatory responses. International Journal of Molecular Sciences. 22 (15), 7864(2021).
  2. Compston, A., Coles, A. Multiple sclerosis. Lancet. 372 (9648), 1502-1517 (2008).
  3. Dobson, R., Giovannoni, G. Multiple sclerosis - a review. European Journal of Neurology. 26 (1), 27-40 (2019).
  4. Mahad, D. H., Trapp, B. D., Lassmann, H. Pathological mechanisms in progressive multiple sclerosis. The Lancet Neurology. 14 (2), 183-193 (2015).
  5. Filippi, M., et al. Multiple sclerosis. Nature Reviews Disease Primers. 4 (1), 43(2018).
  6. Villoslada, P., Steinman, L. New targets and therapeutics for neuroprotection, remyelination and repair in multiple sclerosis. Expert Opinion on Investigational Drugs. 29 (5), 443-459 (2020).
  7. Lassmann, H. Multiple sclerosis pathology. Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine. 8 (3), 028936(2018).
  8. Franklin, R. J., Ffrench-Constant, C. Remyelination in the CNS: From biology to therapy. Nature Reviews Neuroscience. 9 (11), 839-855 (2008).
  9. Gentile, A., et al. Immunomodulatory effects of exercise in experimental multiple sclerosis. Frontiers in Immunology. 10, 2197(2019).
  10. Chen, M., et al. Deficiency of microglial Hv1 channel is associated with activation of autophagic pathway and ROS production in LPC-induced demyelination mouse model. Journal of Neuroinflammation. 17 (1), 333(2020).
  11. Luo, Q., et al. A stable and easily reproducible model of focal white matter demyelination. Journal of Neuroscience Methods. 307, 230-239 (2018).
  12. Blakemore, W. F., Franklin, R. J. Remyelination in experimental models of toxin-induced demyelination. Current Topics in Microbiology and Immunology. 318, 193-212 (2008).
  13. Degaonkar, M. N., Raghunathan, P., Jayasundar, R., Jagannathan, N. R. Determination of relaxation characteristics during preacute stage of lysophosphatidyl choline-induced demyelinating lesion in rat brain: An animal model of multiple sclerosis. Magnetic Resonance Imaging. 23 (1), 69-73 (2005).
  14. Baydyuk, M., et al. Tracking the evolution of CNS remyelinating lesion in mice with neutral red dye. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 116 (28), 14290-14299 (2019).
  15. Plemel, J. R., et al. Mechanisms of lysophosphatidylcholine-induced demyelination: A primary lipid disrupting myelinopathy. Glia. 66 (2), 327-347 (2018).
  16. Nave, K. A. Myelination and support of axonal integrity by glia. Nature. 468 (7321), 244-252 (2010).
  17. Liu, Z., et al. Induction of oligodendrocyte differentiation by Olig2 and Sox10: evidence for reciprocal interactions and dosage-dependent mechanisms. Developmental Biology. 302 (2), 683-693 (2007).
  18. Kassis, H., et al. Histone deacetylase expression in white matter oligodendrocytes after stroke. Neurochemistry International. 77, 17-23 (2014).
  19. Vorhees, C. V., Williams, M. T. Morris water maze: Procedures for assessing spatial and related forms of learning and memory. Nature Protocols. 1 (2), 848-858 (2006).
  20. Merkler, D., Ernsting, T., Kerschensteiner, M., Bruck, W., Stadelmann, C. A new focal EAE model of cortical demyelination: multiple sclerosis-like lesions with rapid resolution of inflammation and extensive remyelination. Brain. 129, Pt 8 1972-1983 (2006).
  21. Karussis, D. The diagnosis of multiple sclerosis and the various related demyelinating syndromes: A critical review. Journal of Autoimmunity. 48-49, 134-142 (2014).
  22. Kamma, E., Lasisi, W., Libner, C., Ng, H. S., Plemel, J. R. Central nervous system macrophages in progressive multiple sclerosis: Relationship to neurodegeneration and therapeutics. Journal of Neuroinflammation. 19 (1), 45(2022).
  23. Kutzelnigg, A., et al. Cortical demyelination and diffuse white matter injury in multiple sclerosis. Brain. 128, Pt 11 2705-2712 (2005).
  24. Lassmann, H., Bradl, M. Multiple sclerosis: Experimental models and reality). Acta Neuropathologica. 133 (2), 223-244 (2017).
  25. Lamport, A. C., Chedrawe, M., Nichols, M., Robertson, G. S. Experimental autoimmune encephalomyelitis accelerates remyelination after lysophosphatidylcholine-induced demyelination in the corpus callosum. Journal of Neuroimmunology. 334, 576995(2019).
  26. Torkildsen, O., Brunborg, L. A., Myhr, K. M., Bo, L. The cuprizone model for demyelination. Acta Neurologica Scandinavica. Supplementum. 188, 72-76 (2008).
  27. Zhan, J., et al. The cuprizone model: Dos and do nots. Cells. 9 (4), 843(2020).
  28. Torre-Fuentes, L., et al. Experimental models of demyelination and remyelination. Neurologia (Barcelona, Spain). 35 (1), 32-39 (2020).
  29. Merkler, D., et al. Myelin oligodendrocyte glycoprotein-induced experimental autoimmune encephalomyelitis in the common marmoset reflects the immunopathology of pattern II multiple sclerosis lesions. Multiple Sclerosis Journal. 12 (4), 369-374 (2006).
  30. Ucal, M., et al. Widespread cortical demyelination of both hemispheres can be induced by injection of pro-inflammatory cytokines via an implanted catheter in the cortex of MOG-immunized rats. Experimental Neurology. 294, 32-44 (2017).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة