يصف هذا البروتوكول تقنية معدلة ومبسطة مع إجراء انقباض الأبهر المستعرض (TAC) طفيف التوغل باستخدام مبعدة عصامي. يمكن إجراء هذا الإجراء بدون جهاز التنفس الصناعي أو المجهر ويؤدي إلى زيادة الضغط ، مما يؤدي في النهاية إلى تضخم القلب أو فشل القلب.
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
يصف هذا البروتوكول تقنية معدلة ومبسطة مع إجراء انقباض الأبهر المستعرض (TAC) طفيف التوغل باستخدام مبعدة عصامي. يمكن إجراء هذا الإجراء بدون جهاز التنفس الصناعي أو المجهر ويؤدي إلى زيادة الضغط ، مما يؤدي في النهاية إلى تضخم القلب أو فشل القلب.
انقباض الأبهر المستعرض (TAC) هو عملية جراحية تستخدم بشكل متكرر في الأبحاث المتعلقة بفشل القلب وتضخم القلب بناء على تكوين الحمل الزائد للضغط في نماذج الفئران. يتمثل التحدي الرئيسي لهذا الإجراء في تصور قوس الأبهر المستعرض بوضوح وتحديد الوعاء المستهدف بدقة. تقوم الأساليب الكلاسيكية بإجراء بضع الصدر الجزئي لكشف قوس الأبهر المستعرض. ومع ذلك ، فهو نموذج للصدر المفتوح يسبب صدمة جراحية كبيرة إلى حد ما ويتطلب جهاز التنفس الصناعي أثناء الجراحة. لمنع الصدمات غير الضرورية وتبسيط إجراءات التشغيل ، يتم الاقتراب من قوس الأبهر عبر النسبة القريبة من القص ، والوصول إلى الوعاء المستهدف وربطه باستخدام ضامد صغير عصامي يحتوي على فخ. يمكن إجراء هذا الإجراء دون دخول تجويف غشاء الجنب ولا يحتاج إلى جهاز التنفس الصناعي أو الجراحة المجهرية ، مما يترك الفئران مع أنماط التنفس الفسيولوجية ، ويبسط الإجراء ، ويقلل بشكل كبير من وقت العملية. نظرا للنهج الأقل توغلا ووقت التشغيل الأقل ، يمكن للفئران الخضوع لتفاعلات إجهاد أقل والتعافي بسرعة.
قصور القلب هو أحد الأعراض السريرية المعقدة التي تنتج عن ضعف بنية ووظيفة ملء البطين أو إخراج الدم1. يتم تحديد مرحلة المرض بشكل أساسي من خلال تصنيف وظيفة جمعية القلب في نيويورك بناء على شدة الأعراض والنشاط البدني2. بالنسبة لأولئك المرضى الذين لديهم جزء طرد يزيد عن 50٪ ، فإن التشوهات الهيكلية و / أو الوظيفية أثارت الببتيدات الناتريوتريك لدعم تشخيص قصور القلب مع الكسر القذفي المحفوظ (HFpEF) 2. مرض القلب الإقفاري هو السبب الرئيسي بين مسببات متعددة لفشل القلب. وبالتالي ، غالبا ما يستخدم نموذج احتشاء عضلة القلب (مثل ربط الشريان التاجي الدائم) لدراسة الفيزيولوجيا المرضية بعد نقص تروية القلب أو إصابة نقص التروية 3,4. إلى جانب إصابة عضلة القلب الحادة ، تساهم عوامل الخطر الأخرى مثل ارتفاع ضغط الدم والسكري والسمنة والتاريخ العائلي لاعتلال عضلة القلب أيضا في تطور قصور القلب. بعد اجتياز المرضى المرحلة A (المعرضين لخطر الإصابة بقصور القلب) ودخول المرحلة B (ما قبل قصور القلب) ، يحدث التعديل الهيكلي1. على سبيل المثال ، يمر مرضى ارتفاع ضغط الدم أولا بتضخم البطين الأيسر التكيفي ، ثم يتطورون تدريجيا إلى تضخم القلب غير القادر على التكيف والعبور إلى قصور القلب من خلال إعادة التشكيل المرضي5.
كمرحلة نهائية من أمراض القلب والأوعية الدموية المختلفة ، تمت دراسة قصور القلب المزمن لعقود6. تم استخدام نماذج الفئران المتعددة على نطاق واسع في أبحاث قصور القلب ، بما في ذلك ضخ الأدوية (أنجيوتنسين II) ، واضطرابات التمثيل الغذائي (مرض السكري أو النظام الغذائي عالي السعرات الحرارية) ، وانقباض الأبهر7. من بين هذه النماذج ، يصاحب نضح الأنجيوتنسين II آثار جانبية مختلفة للأعضاء ، مثل الكلى7. عادة ما تتطلب الاضطرابات الأيضية المستحثة فترة طويلة من الزمن. وقد اعتبر أن انقباض الأبهر الصاعد له صلة محدودة بالأمراض البشرية7.
TAC هو نموذج موثوق به يزيد من الحمل اللاحق ويحفز تضخم القلب وكذلك قصور القلب8. تم وصف نموذج TAC مفتوح الصدر لأول مرة بواسطة Rockman et al. وتم استخدامه في العديد من المختبرات حول العالم9. ومع ذلك ، فإن إجراء TAC الكلاسيكي هذا يسبب صدمة كبيرة إلى حد ما للفئران ويغير سلوكها الطبيعي ، الأمر الذي قد يستغرق وقتا طويلا للشفاء ويزعج المزيد من العلاج10. أدت إجراءات TAC المعدلة الأخرى المغلقة الصدر إلى تقليل بعض الخطوات الغازية ولكنها تتطلب مهارات جراحية مجهرية أو تهوية ميكانيكية10,11.
يفصل البروتوكول الحالي طريقة خطوة بخطوة مع نهج طفيف التوغل لقوس الأبهر باستخدام مبعدة عصامي عبر شق خط الوسط 3 مم للحافة العلوية من القص. لا يحتاج هذا النموذج إلى مهارة جراحية مجهرية أو تهوية ميكانيكية أو قطع الأضلاع ، وبالتالي توفير طريقة جراحية سريعة ومحدودة الصدمات وغير معقدة وغير مكلفة لإجراء جراحة TAC.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تمت الموافقة على البروتوكول الحالي من قبل لجنة الأخلاقيات في مستشفى تونغجي ، كلية تونغجي الطبية ، جامعة هواتشونغ للعلوم والتكنولوجيا ، ووهان ، الصين. يتم تنفيذ هذا الإجراء على ذكور الفئران البالغة C57 / BL6 (> 10 أسابيع من العمر). تم تعقيم جميع الأدوات الجراحية عن طريق التعقيم قبل العملية.
1. إعداد أداة جراحية
2. إعداد الحيوان
3. انقباض الشريان الأورطي المستعرض
4. رعاية ما بعد الجراحة
5. التصوير بالموجات فوق الصوتية
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
بعد جراحة TAC الناجحة ، تم الكشف عن الحمل الزائد للضغط باستخدام نظام التصوير بالموجات فوق الصوتية. بعد أربعة أسابيع من الجراحة ، تصاب الفئران بانخفاض وظائف القلب. في الدراسة الحالية ، تم التحقق من فعالية جراحة TAC عن طريق الكسر القذفي (EF) ، والتقصير الجزئي (FS) ، وكتلة البطين الأيسر (كتلة LV) والقطر الداخلي للبطين الأيسر (LVID) للفئران التي خضعت لجراحة TAC بعد 4 أسابيع. انخفض EF بشكل ملحوظ في الفئران TAC بعد 4 أسابيع مقارنة بالفئران الوهمية (47٪ ± 10٪ مقابل 78٪ ± 4٪ ، p < 0.0001) (
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يمكن أن يؤدي تحريض الحمل الزائد المستمر للضغط تدريجيا إلى تضخم القلب وفشل القلب. تم استخدام هذا النموذج في العديد من المختبرات حول العالم14،15،16. قدم البروتوكول طريقة TAC محسنة لا تحتاج إلى مهارات جراحية مجهرية أو تهوية ميكانيكية.
الخطوة الأكثر أهمية في هذا البروتوكول هي تمرير خياطة الحرير تحت قوس الأبهر. عندما يربط الفخ قوس الأبهر ، يجب أن تكون جميع الحركات لطيفة لتقليل الجر غير الضروري إلى الشريان....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وأعلن أصحاب البلاغ أنه لا يوجد تضارب في المصالح.
يتم تمويل هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (NSFC 81822002). ونشكر جميع الأعضاء الذين شاركوا في هذا العمل.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 4-0 خياطة غير قابلة للامتصاص | Jinhuan | HM403 | تستخدم لخياطة الجلد |
| حقنة 5 مل | Haifuda Technology Co.، Ltd. | BD-309628 | تستخدم لصنع الفخ الذي يحتوي على ضام |
| 7-0 خياطة غير قابلة للامتصاص | Jinhuan | HM701 | تستخدم لربط الشريان الأورطي |
| مراقبة درجة حرارة | Kaerwen | FT3400 | تستخدم لمراقبة درجة حرارة الجسم |
| بوبرينورفين ؛ | Sigma | B-044 | يستخدم لعلاج آلام ما بعد الجراحة |
| كريم مزيل الشعر | Veet | N / A | يستخدم لإزالة شعر الجسم من المنطقة الجراحية |
| وسادة التدفئة | Xiaochuangxin | N / A | تستخدم للحفاظ على درجة حرارة الجسم |
| الإيبوبروفين | MCE | HY-78131 | تستخدم لعلاج الآلام بعد الجراحة |
| سلك حديدي (0.5 مم) | تشينغ يوان | الحديدي # 26 | يستخدم لصنع الفخ الذي يحتوي على |
| ملاقط مجهرية | RWD | F12006-10 | تستخدم لاختراق وفصل الأنسجة لفتح مساحة التشغيل |
| حامل إبرة | RWD | F12005-10 | يستخدم لقرص طرف إبرة المقياس وتخفيف ملقط |
| العيون | RWD | F14012-10 & nbsp ؛ | يستخدم لتثبيت الجلد والأنسجة الأخرى |
| مقص العيون | RWD | S11001-08 | يستخدم لعمل شق سكينغ للفأر |
| Pentobarbital الصوديوم | Sigma | P3761 | يستخدم لتخدير الفأر |
| حصيرة تشغيل معقمة | Hale & 211002 القلبية | تستخدم لوضع أثناء الجراحة | |
| نظام التصوير بالموجات فوق الصوتية | Fujifilm visualsonics | vevo1100 | تستخدم لقياس سرعة تدفق الدم وسمك جدار البطين الأيسر وكسر القذف https://www.visualsonics.com/product/imaging-systems/vevo-1100 |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه
طلب إذن