مقالة منهجية

منهجيات البحث في أمراض الأوعية الدموية

DOI:

10.3791/64588

أغسطس 16, 2022

في هذه المقالة

الملخص

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المقالات التي تمت مناقشتها:

أوماتسو ، أ. وآخرون. طريقة كشف كمية للحمض النووي الريبي الصغير في الكلى لنموذج الفأر الإقفاري لإصابة الكلى. مجلة التجارب المرئية. (163) ، e61378 (2020).

باور ، س. ، باولي ، ج. ، بيليسيك ، ج. استخراج الحمض النووي الأمثل عالي الجودة من آفات تصلب الشرايين البشرية المضمنة في البارافين الثابت بالفورمالين. مجلة التجارب المرئية. (168) ، e61452 (2021).

Suárez-Cuenca, J. A. et al. التنبؤ بالبتر باستخدام الخلايا السلفية أحادية النواة المنتشرة المحلية في المرضى الذين عولجوا بالرأب الوعائي والذين يعانون من نقص تروية الأطراف الحرجة. مجلة التجارب المرئية. (163) ، e61503 (2020).

Zoli, M. et al. دور تصوير المجرى بالرنين المغناطيسي المنتشر في جراحة قاعدة الجمجمة داخل الأنف بالمنظار. مجلة التجارب المرئية. (173) ، e61724 (2021).

افتتاحية

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الغرض الرئيسي من المجموعة الحالية هو تزويد القراء بمعرفة محدثة حول المنهجية الجديدة لدراسة أمراض الأوعية الدموية على مستويات الخلايا والبروتين والحمض النووي الريبي المرسال ، سواء في الجسم الحي أو في المختبر ، في البشر أو في نموذج الفأر. يتضمن ذلك طرائق التصوير والذكاء الاصطناعي الجديدة ، بالإضافة إلى التحليل النسيجي المرضي الممتد إلى استرجاع الأنسجةالصعب 1 ، مثل الشرايين المتكلسة. تقدم المجموعة أربع طرق تجيب بشكل كامل على هذه الأسئلة ، وتقدم إشارات مثيرة للاهتمام حول كيفية التعامل مع القضايا القديمة من منظور حديث وتكنولوجي ، مما يدل على تطور تقني سريع في هذا المجال.

إصابة نقص تروية الدم (IRI) هي عامل خطر رئيسي لإصابة الكلى الحادة (AKI) 2. لم يتم إنشاء مؤشرات حيوية تشخيصية محددة ، على الرغم من أن miRNAs مرشحة ممتازة3. أوماتسو وآخرون.4 طور نموذج ماوس AKI مثير للاهتمام ، لتنقية وقياس miRNAs بواسطة qRT-PCR. حددوا 17 miRNAs عالية التنظيم مع AKI ، الناجمة عن تلف نقص تروية إعادة التروية. تسمح الطريقة بدراسة ملف تعريف miRNAs في كلى AKI بنطاق ديناميكي وقياس دقيق وخصوصية عالية. بالإضافة إلى ذلك ، يسهل النموذج إعطاء الأدوية قبل وبعد IRI. يصف البروتوكول أيضا للقارئ النقاط الحرجة التي يجب أن يكون على دراية بها وردود الفعل غير المحددة بعد تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). بعض النقاط الرئيسية هي التجانس ، واختيار التحكم الداخلي ، وجودة miRNAs المنقاة. هذه الطريقة مفيدة للغاية لأنها توفر نموذجا حيوانيا ل AKI لدراسة IRI في الكلى البشرية ، والتي من المحتمل أن تكون مجدية لمزيد من الدراسات بخلاف miRNAs.

أنشأ باور وآخرون طريقة شبه آلية لاستخراج الحمض النووي من كمية صغيرة من لويحات تصلب الشرايين المضمنة بالبارافين الثابت في الفورمالين. هذا موضوع آخر مثير للاهتمام ، لأنه من المحتمل أن يوفر طريقة موحدة لدراسة البيولوجيا المرضية لأنسجة صعبة للغاية ، مثل ورم الشرايين المتكلسالمنتشر 1. هذا يجعل استرجاع الأنسجة صعبا ، لأنه يتضمن استخدام بروتوكولات إزالة الكلس التي تغير الأحماض النووية ومحتوى الخلايا الأخرى1. حصل المؤلفون على تركيز أعلى للحمض النووي وجودة DNA أفضل (الاستقرار والاستنساخ) مقارنة بطريقتين يدويتين قائمتين على العمود ، دون فروق ذات دلالة إحصائية في تجزئة الحمض النووي. تشمل تعديلات البروتوكول المهمة خطوة الحضانة لإزالة البارافين (سمية أقل من الكواشف) ، وهضم البروتياز K بين عشية وضحاها ، ووقت حضانة إضافي بعد إضافة محلول التحلل عند 65 درجة مئوية ، وزيادة حجم الشطف. من المؤكد أن البروتوكول واعد للتحليلات المستقبلية عالية الإنتاجية.

قدم Suarez-Cuenca et al.6 بروتوكولا للقياس الكمي للخلايا السلفية أحادية النواة المنتشرة (MPCs) من الأوعية القريبة من موقع الرأب الوعائي ، من أجل التنبؤ بخطر بتر الأطراف في المرضى الذين يعانون من نقص تروية الأطراف الحرجة (CLI). هذا موضوع آخر مثير للاهتمام ، نظرا لأن خطر البتر في CLI في الوقت الحاضر لا يزال مرتفعاجدا 7 ، وهناك نقص كبير في النماذج التنبؤية المتاحة8. تعد إمكانية تحديد المؤشرات الحيوية المنتشرة واعدة للغاية في الممارسة السريرية ، مما يوفر منظورا مجديا لتغيير تاريخ وإدارة المرضى الذين يعانون من CLI.

من خلال عمل Zoli et al.9 ، تم استخدام تقنية التصوير لفحص امتداد أورام الغدة النخامية وثنائية الدماغ وأورام قاعدة الجمجمة. يعد تقييم التصوير العصبي قبل الجراحة أمرا بالغ الأهمية قبل الجراحة القائمة على الجمجمة ، ونادرا ما تم اعتماد تصوير الجهاز في جراحة قاعدة الجمجمة حتى الآن بسبب المشكلات الفنية10. بالإضافة إلى تنفيذ بروتوكول التصوير بالرنين المغناطيسي لإدارة هذه الأورام ، كان هدف المؤلفين أيضا وصف التعاون الانتقالي بين جراحي الأعصاب وفريق التصوير العصبي. يقدم هذا التعاون بروتوكولا متعدد التخصصات لنهج فعال ومتكامل متعدد المحاور لهؤلاء المرضى. تضمن البروتوكول المنفذ تسلسلات سريعة (مسح التشفير العكسي للطور للصور المرجحة بالانتشار) كنهج جديد لتصحيح ما بعد المعالجة المتقدمة. هذا يفتح الطريق لمناهج جديدة لدراسة ما قبل الجراحة لهذه الأورام الصعبة.

لا تزال أمراض الشرايين الوعائية مشكلة صحية كبيرة في جميع أنحاء العالم ، وهناك حاجة إلى طرق جديدة أكثر فأكثر من أجل دراسة هؤلاء المرضى على مستويات مختلفة ، من التصوير والدم إلى الأنسجة. تكشف هذه المجموعة عن نصائح للتغلب على بعض المشكلات في دراسة أمراض الأوعية الدموية ، وفهمها: (1) طرق جديدة لدراسة محتوى خلايا البلاك والبروتين والحمض النووي الريبي المرسال ، (2) التحليل النسيجي المرضي الممتد إلى استعادة الأنسجة الصعبة (على سبيل المثال ، المناطق المتكلسة) ، و (3) القياس الكمي لتكوين الأوعية. من المؤكد أن تطوير وكشف مناهج جديدة تتعلق بتحليل الأنسجة ذات صلة بمجموعة واسعة من الأمراض ومن المحتمل أن تؤثر على الإرشادات السريرية للتشخيص على جميع المستويات.

الإفصاحات

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المؤلفون ليس لديهم اعترافات.

المراجع

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Fittipaldi, S., et al. The study of calcified atherosclerotic arteries: an alternative to evaluate the composition of a problematic tissue reveals new insight including metakaryotic cells. BMC Clinical Pathology. 16, 12(2016).
  2. Kelly, K. J. Acute renal failure: much more than a kidney disease. Seminas in Nephrology. 26 (2), 105-113 (2006).
  3. Fittipaldi, S., et al. miRNA signature of hepatocellular carcinoma vascularization: how the controls can influence the signature. Digestive Diseases and Sciences. 62 (9), 2397-2407 (2017).
  4. Aomatsu, A., et al. A quantitative detection method for microRNAs in the kidney of an ischemic kidney injury mouse model. Journal of Visualized Experiments. (163), e61378(2020).
  5. Bauer, S., Pauli, J., Pelisek, J. Optimized high quality DNA extraction from formalin-fixed paraffin-embedded human atherosclerotic lesions. Journal of Visualized Experiments. (168), e61452(2021).
  6. Suárez-Cuenca, J. A., et al. Predicting amputation using local circulating mononuclear progenitor cells in angioplasty-treated patients with critical limb ischemia. Journal of Visualized Experiments. (163), e61503(2020).
  7. Uccioli, L., et al. Critical limb ischemia: current challenges and future prospects. Vascular Health and Risk Management. 14, 63-74 (2018).
  8. Vasuri, F., et al. Biochemical and immunomorphological evaluation of hepatocyte growth factor and c-Met pathway in patients with critical limb ischemia. European Journal of Vascular and Endovascular Surgery. 48 (4), 430-437 (2014).
  9. Zoli, M., et al. Role of diffusion MRI tractography in endoscopic endonasal skull base surgery. Journal of Visualized Experiments. (173), e61724(2021).
  10. Jacquesson, T., et al. Full tractography for detecting the position of cranial nerves in preoperative planning for skull base surgery: technical note. Journal of Neurosurgery. 132 (5), 1642-1652 (2019).

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

MicroRNAsIschemic Kidney InjuryDNA ExtractionAtherosclerotic LesionsMononuclear Progenitor CellsCritical Limb IschemiaDiffusion MRI TractographyEndoscopic Endonasal Skull Base Surgery

مقالات ذات صلة