يصف هذا البروتوكول نموذج تبديل ورم العصب الظنبوبي ، والذي يستلزم آفة في العصب الظنبوبي مع تبديل لاحق لنهاية العصب القريب نحو وضع ما قبل الظنبوب أو الجانب تحت الجلد. يتم قياس الاختبار السلوكي لألم الورم العصبي وفرط التألم الأخمصي باستخدام خيوط فون فراي الأحادية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
الجراحة والاختبارات السلوكية في نموذج تبديل الورم العصبي الظنبوبي في الفئران
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تبديل الورم العصبي الظنبوبي (TNT) هو نموذج للفئران يمكن فيه تقييم الأورام الخيفية في موقع الورم العصبي (العصب الظنبوبي) بشكل مستقل عن الألم الخيفي على السطح الأخمصي للمخلب الخلفي المعصب بواسطة العصب الجداري السليم. نموذج TNT هذا مناسب لاختبار علاجات آلام الورم العصبي ، مثل التفوق المحتمل لبعض العلاجات الجراحية المستخدمة بالفعل في العيادة ، أو لتقييم الأدوية الجديدة وتأثيرها على كل من طرق الألم في نفس الحيوان. في هذا النموذج ، يتم إجراء آفة بعيدة (neurotmesis) في العصب الظنبوبي ، ويتم نقل نهاية العصب القريب وتثبيتها تحت الجلد وقبل الظنبوب لتمكين تقييمات موقع الورم العصبي باستخدام خيوط أحادية Von Frey 15 جم. لتقييم الألم الخيفي على العصب الجدري ، يمكن استخدام خيوط Von Frey الأحادية عبر طريقة أعلى لأسفل في المنطقة الجانبية الأخمصية للمخلب الخلفي. بعد قطع العصب الظنبوبي ، تتطور فرط الحساسية الميكانيكية في موقع الورم العصبي في غضون أسبوع واحد بعد الجراحة وتستمر على الأقل حتى 12 أسبوعا بعد الجراحة. يتطور الألم الخيفي على السطح الأخمصي المعصب في الجدارية في غضون 3 أسابيع بعد الجراحة مقارنة بالطرف المقابل. في الأسبوع 12 ، يتشكل ورم عصبي على الطرف القريب من العصب الظنبوبي المقطوع ، ويشار إليه بتشتت ودوامات المحاور. بالنسبة لجراحة نموذج TNT ، يجب اتباع خطوات جراحية حرجة (دقيقة) متعددة ، وينصح ببعض ممارسات الجراحة تحت التخدير النهائي. بالمقارنة مع نماذج آلام الأعصاب الأخرى ، مثل نموذج إصابة العصب الذي تم تجنيبه ، يمكن اختبار الألم الخيفي فوق موقع الورم العصبي بشكل مستقل من فرط حساسية العصب الجداري في نموذج TNT. ومع ذلك ، يمكن اختبار موقع الورم العصبي فقط في الفئران ، وليس في الفئران. يمكن أن تساعد النصائح والتوجيهات الواردة في هذا البروتوكول مجموعات البحث التي تعمل على الألم على تنفيذ نموذج TNT بنجاح في منشآتها.
المقدمة
كل جرح ، يتراوح من التمزقات البسيطة إلى بتر الأطراف بالكامل ، مصحوب بدرجات متفاوتة من إصابة الأعصاب الطرفية. يمكن أن تؤدي إصابة الأعصاب هذه إلى تكوين ورم عصبي ، وهو تشابك غير منظم للألياف العصبية المنبثقة. تصبح الأورام العصبية مؤلمة في 8٪ -30٪ من المرضى ، مما يؤثر بشدة على نوعية حياتهم1،2،3،4،5. بعد بتر الأطراف ، يتطور ألم الورم العصبي في 50٪ من المرضى6،7،8. تشمل الأعراض المبلغ عنها الرقة ، والألم التلقائي ، والألم....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تم إجراء هذا البحث وفقا ل IVD (Instantie voor Dierenwelzijn Utrecht) والمبادئ التوجيهية للبحوث الحيوانية ، رقم المشروع AVD1150020198824.
1. قياسات خط الأساس فون فراي
- قبل الجراحة ، قم بإجراء قياسات خط الأساس وفقا لإجراء اختبار Von Frey ، الموضح أدناه في القسم 5 والقسم 6.
2. التخدير والتحضير
ملاحظة: أجريت هذه الدراسة على 15 من ذكور فأر Sprague Dawley التي كان عمرها 12 أسبوعا.
- تخدير الحيوانات عن طريق الحث مع 5 ٪ إيزوفلوران والحفاظ على التخدير مع 2 ٪ -3 ٪ إيزوفلوران.
ملاحظة: عادة ما تؤدي الصيانة التي تحتوي على إيزوفلوران بنسبة ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
أظهر التقييم في موقع الورم العصبي زيادة الحساسية لتطبيق خيوط 15 g von Frey الأحادية. عند خط الأساس ، استجابت الفئران عادة ل 10٪ -15٪ (± 13٪) من 25 تطبيقا لخيوط أحادية 15 جم. ارتفع معدل الاستجابة إلى 45٪ -50٪ (± 24٪) 1 أسبوع بعد جراحة TNT. على الجانب المقابل، كان عدد الاستجابات بعد الجراحة مشابها لتلك الموجودة عند خط الأساس (الشكل 2 أ). حوالي 20 ٪ من الفئران لم تتطور ورم عصبي مؤلم. ولم يزد معدل الاستجابة مقارنة بخط الأساس (الشكل 2 باء). هذا مشابه للحالة البشرية ،.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
الخطوات الحاسمة في البروتوكول
يتضمن نموذج TNT قطع العصب الظنبوبي ونقله بشكل جانبي وتحت الجلد إلى موقع ما قبل الظنبوب لتمكين اختبار حساسية الورم العصبي ، بالإضافة إلى فرط التألم الأخمصي على العصب الجداري. في نموذج TNT ، من المهم أن يكون مكان الورم العصبي مرئيا للباحثين. لذلك ، يفضل سلالة الفئران البيضاء لأن الغرز تحت الجلد يمكن رؤيتها بسهولة من خلال الجلد ويفضل أن يكون لون الخيط أزرق داكن أو أسود.
عندما يتم إجراء الجراحة ويتعرض العصب الظنبوبي ، يكون هناك اختلاف في المكان (عل.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
أفاد المؤلفون أنه ليس لديهم تضارب في المصالح. على الرغم من أن هذا العمل البحثي تم تمويله جزئيا من قبل Axogen ، إلا أن الشركة لم يكن لها أي تأثير على تنفيذ الدراسة وعلى النتائج.
شكر وتقدير
نود أن نشكر سابين فيرستيج على المساعدة أثناء الجراحة المجهرية وأنجا فان دير سار وترودي أوسترفيلد-رومين من مختبر الحيوانات المشتركة (Gemeenschappelijk Dieren Laboratorium) لمساعدتهم في إعداد المجهر وغرفة الجراحة ورعاية الحيوانات.
تم تمويل هذا البحث من قبل Axogen.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
514007 أجهزة حامل إبرة
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| Aesthesio | Linton | حتى 514015 | 0.6 جم حتى 15 جم من الشعيرات الأحادية |
| الصيدلية البيطرية المحلية Carprofen | Medicinal N / a | تصنع الصيدلية البيطرية المحلية تخفيف الكابروفين | |
| مسحات قطنية | Nobamed | 974255 | |
| Electrocautery | أدوات العلوم الدقيقة | 18010-00 | |
| الإيثانول 70٪ | Interchema BV | 400406 | |
| إثيلون 4.0 | جونسون آند أمبير جونسون | 1854G | هام: يجب أن يكون اللون أزرق أو أسود |
| Ethilon 8.0 | Johnson & amp جونسون | BV130-5 | |
| Isoflo ، isoflurane Zoetis | Dechra المنتجات البيطرية | B506 | |
| أقفاص سفلية شبكية | StoeltingCo | 57816 و 57824 | |
| ملقط صغير | أدوات العلوم | الدقيقة 11251-35 | |
| حامل إبرة صغيرة ؛ | أدوات العلوم الدقيقة | 12076-12 | |
| مقص صغير | أدوات العلوم | الدقيقة 15019-10 | |
| ملاقط صغيرة | أدوات العلوم الدقيقة | 11254-20 | |
| كلوريد الصوديوم 0.9٪ | Trademed | H7 1000-FRE | |
| أدوات العلوم | الدقيقة 12004-16 | ||
| مرهم العيون ؛ | الصيدلية البيطرية المحلية | n / a | الصيدلية البيطرية المحلية تصنع مرهم العيون |
| مشرط | أدوات العلوم الدقيقة | 10003-12 | |
| مقص | أدوات العلوم الدقيقة | 14001-12 | |
| مجهر جراحي ستيريو | Leica | A60 F | |
| ورقة معقمة مع ثقب | شفرة جراحية Evercare OneMed | 1555-01 | |
| رقم 15 | أدوات العلوم الدقيقة | 10015-00 | |
| أدوات العلوم الدقيقة للملاقط | 11617-12 |
المراجع
- Stokvis, A., vander Avoort, D. J., van Neck, J. W., Hovius, S. E., Coert, J. H. Surgical management of neuroma pain: a prospective follow-up study. Pain. 151 (3), 862-869 (2010).
- Domeshek, L. F., et al. Surgical treatment of neu....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
