$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
ظهر جائحة فيروسي ناجم عن فيروس كورونا بيتاالجديد 1 (أي 2019-nCoV) ، والذي أطلق عليه لاحقا اسم فيروس كورونا 2 (SARS-CoV-2) 2 (يشار إليه فيما يلي باسم الفيروس) ، والذي ينطوي على عنقود رئوي وضيق تنفسي حاد شديد ، في مدينة ووهان ، الصين ، في نهاية عام 20193. نظرا لانتقاله السريع من إنسان إلى إنسان في جميع أنحاء العالم ، وارتفاع معدل الإصابة ، وارتفاع معدل الوفيات ، والآثار الضارة الخطيرة التي تهدد الحياة4 ، خلال الوباء ، تطورت أبحاث علمالفيروسات 5 بسرعة لتحديد التنظيم الجيني للفيروس وهيكله5،6. تشمل أعراض COVID-19 7,8 ارتفاع في درجة الحرارة والسعال الجاف والألم العام9. الأهم من ذلك ، أن الأنماط المصلية المختلفة للفيروس تؤدي إلى اختلاف شدة المرض10. علاوة على ذلك ، يمكن للناقلات التي لا تظهر عليها أعراض أن تنشر الفيروس. عادة ، تحت المجهر ، تظهر جزيئات فيروس COVID-19 إسقاطات تشبه النادي تتكون من بروتينات سبايك11. لذلك ، للسيطرة على انتشار هذا العامل الممرض الجديد ، يجب أن يكون الكشف عن الحالات في الوقت المناسب وفعالا. وبالتالي ، أصبح الكشف شديد الحساسية والسرعة والانتقائي للفيروس في المراحل المبكرة من العدوى الفيروسية أمرا بالغ الأهمية2،11. هناك حاجة إلى التباعد الاجتماعي / الجسدي لتجنب انتقالالفيروس 12. وتؤكد الوكالات الصحية على تطوير أدوات التشخيص الذكية وأنظمة النانو13. في الواقع ، كما اقترحت الوكالات الصحية ، هناك حاجة إلى اختبار مستهدفوجماعي 14،15 ولا يزال مطلوبا.
من حيث المبدأ ، تعد طرق التشخيص البيولوجي المستمرة مثل تفاعل البوليميراز المتسلسل للنسخ العكسي (RT-PCR) أفضل وسيلة للتعرف الجماعي على SARS-CoV-2 ، كما هو الحال مع فيروس كورونا المرتبط بمتلازمة الشرق الأوسط التنفسية (MERS-CoV) 16 و SARS-CoV-117. في هذا السياق ، يعتمد التحديد المعياري الحالي للتلوث ب SARS-CoV-2 على تعزيز الخصائص الخاصة بالعدوى18،19. بالإضافة إلى ذلك ، يجب مراعاة التباين في عدوى SARS-CoV-2 وفقا للمنطقة والعمر والعرق والجنس. مع الهدف النهائي المتمثل في إنقاذ الأرواح ، من الأهمية بمكان بناء أدوات تشخيص سريعة لاستخدام نقاط الرعاية (POC) 20،21.
في هذا السياق ، فإن الاستراتيجيات المنتظمة مثل التهجين الموضعي الفلوري (FISH) ، وفحص الممتز المناعي للبروتين (ELISA) ، والطرق القائمة على الكرة المجهرية ، والاختبارات الكهروكيميائية ، والتصوير بالرنين المغناطيسي ، و PET ، و NIRFOI22 لها حساسية منخفضة لمستويات الفيروس المنخفضة ، وانتقائية منخفضة ، وقدرة منخفضة على إعادة الاستخدام. بالإضافة إلى ذلك ، فإن هذه الإجراءات لها عيوب ، بما في ذلك أنظمة تشخيص الاستشعار الحيوي المكلفة ، والكواشف غير القابلة لإعادة الاستخدام ، ومتطلبات القوى العاملة ذات المهارات العالية23. لذلك ، لا يمكن اعتبار هذه التقنيات الثاقبة على أنها طرق POC سريعة أو معقولة أو محددة بشكل استثنائي أو حساسة24،25. وتجدر الإشارة إلى أن هناك أنواعا مختلفة من أجهزة الاستشعار الحيوية القائمة على الحمض النووي والتحصين والتي تستخدم التقنيات المركبة والسعوية والكهربائية18،26،27،28. على سبيل المثال ، يمكن تقليص أجهزة الاستشعار الحيوية للحمض النووي الكهربائي ، التي تتمتع باستجابة عالية ، ببساطة ، وهي قابلة للضبط29،30 ، وقد تم إنتاجها للكشف عن الإيبولا31 ، وزيكا ، وفيروس كورونا المسبب لمتلازمة الشرق الأوسط التنفسية ، وفيروس كوروناالسارس 32،33،34. وبالمثل ، تم إنشاء مستشعر حيوي لأشباه الموصلات ذات التأثير الميداني (FET) للكشف عن بروتين سبايك للفيروس باستخدام بعض الأجسام المضادة (أحادية النسيرة) المثبتة على الأجهزة المزججة بالجرافينبشكل فعال 35،36. ومع ذلك ، فإن هذه الاستراتيجية الجديدة أقل حساسية من RT-PCR. وعلاوة على ذلك، تم في الآونة الأخيرة، وضع إطار للكشف ثلاثي الأبعاد عن الفيروس مغطى بأكسيد الجرافين النفاث النفاث على الهباء الجوي، والذي له حد منخفض لتحديد الهوية (2.8 × 10-15 م). على أي حال ، تم اختبار هيكل المستشعر الحيوي المعقدالمقترح 35 فيما يتعلق باستخدام POC ومقارنته باستراتيجيات الاستشعار الحيوي الأخرى الموجودة المستخدمة للكشف عن الفيروس35،37،38.
في هذه الدراسة ، قمنا بتصميم وتصنيع مستشعر حيوي DIDC مصغر وقابل لإعادة الاستخدام قائم على GrO لتحديد بروتين سبايك الفيروس دون القيود الموضحة أعلاه لأجهزة الاستشعار الحيوية الأخرى. يسمح هذا المستشعر الحيوي بالكشف على مستوى الفيمتوجرام (fg) في غضون 3 ثوان18,27 من وقت الاستجابة. لإنجاز هذا البحث ، تم اختيار رقائق GrO النانوية لتحسين الاستجابة والانتقائية ، مما يعني أنه يمكن اكتشاف تركيزات منخفضة من بروتين مستضد الفيروس من مسحات الفم والبلعوم أو البلعوم الأنفي. GrO هي مادة مناسبة ويمكن الاعتماد عليها صناعيا ومتسقة وموصلة يمكن استخدامها بشكل مفيد لتطبيقات الاستشعار الحيوي2،39،40،41. بالإضافة إلى ذلك ، تم استخدام نهج تهجين أحادي النسيلة الخالي من الملصقات المضادة IgG ، مع التركيز على بروتين S1 للفيروس. يمكن إعادة استخدام المستشعر الحيوي SARS-CoV-2-GrO-DIDC المصنع بعد المعالجة المتقدمة والتنظيف بمحلول سمكة الضاري المفترسة. يمكن استخدام هذا المستشعر الحيوي فائق السرعة والحساس والانتقائي وخالي من الملصقات وقابل لإعادة الاستخدام للاستشعار الحيوي للعينات السريرية وتطبيقات الرعاية الصحية الشخصية26،42،43،44.