هنا ، نصف طريقة بسيطة لزرع جهاز مراقبة الجلوكوز المستمر التجاري المصمم للمرضى على الفئران وتوفير البرامج النصية لتحليل النتائج.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
مراقبة بسيطة مستمرة للجلوكوز في الفئران التي تتحرك بحرية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
الفئران هي كائن نموذجي شائع يستخدم لدراسة الأمراض الأيضية مثل داء السكري. عادة ما يتم قياس مستويات الجلوكوز عن طريق نزيف الذيل ، والذي يتطلب التعامل مع الفئران ، ويسبب الإجهاد ، ولا يوفر بيانات عن الفئران التي تتصرف بحرية خلال الدورة المظلمة. يتطلب قياس الجلوكوز المستمر المتطور في الفئران إدخال مسبار في قوس الأبهر للفأر ، بالإضافة إلى نظام قياس عن بعد متخصص. لم يتم اعتماد هذه الطريقة الصعبة والمكلفة من قبل معظم المختبرات. هنا ، نقدم بروتوكولا بسيطا يتضمن استخدام أجهزة مراقبة الجلوكوز المستمرة المتاحة تجاريا والتي يستخدمها ملايين المرضى لقياس الجلوكوز بشكل مستمر في الفئران كجزء من البحث الأساسي. يتم إدخال مسبار استشعار الجلوكوز في الفضاء تحت الجلد في الجزء الخلفي من الماوس من خلال شق صغير في الجلد ويتم تثبيته في مكانه بإحكام باستخدام بضع غرز. يتم خياطة الجهاز على جلد الفأر لضمان بقائه في مكانه. يمكن للجهاز قياس مستويات الجلوكوز لمدة تصل إلى 2 أسابيع ويرسل البيانات إلى جهاز استقبال قريب دون الحاجة إلى التعامل مع الفئران. يتم توفير البرامج النصية لتحليل البيانات الأساسية لمستويات الجلوكوز المسجلة. هذه الطريقة ، من الجراحة إلى التحليل الحسابي ، فعالة من حيث التكلفة ويحتمل أن تكون مفيدة جدا في أبحاث التمثيل الغذائي.
المقدمة
داء السكري (DM) هو مرض مدمر يتميز بارتفاع مستويات الجلوكوز في الدم. يمكن أن يكون النوع 1 DM نتيجة لهجوم المناعة الذاتية على خلايا بيتا المنتجة للأنسولين في البنكرياس. من ناحية أخرى ، يتميز النوع 2 DM و DM الحملي بفشل خلايا بيتا في إفراز كمية كافية من الأنسولين استجابة لارتفاع مستويات الجلوكوز1. الفأر هو كائن نموذجي شائع يستخدم لدراسة DM لأنه يحتوي على فسيولوجيا مماثلة ، ومستويات الجلوكوز الطبيعية قريبة من مستويات البشر. علاوة على ذلك ، قد تصاب سلالات معينة من الفئران ب DM بسبب الطفرات في مسارات الإشارات الرئيسية أو بعد التعرض لأنظمة غذائية محددة ، مما يتيح نمذجة المرض2،3....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تمت الموافقة على التجارب من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانات في الجامعة العبرية (IACUC).
ملاحظة: يجب تعقيم جميع الأدوات ، ويجب إجراء التعامل مع القنية باستخدام تقنية معقمة. يتم ضبط البروتوكول أدناه بدقة على CGM محدد. يمكن تكييف البروتوكول مع CGMs الأخرى.
1. إعطاء مسكن قبل الإجراء
- يتم تطبيق 5٪ دكستروز ومحلول ملحي 0.45٪ مع ميلوكسيكام عند تناول 5 ملغ/ كغ من وزن الجسم تحت الجلد.
2. إدارة التخدير
- ضع الماوس في غرفة الحث ، وأغلق الغطاء بإحكام. اضبط تحريض التخدير في غرفة الحث على 3٪ إيزوفلوران بمعدل تدفق 500 مل / دقيقة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
النتائج الجراحية
النتائج من ثمانية HSD: ICR الفئران (الذين تتراوح أعمارهم بين 8 أسابيع) تغذت على نظام غذائي عالي الدهون عالية السكروز (HFHS) لمدة 18 أسبوعا وخمسة HSD: الفئران ICR العجاف (الذين تتراوح أعمارهم بين 12 أسبوعا) موضحة. يخزن الجهاز الذي استخدمناه البيانات لمدة تصل إلى 8 ساعات. تم تقييد الوصول إلى مرفق الحيوانات المحلي إلى الساعة 07:00 إلى الساعة 19:00 ، وبالتالي حظر جمع البيانات خلال ساعات المساء المتأخرة ، عندما تكون الفئران نشطة. لذلك ، تم وضع الفئران في غرفة ذات إضاءة عكسية لمدة 7 أيام قب.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
يقدم هذا البروتوكول طريقة بسيطة وغير مكلفة لمراقبة مستويات الجلوكوز في الفئران التي لا تتطلب جراحة مجهرية صعبة ولا تنطوي على نزيف أو التعامل مع الفئران. هذه الطريقة سهلة التنفيذ في كل منشأة ولا تسبب الوفيات أو الألم أو الانزعاج المفرط للفئران. الخطوة الأكثر أهمية في البروتوكول هي إدخال قنية مستشعر الجلوكوز تحت جلد الماوس. تسمح إضافة بعض الغرز للقنية بالبقاء في مكانها لفترة أطول. المستشعرات صغيرة ويمكن أن تصبح مسدودة أو في غير محلها أثناء تحرك الماوس. يجب تأمين المستشعر بواسطة الغرز الداخلية وتوصيله بالجزء الخلفي من الماو.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للكشف عنه.
شكر وتقدير
نشكر Dvir Mintz DVM والموظفين البيطريين وتربية الحيوانات في منشأة الحيوانات ، وكذلك أعضاء مجموعتنا ، على المناقشات المثمرة. تم دعم هذه الدراسة من خلال منحة مؤسسة العلوم الإسرائيلية 1541/21 الممنوحة ل D.B.Z. D.B.Z. هي كلية Zuckerman STEM.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 2٪ كلورهيكسيدين غلوكونات و 70٪ كحول الأيزوبروبيل | 3M | ID 7000136290 | |
| 5٪ سكر العنب و 0.45٪ حقن كلوريد الصوديوم ، حامل | Braun | L6120 | |
| Castroviejo | FST | 12061-02 | |
| مقص بون فائق الدقة | FST | 14084-08 | |
| فري ستايل ليبر 1 قارئ | أبوت | ART27543 | |
| مستشعر فري ستايل ليبري | أبوت | ART36687 | |
| فري ستايل ليبري قضيب مستشعر | أبوت | ART36787 | |
| وسادات شاش سيون | الطبية | PC912017 | |
| ملقط Graefe | FST | 11052-10 | |
| كريم إزالة الشعر | Veet | 3116523 | |
| حمية عالية السكروز عالية الدسم | Envigo Teklad الوجبات الغذائية | TD.08811 | |
| Isoflurane ، USP Terrell | Piramal | 26675-46-7 | |
| Meloxicam 5 مجم / مل | Chanelle Pharma | 08749/5024 | |
| MiniARCO Clipper Kit | Moser | CL8787-KIT | |
| PROLENE Polypropylene Suture 5-0 | Ethicon | 8725H | |
| Puralube Opthalmic Ointment | Perrigo | 574402511 | |
| س نصائح | نظام التخدير منخفض التدفق BHW | 271676 | |
| SomnoSuite | Kent Scientific | SOMNO |
المراجع
- Polonsky, K. S. The past 200 years in diabetes. New England Journal of Medicine. 367 (14), 1332-1340 (2012).
- Rees, D. A., Alcolado, J. C. Animal models of diabetes mellitus. Diabetic Medicine. 22 (4), 359-370 (2005).
- Pearson, J. A., Wong, F. S., Wen, L.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
