التزم البروتوكول بالكود الأسترالي للمجلس الوطني الأسترالي للصحة والبحوث الطبية لرعاية واستخدامها للأغراض العلمية18. وافقت لجنة أخلاقيات بجامعة أستراليا الغربية على البروتوكول (RA3 / 100/1596). تم الحصول على الأغنام من مزرعة ريدجفيلد بجامعة غرب أستراليا (UWA) (2018-2020). تم إدخال الأغنام إلى مرفق UWA للحيوانات الكبيرة المعتمد من AAALAC قبل 2-3 أسابيع من التدخل الجراحي. تم إيواء الأغنام في البداية في الداخل في حظائر أرضية مرتفعة مشتركة ، مع استخدام حظائر مفردة في الفترة المحيطة بالجراحة. تم تغذية الأغنام بالكريات وقشر الشوفان والترمس بمزيج معدني محسوب على وزن الجسم. تم التحكم في درجة حرارة الغرف (20.5-21.5 درجة مئوية) والحفاظ عليها في 12:12 ساعة من الضوء: دورة الظلام. تم تقييم الألم والرفاهية في فترة ما بعد الجراحة مرتين يوميا لمدة 7 أيام ، ثم يوميا حتى اكتمال الدراسة. تضمنت المعلمات التي تمت مراقبتها بعد الجراحة علامات الألم ، وشد الحجاج ، والجهد التنفسي ، ودرجة الحرارة ، ومعدل ضربات القلب ، وموقع الجراحة ، والشهية وتناول الماء ، والنشاط ، والعرج ، وحالة المعطف ، واتساق البراز ، والولادة المبكرة ، والسلوك ، وعلامات تسمم الدم أثناء الحمل. أدت الدرجات المنسوبة إلى كل معلمة إلى التدخل عند الضرورة.
ملاحظة: كانت هناك حاجة إلى إجراءين جراحيين للتعافي: تحضير النعجة ، والنهج الجراحي والإغلاق ، وتعافي النعجة هي نفسها لكلا الإجراءين الجراحيين. الإجراء الأول هو الإنشاء الجراحي للفتق الحجابي في الحمل الجنيني. الإجراء الثاني هو وضع جهاز التدخل الجنيني ومراقبة الضغط. استلزم تصميم الدراسة إجراء عمليتين جراحيتين للبقاء على قيد الحياة للسماح لمحتويات البطن بالانتقال إلى تجويف الصدر بعد تكوين الفتق الحجابي بحيث يمكن أن يتطور نقص تنسج الرئة قبل جراحة التدخل اللاحقة.
1. الإنشاء الجراحي للفتق الحجابي في الحمل الجنيني
- تحضير النعجة
- في ~ 80 يوما من الحمل ، قم بمعالجة النعجة مسبقا بحقن عضلي من الأسيبرومازين (0.04 مجم / كجم) والمورفين (0.3 مجم / كجم).
- تحفيز التخدير عن طريق الوريد باستخدام الكيتامين (5 ملغ/كغ) والميدازولام (0.25 ملغ/كغ).
- تنبيب القصبة الهوائية للنعجة بأنبوب داخل القصبة الهوائية (قطر داخلي 8 مم [ID]). الحفاظ على التخدير مع الأيزوفلوران (1٪ -3٪ في الأكسجين) التي يتم إجراؤها عن طريق التهوية بالضغط الإيجابي (10-12 نفسا / دقيقة ، حجم المد والجزر 8-10 مل / كجم).
- قم بمراقبة النعاج باستخدام مخطط كهربية القلب (ECG) ، وضغط الدم الشرياني الغازي عبر قسطرة شريانية الأذن ، وثاني أكسيد الكربونمنتهي الصلاحية 2 ، وتشبع الأكسجين المحيطي ، ودرجة الحرارة أثناء الجراحة.
- ضع النعجة على نقالة. قم بلف الحبال حول أرجل النعجة وثبتها برفق على الطاولة.
- قص الصوف من بطن النعجة وجانبها ثم قصها بالقرب من الجلد.
- قم بإزالة الأوساخ واللانولين من بطن النعجة وجانبها وفخذها بالماء والصابون.
- أعط سيفازولين (20 ملغم/كغ) عن طريق الوريد كل 90 دقيقة أثناء الجراحة.
- انقل النعجة إلى غرفة الجراحة على نقالة.
- انقل النعجة من نقالة النقل إلى طاولة الجراحة.
- ضع النعجة في وضع الاستلقاء الظهري على طاولة الجراحة.
- ثبت جميع الأطراف على طاولة الجراحة برباطات حبل ناعمة.
- تحضير معقم للبطن المكشوف: يغسل 3 مرات بمقشر جراحي بالكلورهيكسيدين بنسبة 4٪ ، وإزالة المحلول الملوث بين كل غسلة بنسبة 70٪ كحول.
- استكمال التحضير المعقم عن طريق رش محلول اليود بنسبة 10٪ برفق على البطن والخاصرة والأفخذ.
- قم بتغطية النعجة بستارة جراحية معقمة بحيث يتعرض موقع شق البطن فقط. تأكد من أن جميع الأدوات الجراحية والقسطرة والمحاقن والمحاليل المستخدمة أثناء الجراحة معقمة.
- النهج الجراحي
- إنشاء تخدير موضعي للكتلة الخطية عن طريق التسلل الموضعي تحت الجلد والعضلات للبوبيفاكائين (5٪ ؛ 9.5 مل) بحقنة 10 مل وإبرة 22 جرام.
- كشف الرحم عن طريق شق بطني شبه خط الوسط (8-11 سم) عبر جلد النعجة والأنسجة تحت الجلد وخط النعجة المصنوع بشفرة جراحية مقاس 10 مع الكي كما هو مطلوب لتقليل النزيف الجراحي.
- إنشاء فتق الحجاب الحاجز
- حدد موقع رأس الجنين / الصدر عن طريق الجس.
- غطي الرحم بغلاف بلاستيكي معقم.
- استخدم مقصا جراحيا لعمل نافذة (6 سم × 4 سم) في غلاف بلاستيكي.
- قم بعمل شق رحمي بطول 5-7 سم عبر الرحم والكيس الأمنيوسي مع قطع الكي ، وتجنب الأوعية الدموية الرحمية والفلقات المشيمة.
- قم بإخراج رأس الجنين والأطراف الأمامية.
- استخدم مشابك الرحم من بابكوك لإغلاق حواف شق الرحم ولفافة بلاستيكية معقمة بإحكام حول بطن الجنين لمنع فقدان السائل الأمنيوسي.
- ضع الجنين على جانبه الأيمن وقم بتثبيت غلاف بلاستيكي معقم ثان فوق الجنين الخارجي لتقليل فقدان الحرارة والرطوبة. حدد المسافة الوربيةبين الأضلاع9 و 10 على اليسار وقم بقطع ثقب في الغلاف البلاستيكي بمقص جراحي للوصول إلى موقع شق الجنين المقصود.
- إنشاء تخدير موضعي لكتلة الخط في الجنين عن طريق التسلل الموضعي تحت الجلد والعضلات للبوبيفاكائين (5٪ ؛ 0.25 مل مخفف إلى 0.5 مل مع محلول ملحي معقم ؛ 1 مل حقنة معقمة و 27 جم إبرة) في 9المساحة الوربية المجاورة مباشرة للحد العلويللضلع 10 لتجنب الأوعية تحت الضلعية.
- استخدم حقنة معقمة سعة 60 مل لاستحمام جلد الجنين المكشوف بمحلول هارتمان الدافئ (5-10 مل كل 5-10 دقائق) للحفاظ على رطوبة جلد الجنين خلال الخطوات اللاحقة.
- قم بإنشاء بضع الصدر الخلفي الوحشي الأيسر عن طريق عمل شق جلدي بطول 2-4 سم مع الكي الكهربائي في المساحة الوربية التاسعة المجاورة مباشرة للحدود القحفية للضلع العاشر.
- استخدم مرقئ البعوض لتشريح الأنسجة تحت الجلد والعضلات الوربية والغشاء الجنبي بشكل صريح للوصول إلى الحجاب الحاجز.
- استخدم اثنين من مرقئ البعوض الصغير لالتقاط الحجاب الحاجز في كل طرف من موقع الفتق المقصود الذي يبلغ طوله 1 سم ورفع الحجاب الحاجز بشكل قحفي لإبعاده عن المعدة والكبد والطحال الكامنين.
- قم بعمل شق 1 سم بين مرقئ الدم باستخدام مقص صغير بزاوية.
- حرر مرقئ الحجاب الحاجز.
- استخدم ملقط بوتس اللارضحي لسحب المعدة بشكل متفوق عبر الفتحة الموجودة في الحجاب الحاجز.
- استخدم ربطة عنق واحدة من الشعيرات الأحادية 5-0 البولي ديوكسانون القابلة للامتصاص (إبرة النقطة المستدقة RB-1) لتغليفالأضلاع 9 و 10 بعناية لمعارضة أضلاع الجنين ، وتجنب الرئة الأساسية.
- أغلق شق بضع الصدر بخياطة مرتبة (شعيرات أحادية بولي ديوكسانون قابلة للامتصاص).
- الإغلاق الجراحي
- أعد الجنين إلى الكيس الأمنيوسي.
- تطبيق ميلوكسيكام أثناء الجراحة (0.25 ملغ/كغ؛ تحت الجلد) للنعجة لعلاج تسكين الألم بعد الجراحة.
- استبدل السائل الأمنيوسي المفقود باستخدام محلول هارتمان الدافئ (~ 50 مل) جنبا إلى جنب مع بيبيراسيلين / تازوباكتام داخل السلى (1000 مجم / 125 مجم).
- ضع الأسطح المتعارضة للمشيمة والسلى وجدران الرحم المجاورة واستخدم خياطة مضفرة 2-0 قابلة للامتصاص مع خياطة مرتبة مقلوبة لإغلاق الرحم والكيس الأمنيوسي معا.
- أغلق خط النعجة ، والأنسجة تحت الجلد ، والجلد (شعيرات بولي ديوكسانون أحادية قابلة للامتصاص 1 ، بوليجليكابرين قابلة للامتصاص 25 خيوط أحادية 3-0 ، وحيدة بولي بروبيلين غير قابلة للامتصاص 2-0 على التوالي).
- استعادة النعجة ومراقبتها
- رش جرح البطن بعد الجراحة بشريط لاصق مقاوم للماء وقم بتغطيته بضمادة لتقليل خطر الإصابة بعدوى الجرح بعد الجراحة.
- ضع لصقة فنتانيل عبر الجلد (100 ميكروغرام/ساعة) على الفخذ للحصول على تسكين إضافي بعد الجراحة.
- استرجع النعجة ونزع الأنبوب عند التنفس تلقائيا ، ثم اتركها تستيقظ.
- مراقبة النعاج يوميا حتى الولادة لجراحة تدخل الجنين.
- قم بإزالة الغرز بعد 14 يوما.
2. وضع جهاز التدخل ومراقبة الضغط للجنين
- تحضير النعجة لجراحة تدخل الجنين في 101 يوما من الحمل
- حقن ميدروكسي بروجسترون (1 مل) في العضل العضلي عند ~85 يوما من الحمل (المدة ~ 147 يوما) لتقليل خطر الولادة المبكرة.
- استخدم نفس إجراء التخدير والتحضير الجراحي المستخدم في جراحة إنشاء الحجاب الحاجز الأولية.
- اتبع النهج الجراحي في الخطوتين 2.1.2.2 و 2.1.2.3 ، على غرار الخطوات 1.2.1-1.2.2.
- إنشاء تخدير موضعي لكتلة الخط عن طريق التسلل الموضعي تحت الجلد والعضلات للبوبيفاكائين (5٪ ؛ 9.5 مل) باستخدام حقنة 10 مل وإبرة 22 جرام.
- مع شق بطني شبه خط الوسط (8-11 سم) بجوار موقع شق البطن المستخدم في جراحة تكوين الحجاب الحاجز ، قم بتعريض الرحم بجلد النعجة والأنسجة تحت الجلد وخط ألبا المصنوع بشفرة جراحية مقاس 10 مع الكي كما هو مطلوب لتقليل النزيف الجراحي.
- بالإضافة إلى ذلك ، يتم إعطاء أوكسي تتراسيكلين (20 مجم / كغ) في النعجة العضلية لتوفير حماية مضادة للميكروبات للجنين ضد جهاز المراقبة المزروع بشكل مزمن.
- تنشيط الجهاز
- تفعيل جهاز قياس الضغط19.
- أنبوب قياس ضغط المشبك مع مرقئ.
- ضع الجهاز بالكامل في وعاء معقم يحتوي على خليط من حمض البيراسيتيك 0.08٪ و 1٪ بيروكسيد الهيدروجين لمدة ساعة واحدة على الأقل ، مع التأكد من تغطية الجهاز بالكامل.
- باستخدام مشبك معقم ، انقل الجهاز إلى وعاء معقم يحتوي على ماء معقم لمدة 10 دقائق على الأقل قبل زرع الجنين. تأكد من تغطية الجهاز بالكامل بالماء المعقم.
- النهج الجراحي وتدخل الجنين
- إخراج رأس الجنين من الخارج عن طريق بضع الرحم باستخدام نفس النهج الجراحي المستخدم في الجراحة الأولية ولكن مع شقوق الرحم المجاورة (الخطوات 1.1-2.2).
- حافظ على رأس الجنين الخارجي والرقبة ملفوفة في الستارة البلاستيكية المعقمة لتقليل فقدان درجة الحرارة والسوائل.
- قم بأداة القصبة الهوائية بقسطرة لقياسات الضغط (الشكل 1).
- بالنسبة للقصبة الهوائية غير المسدودة، اتبع الخطوات 2.3.3.2-2.3.3.3.
- قم بتنبيب خروف الجنين بقسطرة شفط 5 فرنسية (1.67 مم ID) مع إزالة موصل الشفط إلى عمق 14 سم عند زاوية فم الخروف.
- قم بتوصيل الطرف الخارجي للقسطرة بموصل 1.59 مم (القطر الخارجي ، OD) إلى 3.18 مم (OD) إلى أنبوب سيليكون بطول 30 سم (ID).
- بالنسبة للقصبة الهوائية المسدودة، اتبع الخطوات 2.3.3.5-2.3.3.6.
- قم بتنبيب الحمل الجنيني بأنبوب داخل القصبة الهوائية 3.0 مع إزالة الموصل إلى عمق 14 سم إلى زاوية من فم الخروف.
- قم بتوصيل الطرف الخارجي للقسطرة بموصل 3.18 مم (OD) إلى 3.18 مم (OD) إلى أنبوب سيليكون بطول 30 سم (ID).
- قم بتوصيل الطرف الآخر من أنبوب السيليكون بطول 30 سم (ID) بجهاز قياس الضغط بواسطة موصل 3.18 مم (OD) إلى 1.59 مم (OD) على جهاز قياس الضغط.
- خياطة القسطرة في زاوية فم وعنق الحمل (خيوط نايلون أحادية غير قابلة للامتصاص 4-0).
- قم بتثبيت جهاز قياس الضغط على جلد الحمل على الصدر (خيوط نايلون أحادية غير قابلة للامتصاص 4-0) (الشكل 2).
- إغلاق الشقوق الجراحية للجنين والنعجة وفقا لجراحة إنشاء الفتق الحجابي الأولي (الخطوات 1.4 - 1.5).
- جهاز الاختبار
- اختبر ما إذا كان الجهاز يرسل إشارة19.
- استعادة النعجة ومراقبتها
- استعادة النعجة حسب الجراحة الأولية.
- راقب النعاج يوميا حتى الولادة.
- أعط جرعة ثانية من ميدروكسي بروجسترون (0.5 مل) في العضل عند ~120 يوما من الحمل.
- يجب إعطاء بيتاميثازون (5.7 ملغ) في العضل قبل 48 ساعة و24 ساعة من الولادة القيصرية لتعزيز نضوج الجنين لرعاية ما بعد الولادة.
- توصيل لحم الضأن
- في ~ 142 يوما من الحمل (المدة ~ 147-150 يوما) ، قم بمعالجة النعاج مسبقا عن طريق الحقن العضلي للأسيبرومازين (0.03 مجم / كجم) والمورفين (0.3 مجم / كجم).
- تحفيز التخدير عن طريق الوريد باستخدام ثيوبنتال (10-15 مجم / كجم) ، وتنبيب النعجة بأنبوب داخل القصبة الهوائية (مقاس 8.5 مم) ، والحفاظ على التخدير عن طريق الأيزوفلوران مع المراقبة المناسبة لكل مخدر سابق.
- المضي قدما في الولادة الجراحية للجنين عن طريق بضع الرحم كما هو الحال في العمليات الجراحية السابقة ، مع النعجة في الاستلقاء الظهري (الخطوات 1.1 - 2.2).
- قم بإزالة جهاز المراقبة. نظف الجهاز بالماء و 70٪ إيثانول.
- اقتل النعجة بشكل إنساني بحقنة وريدية 160 مجم / كجم من محلول البنتوباربيتون الصوديوم.
- إنعاش الحمل وتهويته لمدة 2-3 ساعات ثم قتل بشكل إنساني (160 مجم / كجم من محلول البنتوباربيتون الصوديوم ، الحقن في الوريد).
- بيانات
- قم بتنزيل البيانات على جهاز كمبيوتر محمولوتحليل 19. قم بتصفية بيانات الضغط باستخدام نافذة 6 ساعات. احسب الفرق في الضغط بين الضغط الأمنيوسي والقصبة الهوائية.