للحصول على أفضل النتائج الممكنة ، يجب أن يكون الجراحون الذين يجرون تجارب بحثية متعدية بارعين في التنبيب ووضع خط الأوعية الدموية. تصف هذه الورقة التقنيات التي يستخدمها مختبر تورونتو للحفاظ على الأعضاء لتنفيذ هذه الإجراءات.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
للحصول على أفضل النتائج الممكنة ، يجب أن يكون الجراحون الذين يجرون تجارب بحثية متعدية بارعين في التنبيب ووضع خط الأوعية الدموية. تصف هذه الورقة التقنيات التي يستخدمها مختبر تورونتو للحفاظ على الأعضاء لتنفيذ هذه الإجراءات.
تعد نماذج البحث الجراحية الانتقالية في الخنازير ضرورية لتطوير بروتوكولات ما قبل السريرية الآمنة. ومع ذلك ، فإن نجاح العمليات الجراحية التجريبية لا يعتمد فقط على المهارات الجراحية لفريق البحث. تعتبر إجراءات الرعاية والإدارة المحيطة بالجراحة ، مثل التنبيب ، والخط الوريدي المركزي ، ووضع الخط الشرياني ، ضرورية وذات أهمية قصوى لنتائج التجربة الإيجابية. نظرا لأنه من غير المألوف أن يكون لدى فرق البحث أطباء تخدير أو أي طاقم آخر غير الفريق الجراحي ، يجب على الفريق الجراحي المشارك في البحث الانتقالي اكتساب و / أو تطوير المهارات اللازمة لأداء الرعاية المحيطة بالجراحة. الغرض من هذه الورقة هو إظهار تقنيات التنبيب والقسطرة الوريدية المركزية ووضع الخط الشرياني المستخدمة والمثالية في مختبر تورونتو للحفاظ على الأعضاء على مدى السنوات العشر الماضية ، لاستخدامها كمرجع للباحثين المستقبليين الذين ينضمون إلى هذا الفريق أو أي مختبر آخر يقوم بإجراء بروتوكولات بحثية انتقالية في زراعة الخنازير و / أو البطن.
غالبا ما تستخدم النماذج التجريبية للخنازير في دراسة الأمراض التي تصيب الإنسان بسبب خصائصها التشريحية والفسيولوجية المتشابهة. هذه النماذج ضرورية في تطوير بروتوكولات ما قبل السريرية الآمنة ، ولكنها تخضع أيضا لقيود قانونيةوأخلاقية 1. يجب أن يتم استخدام الخنازير للبحث في أفضل الظروف الممكنة لتجنب الخسارة غير الضرورية للحيوانات والمعاناة بسبب مضاعفات التخدير التي لا علاقة لها بالمشروع البحثي.
تعد تقنيات ومهارات ما قبل الجراحة مثل التنبيب ووضع الخط الوريدي المركزي ووضع الخط الشرياني ضرورية لتحقيق نتائج ناجحة وقابلة للتكرار.
يجب تنبيب كل يخضع للتخدير العام لإجراء جراحي للحفاظ على مجرى هوائي مفتوح ، مما يسمح بالتهوية المساعدة وتجنب شفط الشعبالهوائية 2. المواضع الأكثر شيوعا للتنبيب في الخنازير هي الاستلقاء الظهري والجانبي والقصي3،4. يميل الاستلقاء القصي إلى أن يكون أسهل بالنسبة للموظفين المدربين على التنبيب البشري3 ، وهذا هو الحال في منشأة البحث هذه.
يعد الوصول الجيد إلى الأوعية الدموية أمرا ضروريا لإدارة السوائل والأدوية وأخذ العينات أثناء الجراحة وبعدها. يعد استخدام مثبطات الأوعية أمرا شائعا أثناء جراحات زراعة البطن بسبب عدم استقرار الدورة الدموية الناتجة عن إصابة نقص التروية وإعادة التروية. يمكن أن يتسبب حقن مثبطات الأوعية الدموية من خلال خط محيطي في إصابة الأنسجة الموضعية بسبب التأثيرات الضيقةللأوعية 5. يسمح وضع الخط الوريدي المركزي بضخ كميات كبيرة من السوائل والأوعية الدموية. نحن نفضل تقنية عن طريق الجلد بمساعدة سلك التوجيه لوضع الخط المركزي لأنها تقلل من الضرر الذي يلحق بالأنسجة الرخوة والأوعية6.
مطلوب استقرار ديناميكي الدم للحيوان أثناء الجراحة ، وضغط الدم هو المعلمة الأكثر مراقبة لهذا الغرض7. يسمح الخط الشرياني بقياس ضغط الدم المستمر ، وهو أكثر دقة من القياس التقليدي غير الجراحي8 حيث تقلل التقنيات غير الغازية من تقدير القيم أثناء ارتفاع ضغط الدم وتبالغ في تقديرها أثناء انخفاض ضغطالدم 7،8. تعد القراءة الدقيقة لضغط الدم أثناء هذه التجارب أمرا أساسيا لتكون قادرا على التحكم في كمية السوائل ومثبطات الأوعية الدموية التي يجب إعطاؤها للخنزير.
يستخدم مختبر تورونتو للحفاظ على الأعضاء نماذج الخنازير لأكثر من 10 سنوات وقد قام بتوحيد هذه الإجراءات على مر السنين مع نتائج ممتازة. على الرغم من أنه يمكن العثور على مناهج أخرى في الأدبيات لنفس الإجراءات ، إلا أن الهدف من هذه الورقة هو تقديم التقنيات التي تم تطويرها وإتقانها على مر السنين في منشأتنا.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تلقت جميع المستخدمة في هذه الدراسة رعاية إنسانية وفقا ل "مبادئ رعاية المختبر" التي صاغتها الجمعية الوطنية للبحوث الطبية و "دليل رعاية المختبر" الذي نشرته المعاهد الوطنية للصحة ، أونتاريو ، كندا. تمت الموافقة على جميع الدراسات من قبل لجنة رعاية التابعة لمعهد البحوث العامة في تورنتو. في هذه الدراسة ، تم استخدام خنازير يوركشاير الذكور البالغة من العمر 11-12 أسبوعا والتي تزن 30-40 كجم.
1. التنبيب
2. وضع القسطرة الوريدية المركزية
ملاحظة: يعتمد اختيار القسطرة على نوع النموذج المستخدم. بالنسبة لنماذج البقاء على قيد الحياة ، يتم استخدام قسطرة يمكن حفرها في نهاية الإجراء. بالنسبة للنماذج الطرفية ، يتم استخدام نموذج أبسط (راجع جدول المواد).
3. وضع الخط الشرياني
ملاحظة: يفضل وضع الشريان السباتي للخط الشرياني لأنه يوفر طريقا مباشرا أكثر إلى القلب ، وأوعية الرقبة أكبر من الأوعية الفخذية11. يفضل أن يوضع الخط الشرياني على الجانب المقابل للقسطرة الوريدية المركزية وتحت الرؤية المباشرة. إذا لم يكن ذلك ممكنا ، فيمكن وضعه على نفس جانب القسطرة الوريدية.
4. رعاية ما بعد الجراحة (نموذج البقاء على قيد الحياة)
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
لا غنى عن مراقبة الخنازير أثناء الجراحة ، ويتم عرض المعلمات الطبيعية المتوقعة أثناء الجراحة في الجدول 13،14. المدة التقريبية اللازمة لتنفيذ كل إجراء موضحة في الجدول 2.
كما ذكرنا سابقا ، يقوم هذا المختبر بتنفيذ هذه الإجراءات على مدار السنوات العشر الماضية. خلال هذه الفترة ، تم إجراء 595 تجربة كبد و 277 تجربة كلى و 100 تجربة للبنكرياس (الجدول 3).
تم إجراء تجار...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يجب على كل مركز أبحاث إنشاء بروتوكولاته وإرشاداته الخاصة لنماذج البحث الانتقالية. ومع ذلك ، يجب اتباع بعض القواعد الأساسية لضمان نتائج ناجحة.
أولا ، يجب إخضاع الخنزير للفحص البدني بمجرد وصوله إلى مرفق الإسكان. من الضروري توفير ما مجموعه 5-7 أيام من التكييف قبل الإجراء لتقليل مستويات التوتر والسماح للخنزير باستعادة الوزن المفقود أثناء النقل3. من المهم ملاحظة أننا نستخدم الخنازير التي تأتي من مزرعة تربية ولا تزرع حصريا لأغراض البحث ، وكما...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ليس لدى المؤلفين أي شيء يكشفون عنه.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 0.9٪ ري كلوريد الصوديوم ، USP | Baxter | JF7124 | |
| الوعائي 16 GA 1.88 ، 1.7 × 48 مم | BD | 381157 | |
| كبريتات الأتروبين (8 مجم / 20 مل - 0.4 مجم / مل) | West-Ward | 17733 | 20 مل قارورة |
| طبخ TPN مجموعة كاثيثير أحادية التجويف | طبخ طبية ؛ | G08132 | مع 10 Fr قشر بعيدا مجموعة |
| مقدمة هيكمان 9.6 F أحادي التجويف السيرة الذاتية كاثيثر | Bard | 600560 | |
| منظار الحنجرة | هاين | ||
| ميدازولام (5 مجم / مل) | ساندوز | 46237968 | 10 مل قارورة |
| ميلر شفرة 4 | هاين | 185 ملم طول الشفرة | |
| ناركيتان (كيتامين - 100 مجم / مل) ؛ | فيتوكوينال | 8-00223 | 50 مل قارورة |
| أنبوب القصبة الهوائية الأنفي مكبل 7.0 مم ID. | Covidien | 86450 | |
| Optixcare مزلق العين للكلاب والقطط مجموعة | مقدمة غمد أفينتيكس | 5914304 | 20 جم |
| مع صمام إرقاء متكامل / منفذ جانبي للاستخدام -7.5 Fr. القسطرة | سهم | SI-09880 | 8.5 Fr ، 10 سم ، 0.035 بوصة قطر. دليل الأسلاك الربيعية |
| وسادة الجراحة الكهربائية العالمية: انقسام مع سلك | 3M | 9165 | |
| Valleylab Rocker Switch Pencil حافظة | Covidien | E2515H | |
| Xylocaine 10٪ بخاخ | أسترازينيكا | 73050036 | ليدوكائين (10 ملغ/جرعة مقننة) |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم نشر هذه المقالة
الفيديو قريباً