في هذه الدراسة ، تم تقديم نموذج الفئران لتحريض التهاب اللثة عن طريق مزيج من الرباط المحتجز والحقن المتكرر من عديد السكاريد الدهني المشتق من Porphyromonas gingivalis ، على مدار 14 يوما حول الأضراس الفكية الأولى. كانت تقنيات الربط وحقن LPS فعالة في إحداث التهاب القلفة ، مما أدى إلى فقدان العظم السنخي والالتهاب.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تحريض التهاب دواعم السن عن طريق مزيج من حقن الرباط وعديد السكاريد الشحمي في نموذج الفئران
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
التهاب دواعم السن (PD) هو مرض التهابي مناعي مزمن منتشر للغاية يصيب اللثة ، مما يؤدي إلى فقدان الأنسجة الرخوة اللثوية والأربطة اللثوية والملاط والعظام السنخية. في هذه الدراسة ، تم وصف طريقة بسيطة لتحريض PD في الفئران. نحن نقدم تعليمات مفصلة لوضع نموذج الرباط حول الأضراس الفكية الأولى (M1) ومجموعة من حقن عديد السكاريد الشحمي (LPS) ، المشتقة من Porphyromonas gingivalis في الجانب المتوسط الحنكي من M1. تم الحفاظ على تحريض التهاب اللثة لمدة 14 يوما ، مما يعزز تراكم البكتيريا الحيوية والالتهابات. للتحقق من صحة النموذج الحيواني ، تم تحديد IL-1β ، وهو وسيط التهابي رئيسي ، بواسطة مقايسة مناعية في السائل اللثوي (GCF) ، وتم حساب فقدان العظام السنخية باستخدام التصوير المقطعي المحوسب بالشعاع المخروطي (CBCT). كانت هذه التقنية فعالة في تعزيز تراجع اللثة ، وفقدان العظام السنخية ، وزيادة مستويات IL-1β في الصندوق الأخضر للمناخ في نهاية الإجراء التجريبي بعد 14 يوما. كانت هذه الطريقة فعالة في تحفيز مرض باركنسون ، وبالتالي يمكن استخدامها في الدراسات حول آليات تطور المرض والعلاجات المستقبلية الممكنة.
المقدمة
التهاب دواعم السن (PD) هو سادس أكثر حالات الصحة العامة انتشارا في جميع أنحاء العالم ، حيث يؤثر على حوالي 11٪ من إجمالي السكان ، كونه شكلا متقدما لا رجعة فيه ومدمرا لأمراض اللثة 1,2. PD هي عملية التهابية تؤثر على أنسجة اللثة واللثة ، مما يؤدي إلى تراجع اللثة ، والهجرة القمية للظهارة الموصلية مع نمو الجيب ، وفقدان العظم السنخي3. علاوة على ذلك ، يرتبط مرض باركنسون بالعديد من الأمراض الجهازية ، بما في ذلك أمراض القلب والأوعية الدموية والسمنة والسكري والتهاب المفاصل الروماتويدي ، والتي تلعب العوامل البيئية والعوامل الخاصة بالمضيف دورا مهمافي 4,5
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
ملاحظة: تمت الموافقة على البروتوكول التجريبي للدراسة من قبل اللجنة الأخلاقية للتجارب على الحيوانات التابعة لمعهد البحوث الصحية لجزر البليار (CEEA-UIB ؛ الرقم المرجعي 163/03/21).
1. تخدير الحيوان وإعداد الإجراءات
- تعقيم جميع الأدوات الجراحية (كمامات الفم المصنوعة من الألومنيوم ، مستكشف الأسنان ، رمح الماس ، المقص الجراحي ، كماشة الجراحة المجهرية ، حامل الإبرة الدقيقة ، نحات هولينباك ، مصعد جراحي مجهري السمحاق ، ومقص الجراحة المجهرية) (5 دقائق عند 135 درجة مئوية) قبل الجراحة.
- قم بإعداد جميع الحلول اللازمة للإجراء في ظروف معقمة ، كما هو موضح:
- تحضير مزيج من الكيتامين (60 ملغ/مل) والزيلازين (8 ملغ/مل) ع....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
يتم عرض جدول زمني للخطوات التجريبية في الشكل 1. يوضح الشكل 2 أ صورة للفك السفلي بعد التدخل الجراحي ، مع وضع الرباط حول تلم M1 في الوقت 0 من التجربة. يوضح الشكل 2B كيف ، بعد 14 يوما من الإجراء ، يدخل الرباط حول M1 إلى التلم اللثوي ، مما يسبب التهاب اللثة وتسلل التراكم.
الشكل
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
تصف هذه الطريقة تحريض PD في الفئران بعد تقنية مشتركة لحقن Pg-LPS ووضع الرباط حول M1 ، مما يكشف أنه يمكن إحداث تغييرات كبيرة في أنسجة اللثة والعظام السنخية في غضون 14 يوما بعد هذه الطريقة.
خلال هذا الإجراء ، يجب توفير الاهتمام بالخطوات الحاسمة المختلفة. أثناء تخدير الحيوانات وإعداد الإجراء ، يعد تقييم التخدير المناسب أثناء العملية الجراحية أمرا بالغ الأهمية لنجاحها ، وكذلك ضمان الوضع الصحيح للحيوان ، وتثبيت فم الفئران المفتوح باستخدام هفوة الفم المصنوعة من الألومنيوم حول القواطع ، وتجن.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
يعلن أصحاب البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.
شكر وتقدير
تم دعم هذا العمل من قبل Fundació Universitat-Empresa de les Illes Balears (دعوة إثبات المفهوم 2020) ، من قبل معهد الصحة كارلوس الثالث ، وزارة الاقتصاد والمنافسة ، بتمويل مشترك من الصندوق الاجتماعي الأوروبي ESF وصندوق التنمية الإقليمية الأوروبي ERDF (عقد مع M.M.B; FI18/00104) ومن قبل المديرية العامة للتحقيقات، وكونسيلريا دي للتحقيقات، وحاكم باليار (عقد مع M.M.F.C; FPI/040/2020). يشكر المؤلفون الدكتورة آنا توماس وماريا تورتوسا على مساعدتهما في الجراحة التجريبية ومنصة IdISBa. أخيرا ، شكرا لكلية طب الأسنان ADEMA للوصول إلى الماسح الضوئي CBCT.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| نقطة الورق الماصة n & ordm ؛ 30 | Proclinc | 8187 | |
| Aprotinin | Sigma-Aldrich | A1153 | |
| Atipamezole | Dechra | 573751.5 | Revanzol 5 mg / mL |
| أربطة حرير مضفر (5/0) | Laboratorio Arago Sl | 613112 | |
| Buprenorphine | ريختر فارما | 578816.6 | بوباك 0.3 مجم / مل |
| المقطعي المحوسب المخروطي (CBCT) الماسح الضوئي | MyRay | hyperion X9 | Model Hyperion X9 |
| CTAn software | SkyScan | الإصدار 1.13.4.0 | |
| مستكشف الأسنان | Proclinc | 99743 | |
| الماس على شكل رمح bur | Dentaltix | IT21517 | |
| حمية صيانة الأغذية | Sodispain Research | ROD14 | |
| منصة جراحية ساخنة | PetSavers | ||
| Hollenback كارفر | Hu-FRIEDY | HF45234 | |
| إبرة تحت الجلد | BD | 300600 | 25 جم × 5/8 بوصة - 0,5 × 16 مم |
| إيزوفلوران | Karizoo | Isoflutek 1000 مجم / جم | |
| الكيتامين ؛ | Dechra | 581140.6 | Anesketin 100 مجم / مل |
| عديدات السكاريد الدهنية ؛ مشتق من P.Gingivalis ؛ | InvivoGen | TLRL-PGLPS | |
| ميثانول | فيشر Scientific | M / 4000 / PB08 | |
| هولتر إبرة صغيرة | Fehling الأدوات الجراحية | KOT-6 | |
| كماشة الجراحة المجهرية | KLS Martin | 12-384-06-07 | |
| مقص الجراحة المجهرية ؛ | رز & أدوات الجراحة المجهرية | T SDC-15 RV | |
| Monitor iMEC 8 Vet | Mindray | ||
| المقايسة المناعية للحبة متعددة الإرسال | Procartaplex ، Thermo fisher Scientific | PPX-05 | |
| Paraformaldehyde (PFA) ؛ | Sigma-Aldrich | 8187151000 | |
| مصعد الجراحة المجهرية السمحاقية | Dentaltix | CU19112468 | |
| فينيل ميثيل سلفونيل فلوريد (PMSF) ؛ | روش | 10837091001 | |
| محلول عازلة الفوسفات (PBS)الجدي | العلمي | PBS-1A | |
| PhosSTOP | روش | 4906845001 | قرص مثبط الفوسفاتيز التجاري |
| قارورة بلاستيكية | SPL Lifesciencies | 60015 | 1.5 مل |
| سالين | سينفا | 204024.3 | |
| مجهر ستيريو | Zeiss | Model SteREO Discovery.V12 | |
| العدسات الجراحية بقيادة ضوء | Zeiss | ||
| مقص جراحي | زيبف جراحية | 08-1701-17 | |
| حقنة | BD plastipak | 303172 | 1 مل |
| محرك أسنان بيطري | Eickemeyer | 174028 | |
| Xylazine | Calier | 20102-003 | Xilagesic 20 مجم / مل |
المراجع
- Carvalho, J. D. S., et al. Impact of citrus flavonoid supplementation on inflammation in lipopolysaccharide-induced periodontal disease in mice. Food and Function. 12 (11), 5007-5017 (2021).
- Nazir, M. A.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
