يتيح البروتوكول قياس تشوه البنية المجهرية للعظام في عظم الفخذ البشري القريب بأكمله وصلابته من خلال الجمع بين التصوير المقطعي المحوسب الدقيق كبير الحجم ، ومرحلة الضغط المخصصة ، وأدوات معالجة الصور المتقدمة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
يتيح البروتوكول قياس تشوه البنية المجهرية للعظام في عظم الفخذ البشري القريب بأكمله وصلابته من خلال الجمع بين التصوير المقطعي المحوسب الدقيق كبير الحجم ، ومرحلة الضغط المخصصة ، وأدوات معالجة الصور المتقدمة.
يسمح تصوير البنية المجهرية للعظام تحت الأحمال المتزايدة تدريجيا بمراقبة سلوك الفشل المجهري للعظام. هنا ، نصف بروتوكولا للحصول على سلسلة من الصور المجهرية ثلاثية الأبعاد لعظم الفخذ القريب بأكمله تحت تشوه متزايد تدريجيا ، مما يتسبب في كسور ذات صلة سريريا في عنق الفخذ. تم إثبات البروتوكول باستخدام أربعة عظم الفخذ من متبرعات تتراوح أعمارهن بين 66 و 80 عاما في الطرف الأدنى من كثافة المعادن في العظام لدى السكان (نطاق درجة T = -2.09 إلى -4.75). تم تصميم مرحلة ضغط شفافة لاسلكية لتحميل العينات التي تكرر وضع ساق واحدة ، أثناء تسجيل الحمل المطبق أثناء التصوير المقطعي المحوسب الدقيق (micro-CT). كان مجال الرؤية بعرض 146 مم وارتفاع 132 مم ، وكان حجم البكسل الخواص 0.03 مم. استندت زيادة القوة إلى تنبؤات العناصر المحدودة لحمل الكسر. تم استخدام مرحلة الانضغاط لتطبيق الإزاحة على العينة وسن زيادات القوة المقررة. حدثت كسور تحت رأس المال بسبب فتح وقص عنق الفخذ بعد أربع إلى خمس زيادات في الحمل. تمت معالجة صور التصوير المقطعي المحوسب الدقيق وقياسات قوة رد الفعل لدراسة إجهاد العظام وقدرة امتصاص الطاقة. ظهر عدم استقرار القشرة في خطوات التحميل المبكرة. أظهر العظم تحت الغضروفي في رأس الفخذ تشوهات كبيرة تصل إلى 16٪ قبل الكسر ، وزيادة تدريجية في قدرة الدعم حتى الكسر. زادت طاقة التشوه خطيا مع الإزاحة حتى الكسر ، بينما انخفضت الصلابة إلى قيم قريبة من الصفر مباشرة قبل الكسر. تم أخذ ثلاثة أرباع طاقة الكسر بواسطة العينة خلال زيادة القوة النهائية بنسبة 25٪. في الختام ، كشف البروتوكول الذي تم تطويره عن قدرة ملحوظة على امتصاص الطاقة ، أو تحمل الضرر ، وتفاعل تآزري بين العظم القشري والتربيقي في سن مانحة متقدمة.
تشكل كسور عنق الفخذ عبئا كبيرا على شيخوخة السكان. يسمح التصوير المقطعي المحوسب الدقيق (micro-CT) والاختبار الميكانيكي المصاحب لمراقبة البنية المجهرية للعظام ودراسة علاقتها بقوة العظام وتغيراتها المرتبطة بالعمر والنزوح تحت الحمل 1,2. ومع ذلك ، حتى وقت قريب ، اقتصرت دراسات التصوير المقطعي المحوسب الدقيق للعظام تحت الحمل على نوى العظامالمستأصلة 3 ، الصغيرة4 ، ووحدات العمود الفقري البشري5. يمكن للبروتوكول الحالي تحديد إزاحة البنية المجهرية لعظم الفخذ البشري القريب بأكمله تحت الحمل وبعد الكسر.
تم إجراء العديد من الدراسات للتحقيق في فشل عظم الفخذ البشري ، وفي بعض الأحيان ، توصلت هذه الدراسات إلى استنتاجات متناقضة. على سبيل المثال ، يعتقد أن الترقق المرتبط بالعمر للهياكل القشرية والتربيقية يحدد القابلية المرتبطة بالعمر للكسر عن طريق التسبب في عدم استقرار مرن للعظم6,7 ، وهو ما يتناقض بشكل واضح مع المعامل العالي لتحديد الإجهاد القشري وتنبؤات قوة الفخذ بافتراض عدم وجود عدم استقرار مرن (R2 = 0.80-0.97)8,9. ومع ذلك ، فقد قللت هذه الدراسات بشكل منهجي من قوة الفخذ (بنسبة 21٪ -29٪) ، مما أثار تساؤلات حول استجابات العظام الهشة وشبه الهشة المطبقة في النماذج 8,10. قد يكمن أحد التفسيرات المحتملة لهذه النتائج المتناقضة على ما يبدو في سلوك كسر مختلف لعظام كاملة مقارنة بنوى العظام المعزولة. لذلك ، فإن مراقبة استجابات التشوه والكسر للبنية المجهرية العظمية في عظم الفخذ القريب بأكمله قد يعزز المعرفة بميكانيكا كسر الورك والتطبيقات ذات الصلة.
الطرق الحالية لتصوير عظام بشرية كاملة بدقة ميكرومترية محدودة. يجب أن يوفر حجم القنطرة وحجم الكاشف حجم عمل مناسب لاستضافة عظم الفخذ القريب البشري (حوالي 13 سم × 10 سم ، العرض × الطول) وربما حجم بكسل في حدود 0.02-0.03 مم لضمان إمكانية التقاط الميزات المعمارية الدقيقة ذات الصلة11. يمكن تلبية هذه المواصفات حاليا من قبل بعض مرافق السنكروترون1 وبعض الماسحات الضوئية المقطعية الدقيقة كبيرة الحجم المتاحة تجاريا12,13. يجب أن تكون مرحلة الانضغاط شفافة لاسلكيا من أجل تقليل توهين الأشعة السينية مع توليد قوة كافية لإحداث كسر في عظم الفخذ البشري (على سبيل المثال ، بين 0.9 كيلو نيوتن و 14.3 كيلو نيوتن للنساء البيض المسنات)14. هذا التباين الكبير في حمل الكسر يعقد تخطيط عدد خطوات الحمل للكسر ، ووقت التجربة الإجمالي ، والكمية المقابلة من البيانات المنتجة. لمعالجة هذه المشكلة ، يمكن تقدير حمل الكسر وموقعه من خلال نمذجة العناصر المحدودة باستخدام توزيع كثافة العظام للعينة من صور التصوير المقطعي المحوسب السريري (CT) 1,2. أخيرا ، بعد التجربة ، يجب معالجة الحجم الكبير من البيانات المتولدة لدراسة آليات الفشل وقدرة تبديد الطاقة في عظم الفخذ البشري بأكمله.
هنا ، نصف بروتوكولا للحصول على سلسلة من الصور المجهرية ثلاثية الأبعاد لعظم الفخذ القريب بأكمله تحت تشوه متزايد تدريجيا ، مما يسبب كسور ذات صلة سريريا في عنق الفخذ2. يتضمن البروتوكول تخطيط الزيادة التدريجية لضغط العينة ، والتحميل عبر مرحلة ضغط شفافة لاسلكية مخصصة ، والتصوير عبر ماسح ضوئي بالأشعة المقطعية الدقيقة كبير الحجم ، ومعالجة الصور وملفات تعريف الحمل.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم تطوير البروتوكول واختباره مع 12 عينة من عظم الفخذ تم تلقيها من برنامج التبرع بالجسم. تم الحصول على العينات طازجة وتخزينها في -20 درجة مئوية في مختبر الميكانيكا الحيوية والغرسات بجامعة فلندرز (تونسلي ، جنوب أستراليا ، أستراليا). تم الحفاظ على رطوبة العظام طوال التجربة. وكانت الجهات المانحة من النساء القوقازيات (66-80 سنة). تم الحصول على تصريح الأخلاقيات من لجنة أخلاقيات البحوث الاجتماعية والسلوكية (SBREC) بجامعة فليندرز (مشروع # 6380).
1. التخطيط لزيادة خطوة الحمل الخاصة بالعينة

الشكل 1: حساب حمل الكسر. خريطة إجهاد العناصر المحدودة ، والمعادلات المستخدمة لتحويل القوة الاسمية إلى حمل الكسر (يسار) ، ومخطط التحميل الذي يعرض عظم الفخذ (وسط اليمين) ، وكوب الألومنيوم البعيد (أعلى اليمين) ، ومقبس ضغط البولي إيثيلين (أسفل اليمين). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
2. تحضير تجميع عينة عظم الفخذ (الشكل 2)

الشكل 2: جهاز المحاذاة. صورة أمامية (يسار) وجانبية (يمين) لجهاز المحاذاة تعرض (أ) الإطار ، (ب) كوب القدر المصنوع من الألومنيوم ، (ج) نموذج عظم الفخذ الاصطناعي ، و (د) مقبس الضغط الكروي الشكل. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
3. تجميع مرحلة الضغط
ملاحظة: الأبعاد الخارجية لمرحلة الضغط هي قطر 245 مم وارتفاع 576 مم ووزن 14 كجم ، باستثناء العينة. تتكون مرحلة الضغط من جزأين رئيسيين: غرفة الضغط والمشغل ، والتي يتم تجميعها على النحو التالي:

الشكل 3: تجميع مرحلة الضغط الشفاف الشفاف حسب الطلب. صورة (يسار) ونموذج (يمين) لمرحلة الانضغاط. (أ) غرفة الضغط، وهي عبارة عن أسطوانة ألومنيوم بسمك 3 مم مغلقة من الأسفل؛ (ب) مجموعة المشغل ذات الهيكل العلوي ؛ (ج) آلية الرافعة اللولبية؛ (د) جدول x-y منخفض الاحتكاك ؛ و (ه) يتم عرض خلية الحمل ذات المحاور الستة والإشارة إليها في النموذج. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
4. إعداد التجربة
5. الاختبار الميكانيكي مع التصوير المجهري المصاحب
6. حساب مجال الإزاحة والإجهاد
7. التحليل
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تعرض الصور عظم الفخذ القريب بالكامل ، ومقبس الضغط ، والأسمنت السني ، وكوب الألومنيوم ، ونسيج التغليف. يمكن رؤية البنية الدقيقة للعظام تتشوه تدريجيا مع زيادة الحمل قبل الكسر وبعد الكسر (الشكل 4).

الشكل 4: مرحلة الانضغاط المتصلة بالكمبيوتر المحمول. أ: مرحلة الانضغاط، ب<...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يسمح البروتوكول الحالي بدراسة الميكانيكا الدقيقة المنقضية لكسور الورك في ثلاثة أبعاد خارج الجسم الحي. تم تصميم مرحلة الانضغاط الشفافة إشعاعيا (الألومنيوم) القادرة على تطبيق تشوه تدريجي على النصف القريب من عظم الفخذ البشري وقياس قوة رد الفعل وتصنيعها واختبارها حسب الطلب. يتم استخدام ماسح التصوير المقطعي المحوسب الدقيق كبير الحجم في هذا البروتوكول لتوفير تسلسل زمني لأحجام الصور التي تعرض عظم الفخذ القريب بالكامل مع التحميل التدريجي بدقة ميكرومترية. في هذا العمل ، تم حساب حقول الإزاحة والانفعال باستخدام التسجيل الم...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يعلن جميع المؤلفين عدم وجود تضارب في المصالح.
تمويل من مجلس البحوث الأسترالي (FT180100338; IC190100020) معترف به بامتنان.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| الأنسجة الماصة | N / A | الحفاظ على رطوبة العظام طوال التجربة | |
| جهاز المحاذاة جهاز المحاذاة | مخصص | لوضع العينة في كوب تأصيص | |
| من الألومنيوم كوب تأصيص | مخصص | ||
| منشار العظام | N / A | قطع العينة حسب الحجم | |
| المعايرة شبح QCT Pro | Mindways Software، Inc. ، أوستن ، الولايات المتحدة الأمريكية | التصوير المقطعي المحوسب 13002 | معايرة المستويات الرمادية في الصور إلى مستويات كثافة معدنية (رماد) مكافئة |
| للماسح الضوئي السريري المحوسب للتصوير المكبوس | جنرال إلكتريك للأنظمة الطبية ، ويسكونسن ، الولايات المتحدة الأمريكية | Optima CT660 | التصوير الأولي للتنبؤ بخطوة الحمل للكسر |
| مرحلة الانضغاط | حسب الطلب | مرحلة ضغط مشعة 10 كجم لتطبيق والحفاظ على التصوير المروري للتشوه الموصوف للعينة. | |
| أسمنت الأسنان | Soesterberg ، هولندا | Vertex RS | |
| عظم الفخذ عينة | Science Care ، فينيكس ، الولايات المتحدة الأمريكية | ||
| برنامج تحليل العناصر المحدودة | ANSYS Inc. ، Canonsburg ، الولايات المتحدة الأمريكية | ANSYS Mechanical APDL | حزمة برامج العناصر المحدودة |
| الفريزر | N / A | عينات المتجر عند -20 درجة ؛ C | |
| القرص الصلب | Dell | : 500 جيجابايت لكل وحدة تخزين | |
| تجزئة وتجزئة الصور | Skyscan-Bruker و Kontich و Belgium | CT | محلل معالجة الصور |
| تجزئة الصور المرنة | بجامعة شيفيلد | بون DVC | https://bonedvc.insigneo.org/dvc/ |
| وأتمتة | الصور The MathWork Inc. | برنامج معالجة الصور | Matlab |
| تسجيل الصور | Skyscan-Bruker و Kontich و Belgium | DataViewer | برنامج معالجة الصور |
| تجزئة الصور وبرنامج نمذجة FE | Simpleware و Exeter والمملكة المتحدة | برنامج مسح IP | لقياس العظام |
| برنامج لصق الصور | السيناريو السنكروترون الأسترالي ، كلايتون ، فيكتوريا ، الاتحاد الأفريقي | متاح في IMBL | |
| تصور الصورة | Kitware ، كليفتون بارك ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية | Paraview | تصور |
| الصورة تصور الصورة الجامعة | الوطنية الأسترالية | Dristhi | تصور الصورة: doi: 10.1117 / 12.935640 |
| التصوير وخط الشعاع الطبي | السنكروترون الأسترالي ، كلايتون ، فيكتوريا ، الاتحاد الأفريقي | شعاع التصوير المقطعي المحوسب الصغير للجسم الكبير في الكمبيوتر المحمول الأسترالي Synchrotron | |
| Dell Inc. ، الولايات المتحدة الأمريكية | |||
| طاولة xy منخفضة الاحتكاك | THK Co. ، طوكيو ، اليابان | ||
| NI برنامج الحصول على الإشارات | National Instruments ، أوستن ، تكساس | NI-DAQmx | |
| محلول ملحي مخزن بالفوسفات | حسب الطلب | الحفاظ على رطوبة العظام طوال التجربة | |
| كيس بلاستيكي | N / A | الحفاظ على رطوبة العظام طوال التجربة | |
| شركة السكك الحديدية | SKF Inc. ، Lansdale ، PA ، الولايات المتحدة الأمريكية | ||
| آلية جاك لولبي | ؛ Benzlers, & Ouml; rebro ، السويد | Serie BD (وحدة تروس دافئة) | السكتة الدماغية: 150 مم ، الحمولة القصوى: 10،000 نيوتن ، نسبة التروس: 27: 1 ، الإزاحة لكل ثورة: 0.148 مم |
| مستشعر pco.edge واحد ، الومضن المقترن بالعدسة | السنكروترون الأسترالي ، كلايتون ، فيكتوريا ، كاشف الاتحاد الأفريقي | روبي مجال الرؤية: 141 × 119 مم ؛ 2560 × 2160 بكسل ؛ 55 وميكرو ؛ م / بكسل ؛ 50 إطارا في | |
| الثانية خلية تحميل سداسية المحاور | ME-Me & szlig ؛ systeme GmbH ، Hennigsdorf ، GE | K6D6 | خطأ القياس الأقصى: 0.005٪ ؛ القوة القصوى: 10000 نيوتن ؛ عزم الدوران الأقصى: 500 نيوتن متر |
| مضخم الإجهاد | ME-Me & szlig ؛ systeme GmbH و Hennigsdorf و GE | GSV-1A8USB K6D / M16 |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.