يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

تشريح الفئران في الجهاز العصبي المركزي والمحيطي بالكامل

11K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/64974

⸱

فبراير 24, 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

هنا ، نقدم بروتوكولا لاستكمال تشريح الجهاز العصبي المركزي والمحيطي للفئران. يتم تحليل الأنسجة المقطعة بشكل أكبر في التطبيقات النهائية ، مثل التقاط صور إجمالية أو الأنسجة.

الملخص

تمثل النماذج الحيوانية العمود الفقري في مجال علم الأعصاب. على الرغم من ذلك ، لا يوجد حتى الآن بروتوكول خطوة بخطوة لتشريح الجهاز العصبي الكامل للقوارض ، ولا يوجد تخطيطي كامل يمثله متاحا مجانا. تتوفر فقط طرق حصاد الدماغ والحبل الشوكي وعقدة الجذر الظهري المحددة والعصب الوركي (بشكل منفصل). هنا ، نقدم صورا مفصلة ومخططا للجهاز العصبي المركزي والمحيطي للفئران. والأهم من ذلك ، أننا نحدد إجراء قويا لإجراء تشريحه. تسمح خطوة ما قبل التشريح لمدة 30 دقيقة بعزل الجهاز العصبي السليم داخل الفقرة بعضلات خالية من الأحشاء والجلد. يتبعه تشريح لمدة 2-4 ساعات تحت مجهر التشريح المجهري لفضح الحبل الشوكي والأعصاب الصدرية ، وأخيرا تقشير الجهاز العصبي المركزي والمحيطي بالكامل من الذبيحة. يمثل هذا البروتوكول خطوة مهمة إلى الأمام في دراسة التشريح والفيزيولوجيا المرضية للجهاز العصبي على مستوى العالم. على سبيل المثال ، يمكن معالجة العقدات الجذرية الظهرية التشريح من نموذج الفئران الورمي العصبي الليفي من النوع الأول بشكل أكبر من أجل علم الأنسجة لكشف التغيرات في تطور الورم.

المقدمة

الهدف العام من هذه الطريقة هو عزل الجهاز العصبي المركزي والمحيطي للفأر في قطعة واحدة. لا يوجد حاليا بروتوكول لتشريح الجهاز العصبي بأكمله للقوارض لدراسته على المستوى العالمي. يستخدم علماء الأعصاب عادة العصب الوركي كبديل لأي عصب محيطي1 ، والعقدات L3 إلى L52 كبديل لأي عقدات. باستخدام هذه الطرق ، من المستحيل استنتاج ما إذا كانت النتائج خاصة بالعصب / العقدة المعينة. كما هو معروف أن بعض أمراض الأعصاب على الأقل لا تؤثر على جميع الأعصاب والعقدات بالتساوي3،4،5 ، يجب على المرء تطوير تقنية للسماح بعزل الجه....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت الموافقة على البروتوكولات المستخدمة في هذه الدراسة من قبل Comité Institutionnel des Animaux de l'Université de Sherbrooke ، وهي مؤسسة معتمدة من المجلس الكندي لرعاية.

1. التحضير للتشريح الدقيق (ما قبل التشريح)

  1. إجراء التخدير باستخدام 5٪ إيزوفلوران ، يليه القتل الرحيم بنسبة 2٪ إيزوفلوران و 10 رطل لكل بوصة مربعة من ثاني أكسيد الكربون2 حتى لا تظهر علامات حيوية.
    ملاحظة: لا تقم بخلع عنق الرحم ، لأن هذا يضر بالحبل الشوكي والعقدات العنقية.
  2. ضع الفأر القتل رحيم متجها لأعلى (المنظر الأمامي) على وسادة تشريح ، ورش الفراء بنسبة 70٪ من الإيثانول.
  3. بعد ذلك ، ....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

لعبت القوارض دورا أساسيا في فهمنا لبيولوجيا الجهاز العصبي والفيزيولوجيا المرضية10. ومن المثير للاهتمام ، أنه لا توجد طرق تقدم التشريح الكامل للجهاز العصبي المركزي والمحيطي للقوارض لتقييم التشريح والتباين المرضي في نموذج الوقت الفعلي1،2،11. يقدم الشكل 1 نظرة عامة على الخطوة 1 إلى الخطوة 4 (التحضير للتشريح المجهري ، والتعرض للحبل الشوكي ، والتعرض للعصب الصدري ، وتقشير الأعصاب ا.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

لمنع العضلات والأعصاب من الجفاف ، يجب نقع الذبيحة في PBS كل 10 دقائق. عند خلع الأطراف السفلية (الخطوة 1.12.6) ، من المهم دائما أن تكون الضفيرة الوركي و L2 في الأفق لتجنب إلحاق الضرر / التمزق بها. عند تشريح الدماغ (الخطوة 1.14.4) ، من الأهمية بمكان تجنب التعمق الشديد حتى لا تتلف الدماغ. عند تشريح العقدات الجذرية الظهرية والأعصاب الطرفية بشكل عام ، من الأهمية بمكان استخدام ملقط دومون صغير عالي الجودة (غير تالف) لتجنب إتلاف الهياكل العصبية.

بدلا من خطوة تثبيت الف.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

وأعلن أصحاب البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.

شكر وتقدير

JPB هو باحث في FRSQ J1 وحاصل على جائزة أبحاث الباحث المبكر من وزارة الدفاع الأمريكية. حصلت LQL على جائزة مهنية لعلماء الطب من صندوق بوروز ويلكوم وأستاذية توماس إل شيلدز في طب الأمراض الجلدية.

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

أدوات
قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
العلوم الدقيقة المصغرة من دومون# 11200-10
أدوات العلوم الدقيقة لمقص بونالإضافي # 14084-08
الفورمالين 10٪فيشر العلمي# 22-046-361
PBS 1xBioShopCanada#PBS404.500
الملقط التشريحي القياسيأدوات العلوم الدقيقة# 91100-12
مقص جراحيأدوات العلوم الدقيقة# 140001-12
مقص زنبركي فاناسكينت علمي#INS600124

المراجع

  1. Bala, U., Tan, K. L., Ling, K. H., Cheah, P. S. Harvesting the maximum length of sciatic nerve from adult mice: a step-by-step approach. BMC Reserach Notes. 7, 714(2014).
  2. Sleigh, J. N., Weir, G. A., Schiavo, G. A simple....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

تشريح الجهاز العصبيالجهاز العصبي المركزيتشريح الفئرانعزل النخاع الشوكيعقدة الجذر الظهريتشريح العصب الوركيمجهر التشريح الدقيقنموذج فأر لمرض الورم الليفي العصبيتشريح الجهاز العصبي

تم نشر هذه المقالة

الفيديو قريباً