تمثل الدهون فئة كبيرة من الجزيئات التي تلعب أدوارا حيوية في العمليات البيولوجية. نظرا للعدد الهائل والتنوع من أنواع الدهون بين الأنظمة البيولوجية المتنوعة ، يظل القياس الكمي السريع والدقيق للدهون مهمة صعبة ، خاصة عندما تكون الجزيئات المستهدفة عبارة عن أنواع دهنية منخفضة الوفرة معقدة ونادرة. عززت التطورات الحديثة في استخراج الدهون وتحديدها وقياسها بشكل كبير فهم وظائف أنواع الدهون المتميزة. تهدف مجموعة الأساليب هذه إلى تغطية التطورات الحديثة في الأساليب التي تم تطويرها لتحليل الدهون الناشئة من موارد مختلفة ، بما في ذلك التقدم في تحضير العينات وفصلها وتحديدها وقياسها كميا.
الهدف من الطريقة التي وصفها باريش وويلز هو تحديد المحتوى الإجمالي للدهون وتمييز أنواع الدهون في العينات البحرية1. يتم جمع الدهون والعينات البيولوجية في مياه البحر أولا عن طريق الترشيح ثم يتم استعادتها عن طريق استخراج السائل السائل في مذيبات عضوية غير قطبية ، والتي تتكون من الكلوروفورم أو مخاليط من الكلوروفورم والميثانول. يستخدم الخليط الأخير عند وجود المواد الصلبة. بعد اشتقاق FAME باستخدام H2SO4 في MeOH ، يتم قياس الدهون بواسطة كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة للقضيب واكتشافها بتأين اللهب. تتمثل ميزة هذه الطريقة في أنه يمكن عزل الكسور المحتوية على الدهون من العينات البحرية في خطوة الفصل باستخدام المرشحات عند قطع محدد. بالإضافة إلى ذلك ، يسهل استخراج السائل السائل فصل الدهون عن المكونات الأخرى في المصفوفة المائية. تساهم الطبيعة الكارهة للماء للدهون في عزل الدهون من العينات البحرية وإثرائها. قد يكون للبروتوكول تطبيقات في الدراسات البيئية والكيميائية الحيوية التي تهدف إلى تقييم صحة النظام الإيكولوجي ، مثل الدراسات التي تقيس درجة تأثير البشرية على النظام البيئي.
العقديات هي جليكوسفينغوليبيدات حاملة لحمض السياليك ، وهي وفيرة للغاية في الدماغ. العقدة هي معدلات فسيولوجية وأهداف علاجية عبر السرطان والتمثيل الغذائي ووظائف المخ. في هذا السياق ، بورتر وآخرون يصف الأساليب على مستوى مقاعد البدلاء التي يمكن استخدامها للعزل والتنقية والتحليل شبه الكمي أو النوعي للعقدة2. تسمح هذه التقنيات ، التي تشمل تحليل الكروماتوغرافيا ذات الطبقة الرقيقة ، بتعظيم عوائد العقدة على نطاقات كبيرة وصغيرة مع تبسيط التنقية ، كما أنها تضمن الاسترداد الأمثل والتحليلات الدقيقة. الطريقة الموضحة هنا مفيدة للباحثين المهتمين بعزل العقدة وتنقيتها وتحليلها في الاكتشاف الطبي الحيوي والتطوير العلاجي.
الطريقة التي طورها Angelini et al. تستخدم لتوليد بصمات الكريات البيض بواسطة قياس الطيف الكتلي MALDI-TOF3. تسمح الطريقة بقياس النسبة بين أحادي القلب والكارديوليبين للتشخيص السريع لمتلازمة بارث. يستخدم قياس الطيف الكتلي MALDI-TOF للحصول على ملامح الدهون لكميات صغيرة من العينات البيولوجية المختلفة لتحديد المؤشرات الحيوية للدهون أو التغيرات المرضية. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي الكشف عن أنواع الدهون التشخيصية عن طريق جولة واحدة من قياس الطيف الكتلي مباشرة بعد عزل الكريات البيض من 1 مل من الدم. الكفاءة العالية وحساسية العين وخصوصية هذا الفحص تجعله اختبارا تشخيصيا مناسبا ليتم دمجه في العمل الروتيني للمختبرات السريرية لفحص متلازمة بارث.
تتمتع السواغات القائمة على الدهون (LBEs) بمزايا معينة ، مثل السمية المنخفضة ، والتوافق الحيوي الجيد ، والمعالجة الطبيعية ، ويساهم تطبيق LBEs في التنمية المستدامة لتصنيع الأدوية. وبالتالي ، فإن فهم تغيرات الحالة الصلبة في LBEs وتأثيرها على أداء المنتجات الصيدلانية LBE هو عامل رئيسي في تصنيع أشكال جرعات قوية قائمة على الدهون. يظهر البروتوكول الذي وصفه سالار بهزادي وآخرون أن حيود الأشعة السينية وقياس كالوريمتر المسح التفاضلي يمكن الإشارة إليهما على أنهما معايير ذهبية في التحقيق في LBEs للحالة الصلبة4. عند استخدام LBEs كمواد طلاء أو كمصفوفة تغليف ، يسمح قياس كالوريمتر المسح التفاضلي (DSC) بفحص السلوك الحراري للدهون وتقييم قابلية امتزاج المكونات الصيدلانية النشطة المحتملة (API).
على الرغم من أن بروتوكولات تحليل الدهون موثقة جيدا ، إلا أنها غالبا ما تتطلب تعديلات وفقا لظروف البحث وأنواع العينات. في العلوم المائية ، يعد تحديد أنواع الدهون ومحتوى الكائنات المائية مجالا مزدهرا للدراسة5. يمكن لنظام Chromarod Iatroscan TLC-FID إنشاء بيانات فئة الدهون السينوبتيكية السريعة من عينات صغيرة. لذلك ، يمكن استخدامه لفحص العينات البحرية قبل إجراء دراسات كروماتوغرافية مفصلة. عند دمجه مع الطرق المجهرية النوعية ، يمكن أن يكون هذا النظام أداة مفيدة للغاية للتحقيق في التبلور على المستوى الدقيق.
حتى الآن ، لا يزال توصيف الدهون المتساوية يمثل تحديا بسبب وجود أنواع لها هياكل معقدة ، مثل مواضع الرابطة المزدوجة ، والاتجاهات المختلفة ، واتصال سلسلة الأسيل المتعددة مع الكيمياء الفراغية للمجموعة الوظيفية المميزة6. في المستقبل ، ستكون هناك حاجة إلى مناهج مشتركة و / أو تقنيات تحليلية متقدمة لتوصيف الدهون بشكل فعال ، والأهم من ذلك ، لفهم أفضل لأنواع الدهون الجديدة التي يتم اكتشافها باستمرار7. يجب تطوير المزيد من الأدوات التحليلية لتتناسب مع عملية تحضير العينة المختارة. من أجل تصميم مستحضرات صيدلانية عالية الفعالية قائمة على الدهون ، من الضروري فهم علاقات الهيكل والوظيفة وقابلية المعالجة للدهون. سيؤدي هذا الفهم ، بدوره ، إلى إنشاء أدوار جديدة لوظائف الدهون وتطوير تشخيص وأدوية أكثر كفاءة. علاوة على ذلك ، فإن الطرق عالية الإنتاجية للفحص السريع للخلايا المنتجة للدهون أو الأحماض الدهنية مرغوبة للغاية. في هذا السياق ، أثبتت مجموعة الطرق هذه أن التقنيات التحليلية المحسنة يمكن أن تميز أنواع الدهون المتنوعة بدقة وخصوصية عالية ، وأن تحسين وتوحيد الطرق الحالية يمكن أن يعزز فهم الآليات البيولوجية للدهون واستخدامها.