إجراء متوافق مع GMP لتوليد الخلايا التائية المعدلة جينيا

Nikolaos Savvopoulos; Klearchos Stampolitis; Georgios Alexandropoulos; Dionysia Kefala; Memnon Lysandrou; Vassiliki Zacharioudaki; Nikos Tsolakos; Alexandros Spyridonidis

doi:10.3791/65097

يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

إجراء متوافق مع GMP لتوليد الخلايا التائية المعدلة جينيا

1.6K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/65097

⸱

أكتوبر 6, 2023

Nikolaos Savvopoulos¹ , Klearchos Stampolitis¹ , Georgios Alexandropoulos¹ , Dionysia Kefala¹ , Memnon Lysandrou¹ , Vassiliki Zacharioudaki¹ , Nikos Tsolakos² , Alexandros Spyridonidis¹

¹Institute of Cell Therapy, Bone Marrow Transplantation Lab, Department of Medicine, University of Patras, ²Protatonce Ltd, Demokritos Science Park

في هذه المقالة

ملخص

يحدد هذا البروتوكول عملية تحويل الخلايا التائية البشرية الأولية بجين مهم ، مما يضمن التوافق مع معايير ممارسات التصنيع الجيدة (GMP).

الملخص

تم إحداث ثورة في مجال العلاج بالخلايا بالتبني (ACT) من خلال تطوير الخلايا المعدلة وراثيا ، وتحديدا الخلايا التائية لمستقبلات المستضد الخيمري (CAR). أظهرت هذه الخلايا المعدلة استجابات سريرية ملحوظة في المرضى الذين يعانون من الأورام الخبيثة الدموية. ومع ذلك ، فإن التكلفة العالية لإنتاج هذه العلاجات وإجراء تقييمات شاملة لمراقبة الجودة قد حدت من إمكانية وصولها إلى مجموعة أوسع من المرضى. لمعالجة هذه المشكلة ، تستكشف العديد من المؤسسات الأكاديمية جدوى التصنيع الداخلي للخلايا المعدلة وراثيا ، مع الالتزام بالمبادئ التوجيهية التي وضعتها الوكالات التنظيمية الوطنية والدولية.

يمثل تصنيع منتجات الخلايا التائية المعدلة وراثيا على نطاق واسع العديد من التحديات ، لا سيما من حيث القدرات الإنتاجية للمؤسسة والحاجة إلى تلبية متطلبات كمية التسريب. ينطوي أحد التحديات الرئيسية على إنتاج ناقلات فيروسية واسعة النطاق بموجب إرشادات ممارسات التصنيع الجيدة (GMP) ، والتي غالبا ما يتم الاستعانة بمصادر خارجية لشركات خارجية. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن يساعد تبسيط عملية نقل الخلايا التائية في تقليل التباين بين دفعات الإنتاج ، وخفض التكاليف ، وتسهيل تدريب الموظفين. في هذه الدراسة ، نحدد عملية مبسطة لنقل الفيروسات العدسية للخلايا التائية البشرية الأولية مع علامة الفلورسنت كجين مهم. تلتزم العملية برمتها بالمعايير المتوافقة مع GMP ويتم تنفيذها داخل مؤسستنا الأكاديمية.

المقدمة

أدى ظهور علاجات الخلايا المتبنية (ACT) والخلايا التائية لمستقبلات المستضد الخيمري (CAR) إلى إحداث تحول ثوري في الممارسة السريرية الحديثة ، مما أدى إلى إنشاء نموذج جديد للطب الشخصي. على وجه الخصوص ، أظهرت الخلايا التائية ذات مستقبلات المستضدات الوهمية التي تستهدف CD19 استجابات سريرية استثنائية وتمثل العلاج بالخلايا التائية الأكثر تقدما لأورام الخلايا البائية^{الخبيثة 1}^،²^،³^،⁴^،⁵. ومع ذلك ، فإن علاجات الخلايا التائية المعدلة جينيا التجارية الحالية تعتمد بشكل كبير على النواقل الفيروسية لنقل الجينات. يمثل تنفيذ الن....