Method Article

استخدام تشتت الضوء المتعدد لفحص استقرار مستخلصات Phyllanthus emblica L. التي تم الحصول عليها بطرق استخراج مختلفة

DOI:

10.3791/65130

⸱

April 14th, 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy/Academy for Interdiscipline, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2Meishan Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 3Sichuan Nursing Vocational College, 4State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 5Sanajon Pharmaceutical Group, 6TCM Regulating Metabolic Diseases Key Laboratory of Sichuan Province, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

In This Article

Erratum Notice

Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هنا ، نقدم طريقة تقييم الاستقرار على أساس تقنية تشتت الضوء المتعددة لتقييم استقرار مستخلصات الطب الصيني التقليدي.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وسيط استخراج الطب الصيني التقليدي هو الوسيط الرئيسي في عملية التحضير ، واستقراره له تأثير مهم على فعالية وجودة المنتج النهائي. ومع ذلك ، فإن طرق تقييم الاستقرار الحالية غالبا ما تستغرق وقتا طويلا وتتطلب عمالة كثيفة ، وتتطلب مراقبة طويلة الأجل وتشغيل معدات معقدة (مثل اللوني السائل عالي الأداء) ، ومن الصعب الحصول على مزيد من المعلومات المادية حول عدم استقرار النظام. لذلك ، هناك حاجة ملحة لإنشاء تقنية تحليل استقرار سريعة ودقيقة للطب الصيني التقليدي. تشتت الضوء المتعدد هو طريقة تحليلية متطورة يمكنها تقييم استقرار الأدوية الصينية التقليدية بدقة وسرعة بطريقة صديقة للبيئة دون تغيير طبيعة أو حالة العينة أو استخدام الكواشف العضوية.

في هذا العمل ، باستخدام بيانات المسح الدقيقة لتشتت الضوء المتعدد ، اكتسب البروتوكول الحالي بسرعة منحنيات الاختلاف لسمك الطبقة وسرعة هجرة الجسيمات ومتوسط حجم الجسيمات بمرور الوقت. وقد مكن ذلك من التحديد الدقيق للآلية والخصائص الحاسمة التي تسببت في عدم استقرار النظام في مراحله المبكرة. تجدر الإشارة إلى أنه يمكن تقصير فترة البحث لعملية الاستخراج بشكل كبير من خلال التحديد الكمي التفصيلي لاستقرار النظام ، والذي يسمح أيضا بإجراء تحليل سريع ودقيق ومتعمق لتأثيرات عمليات الاستخراج المختلفة على استقرار Phyllanthus emblica L.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

في تصنيع الطب الصيني التقليدي (TCM) ، كان استقرار وسيطة استخراج الطب الصيني التقليدي والمستحضرات السائلة ذات الصلة دائما محور التفتيش1. تعاني الفعالية السريرية للمنتجات الطبية ، خاصة مع مادة البوليفينول كعنصر نشط أساسي ، بسبب مشكلات الاستقرار الكبيرة 2,3. يعد السائل الفموي Sanajon والسائل الفموي Nuodikang أمثلة على الحالات النموذجية لهذه المشكلة4. لذلك ، من الأهمية بمكان معرفة كيفية استخدام الأدوات الفعالة لتقييم وتحسين استقرار المواد الوسيطة السائلة بسرعة وبدقة في عملية إنتاج الطب الصيني التقليدي. يعتقد أن Phyllanthus emblica L. (PE) ، وهو نبات طبي واسع الانتشار في جنوب شرق آسيا ، له خصائص جيدة مضادة للأكسدة5 ، بالإضافة إلى مضادات الالتهاب6 ، ومضاد للبكتيريا7 ، ومضاد للأورام8. أثناء إجراء الاستخراج الحراري ، تتحول العفص في PE بعنف9. تحت الحفز مع درجات حرارة عالية ، تتحلل هذه العفص بسرعة لإنتاج جزيئات مثل حمض الغال وحمض الإيلاجيك ، مما يؤدي إلى عدم الاستقرار أو هطول الأمطار بسبب ضعف قابليتها للذوبان1. عادة ما تكون الطرق الحالية لتقييم استقرار الطب الصيني التقليدي ، مثل الاختبار المعجل أو الطرد المركزي ، مرهقة4 ، مما يحد من التطوير الإضافي لعمليات التحضير ذات الصلة.

استنادا إلى مبدأ تشتت الضوء المتعدد (MLS) ، أنشأنا طريقة تقييم استقرار سريعة لمستخلصات PEF وقمنا بتحليل آلية عدم الاستقرار. MLS هي طريقة قياس تعتمد على مسح مصادر الضوء القريبة من الأشعة تحت الحمراء. ينتج عن أي تغيير في نظام الحل تغيير في شدة الضوء. يتشتت الضوء الساقط عندما تمتصه جزيئات العينة أو تخترقه. يسجل النظام إشارة ضوء الإرسال عندما يمر عبر العينة ؛ إذا كانت نفاذية الضوء للعينة ضعيفة ، يسجل النظام إشارة ضوء التشتت العكسي. بالمقارنة مع الملاحظة البصرية ، يمكن أن يوفر هذا الكثير من الوقت1 ويمكنه تحليل ظاهرة عدم الاستقرار بسرعة وبدقة بالتفصيل ، وبالتالي توفير معلومات أكثر فائدة لتوجيه تحسين عملية الاستخراج.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. استخراج التحضير

  1. قم بوزن كمية مناسبة من PE بدقة ، وأضف 10x (وزن) من الماء منزوع الأيونات لاستخراج الارتجاع.
  2. اضبط خمس عينات لاستخراج الارتجاع لمدة 0 ساعة (E1) و0.5 ساعة (E2) وساعة واحدة (E3) و1.5 ساعة (E4) و2 ساعة (E5) بعد الوزن.
  3. بعد الاستخراج ، قم بتبريد العينات إلى درجة حرارة الغرفة ، وقم بوزنها لتعويض الوزن المفقود لضمان الاتساق مع أوزان ما قبل الاستخراج.
  4. أجهزة الطرد المركزي العينات عند 8581 × جم لمدة 10 دقائق لضمان إزالة المواد غير القابلة للذوبان والمخلفات العشبية من محلول العينة.
  5. استخدم ماصة لإضافة 20 mL من محلول العينة إلى زجاجة العينة للتأكد من أن المحلول المضاف في كل مرة يكون على نفس الارتفاع.
    ملاحظة: تجنب التلوث، مثل بصمات الأصابع، على جزء المسح الضوئي لزجاجة العينة، وتأكد من نظافة زجاجة العينة، وتحقق مما إذا كانت هناك خدوش مرئية على سطح الزجاجة. عند إضافة محلول العينة ، احرص على عدم انسكاب أو تناثر زجاجة العينة ، وتأكد من أن مستوى السائل على نفس الارتفاع في كل زجاجة.

2. تشغيل الصك

  1. قم بتشغيل أداة الكشف عن MLS ، وقم بتسخينها لمدة 30 دقيقة.
  2. انقر فوق الزر "إنشاء ملف" في القائمة العلوية (أو انقر فوق ملف | وظيفة ملف جديدة) لإنشاء ملف اختبار جديد.
  3. انقر فوق الزر "إظهار درجة حرارة مختبر التوربسكان " في القائمة العلوية لضبط درجة الحرارة المستهدفة للأداة على 25 درجة مئوية.
    ملاحظة: يجب أن تكون درجة الحرارة المحددة للأداة أعلى من درجة حرارة الغرفة ؛ خلاف ذلك ، ستتأثر درجة حرارة العينة بدرجة حرارة الغرفة.
  4. انقر فوق فحص البرنامج في القائمة العلوية للدخول إلى برنامج تحليل الإعداد . أضف البرنامج إلى القائمة ، وفي شريط المهام ، أضف 5 دقائق كدورة ، وامسح لمدة 48 ساعة إلى تسلسل التحليل ، واضبط وقت التوازن على 20 دقيقة. حدد برنامج التحليل هذا لجميع القياسات اللاحقة.
  5. انقل زجاجة العينة المعدة إلى نظام الكشف عن MLS. بعد إعداد البرنامج ، انقر فوق ابدأ لبدء القياس.
    ملاحظة: احرص على عدم هز الزجاجة عند تحميل العينة. لا يمكن بدء القياس إلا بعد موازنة درجة حرارة العينة ودرجة حرارة الضبط.

3. إعداد برنامج تحليل تشتت الضوء المتعدد

  1. بعد جمع البيانات ، انقر فوق قائمة معلمات الحساب لتعيين المعلمات الضوئية لحساب مؤشر الاستقرار (SI) وحجم الجسيمات وسرعة هجرة الجسيمات.
  2. اضبط المعلمات البصرية على النحو التالي: شدة انتقال ضوء الطور المستمر (T0) بنسبة 99.99٪ (ماء) ، ومعامل انكسار الطور المشتت (np) ك 1.36 ، ومعامل انكسار الطور المستمر (nf) ك 1.33.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يوضح الشكل 1 مبدأ قياس الضوء المتعدد ومعنى النتائج التي تم جمعها. في نتائج أطياف MLS (الشكل 2) ، كان الإحداثي هو ارتفاع خلية العينة ، وكان الإحداثي هو شدة الإرسال (T٪) والتشتت العكسي (BS٪). من خلال حساب نتائج أطياف MLS ، يمكن للنظام الحصول على التغييرات في المعلمات الفيزيائية الرئيسية للعينة خلال فترة القياس ، بما في ذلك قيمة متوسط انتقال دلتا (ΔT) (الشكل 3A) ، والمسار الخالي من الفوتون (الشكل 3B) ، و SI (الشكل 3C) ، وحجم الجس...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لطالما كان التقييم السريع والدقيق لاستقرار الطب الصيني التقليدي محور تركيز أبحاث الطب الصيني التقليدي. لتوفير معلومات أكثر فائدة لتوجيه تحسين عملية الاستخراج ، حللت هذه الدراسة آليات الاستقرار وعدم الاستقرار للعينة باستخدام تقنية غير مدمرة للأشعة تحت الحمراء القريبة.

في هذا البروتوكول ، يتم حساب معلمات الاستقرار المهمة بناء على بيانات فحص MLS الدقيقة. يمكن لمسح MLS جمع الإرسال (T٪) والتشتت العكسي (BS٪) للعينة في الوقت الفعلي وحساب مؤشر الاستقرار (SI) وحجم الجسيمات وس...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للكشف عنه.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم دعم هذه الدراسة بمنح من المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81973493) ؛ فريق الابتكار الوطني متعدد التخصصات للطب الصيني التقليدي (ZYYCXTD-D-202209) ؛ مجموعة ساناجون الدوائية جامعة تشنغدو للإنتاج والدراسة ومشروع المختبر المشترك للبحوث (2019-YF04-00086-JH) ؛ والمشروع الممول من خطة العلوم والتكنولوجيا لمقاطعة سيتشوان (2021YFN0100). يشكر المؤلفون المعهد المبتكر للطب الصيني والصيدلة بجامعة تشنغدو للطب الصيني التقليدي على دعمه الفني في أعمال قياس الطيف الكتلي.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
سترة التدفئة الكهربائية القابلة للتعديلBeijing Kewei Yongxing Instrument Co.، LtdMH-1000 & nbsp ؛www.keweiyq.com
ميزان تحليلي(1/10000)Sartorious, GermanyBSA224S www.sartorius.com.cn
أداة الموجات فوق الصوتية CNCKunshan Ultrasonic Instrument Co., LtdKQ-500DEwww.ks-csyq.com
GL-16 أجهزة طرد مركزي عالية السرعة  ؛ شركة Sichuan Shuke Instrument Co.، Ltd18091403www.sklxj.com
Phyllanthus emblica L.سوق المواد الطبية Hehuachi  YJL2004أنتجت في Yunnan
Turbisoft Lab أداة تشتت الضوء المتعددةشركة Formulaction الفرنسيةTurbisoft Lab 2.3.1.125 Fanalyser 1.3.5www.formulaction.com
جهاز مياه فائق النقاء UPR-II-5TSichuan ULUPURE   ؛ شركة Ultrapure Technology Co.، LtdZ16030559www.ccdup.com

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Huang, H. -Z., et al. Exploration on the approaches of diverse sedimentations in polyphenol solutions: An integrated chain of evidence based on the physical phase, chemical profile, and sediment elements. Frontiers in Pharmacology. 10, 1060(2019).
  2. Ran, F., et al. High or low temperature extraction, which is more conducive to Triphala against chronic pharyngitis. Biomedicine and Pharmacotherapy. 140, 111787(2021).
  3. Wei, X., et al. Hepatoprotective effects of different extracts from Triphala against CCl(4)-induced acute liver injury in mice. Frontiers in Pharmacology. 12, 664607(2021).
  4. Huang, H. Z., et al. Study on the stability control strategy of Triphala solution based on the balance of physical stability and chemical stabilities. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 158, 247-256 (2018).
  5. Bhattacharya, A., Chatterjee, A., Ghosal, S., Bhattacharya, S. K. Antioxidant activity of active tannoid principles of Emblica officinalis (amla). Indian Journal of Experimental Biology. 37 (7), 676-680 (1999).
  6. Chao, P. C., Hsu, C. C., Yin, M. C. Anti-inflammatory and anti-coagulatory activities of caffeic acid and ellagic acid in cardiac tissue of diabetic mice. Nutrition and Metabolism. 6, 33(2009).
  7. Tiwari, V., Kuhad, A., Chopra, K. Emblica officinalis corrects functional, biochemical and molecular deficits in experimental diabetic neuropathy by targeting the oxido-nitrosative stress mediated inflammatory cascade. Phytotherapy Research. 25 (10), 1527-1536 (2011).
  8. Baliga, M. S., Dsouza, J. J. Amla (Emblica officinalis Gaertn), a wonder berry in the treatment and prevention of cancer. European Journal of Cancer Prevention. 20 (3), 225-239 (2011).
  9. Rehman, H. -u, et al. Studies on the chemical constituents of Phyllanthus emblica. Natural Product Research. 21 (9), 775-781 (2007).
  10. Jang, Y., Koh, E. Characterisation and storage stability of aronia anthocyanins encapsulated with combinations of maltodextrin with carboxymethyl cellulose, gum Arabic, and xanthan gum. Food Chemistry. 405, 135002(2022).
  11. Fu, X., et al. Novel phenylalanine-modified magnetic ferroferric oxide nanoparticles for ciprofloxacin removal from aqueous solution). Journal of Colloid and Interface Science. 632, 345-356 (2023).
  12. Jiang, T., Charcosset, C. Encapsulation of curcumin within oil-in-water emulsions prepared by premix membrane emulsification: Impact of droplet size and carrier oil on the chemical stability of curcumin. Food Research International. 157, 111475(2022).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Erratum

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Formal Correction: Erratum: Using Multiple Light Scattering to Examine the Stability of Phyllanthus emblica L. Extracts Obtained with Different Extraction Methods
Posted by JoVE Editors on 8/04/2023. Citeable Link.

An erratum was issued for: Using Multiple Light Scattering to Examine the Stability of Phyllanthus emblica L. Extracts Obtained with Different Extraction Methods. The Authors section was updated from:

Haozhou Huang1
Mengqi Li2
Chuanhong Luo3
Sanhu Fan4
Taigang Mo4
Li Han3
Dingkun Zhang3
Junzhi Lin5
1Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy/Academy for Interdiscipline, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
2Sichuan Nursing Vocational College
3School of Pharmacy/School of Modern Chinese Medicine Industry, State Key Laboratory of Characteristic Chinese Medicine Resources in Southwest China
4Sanajon Pharmaceutical Group
5TCM Regulating Metabolic Diseases Key Laboratory of Sichuan Province, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

to

Haozhou Huang1,2
Mengqi Li3
Chuanhong Luo4
Sanhu Fan5
Taigang Mo5
Li Han4
Dingkun Zhang4
Junzhi Lin6
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy/Academy for Interdiscipline, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
2Meishan Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
3Sichuan Nursing Vocational College
4State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
5Sanajon Pharmaceutical Group
6TCM Regulating Metabolic Diseases Key Laboratory of Sichuan Province, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

Tags

Multiple Light ScatteringStability EvaluationPhyllanthus Emblica ExtractsExtraction MethodsParticle Size AnalysisReflux ExtractionStability IndexParticle Migration SpeedLayer ThicknessTurbiscan Analysis

Related Articles