هنا ، نقترح بروتوكولا لتوصيل عديد السكاريد الدهني داخل القصبة الهوائية (LPS) عن طريق التنبيب الرغامي الفموي البلعومي غير الباضع. تقلل هذه الطريقة من صدمة الإجراء الجراحي للحيوان وتوصل بدقة LPS إلى القصبة الهوائية ثم إلى الرئتين.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تقطير عديد السكاريد الدهني داخل القصبة الهوائية غير الباضع في الفئران
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
لا يزال نموذج فأر إصابة الرئة الحادة (ALI) الناجم عن عديد السكاريد الدهني (LPS) أو الذيفان الداخلي من بين النماذج الأكثر استخداما في الدراسات التي أجريت على الحيوانات لإصابة الرئة الحادة أو الالتهاب الحاد. الطرق الحالية الأكثر استخداما في نماذج الفئران المصابة بإصابات الرئة الحادة هي الحقن داخل الصفاق من LPS وفغر القصبة الهوائية لتسريب القصبة الهوائية من LPS. ومع ذلك ، فإن الطريقة الأولى تفتقر إلى استهداف الرئة وتلف الأعضاء الأخرى ، والطريقة الأخيرة تحفز الصدمة الجراحية ، وخطر العدوى ، وانخفاض معدل البقاء على قيد الحياة. هنا ، نوصي بطريقة التنبيب الرغامي الفموي البلعومي غير الغازية لتقطير LPS في الفئران. في هذه الطريقة ، يتم إدخال LPS بشكل غير جراحي في القصبة الهوائية من خلال تجويف البلعوم الفموي ليتم غرسه في الرئة بمساعدة جهاز للتنبيب الرغامي. لا تضمن هذه الطريقة استهداف الرئة فحسب ، بل تتجنب أيضا الضرر وخطر الموت في الحيوانات. نتوقع أن يصبح هذا النهج مستخدما على نطاق واسع في مجال إصابة الرئة الحادة.
المقدمة
إصابة الرئة الحادة (ALI) هي متلازمة سريرية شائعة. في ظل مجموعة متنوعة من العوامل المسببة للأمراض ، يؤدي تعطيل الحاجز الفسيولوجي للخلايا الظهارية الرئوية والخلايا البطانية الوعائية إلى زيادة نفاذية السنخية ، مما يؤدي إلى انخفاض امتثال الرئة ، وذمة رئوية ، ونقص الأكسجة الشديد1. متلازمة الضائقة التنفسية الحادة (ARDS) هي أشد أشكال ALI. يعتبر الالتهاب غير المنضبط وتلف الإجهاد التأكسدي من الأسباب الرئيسية ل ALI ومتلازمة الضائقة التنفسية الحادة2 الأكثر حدة. عندما تصاب الخلايا الظهارية السنخية مباشرة بسبب الصدمة ، يتم تنشيط سلسلة الاستجابة الالتهابية للبلاعم السنخية ، مما يؤدي إلى التهاب في الرئة3. على ال....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تمت مراجعة بروتوكول التجارب على الحيوانات والموافقة عليه من قبل لجنة إدارة جامعة تشنغدو للطب الصيني التقليدي (سجل رقم 2021-11). تم استخدام ذكور الفئران C57 / BL (20-25 جم ، 6-8 أسابيع) في هذه الدراسة. تم الاحتفاظ بالفئران في غرفة الحيوانات وكانت حرة في الشرب والأكل أثناء التجربة.
1. التحضير
- تأكد من أن منصة التنبيب تتكون من قاعدة ورافع ومشبك ورق وشريطين مطاطيين وبعض الأوتار. خذ خيطا ، وقم بتمرير الخيط عبر الفتحتين في الجزء العلوي من الناهض ، واربط طرفي الخيط ، على التوالي ، بالنتوءات الصغيرة في الجزء العلوي من الناهض.
ملاحظة: اترك مساحة لرأس الماوس للمرور بين الخيط والفتحتين. - اربط شريطين مطاطيين بكل طر....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تم التحقق من الطريقة المقترحة لتقطير LPS في الفئران من خلال تقييم التعبير عن السيتوكين الالتهابي TNF-α ونسبة الوزن الجاف الرطب للرئة بعد 12 ساعة من تقطير LPS. كانت هناك أربع مجموعات في التجربة: التحكم الفارغ (بدون أي علاج) ، التنبيب الجراحي16 ، داخل الأنف17،18 ، والتنبيب الفموي البلعومي غير الباضع (ن = 6). بالمقارنة مع المجموعة الضابطة الفارغة ، زادت مستويات TNF-α المصل في مجموعة التنبيب الفموي البلعومي غير.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
في البداية ، نظرنا داخل تجويف الفم للعثور على موقع القصبة الهوائية19. ومع ذلك ، خلال هذه العملية ، اكتشفنا أن القصبة الهوائية للفئران C57 / BL ضيقة ، مما يجعل من الصعب العثور على الموقع الصحيح بهذه الطريقة دون مساعدة من معدات مثل المنظار الداخلي20. عند إجراء مزيد من الاستكشاف ، وجدنا أن الضوء الصادر من مصباح التنبيب يمكن أن يخترق سطح الجسم ، مما يسمح للمشغل بتحديد موضع القنية21.
للتحقق مما إذا كان الأنبوب قد دخل القصبة اله.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
شكر وتقدير
تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم: 81903902) ، ومؤسسة علوم ما بعد الدكتوراه الصينية (رقم: 2019M663457) ، وبرنامج سيتشوان للعلوم والتكنولوجيا (رقم: 2020YJ0172) ، ومشروع Xinglin Scholar Research Premotion التابع لجامعة تشنغدو في الطب الصيني التقليدي (رقم: QJRC2022053).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| حاقن عديد السكاريد الدهنية | MERK | L4130 | LPS |
| محاقن مايكرولتر | شنغهاي GAOGE الصناعة والتجارة المحدودة | 10028505008124 لتقديم | |
| قنية الماوس | LPS RWD Life Science | 803-03008-00 | قنية الماوس |
| طقم تنبيب الفأر | RWD Life Science | 903-03027-00 | بما في ذلك قاعدة ، ناهض ، أنبوب ، ملقط جراحي وبعض سلاسل |
| ماصة باستور | Biosharp علوم الحياة | BS-XG-03 | للتحقق من نجاح التنبيب |
| Pentobarbital الصوديوم | شركة بكين للكيماويات ، الصين | 20220918 | لتخدير الفئران |
المراجع
- Xia, Y., et al. Protective effect of human amnion epithelial cells through endotracheal instillation against lipopolysaccharide-induced acute lung injury in mice. Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi. 33 (1), 7-11 (2017).
- Butt, Y., Kurdowska, A., Allen, T. C.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
