يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

إصابة الرباط الصليبي الأمامي الناجم عن الانضغاط (ACL) غير الغازية والتصوير في الجسم الحي لنشاط الأنزيم البروتيني في الفئران

1.6K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/65249

⸱

سبتمبر 29, 2023

 , 
1Lawrence J. Ellison Musculoskeletal Research Center, Department of Orthopaedic Surgery, University of California Davis Health

في هذه المقالة

ملخص

تعد إصابة الرباط الصليبي الأمامي غير الغازية طريقة موثوقة وذات صلة سريريا لبدء هشاشة العظام بعد الصدمة (PTOA) في الفئران. تسمح طريقة الإصابة هذه أيضا بالقياس الكمي في الجسم الحي لنشاط الأنزيم البروتيني في المفصل في نقاط زمنية مبكرة بعد الإصابة باستخدام مجسات الأشعة تحت الحمراء القريبة القابلة للتنشيط بالبروتياز وتصوير انعكاس التألق.

الملخص

عادة ما تؤدي إصابات المفاصل الرضحية مثل تمزق الرباط الصليبي الأمامي (ACL) أو تمزق الغضروف المفصلي إلى هشاشة العظام بعد الصدمة (PTOA) في غضون 10-20 سنة بعد الإصابة. يعد فهم العمليات البيولوجية المبكرة التي بدأتها إصابات المفاصل (على سبيل المثال ، الالتهاب ، والبروتينات المعدنية المصفوفة (MMPs) ، وبروتياز الكاثيبسين ، وارتشاف العظام) أمرا بالغ الأهمية لفهم مسببات PTOA. ومع ذلك ، هناك خيارات قليلة لقياس هذه العمليات البيولوجية في الجسم الحي ، وقد يتم الخلط بين الاستجابات البيولوجية المبكرة إذا تم استخدام التقنيات الجراحية الغازية أو الحقن لبدء الزراعة العضوية. في دراساتنا ل PTOA، استخدمنا مجسات قابلة للتنشيط للبروتياز بالقرب من الأشعة تحت الحمراء المتاحة تجاريا جنبا إلى جنب مع تصوير انعكاس التألق (FRI) لتحديد نشاط الأنزيم البروتيني في الجسم الحي بعد إصابة الرباط الصليبي الأمامي غير الغازية الناجمة عن الضغط في الفئران. تلخص طريقة إصابة الرباط الصليبي الأمامي غير الغازية هذه عن كثب حالات الإصابة ذات الصلة سريريا وهي معقمة تماما لأنها لا تنطوي على تعطيل الجلد أو كبسولة المفصل. يسمح لنا الجمع بين هذه الإصابات وطرق التصوير بدراسة المسار الزمني لنشاط الأنزيم البروتيني في نقاط زمنية متعددة بعد إصابة المفصل الرضحية.

المقدمة

هشاشة العظام هي مشكلة صحية منتشرة تؤثر على ملايين الأشخاص في الولايات المتحدة1. هشاشة العظام بعد الصدمة (PTOA) هي مجموعة فرعية من هشاشة العظام التي تبدأ بإصابة مشتركة مثل تمزق الرباط الصليبي الأمامي (ACL) أو إصابة الغضروف المفصلي أو الكسر داخل المفصل2. تبلغ نسبة مرضى هشاشة العظام الذين تظهر عليهم الأعراض والتي يمكن تصنيفها على أنها PTOA 12٪ على الأقل 3 ، وتؤثر هذه المسببات عادة على السكان الأصغر سنا من OA4 مجهول السبب. تعد نماذج الفئران من الزراعة العضوية أدوات حاسمة للتحقيق في مسببات الأمراض وعلاجات الزراعة العضوية المحتملة في جدول زمني أقصر بكثير (4-12 أسبوعا في نماذج الفئران مقارنة ب 10-20 عاما في البشر). ومع ذلك ، فإن طرق بدء هشاشة العظام في الفئران تتضمن عادة تقنيات جراحية غازية مثل استئصال الرباط الصليبي الأمامي5،6 ، أو إزالة أو زعزعة استقرار الغضروف المفصليالإنسي 5،7،8،9،10،11،12،13،14،15،16 ، أو مزيج من الاثنين17،18،19 ، والتي لا تعيد إنتاج حالات الإصابة ذات الصلة سريريا. تؤدي النماذج الجراحية أيضا إلى تفاقم الالتهاب في المفصل بسبب اضطراب كبسولة المفصل ، مما قد يسرع من تطور هشاشة العظام.

توفر نماذج الفئران غير الغازية لإصابة الركبة الفرصة لدراسة التغيرات البيولوجية والميكانيكية الحيوية في نقاط زمنية مبكرة بعد الإصابة وقد تسفر عن نتائج أكثر صلة سريريا20. أنشأ مختبرنا نموذجا غير جراحي للإصابات يستخدم ضغطا زائدا واحدا مطبقا خارجيا لإحداث تمزق في الرباط الصليبي الأمامي (ACL) في الفئران21،22،23،24. طريقة الإصابة غير الغازية هذه قادرة على إنتاج إصابة معقمة في المفصل دون تعطيل الجلد أو كبسولة المفصل.

تصوير انعكاس التألق (FRI) هو طريقة تصوير بصري تتضمن إثارة هدف بضوء الأشعة تحت الحمراء بطول موجي محدد وتحديد كمية الضوء المنعكس المنبعث عند طول موجي آخر. يمكن حقن مجسات خاصة بالبروتياز المتاحة تجاريا في النماذج الحيوانية ويمكن بعد ذلك استخدام FRI لتحديد نشاط الأنزيم البروتيني في مواقع محددة مثل مفصل الركبة. تم استخدام هذه الطريقة على نطاق واسع للكشف في الجسم الحي عن الأنشطة البيولوجية مثل الالتهاب. يتم إخماد المجسات المستخدمة لهذا التطبيق بشكل فلوري حتى تواجه البروتياز ذات الصلة. ستقوم هذه البروتياز بعد ذلك بكسر موقع انشقاق الإنزيم على المجسات ، وبعد ذلك ستنتج إشارة فلورية قريبة من الأشعة تحت الحمراء. تم التحقق من صحة هذه المجسات وطريقة التصوير هذه على نطاق واسع واستخدامها في دراسات السرطان25،26،27،28 وتصلب الشرايين29،30،31،32 ، وقد استخدمتها مجموعتنا لدراسات الجهاز العضلي الهيكلي لقياس علامات الالتهاب وتدهور المصفوفة23،24،33.

معا ، توفر إصابة المفاصل غير الغازية جنبا إلى جنب مع مجسات FRI في الجسم الحي والمجسات القابلة للتنشيط البروتيني قدرة فريدة على تتبع الالتهاب ونشاط الأنزيم البروتيني بعد إصابة المفاصل المؤلمة. يمكن إجراء هذا التحليل في وقت مبكر من ساعات أو حتى دقائق بعد الإصابة ، ويمكن تقييم نفس عدة مرات لدراسة المسار الزمني لنشاط البروتياز في المفصل. الأهم من ذلك ، قد لا تكون طريقة التصوير هذه ممكنة عند دمجها مع النماذج الجراحية ل OA ، لأن اضطراب الجلد وكبسولة المفصل يؤدي إلى إشارة مضان من شأنها أن تربك الإشارة من داخل المفصل.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت الموافقة على جميع الإجراءات الموضحة من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام في جامعة كاليفورنيا ديفيس. تم استخدام ذكور الفئران C57BL / 6J البالغة من العمر 3 أشهر في الدراسة الحالية.

1. إصابة الرباط الصليبي الأمامي غير الغازية

ملاحظة: إصابة الرباط الصليبي الأمامي الناتجة عن حمل ضغط مطبق خارجيا هي طريقة بسيطة وقابلة للتكرار تلخص عن كثب حالات إصابة الرباط الصليبي الأمامي لدى البشر. تمت كتابة هذا البروتوكول لأداة إطار تحميل متاحة تجاريا (انظر جدول المواد) ، ولكن يمكن تكييفها لأنظمة مماثلة.

  1. افتح البرنامج المتوافق مع أداة إطار التحميل (انظر جدول المواد) وحدد ملف تحكم موجود أو أنشئ ملفا جديدا.
  2. قم بتشغيل قوة المشغل.
  3. في قائمة المعايرة ، قم بقراءة القوة لخلية التحميل واضبط إزاحة المشغل على 0.
  4. استخدم 1٪ -4٪ إيزوفلوران مستنشق في الأكسجين لتخدير الفئران والتأكد من تخدير بالكامل عن طريق قرصة إصبع القدم و / أو قرصة الذيل.
  5. ضع الماوس في وضع الانبطاح على المنصة. ضع الجزء السفلي من الساق عموديا بين تركيبتي تحميل (الشكل 1) (انظر جدول المواد). ضع القدم في فتحة المباراة العلوية والركبة في كوب المباراة السفلية.
  6. اضبط ارتفاع التركيبات السفلية يدويا لتطبيق تحميل مسبق من 1-2 نيوتن (يتم مراقبته في الوقت الفعلي على شاشة الكمبيوتر) وشد المسمار اللولبي لتثبيت الموضع. التحميل المسبق ضروري لتثبيت الساق في الموضع الصحيح قبل تطبيق حمل الإصابة.
  7. قم بتطبيق حمل ضغط واحد على قوة مستهدفة (~ 12-15 نيوتن) أو إزاحة مستهدفة (~ 1.5-2.0 مم).
    ملاحظة: سيوفر تطبيق الحمل بمعدل تحميل أبطأ (~ 1 مم / ثانية) مستوى أكبر من المراقبة والتحكم في الوقت الفعلي ولكن من المحتمل أن يؤدي إلى فشل قلع في ACL. من المرجح أن يؤدي تطبيق معدل تحميل أسرع (~ 200 مم / ثانية) إلى إصابة الرباط الصليبي الأمامي متوسطة المادة22. إذا تم تحديد حدوث كسر في الظنبوب أو إصابة مفرطة أخرى ، فقم بالقتل الرحيم للحيوان باستخدام طريقة معتمدة من IACUC قبل تعافي من التخدير.
    1. اضبط معدل التحميل في ملف التحكم في البرنامج وقم بالتأكيد باستخدام بيانات إزاحة القوة.
      ملاحظة: عادة لا يكون كسر العظام أثناء تحميل ضغط الظنبوب مصدر قلق لأن قوة الكسر (~ 20 نيوتن) أعلى بكثير من قوة إصابة الرباط الصليبي الأمامي. ومع ذلك ، يجب مراقبة ذلك بالجس ، ويمكن استخدام التصوير (أي الأشعة السينية) للتأكد من عدم حدوث كسور في الظنبوب.
  8. يشار إلى الإصابة عادة بصوت ("نقرة" أو "أزمة") وإطلاق قوة يمكن التعرف عليه في مخططات إزاحة القوة (الشكل 1C). إذا تم استخدام معدل تحميل أبطأ ، فقم بإيقاف الحمل الضاغط فورا بعد الإصابة لمنع المزيد من التحميل والضرر المحتمل لأنسجة المفاصل الأخرى.
    ملاحظة: تحدث إصابة الرباط الصليبي الأمامي عادة عند 8-15 نيوتن اعتمادا على كتلة الجسم34. من المهم تحديد قوة مستهدفة أكبر من قوة إصابة الرباط الصليبي الأمامي المتوقعة.
  9. قم بتأكيد إصابة الرباط الصليبي الأمامي باستخدام اختبار الدرج الأمامي الخلفي35,36 أو تقييم مماثل لعدم استقرار المفصل.
  10. تطبيق جرعة تعتمد على وزن (على سبيل المثال، 0.05-0.1 ملغم/كغ من البوبرينورفين، انظر جدول المواد) للفئران بعد الإصابة، مع المدة والجرعة على النحو الموصى به والمعتمد من قبل المؤسسة المحلية IACUC.
    ملاحظة: قد تغير مضادات الالتهاب غير الستيروئيدية تطور PTOA بعد الإصابة ، لذلك لا يوصى باستخدام مضادات الالتهاب غير الستيروئيدية لإدارة الألم في نموذج الإصابة هذا ما لم يكن هدفا محددا للدراسة.

2. إعداد لتصوير FRI

ملاحظة: بالنسبة للتصوير البصري ، فإن فراء (خاصة الفراء الداكن) فعال للغاية في حجب الضوء وامتصاصه وتشتيته ، لذلك يجب إزالة الفراء قدر الإمكان من المنطقة المحيطة بمفاصل الركبة قبل التصوير. عادة ما يكون كريم مزيل الشعر أكثر فعالية لإزالة الفراء من كليبرز . الفئران العارية أو الخالية من الشعر لا تتطلب إزالة الفراء. ومع ذلك ، فإن إزالة الفراء ضرورية لسلالات الفئران الأكثر استخداما (على سبيل المثال ، C57BL / 6). إذا أمكن ، قم بإطعام الفئران بطعام منقى منخفض التألق قبل التصوير. يحتوي تشاو الفأر القياسي على الكلوروفيل ، الذي يتألق تلقائيا بطول موجي يبلغ حوالي 700 نانومتر وقد يؤثر على جمع البيانات من نظام FRI القريب من الأشعة تحت الحمراء.

  1. تخدير الفئران مع 1 ٪ -4 ٪ استنشاق isoflurane في الأكسجين. إبقاء الفئران على وسادة التدفئة قدر الإمكان وتطبيق مرهم العين لمنع تهيج العينين.
  2. استخدم قطعة قطن لتطبيق كريم مزيل الشعر (انظر جدول المواد) على الجانب الأمامي (الجمجمة) من أرجل الفئران حول مفصل الركبة.
  3. دع الكريم يقف لمدة ~ 1 دقيقة ، ثم استخدم المناديل لإزالة الكريم والفراء من الساق. كرر إذا لزم الأمر.
  4. بمجرد انكشاف مفاصل الركبة بالكامل دون أي فرو يغطي المنطقة ، نظف الساقين بمناديل كحولية لإزالة أي كريم مزيل شعر متبقي.
    ملاحظة: يمكن استخدام كريم مزيل الشعر على نفس الفئران عدة مرات خلال الدراسة ، ولكن يجب أن تكون هذه التطبيقات على بعد أسبوع واحد على الأقل لمنع تهيج الجلد غير الضروري.

3. إعداد حل التحقيق

  1. إذا لزم الأمر ، قم بتخفيف المسبار القابل للتنشيط الفلوري وفقا لتعليمات الشركة المصنعة في محلول ملحي معقم 1x مخزن بالفوسفات (PBS). تحتوي قارورة واحدة من المسبار المتاح تجاريا (انظر جدول المواد) عادة على 20 نانومول في 0.15 مل من 1x PBS. لتخفيف المحلول في القارورة ، أضف 1.35 مل من 1x PBS لعمل 20 نانومول في 1.5 مل من 1x PBS.
    ملاحظة: بعد التخفيف ، يمكن استخدام قارورة واحدة لتصوير عشرة فئران عند حقن 0.15 مل لكل فأر.
  2. دوامة الحل مع الحد الأدنى من السرعة (~ 2000 دورة في الدقيقة) لمدة 30 ثانية لضمان أن يتم إذابة المسبار في الحل ، ثم أجهزة الطرد المركزي لفترة وجيزة لضمان أن كل السائل خارج الغطاء.
    ملاحظة: يمكن تخزين المحلول في درجة حرارة 2-8 درجة مئوية في مكان محمي من الضوء لمدة تصل إلى 12 شهرا.

4. الحقن المداري الرجعي

ملاحظة: ارجع إلى Yardeni et al. فيما يتعلق بتفاصيل هذا الإجراء37.

  1. استخدم 1٪ -4٪ إيزوفلوران مستنشق في الأكسجين لتخدير الفئران ووضع الماوس على جانبه مع الخطم في مخروط الأنف.
  2. استخدم محاقن الأنسولين ~ 29 G لحقن محلول المسبار (أعدت في الخطوة 3).
  3. حافظ على تغطية المحقنة قبل الاستخدام لمنع التعرض للضوء.
  4. عند إعطاء الحقن:
    1. الحقن في داخل العين (القرنية الدمعية) ، وتأكد من أن شطبة المحقنة مائلة نحو العين. بالنسبة للأشخاص الذين يستخدمون اليد اليمنى ، يوصى بالحقن في العين اليمنى للماوس مع مواجهة لليمين.
    2. باستخدام اليد غير المحقونة ، اسحب الجلد حول العين برفق لتثبيت الرأس والتسبب في بروز العين.
    3. زاوية المحقنة موازية لجسم الماوس.
    4. تقدم المحقنة برفق عبر العين حتى تواجه مقاومة صلبة ؛ لا تحاول تجاوز هذه النقطة.
    5. قم بحقن محلول المسبار ببطء في الجيب الحجاجي الخلفي ، ثم اسحب الإبرة ببطء من مقبس العين. إذا لم يخرج أي محلول بالإبرة ، يكون الحقن ناجحا.
    6. ضع محلول ملحي أو مرهم للعين على العين المحقونة.
      ملاحظة: استنادا إلى الوثائق المقدمة مع مجسات التصوير ، يكون وقت التصوير الأمثل عادة ما بين 1 و 2 أيام بعد حقن محلول المسبار. إذا أمكن ، يوصى بإجراء فحص أولي لتحديد وقت التصوير الأمثل لكل تطبيق محدد. ستقوم الفئران باستقلاب المسبار المحقون في غضون 7 أيام تقريبا ، وبعد ذلك ستحتاج إلى حقن جرعة جديدة من محلول المسبار إذا كانت هناك حاجة إلى نقاط زمنية إضافية.

5. تصوير انعكاس مضان

ملاحظة: الإجراءات الواردة في هذا القسم خاصة بنظام التصوير البصري المتاح تجاريا (انظر جدول المواد). يمكن إجراء تصوير مماثل باستخدام أنظمة مماثلة.

  1. تخدير الفئران بنسبة 1٪ -4٪ من الأيزوفلوران المستنشق في الأكسجين ووضع مستلق في نظام التصوير مع الخطم في مخروط الأنف.
  2. ضع الماوس مع تمديد أسفل الساقين بحيث يتم توجيه الركبتين قليلا في الهواء (قد يكون من الضروري وضع شريط على القدمين). من الأهمية بمكان استخدام وضع ثابت لجميع.
  3. افتح البرنامج المتوافق (انظر جدول المواد) على كمبيوتر نظام التصوير ؛ ستظهر "لوحة التحكم في الاستحواذ".
  4. لتسخين النظام ، انقر فوق تهيئة وانتظر حتى يتحول ضوء درجة الحرارة إلى اللون الأخضر.
  5. انقر فوق معالج التصوير ، وتأكد من ظهور نافذة "معالج التصوير".
  6. انقر فوق تصفية الزوج ، وتأكد من أن الإعداد على "إضاءة Epi-Illumination" ، ثم اضغط على التالي.
  7. لتحديد إعدادات الإثارة / الانبعاث الصحيحة ، ابحث عن مسبار الاهتمام من القائمة المنسدلة. إذا لم يتمكن المرء من العثور على المسبار الصحيح ، فابحث عن الاسم "Input Ex / Em" واكتب يدويا قيمة ذروة الإثارة وذروة الانبعاث بناء على خاصية المسبار الذي سيتم استخدامه (على سبيل المثال ، لذروة الإثارة ، أدخل 675 ، ولذروة الانبعاث ، أدخل 720). انقر فوق التالي.
  8. اختر الماوس ل "موضوع التصوير". في "معلمات التعريض الضوئي" ، تأكد من تحديد الإعدادات التلقائية ، وتحديد خيارات الفلورسنت والصورة الفوتوغرافية. حدد D-22.6 سم في قائمة التحقق من "مجال الرؤية". اضغط على التالي.
  9. يمكن رؤية إعداد التصوير وتعديله على اللوحة اليمنى من "لوحة التحكم في الاستحواذ". تأكد من صحة جميع الإعدادات، واضغط على الزر Acquisition Sequence . بعد ظهور الصورة ، تأكد من أن الصورة بها تعرض كاف. إذا لم يكن الأمر كذلك ، فقم بتغيير إعداد وقت التعرض وانقر فوق الحصول على تسلسل مرة أخرى.
  10. لتحليل الصورة ، ضع دائرة منطقة الاهتمام (ROI) بحجم ثابت فوق كل مفصل ركبة على الصورة بالأبيض والأسود (وهذا يمنع تحديد المواقع المتحيزة بناء على مناطق إشارة الفلورسنت).
  11. احسب الكفاءة الإشعاعية الكلية و / أو متوسط الكفاءة المشعة لكل مفصل ركبة. إذا تم حساب الكفاءة المشعة أيضا على الأرجل المقابلة ، فقم بتطبيع البيانات بقسمة قياس الكفاءة المشعة للساق المصابة على قياس الكفاءة المشعة للساق المقابلة.
    ملاحظة: إذا تم استخدام منطقة ذات أهمية ذات مساحة ثابتة لجميع الركبتين ، فإن كلا من الكفاءة الإشعاعية الكلية ومتوسط الكفاءة الإشعاعية سيسفر عن نتائج مماثلة. يوصى باستخدام متوسط الكفاءة المشعة إذا تم استخدام مناطق الاهتمام بأحجام مختلفة. سيوفر تطبيع بيانات الكفاءة المشعة من المفصل المصاب مع البيانات من الركبة المقابلة غير المصابة تحكما داخليا لحساب أي اختلافات في كمية المسبار المحقون وكفاءة التوصيل بين المختلفة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

بعد تطبيق قوة ضغط واحدة (1 مم / ثانية حتى الإصابة) على أسفل الساقين لذكور الفئران C57BL / 6J البالغة من العمر 3 أشهر ، تم إحداث إصابة الرباط الصليبي الأمامي باستمرار في جميع الفئران. كان متوسط قوة الضغط عند إصابة الركبة حوالي 10 نيوتن (الشكل 1).

أظهر تحليل FRI نشاطا أكبر بكثير للبروتياز في المفاصل المصابة للفئران المعرضة لإصابة الرباط الصليبي الأمامي غير الغازية في 7 أيام بعد الإصابة (الشكل 2). كما تم إجراء تحليل FRI لمفاصل الركبة على...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

أنشأ هذا البروتوكول ووصف بدقة طريقة غير جراحية قابلة للتكرار لإحداث إصابة الرباط الصليبي الأمامي في الفئران20،21،24،33. يمكن إجراء طريقة الإصابة البسيطة والفعالة هذه في بضع دقائق فقط ، مما يسهل إجراء دراسات عالية الإنتاجية ل PTOA. تلخص طريقة الإصابة هذه أيضا عن كثب حالات الإصابة ذات الصلة بإصابة الرباط الصليبي الأمامي البشري. قد تمنع الطرق الجراحية المستخدمة للحث على هشاشة العظام في الفئران است...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

تم دعم البحث الوارد في هذا المنشور من قبل المعهد الوطني لالتهاب المفاصل وأمراض الجهاز العضلي الهيكلي والجلد ، وهو جزء من المعاهد الوطنية للصحة ، تحت رقم الجائزة R01 AR075013.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
10x الأنسجة المالحة المخزنة بالفوسفاتProtechPBS01-32Rأو ما يعادل
التخدير الهوائيIsoflurane مع غرفة الحث ومخروط الأنف
Buprenorphineمسكن بعد الإصابة   ؛
مزيل الشعر كريمVeetB001KYPZ4Gأو ما يعادلها
تركيبات الركبة المصنوعة حسب الطلب ، وتركيبات الكاحل ، والمنصة
IVIS SpectrumPerkin Elmer124262يمكن أيضا استخدام نظام التصوير البصري المماثل
KimwipesKimberly-Clark Corporation06-666أو ما يعادله
برنامج Living Image   ؛مواد بيركين إلمر
 يمكن
مثل OsteoSense و MMPSense و Cat K و AngioSenseProSense680Perkin ElNEV10003
حقنة معقمة معإبرة الطيف الكيميائية Mfg. Corp.550-82231-CSCovidien 1 مل حقنة TB مع 28 جم × 1/2 بوصة. إبرة أو معقمة أو ما يعادلها
من خلية الحمل أحادية المحورTA Instrumentsسعة 20
N Vortex-Genie 2Scientific Industries، Inc.SI-0236أو ما يعادله
برنامج WinTest أدواتالمتوافقة مع Electroforce 3200
نظام أنظمة اختبار أيضا استخدام مجسات أخرى وما يعادلها من mer وما إلى ذلك. TA

المراجع

  1. Deshpande, B. R., et al. Number of persons with symptomatic knee osteoarthritis in the us: impact of race and ethnicity, age, sex, and obesity. Arthritis Care & Research (Hoboken. 68 (12), 1743-1750 (2016).
  2. Carbone, A., Rodeo, S. Review of current understanding of post-traumatic osteoarthritis resulting from sports injuries. Journal of Orthopaedic Research. 35 (3), 397-405 (2017).
  3. Thomas, A. C., Hubbard-Turner, T., Wikstrom, E. A., Palmieri-Smith, R. M. Epidemiology of posttraumatic osteoarthritis. Journal of Athletic Training. 52 (6), 491-496 (2017).
  4. Wang, L. J., Zeng, N., Yan, Z. P., Li, J. T., Ni, G. X. Post-traumatic osteoarthritis following ACL injury. Arthritis Research & Therapy. 22 (1), 57(2020).
  5. Glasson, S. S., Blanchet, T. J., Morris, E. A. The surgical destabilization of the medial meniscus (DMM) model of osteoarthritis in the 129/SvEv mouse. Osteoarthritis Cartilage. 15 (9), 1061-1069 (2007).
  6. Kamekura, S. Osteoarthritis development in novel experimental mouse models induced by knee joint instability. Osteoarthritis Cartilage. 13 (7), 632-641 (2005).
  7. Ma, H. L., et al. Osteoarthritis severity is sex dependent in a surgical mouse model. Osteoarthritis Cartilage. 15 (6), 695-700 (2007).
  8. Malfait, A. M., et al. ADAMTS-5 deficient mice do not develop mechanical allodynia associated with osteoarthritis following medial meniscal destabilization. Osteoarthritis Cartilage. 18 (4), 572-580 (2010).
  9. Yang, S., et al. Hypoxia-inducible factor-2alpha is a catabolic regulator of osteoarthritic cartilage destruction. Nature Medicine. 16 (6), 687-693 (2010).
  10. Moodie, J. P., Stok, K. S., Muller, R., Vincent, T. L., Shefelbine, S. J. Multimodal imaging demonstrates concomitant changes in bone and cartilage after destabilisation of the medial meniscus and increased joint laxity. Osteoarthritis Cartilage. 19 (2), 163-170 (2011).
  11. Li, J., et al. Knockout of ADAMTS5 does not eliminate cartilage aggrecanase activity but abrogates joint fibrosis and promotes cartilage aggrecan deposition in murine osteoarthritis models. Journal of Orthopaedic Research. 29 (4), 516-522 (2011).
  12. Shapiro, F., Glimcher, M. J. Induction of osteoarthrosis in the rabbit knee joint. Clinical Orthopaedics and Related Research. 147, 287-295 (1980).
  13. Meacock, S. C., Bodmer, J. L., Billingham, M. E. Experimental osteoarthritis in guinea-pigs. Journal of Experimental Pathology (Oxford). 71 (2), 279-293 (1990).
  14. Armstrong, S. J., Read, R. A., Ghosh, P., Wilson, D. M. Moderate exercise exacerbates the osteoarthritic lesions produced in cartilage by meniscectomy: a morphological study. Osteoarthritis Cartilage. 1 (2), 89-96 (1993).
  15. Pastoureau, P., Leduc, S., Chomel, A., De Ceuninck, F. Quantitative assessment of articular cartilage and subchondral bone histology in the meniscectomized guinea pig model of osteoarthritis. Osteoarthritis Cartilage. 11 (6), 412-423 (2003).
  16. Wancket, L. M., et al. Anatomical localization of cartilage degradation markers in a surgically induced rat osteoarthritis model. Toxicologic Pathology. 33 (4), 484-489 (2005).
  17. Karahan, S., Kincaid, S. A., Kammermann, J. R., Wright, J. C. Evaluation of the rat stifle joint after transection of the cranial cruciate ligament and partial medial meniscectomy. Comparative Medicine. 51 (6), 504-512 (2001).
  18. Kamekura, S., et al. Osteoarthritis development in novel experimental mouse models induced by knee joint instability. Osteoarthritis and cartilage / OARS, Osteoarthritis Research Society. 13 (7), 632-641 (2005).
  19. Jones, M. D., et al. In vivo microfocal computed tomography and micro-magnetic resonance imaging evaluation of antiresorptive and antiinflammatory drugs as preventive treatments of osteoarthritis in the rat. Arthritis & Rheumatology. 62 (9), 2726-2735 (2010).
  20. Christiansen, B. A., et al. Non-invasive mouse models of post-traumatic osteoarthritis. Osteoarthritis Cartilage. 23 (10), 1627-1638 (2015).
  21. Christiansen, B. A., et al. Musculoskeletal changes following non-invasive knee injury using a novel mouse model of post-traumatic osteoarthritis. Osteoarthritis Cartilage. 20 (7), 773-782 (2012).
  22. Lockwood, K. A., Chu, B. T., Anderson, M. J., Haudenschild, D. R., Christiansen, B. A. Comparison of loading rate-dependent injury modes in a murine model of post-traumatic osteoarthritis. Journal of Orthopaedic Research. 32 (1), 79-88 (2014).
  23. Satkunananthan, P. B., et al. In vivo fluorescence reflectance imaging of protease activity in a mouse model of post-traumatic osteoarthritis. Osteoarthritis Cartilage. 22 (10), 1461-1469 (2014).
  24. Hsia, A. W., et al. Post-traumatic osteoarthritis progression is diminished by early mechanical unloading and anti-inflammatory treatment in mice. Osteoarthritis Cartilage. 29 (12), 1709-1719 (2021).
  25. Zhang, H., et al. Biochromoendoscopy: molecular imaging with capsule endoscopy for detection of adenomas of the GI tract. Gastrointestinal Endoscopy. 68 (3), 520-527 (2008).
  26. Gounaris, E., et al. Live imaging of cysteine-cathepsin activity reveals dynamics of focal inflammation, angiogenesis, and polyp growth. PLoS One. 3 (8), e2916(2008).
  27. Sheth, R. A., Mahmood, U. Optical molecular imaging and its emerging role in colorectal cancer. American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology. 299 (4), G807-G820 (2010).
  28. Clapper, M. L., et al. Detection of colorectal adenomas using a bioactivatable probe specific for matrix metalloproteinase activity. Neoplasia. 13 (8), 685-691 (2011).
  29. Nahrendorf, M., et al. Dual channel optical tomographic imaging of leukocyte recruitment and protease activity in the healing myocardial infarct. Circulation Research. 100 (8), 1218-1225 (2007).
  30. Jaffer, F. A., et al. Optical visualization of cathepsin K activity in atherosclerosis with a novel, protease-activatable fluorescence sensor. Circulation. 115 (17), 2292-2298 (2007).
  31. Jaffer, F. A., Libby, P., Weissleder, R. Optical and multimodality molecular imaging: insights into atherosclerosis. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 29 (7), 1017-1024 (2009).
  32. Razansky, D., et al. Multispectral optoacoustic tomography of matrix metalloproteinase activity in vulnerable human carotid plaques. Molecular Imaging and Biology. 14 (3), 277-285 (2012).
  33. Hsia, A. W., et al. Osteophytes and fracture calluses share developmental milestones and are diminished by unloading. Journal of Orthopaedic Research. 36 (2), 699-710 (2018).
  34. Blaker, C. L., Little, C. B., Clarke, E. C. Joint loads resulting in ACL rupture: Effects of age, sex, and body mass on injury load and mode of failure in a mouse model. Journal of Orthopaedic Research. 35 (8), 1754-1763 (2017).
  35. Murata, K., et al. Controlling joint instability delays the degeneration of articular cartilage in a rat model. Osteoarthritis Cartilage. 25 (2), 297-308 (2017).
  36. Murata, K., et al. Controlling Abnormal joint movement inhibits response of osteophyte formation. Cartilage. 9 (4), 391-401 (2018).
  37. Yardeni, T., Eckhaus, M., Morris, H. D., Huizing, M., Hoogstraten-Miller, S. Retro-orbital injections in mice. Laboratory Animals (NY). 40 (5), 155-160 (2011).
  38. Kokubun, T., et al. Effect of changing the joint kinematics of knees with a ruptured anterior cruciate ligament on the molecular biological responses and spontaneous healing in a rat model. The American Journal of Sports Medicine. 44 (11), 2900-2910 (2016).
  39. Bhatti, F. U., et al. Characterization of non-invasively induced post-traumatic osteoarthritis in mice. Antioxidants (Basel). 11 (9), 1783(2022).
  40. Steel, C. D., Stephens, A. L., Hahto, S. M., Singletary, S. J., Ciavarra, R. P. Comparison of the lateral tail vein and the retro-orbital venous sinus as routes of intravenous drug delivery in a transgenic mouse model. Laboratory Animals (NY). 37 (1), 26-32 (2008).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

إصابة الرباط الصليبي الأمامي الناجم عن الانضغاط (ACL) غير الغازية والتصوير في الجسم الحي لنشاط الأنزيم البروتيني في الفئران
اتصل بنا
أوصِ بها للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

2026 © حقوق الطبع والنشر MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.