يقدم هذا البروتوكول إنشاء وتأكيد نموذج الحمل الزائد لحجم البطين الأيمن بعد الولادة (VO) في الفئران المصابة بالناسور الشرياني الوريدي البطني (AVF) ، والذي يمكن تطبيقه للتحقيق في كيفية مساهمة VO في نمو القلب بعد الولادة.
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
يقدم هذا البروتوكول إنشاء وتأكيد نموذج الحمل الزائد لحجم البطين الأيمن بعد الولادة (VO) في الفئران المصابة بالناسور الشرياني الوريدي البطني (AVF) ، والذي يمكن تطبيقه للتحقيق في كيفية مساهمة VO في نمو القلب بعد الولادة.
يعد الحمل الزائد لحجم البطين الأيمن (RV) (VO) شائعا لدى الأطفال المصابين بأمراض القلب الخلقية. في ضوء مراحل النمو المتميزة ، قد تستجيب عضلة القلب RV بشكل مختلف ل VO عند الأطفال مقارنة بالبالغين. تهدف الدراسة الحالية إلى إنشاء نموذج RV VO بعد الولادة في الفئران باستخدام ناسور شرياني وريدي بطني معدل. لتأكيد إنشاء VO والتغيرات المورفولوجية والدورة الدموية التالية لعربة سكن متنقلة ، تم إجراء الموجات فوق الصوتية في البطن ، تخطيط صدى القلب ، وتلطيخ الأنسجة الكيميائية لمدة 3 أشهر. ونتيجة لذلك ، أظهر الإجراء في الفئران بعد الولادة معدل بقاء مقبول ونجاح الناسور. في الفئران VO ، تم توسيع تجويف RV بجدار حر سميك ، وزاد حجم السكتة الدماغية بحوالي 30٪ -40٪ في غضون شهرين بعد الجراحة. بعد ذلك ، زاد الضغط الانقباضي RV ، ولوحظ قلس الصمام الرئوي المقابل ، وظهرت إعادة تشكيل الشريان الرئوي الصغيرة. في الختام ، من الممكن إجراء جراحة الناسور الشرياني الوريدي المعدل (AVF) لإنشاء نموذج RV VO في الفئران بعد الولادة. بالنظر إلى احتمال إغلاق الناسور وارتفاع مقاومة الشريان الرئوي ، يجب إجراء الموجات فوق الصوتية في البطن وتخطيط صدى القلب لتأكيد حالة النموذج قبل التطبيق.
يعد الحمل الزائد لحجم البطين الأيمن (RV) (VO) شائعا عند الأطفال المصابين بأمراض القلب الخلقية (CHD) ، مما يؤدي إلى إعادة تشكيل عضلة القلب المرضية وسوء التشخيص على المدىالطويل 1،2،3. يعد الفهم المتعمق لإعادة تشكيل عربة سكن متنقلة والتدخلات المستهدفة المبكرة ذات الصلة أمرا ضروريا لتحقيق نتائج جيدة لدى الأطفال المصابين بأمراض القلب التاجية. هناك العديد من الاختلافات في الهياكل الجزيئية والوظائف الفسيولوجية والاستجابات للمنبهات في قلوب البالغين والأطفال1،4،5،6. على سبيل المثال ، تحت تأثير الحمل الزائد للضغط ، فإن تكاثر خلايا عضلة القلب هو الاستجابة الرئيسية في قلوب الأطفال حديثي الولادة ، بينما يحدث التليف في قلوب البالغين 5,6. بالإضافة إلى ذلك ، فإن العديد من الأدوية الفعالة في علاج قصور القلب لدى البالغين ليس لها تأثير علاجي على قصور القلب لدى الأطفال ، وقد تسبب المزيد من الضرر 7,8. لذلك ، لا يمكن تطبيق الاستنتاجات المستخلصة من الحيوانات البالغة مباشرة على الحيوانات الصغيرة.
تم استخدام نموذج الناسور الشرياني الوريدي (AVF) للحث على القلب المزمن VO وضعف القلب المقابل لعقود في الحيوانات البالغة من الأنواع المختلفة9،10،11،12،13. ومع ذلك ، لا يعرف الكثير عن النموذج في الفئران بعد الولادة. في دراساتنا السابقة ، تم إنشاء نموذج فأر VO بعد الولادة بنجاح عن طريق إنشاء AVF البطني. كما تم عرض المسار التنموي المتغير للعربة الترفيهية في قلب ما بعد الولادة14،15،16،17.
لاستكشاف العملية الجراحية المعدلة الأساسية وخصائص النموذج الحالي ، يتم تقديم بروتوكول مفصل ؛ تم تقييم النموذج لمدة 3 أشهر في هذه الدراسة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تتوافق جميع الإجراءات المعروضة هنا مع المبادئ الموضحة في إعلان هلسنكي وتمت الموافقة عليها من قبل لجنة رعاية الحيوان والدراسات الإنسانية في مركز شنغهاي الطبي للأطفال (SCMC-LAWEC-2023-003). تم استخدام C57BL / 6 جرو الفئران (P7 ، الذكور ، 3-4 جم) في هذه الدراسة. تم الحصول على الحيوانات من مصدر تجاري (انظر جدول المواد). تم الاحتفاظ بصغار الفئران وأمهاتها المرضعات (الجراء: الأمهات = 6: 1 في قفص واحد) تحت ظروف مختبرية محددة خالية من مسببات الأمراض تحت دورة ضوء وظلام مدتها 12 ساعة عند 22 ± 2 درجة مئوية مع حرية الوصول إلى الماء واتباع نظام غذائي غذائي. تم تقسيم الجراء بشكل عشوائي إلى مجموعتين: مجموعة VO ومجموعة (وهمية) تديرها الوهم.
1. إعداد المعدات والأدوات الجراحية
ملاحظة: يتم سرد التفاصيل التجارية لجميع المواد / المعدات في جدول المواد.
2. الإجراء الجراحي
ملاحظة: تم تعديل إجراء جراحة الناسور وفقا للطريقةالموضحة سابقا 11. يوضح الشكل 1 مخططا لعملية AVF في الفئران بعد الولادة.
3. تأكيد الموجات فوق الصوتية من الناسور
ملاحظة: كانت العملية العامة لجهاز الموجات فوق الصوتية مطابقة للتقارير السابقة18,19.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
معدل البقاء على قيد الحياة وسالكية AVF في غضون 3 أشهر
نجا ما مجموعه 30 (75٪) من الفئران في مجموعة VO و 19 (95٪) من الفئران في المجموعة الوهمية من جراحة AVF (الشكل 4 أ). في مجموعة VO ، توفيت ثمانية فئران في غضون يوم واحد بعد الجراحة بسبب النزيف المفرط (ن = 5) أو أكل لحوم البشر (ن = 3) ، في حين توفي فئران لأسباب غير معروفة في 1 شهر.
من بين الفئران VO الباقية على قيد الحياة (n = 30) ، أكدت الموجات فوق الصوتية التأسيس الناجح للنواسير في 21 فأرا بعد...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في السابق ، تم إنشاء نموذج RV VO الكلاسيكي باستخدام قلس الصمام21 ؛ ومع ذلك ، بالمقارنة مع AVF ، قد تتطلب جراحة صمام القلب المفتوح تقنيات أكثر تطورا وقد تترافق مع معدل وفيات أعلى بكثير ، خاصة في الفئران بعد الولادة. نظرا لأن الدراسات التي أجريت على الحيوانات أظهرت أن نفس تأثير VO قد تم تحقيقه بواسطة AVF22 ، فقد تم استخدام جراحة الناسور البطني المعدلة مع صدمة أقل في هذه الدراسة.
تم النظر في بعض العوامل أثناء الإجراء لإنشاء الناسور بنجاح. أولا ، تم ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
لا يوجد تضارب في المصالح للإعلان.
تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم في الصين (رقم 82200309) ومشروع الابتكار للفريق الطبي المتميز في نينغبو (رقم 2022020405)
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 70٪ إيثانول | Tiandz ، محلول شيا | ||
| أسيتامينوفين عن طريق الفم | VistaPharm، Inc. Largo ، FL 33771 ، الولايات المتحدة الأمريكية | NDC 66689-054-01 | |
| آلة التخدير | RWD علوم الحياة ، قناع التخدير | R550IP | |
| RWD علوم الحياة ، الصين | 68680 | ||
| C57BL / 6 فئران | Xipu er-bikai التجريبي المحدودة (شنغهاي, الصين) | ||
| كريم إزالة الشعر | Veet, فرنسا | VT-200 | |
| Hematoxylin ومجموعة اليوزين | Beyotime biotech | C0105M | |
| Isoflurane | RWD علوم الحياة ، الصين | R510-22-10 | |
| مجهر | ؛ Yuyan Instruments ، الصين | SM-301 | |
| إبر خياطة جراحية | NINGBO MEDICAL NEEDLE CO.، LTD ، الصين | ||
| منصة التدفئة الحرارية | تشينغداو Juchuang مجموعة حماية البيئة المحدودة ، | ||
| جهاز الموجات فوق الصوتية | FUJIFILM VisualSonics، Inc. | Vevo 2100 | B ووضع دوبلر الملون ووضع دوبلر الموجات النبضية |
| جل الموجات فوق الصوتية | Parker Laboratories ، الولايات المتحدة | REF 01-08 | |
| محول الطاقة بالموجات فوق الصوتية | FUJIFILM VisualSonics، Inc. | MS 400 |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه
طلب إذن