القياسات الكمية لاستقلاب الأكسجين والجلوكوز بواسطة PET هي تقنيات راسخة ، ولكن يتم وصف تفاصيل البروتوكولات العملية بشكل ضئيل في الأدبيات. تقدم هذه الورقة بروتوكولا عمليا تم تنفيذه بنجاح على أحدث ماسح ضوئي للتصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
القياسات الكمية لاستقلاب الأكسجين والجلوكوز بواسطة PET هي تقنيات راسخة ، ولكن يتم وصف تفاصيل البروتوكولات العملية بشكل ضئيل في الأدبيات. تقدم هذه الورقة بروتوكولا عمليا تم تنفيذه بنجاح على أحدث ماسح ضوئي للتصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني.
طور المؤلفون نموذجا باستخدام التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني (PET) مع العديد من أدوات التتبع الصيدلانية المشعة التي تجمع بين قياسات معدل الأيض الدماغي للجلوكوز (CMRGlc) ، ومعدل الأيض الدماغي للأكسجين (CMRO2) ، وتدفق الدم الدماغي (CBF) ، وحجم الدم الدماغي (CBV) ، وبلغت ذروتها في تقديرات تحلل السكر الهوائي في الدماغ (AG). هذه التقديرات في الجسم الحي لعملية التمثيل الغذائي للجلوكوز المؤكسد وغير المؤكسد ذات صلة بدراسة الدماغ البشري في الصحة والمرض. توفر أحدث الماسحات الضوئية للتصوير المقطعي المحوسب بالإصدار البوزيتروني (PET-CT) تصويرا لوقت الرحلة (TOF) وتحسينات حاسمة في الدقة المكانية وتقليل القطع الأثرية. وقد أدى ذلك إلى تحسين التصوير بشكل كبير مع جرعات أقل من التتبع الإشعاعي.
تتضمن الطرق المحسنة لأحدث الماسحات الضوئية PET-CT إدارة سلسلة من أول أكسيد الكربون (CO) والأكسجين (O2) المستنشق 15من الماء المصنف على O (H 2) ، و 15ماء مسمى O (H2O) ، و 18F-deoxyglucose (FDG) - كل ذلك في جلسات مسح مدتها 2 ساعة أو 3 ساعات تنتج قياسات كمية عالية الدقة ل CMRGlc ، CMRO2و CBF و CBV و AG. تصف ورقة الطرق هذه الجوانب العملية للمسح المصمم لقياس التمثيل الغذائي للدماغ باستخدام النماذج الحركية التتبع وعينات الدم الشريانية وتقدم أمثلة على قياسات التصوير لعملية التمثيل الغذائي للدماغ البشري.
الدماغ البشري مستهلك كثيف للأكسجين والجلوكوز لعملية التمثيل الغذائي. تحدث نسبة من استقلاب الجلوكوز في الدماغ البشري السليم خارج استخدام الأكسجين ، والمعروف باسم تحلل السكر الهوائي في الدماغ (AG) ، وأغراضه قيد التحقيقالمكثف 1،2،3،4،5. تشير الدراسات السابقة في النماذج الحيوانية والبشر إلى وجود ارتباط بين AG والتطور والشيخوخة ، وتطور المشبكي والعصبي ، والذاكرة ، وترسب الأميلويد في مرض الزهايمر ، ووظيفة المادة البيضاء والمرض1،6،7،8،9،10،11،12،13. وبالتالي ، هناك اهتمام مستمر بدراسة AG والجوانب الأخرى لعملية التمثيل الغذائي للدماغ لفهم الدماغ البشري بشكل أفضل مع تقدمه في العمر وتعرضه للإصابة والمرض.
في الوقت الحاضر ، تتطلب طرق تقييم AG للدماغ البشري في الجسم الحي تصوير التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني باستخدام العديد من أجهزة التتبع الإشعاعي للأكسجين والجلوكوز لقياس كل من معدل الأيض الدماغي للجلوكوز (CMRGlc) 14 ، ومعدل الأيض الدماغي للأكسجين (CMRO2) 15 ، وتدفق الدم الدماغي (CBF) 16 ، وحجم الدم الدماغي (CBV) 17. بالإضافة إلى التصوير ، يتطلب القياس الكمي لعملية التمثيل الغذائي للدماغ باستخدام التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني تعقيدات أخرى ، بما في ذلك تقييم وظيفة الإدخال الشرياني ، عادة عن طريق قنية الشرايين الغازية وأخذ العينات. التأكد من أن المشاركين يتبعون بدقة تعليمات استنشاق المقتفي الإشعاعي مع تقييد حركة الرأس ؛ التعامل مع أجهزة التتبع الإشعاعي ذات عمر النصف القصير جدا (2 دقيقة) بأمان وفعالية؛ إدارة مجموعات البيانات الكبيرة. وتنفيذ طرق تحليلية متقدمة لحساب معلمات التمثيل الغذائي بدقة. ومن الجدير بالملاحظة أيضا قيود استخدام [18F] FDG لتقدير CMRGlc5،14.
يتناول هذا البروتوكول الأمور العملية الأكثر صلة بالقياسات الناجحة لعملية التمثيل الغذائي الكمي للدماغ في تجربتنا. يتضمن هذا البروتوكول وصفا للإجراءات الأساسية والملاحظات التحذيرية لتجنب الأخطاء الشائعة. إنه يؤجل المناقشة المتأنية للمبادئ الأكثر عمومية لعملية التمثيل الغذائي ، وعلم الأعصاب ، والتصوير ، وحركية التتبع ، وطرق الاستدلال من تصوير PET للتتبع الإشعاعي. يشمل الجمهور المستهدف المبتدئين في قياسات التمثيل الغذائي باستخدام التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني ، بالإضافة إلى باحثين وأطباء أكثر خبرة في التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني المهتمين بتوظيف 15متتبعا إشعاعيا. يفترض هذا البروتوكول الإلمام بدراسات التصوير البشري ، والإجراءات الطبية الغازية ، وأجهزة التتبع الإشعاعي ، وطرق الاستدلال الكمية. توجد العديد من المراجع الممتازة حول تصوير الدماغ المقطعي بالإصدار البوزيتروني بشكل عام18 ، و 15O-oxygen PET بشكل أكثر تحديدا19. بالنسبة إلى [18F] FDG ، بالإضافة إلى المسائل العملية الأخرى لإجراء التصوير المبوهني ، يوفر مركز توركو للتصوير البوزيتروني مواد مرجعية قيمة بالإضافة إلى روابط لأدبيات البحث الأولية الشاملة20.
تبدأ أقسام البروتوكول بالاعتبارات ذات الصلة فيما يتعلق باختيار المشاركين والتي تعتبر ضرورية للامتثال والمسح الناجح. بعد ذلك ، يحدد البروتوكول الجوانب المتعلقة بالمسح الداعم باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي للتشريح العصبي. بعد ذلك ، يصف البروتوكول أوامر المختبرات السريرية التي تتضمن تدابير مهمة لقياس كمية الأكسجين واستقلاب الجلوكوز. بعد ذلك ، يسرد البروتوكول الأمور المتعلقة بالسيكلوترون وتوصيل المستحضرات الصيدلانية المشعة. تأخذ الأوصاف فقط منظور المحققين العاملين في نقطة الرعاية في مرفق التصوير ، مع إغفال الاعتبارات المطلوبة من مرافق السيكلوترون وموظفيه. بعد ذلك ، يوضح البروتوكول تفاصيل إعداد وإدارة الخطوط الشريانية. يتطلب إنشاء الخطوط الشريانية وصيانتها تلبية معايير الامتثال الخاصة بالمؤسسات، ويحدد البروتوكول سير العمل الناجح. بعد ذلك ، يوفر البروتوكول الإجراءات التشغيلية الأساسية للمسح باستخدام التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني ، بما في ذلك تفاصيل تحديد موضع المشاركين ، والتصوير المقطعي المحوسب لتصحيح التوهين ، وإعطاء المستحضرات الصيدلانية المشعة ، وإجراء قياسات الشرايين. يناقش أخذ العينات الوريدية البدائل المحتملة لأخذ العينات الشريانية في قياسات CMRGlc مع [18F] FDG. قسم عن إعادة بناء صور التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني وتخزين البيانات يفصل معلمات البرامج والمسائل العملية لتكنولوجيا المعلومات. يشير القسم الخاص بالخروج ومتابعة المشاركين إلى الاتصالات الأساسية لسلامة المشاركين. كما تمت مناقشة أنشطة المعايرة الهامة. تم وصف العديد من طرق التحليل المناسبة والنماذج الحركية بشكل جيد في التقارير العلمية المنشورة وسوابقها العديدة. وبالتالي ، يوجه هذا البروتوكول القارئ إلى حد كبير إلى مراجع الأساليب المنشورة. وتوضح النتائج التمثيلية التنفيذ الناجح للبروتوكولات. يشرح قسم المناقشة الجوانب والقيود المفيدة للبروتوكول ، وإمكانياته في علم الأعصاب البشري ، والمسائل المتعلقة بالسلامة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ملاحظة: وافق مجلس المراجعة المؤسسية ولجنة أبحاث الأدوية المشعة التابعة لكلية الطب بجامعة واشنطن على جميع الدراسات بناء على البروتوكول الموضح أدناه. قدم جميع المشاركين من البشر موافقة خطية مستنيرة قبل المشاركة في الدراسات البحثية بناء على البروتوكول أدناه. راجع جدول المواد للحصول على التفاصيل المتعلقة بجميع المعدات والمواد والكواشف المستخدمة في هذا البروتوكول.
1. اختيار المشاركين
2. التصوير بالرنين المغناطيسي لتشريح الأعصاب
3. أوامر المختبر
4. توصيل المستحضرات الصيدلانية المشعة
ملاحظة: يتطلب قياس استقلاب الأكسجين في الدماغ و AG باستخدام PET منشأة سيكلوترون قادرة على إنتاج وتوصيل 15O من المستحضرات الصيدلانية المشعة ، والتي لها عمر نصف 122 ثانية. يجب أن يكون نقل المستحضرات الصيدلانية المشعة بين مرفق السيكلوترون والماسح الضوئي المقطعي بالإصدار البوزيتروني سريعا بما فيه الكفاية والموثوقية لتوفير الجرعات الكافية في وقت إعطاء المقتفي الإشعاعي.
5. خطوط الشرايين
6. المسح الضوئي
7. قياسات الشرايين
8. أخذ العينات الوريدية
9. إعادة بناء صور PET وتخزين البيانات
10. الخروج ومتابعة المشاركين
11. المعايرة
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تتضمن بعض الجوانب الأكثر تحديا من الناحية الفنية لهذا البروتوكول تكوين البيانات وإدارتها وجمعها بنجاح من الخطوط الشريانية مع إدارة أجهزة التتبع الإشعاعي قصيرة العمر وتشغيل الماسح الضوئي في نفس الوقت. يوفر الشكل 1 وجهة نظر شاملة للإعداد الحالي يلخص سير العمل التنظيمي والتشغيلي المطلوب من منسقي الدراسة والتدخليين والتمريض والتقنيين والمحققين. يمكن دمج المستحضرات الصيدلانية المشعة الموصوفة أعلاه بسهولة في خرائط غير كمية لأنشطة محددة (الشكل 2) ، بما في ذلك حساب نسب ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
التصوير المبزيتروني لاستقلاب الأكسجين والجلوكوز باستخدام غازات استنشاق [15O] CO و [15O] O2 ، والحقن الوريدي ل [15O] H2O ، والحقن الوريدي ل [18F] FDG لها سابقات تاريخية مهمة بناء على التصوير المتراكم من الأجيال القديمة من ماسحات التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني14،15،16،17،
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
لا يوجد تضارب في المصالح ، مالية أو غير ذلك ، بين المؤلفين ومحتوى هذه الورقة.
نحن ممتنون بشكل خاص للمشاركين في البحث لدينا على إيثارهم. نعرب عن تقديرنا لمديري وموظفي مركز أبحاث مختبرات التصوير العصبي ، ومركز أبحاث مرض الزهايمر نايت ، ومركز أبحاث التصوير السريري (CCIR) ، ومنشأة السيكلوترون بجامعة واشنطن لجعل هذا البحث ممكنا. نحن نقدر بامتنان تمويل الأبحاث من المعاهد الوطنية للصحة R01AG053503 و R01AG057536 و RF1AG073210 و RF1AG074992 و 1S10OD025214 ، ومعهد مالينكرودت للأشعة ، ومؤسسة ماكدونيل لعلوم الأعصاب في جامعة واشنطن.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 3/16 "القطر الخارجي 1/8" القطر الداخلي nylaflow أنابيب | Nylaflow Tubing ، Zazareth ، PA | ||
| 4 × 4 بوصة شاش | McKesson MedSurg | 16-4242 | |
| الميزان التحليلي | Fisher Scientific / OHUAS | Pioneer Exal Model 90 مم منصة #PA84 | |
| بكتيري / فيروسي | Hudson RCI ، Teleflex ، Perak ، ماليزيا | REF 1605 (IPN042652) | |
| BD SmartSite صمام خال من الإبرة | Becton Dickinson | 2000E | |
| Biograph mMR | Siemens ، Erlangen ، ألمانيا | ||
| Biograph Vision 600 Edge | Siemens ، Erlangen ، ألمانيا | ||
| Caprac مناديل عداد | Mirion Medical (Capintec) ، فلورهام بارك ، نيوجيرسي & nbsp ؛ | من عام 1991 أو أحدث | NaI حفر جيدا الكريستال |
| كوبان التفاف ذاتية اللصق | 3M | يشيع استخدامها في وحدات العناية المركزة | |
| خلع الملابس ، tegaderm ، 4 × 4 " | 3M الرعاية الصحية | # 1626 | |
| ECAT EXACT HR + | CTI PET Systems ، نوكسفيل ، تينيسي | ||
| إدواردز تروويف 3 سم مكعب / 84 بوصة (210 سم) ؛ | إدواردز لايف ساينس | PX284R | |
| بطول 48 سم ، حجم فتيلة 0.642 مل | براون | V5424 | |
| هيبارين صوديوم ، محلول 2 وحدة / مل ، 1,000 مل | Hospira Worldwide | # 409762059 | |
| IV لوح ذراع مرن 4 × 9 بوصات للبالغين | DeRoyal | M8125-A | |
| Keithley pico-ammeter | Tekronix | ||
| Magnetom Prisma تناسب | سيمنز ، إرلانغن ، ألمانيا | محول 3T | |
| من الذكور إلى الذكور لصمامات Luer شركة | Argon الطبية. | 040184000A | |
| MiniSpin Personal Microcentrifuge | Eppendorf ، هامبورغ ، ألمانيا | EP-022620151 | |
| لسان حال 15 مم ID ، 22 مم OD | Hudson RCI ، Teleflex ، Perak ، ماليزيا | REF 1565 (IPN042595) | |
| Iradmed ، وينتر سبرينغز ، فلوريدا | 3860 + | ||
| زجاجة وسائط PET مربعة Nalgene مع إغلاق ، 650 مل | Thermo Scientific | # 3420400650 | لحقيبة ضخ ضغط المعايرة |
| المتقاطعة مع لمبة ، تستوعب 1,000 مل & nbsp ؛ | الرعاية الصحية Logi | # 10401 | |
| علبة مراقبة الضغط قسطرة البولي إيثيلين ؛ 2.5Fr (2.5 سم) angiocath ؛ 0.015 "15 سم سلك ؛ 22G (2 سم) إبرة | Cook Medical | C-P MSY-250 ، G02854 | |
| RDS 11 MeV Cyclotron | Siemens ، Erlangen ، ألمانيا | قصف البروتون 15N لتوليد محلول 15O | |
| كلوريد الصوديوم IV 0.9٪ ، 1,000 مل | B. براون الطبية | E8000 | |
| شرائط ستيري (إغلاق ، إعادة تشكيل الجلد LF 1 / 2x4 بوصة) | McKesson MecSurg | # 3010 | |
| Twilite II | Swisstrace ، زيورخ ، سويسرا | ||
| الطاقة غير المنقطع بطارية احتياطية وواقي من زيادة التيار | APC | BR1500MS2 |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.