غسيل الكلى داخل الأدمة هو تقنية طفيفة التوغل تستخدم للتحقيق في وظيفة الأوعية الدموية الدقيقة في الصحة والمرض. يمكن استخدام كل من بروتوكولات الاستجابة للجرعة والتدفئة المحلية لهذه التقنية لاستكشاف آليات توسع الأوعية وتضيق الأوعية في الدورة الدموية الجلدية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
غسيل الكلى المجهري داخل الأدمة: نهج للتحقيق في الآليات الجديدة لضعف الأوعية الدموية الدقيقة لدى البشر
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
الأوعية الدموية الجلدية هي نسيج يمكن الوصول إليه ويمكن استخدامه لتقييم وظيفة الأوعية الدموية الدقيقة في البشر. غسيل الكلى داخل الأدمة هو تقنية طفيفة التوغل تستخدم للتحقيق في آليات العضلات الملساء الوعائية والوظيفة البطانية في الدورة الدموية الجلدية. تسمح هذه التقنية بالتشريح الدوائي للفيزيولوجيا المرضية للخلل البطاني الوعائي الدقيق كما هو مفهرس بانخفاض توسع الأوعية بوساطة أكسيد النيتريك ، وهو مؤشر على خطر الإصابة بأمراض القلب والأوعية الدموية. في هذه التقنية ، يتم وضع مسبار غسيل الكلى الدقيق في الطبقة الجلدية من الجلد ، ويتم وضع وحدة تسخين محلية مع مسبار قياس تدفق دوبلر بالليزر فوق المسبار لقياس تدفق خلايا الدم الحمراء. يتم تثبيت درجة حرارة الجلد المحلية أو تحفيزها بتطبيق الحرارة المباشر ، ويتم استخدام العوامل الدوائية من خلال المسبار لتحفيز أو تثبيط مسارات الإشارات داخل الخلايا من أجل تحفيز توسع الأوعية أو تضيق الأوعية أو لاستجواب الآليات ذات الأهمية (العوامل المشتركة ، مضادات الأكسدة ، إلخ). يتم تحديد التوصيل الوعائي الجلدي ، ويمكن تحديد آليات الخلل البطاني في حالات المرض.
المقدمة
أمراض القلب والأوعية الدموية (CVD) هي السبب الرئيسي للوفاة في الولايات المتحدة1. ارتفاع ضغط الدم (HTN) هو عامل خطر مستقل للسكتة الدماغية وأمراض القلب التاجية وفشل القلب ويقدر أنه يؤثر على ما يزيد عن ~ 50٪ من سكان الولايات المتحدة2. يمكن أن يتطور HTN كأمراض قلبية وعائية مستقلة (HTN أولية) أو نتيجة لحالة أخرى ، مثل مرض الكلى المتعدد الكيسات و / أو اضطرابات الغدد الصماء (HTN الثانوي). اتساع نطاق مسببات HTN يعقد التحقيقات في الآليات الأساسية وتلف الأعضاء النهائية التي لوحظت مع HTN. هناك حاجة إلى مناهج بحثية متنوعة وجديدة في الفيزيولوجيا المرضية لتلف الأعضاء النهائية المرتبط ب HTN.
واحدة من أولى ال....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تتم الموافقة على جميع الإجراءات من قبل مجلس المراجعة المؤسسية لجامعة ولاية بنسلفانيا قبل توظيف المشاركين.
1. إعداد المعدات
- قم بتشغيل وحدة التدفئة المحلية ومقياس تدفق دوبلر بالليزر.
ملاحظة: يجب معايرة كلاهما قبل جمع البيانات وفقا لتعليمات الشركة المصنعة. يجب توصيل مقياس تدفق دوبلر بالليزر بأجهزة الحصول على البيانات مع أخذ العينات عند 100 هرتز (100 عينة / دقيقة) والتسجيل المستمر في برنامج الحصول على البيانات. بينما يمكن استخدام أجهزة وبرامج الحصول على البيانات الأخرى ، من أجل البساطة ، تعكس الإرشادات المتبقية إمكانات أجهزة PowerLab وبرامج LabChart. - افتح ملف برنامج LabChart.
ملاحظة: يجب عمل ملف مرجعي مع إدخال البيانات....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
بروتوكول الاستجابة لجرعة الأسيتيل كولين
يصور الشكل 1 أ مخططا يوضح بالتفصيل بروتوكول الاستجابة لجرعة ACh. يوضح الشكل 1B التتبع التمثيلي لقيم تدفق كرات الدم الحمراء (وحدات التروية ، PU ؛ متوسطات 30 ثانية) من بروتوكول الاستجابة لجرعة ACh القياسي لموضوع واحد بمرور الوقت. يوضح الشكل 1C ملف بيانات أولي لبروتوكول الاستجابة لجرعة ACh. تم الاحتفاظ بقياسات خط الأساس الإضافية في ملف البيانات الخام ،.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
تقنية غسيل الكلى داخل الأدمة هي أداة متعددة الاستخدامات في أبحاث الأوعية الدموية البشرية. قد يغير المحققون البروتوكول لزيادة تنويع تطبيقاته. على سبيل المثال ، وصفنا بروتوكول الاستجابة لجرعة ACh ، لكن التحقيقات الأخرى في آليات تضيق الأوعية أو النغمة الحركية الوعائية ، بدلا من توسع الأوعية وحده ، استخدمت نهج الاستجابة للجرعة من النورإبينفرين أو نيتروبروسيد الصوديوم26،27،28،29،
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح وليس لديهم ما يكشفون عنه.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 1 مل محاقن | BD | محاقن 302100 | |
| أسيتليكولين | الولايات المتحدة | دستور الأدوية 1424511 | تشير البيانات التجريبية التي تم جمعها في مختبرنا إلى أن تجفيف الأسيتيل كولين يزيد من تباين استجابة CVC ؛ لا تجف ، تخزن في مجفف |
| مسحات الكحول | Mckesson | 191089 | |
| Baby Bee Syringe Drive | أنظمة التحليل الحيوي ، Incorporated | MD-1001 | في هذه الدراسة ، تم استخدام قوس 3 محاقن اختياري (رقم catalg MD-1002) |
| CMA 30 مجسات غسيل الكلى المجهري الخطي | Harvard Apparatus | CMA8010460 | |
| Connex Spot Monitor | WelchAllyn | 74CT-B | جهاز مراقبة ضغط الدم الآلي |
| لجهاز التحكم في مضخة حقنة الخلية | أنظمة التحليل الحيوي ، | التحكم في MD-1020 | المدمجة حتى 4 محركات حقنة نحل |
| الأطفال LabChart 8 | AD Instruments | ** يجب أن تكون أجهزة PowerLab وبرامج LabChart إصدارات متوافقة | |
| Lactated Ringer's Solution | Avantor (VWR) | 76313-478 | |
| Laser Doppler Blood FlowMeter | Moor Instruments | MoorVMS-LDF | |
| Laser Doppler Investigation Instruments | Instruments | CAL | |
| Laser Doppler VP12 مسبار | Moor Instruments | VP12 | |
| مجسات غسيل الكلى المجهري الخطي | أنظمة التحليل الحيوي ، Inc. | MD-2000 | |
| NG< / sup>-nitro-l-arginine ميثيل إستر | Sigma Aldrich | 483125-M | L-NAME |
| Povidone-iodine / betadine | Dynarex | 1202 | |
| PowerLab C جهاز الحصول على البيانات | AD Instruments | PLC01 | ** |
| PowerLab C Instrument | Interface AD Instruments | PLCI1 | ** |
| أقراص لاصقة للتحقيق | Moor Instruments | تعلق وحدة التدفئة المحلية على الجلد | |
| وحدة تحكم سخان الجلد | Moor Instruments | moorVMS-HEAT 1.3 | |
| مسبار تسخين صغير | Moor Instruments | VHP2 | |
| ستائر معقمة | Halyard | 89731 | |
| شاش معقم | Dukal Corporation | 2085 | |
| قفازات جراحية معقمة | تقدير رقم كتالوج Cardinal Health | 8856N | متبوعا بالأحرف الأولى من حجم القفاز ، ثم الحرف "B" (على سبيل المثال ، 8856NMB للمتوسط) |
| مقص جراحي | Cole-Parmer | UX-06287-26 |
المراجع
- Xu, J. Q., Murphy, S. L., Kochanek, K. D., Arias, E. Mortality in the United States, 2021. NCHS Data Brief. 456, (2022).
- Tsao, C. W., et al. Heart disease and stroke statistics-2023 update: A report from the American heart association. Circulation. 147....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
