يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

غسيل الكلى المجهري داخل الأدمة: نهج للتحقيق في الآليات الجديدة لضعف الأوعية الدموية الدقيقة لدى البشر

2.4K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/65579

⸱

يوليو 21, 2023

 ,  ,  , 
1Department of Kinesiology, The Pennsylvania State University

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

غسيل الكلى داخل الأدمة هو تقنية طفيفة التوغل تستخدم للتحقيق في وظيفة الأوعية الدموية الدقيقة في الصحة والمرض. يمكن استخدام كل من بروتوكولات الاستجابة للجرعة والتدفئة المحلية لهذه التقنية لاستكشاف آليات توسع الأوعية وتضيق الأوعية في الدورة الدموية الجلدية.

الملخص

الأوعية الدموية الجلدية هي نسيج يمكن الوصول إليه ويمكن استخدامه لتقييم وظيفة الأوعية الدموية الدقيقة في البشر. غسيل الكلى داخل الأدمة هو تقنية طفيفة التوغل تستخدم للتحقيق في آليات العضلات الملساء الوعائية والوظيفة البطانية في الدورة الدموية الجلدية. تسمح هذه التقنية بالتشريح الدوائي للفيزيولوجيا المرضية للخلل البطاني الوعائي الدقيق كما هو مفهرس بانخفاض توسع الأوعية بوساطة أكسيد النيتريك ، وهو مؤشر على خطر الإصابة بأمراض القلب والأوعية الدموية. في هذه التقنية ، يتم وضع مسبار غسيل الكلى الدقيق في الطبقة الجلدية من الجلد ، ويتم وضع وحدة تسخين محلية مع مسبار قياس تدفق دوبلر بالليزر فوق المسبار لقياس تدفق خلايا الدم الحمراء. يتم تثبيت درجة حرارة الجلد المحلية أو تحفيزها بتطبيق الحرارة المباشر ، ويتم استخدام العوامل الدوائية من خلال المسبار لتحفيز أو تثبيط مسارات الإشارات داخل الخلايا من أجل تحفيز توسع الأوعية أو تضيق الأوعية أو لاستجواب الآليات ذات الأهمية (العوامل المشتركة ، مضادات الأكسدة ، إلخ). يتم تحديد التوصيل الوعائي الجلدي ، ويمكن تحديد آليات الخلل البطاني في حالات المرض.

المقدمة

أمراض القلب والأوعية الدموية (CVD) هي السبب الرئيسي للوفاة في الولايات المتحدة1. ارتفاع ضغط الدم (HTN) هو عامل خطر مستقل للسكتة الدماغية وأمراض القلب التاجية وفشل القلب ويقدر أنه يؤثر على ما يزيد عن ~ 50٪ من سكان الولايات المتحدة2. يمكن أن يتطور HTN كأمراض قلبية وعائية مستقلة (HTN أولية) أو نتيجة لحالة أخرى ، مثل مرض الكلى المتعدد الكيسات و / أو اضطرابات الغدد الصماء (HTN الثانوي). اتساع نطاق مسببات HTN يعقد التحقيقات في الآليات الأساسية وتلف الأعضاء النهائية التي لوحظت مع HTN. هناك حاجة إلى مناهج بحثية متنوعة وجديدة في الفيزيولوجيا المرضية لتلف الأعضاء النهائية المرتبط ب HTN.

واحدة من أولى العلامات المرضية للأمراض القلبية الوعائية هي الخلل البطاني ، كما يتميز بضعف توسع الأوعية بوساطة أكسيد النيتريك (NO)3،4،5. التمدد بوساطة التدفق هو نهج شائع يستخدم لتحديد الخلل البطاني المرتبط بالأمراض القلبية الوعائية ، ولكن الخلل البطاني في أسرة الأوعية الدموية الدقيقة يمكن أن يكون مستقلا وأوليا لشرايين القناة الكبيرة6،7،8. علاوة على ذلك ، يتم عمل الشرايين المقاومة بشكل مباشر بواسطة الأنسجة المحلية أكثر من الشرايين القناة ولديها سيطرة فورية على توصيل الدم الغني بالأكسجين. وظيفة الأوعية الدموية الدقيقة تنبئ بالبقاء على قيد الحياة الضار الخالي من الأحداث القلبية الوعائية9،10،11. الأوعية الدموية الدقيقة الجلدية هي سرير وعائي يمكن الوصول إليه ويمكن استخدامه لفحص الاستجابات لمضيق الأوعية الفسيولوجي والدوائي أو المحفزات الموسعة للأوعية. غسيل الكلى داخل الأدمة هو تقنية طفيفة التوغل ، والهدف منها هو التحقيق في آليات كل من العضلات الملساء الوعائية ووظيفة البطانة في الأوعية الدموية الدقيقة الجلدية مع التشريح الدوائي المستهدف. تتناقض هذه الطريقة مع التقنيات الأخرى ، مثل احتقان الدم التفاعلي بعد الانسداد ، والذي لا يسمح بالتشريح الدوائي ، والرحلان الشاردي ، الذي يسمح بالتسليم الدوائي ولكنه أقل دقة في آلية عمله (تمت مراجعته بدقة في مكان آخر12).

يتم استعراض الأساس المنطقي وراء تطوير واستخدام هذه التقنية على نطاق واسع في مكان آخر13. تم تطوير هذا النهج في الأصل للاستخدام في الأبحاث العصبية في القوارض ثم تم تطبيقه لأول مرة على البشر للتحقيق في الآليات الكامنة وراء توسع الأوعية النشط من وجهة نظر التنظيم الحراري. في أواخر تسعينيات القرن العشرين ، تم استخدام هذه الطريقة لفحص كل من الآليات العصبية والبطانية فيما يتعلق بالتدفئة المحلية للجلد. منذ ذلك الوقت ، تم استخدام هذه التقنية للتحقيق في عدد من آليات الإشارات العصبية الوعائية في الجلد.

باستخدام هذه التقنية ، استجوبت مجموعتنا وآخرون آليات الخلل البطاني في الأوعية الدموية الدقيقة للعديد من المجموعات السريرية ، بما في ذلك ، على سبيل المثال لا الحصر ، دسليبيدميا ، والشيخوخة الأولية ، والسكري ، وأمراض الكلى المزمنة ، ومتلازمة المبيض المتعدد الكيسات ، وتسمم الحمل ، والاضطراب الاكتئابي الشديد14،15،16،17،18،19 ، وارتفاع ضغط الدم20،21، 22،23،24. على سبيل المثال ، وجدت دراسة سابقة أن النساء ذوات ضغط الدم الطبيعي اللائي لديهن تاريخ من تسمم الحمل ، والمعرضات لخطر متزايد للإصابة بالأمراض القلبية الوعائية ، قد قللن من توسع الأوعية بدون وساطة في الدورة الدموية الجلدية مقارنة بالنساء اللائي لديهن تاريخ من الحمل المعياري20. في دراسة أخرى ، أظهر البالغون الذين تم تشخيص إصابتهم ب HTN الأولي زيادة في حساسية الأنجيوتنسين II في الأوعية الدموية الدقيقة مقارنة بالضوابط الصحية21 ، وقد ثبت أن العلاج الدوائي المزمن الخافض للضغط المتبرع بالسلفهيدريل في مرضى HTN الأساسيين يقلل من ضغط الدم ويحسن كل من توسع الأوعية بوساطة كبريتيد الهيدروجينوبدون وساطة 22. وجد Wong et al.23 ضعف توسع الأوعية بوساطة حسية وبدون وساطة لدى البالغين المصابين بارتفاع ضغط الدم ، بالتزامن مع اكتشافنا لتطور الخلل البطاني مع زيادة مراحل HTN ، كما هو مصنف من قبل جمعية القلب الأمريكية لعام 2017 وإرشادات الكلية الأمريكية لأمراض القلب24.

تسمح تقنية غسيل الكلى المجهري داخل الأدمة بإجراء تحقيقات ميكانيكية خاضعة لرقابة مشددة في وظيفة الأوعية الدموية الدقيقة في الحالات الصحية والمرضية. لذلك ، تهدف هذه الورقة إلى وصف تقنية غسيل الكلى داخل الأدمة كما تطبقها مجموعتنا وغيرها. نحن بالتفصيل إجراءات كل من التحفيز الدوائي للبطانة مع أستيل كولين (ACh) لفحص العلاقة بين الجرعة والاستجابة والتحفيز الفسيولوجي لإنتاج NO الداخلي مع بروتوكول تحفيز التسخين المحلي 39 درجة مئوية أو 42 درجة مئوية. نقدم نتائج تمثيلية لكل نهج ونناقش الآثار السريرية للنتائج التي نشأت عن هذه التقنية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تتم الموافقة على جميع الإجراءات من قبل مجلس المراجعة المؤسسية لجامعة ولاية بنسلفانيا قبل توظيف المشاركين.

1. إعداد المعدات

  1. قم بتشغيل وحدة التدفئة المحلية ومقياس تدفق دوبلر بالليزر.
    ملاحظة: يجب معايرة كلاهما قبل جمع البيانات وفقا لتعليمات الشركة المصنعة. يجب توصيل مقياس تدفق دوبلر بالليزر بأجهزة الحصول على البيانات مع أخذ العينات عند 100 هرتز (100 عينة / دقيقة) والتسجيل المستمر في برنامج الحصول على البيانات. بينما يمكن استخدام أجهزة وبرامج الحصول على البيانات الأخرى ، من أجل البساطة ، تعكس الإرشادات المتبقية إمكانات أجهزة PowerLab وبرامج LabChart.
  2. افتح ملف برنامج LabChart.
    ملاحظة: يجب عمل ملف مرجعي مع إدخال البيانات المطلوب وقدرات جمع البيانات المستمرة مسبقا. يجب أن تكون هناك لوحة واحدة لكل دوبلر ليزر وسخان محلي يتوافق مع كل موقع غسيل الكلى ، ويجب أن تتوافق الألواح مع مدخلات القناة المناسبة في وحدة أجهزة الحصول على البيانات.

2. وضع ألياف غسيل الكلى

  1. تحديد الأوعية الدموية الكبيرة والمرئية للجلد في الجانب البطني من الساعد ، والإشارة إليها بعلامة دائمة (استخدم عاصبة لتصور الأوعية إذا لزم الأمر ؛ قد يتطلب تحديد الأوعية في الجلد المصطبغ الداكن اعتمادا أكبر على الجس).
  2. امسح المنطقة التي تشمل العلامات وجزءا كبيرا من المنطقة المحيطة باستخدام مسحات البيتادين. امسح البيتادين بمسحات الكحول. قم بتغطية المنطقة المعقمة من الجلد بستارة معقمة ، وضع الثلج لمدة ~ 5 دقائق لتخدير المنطقة.
  3. قم بإزالة الثلج ، وأدخل إبرة مقدمة (23 جم ، طول 25 مم) ، مائلة متجهة لأعلى ، في الطبقة الجلدية من الجلد على عمق 2-3 مم (حسب سمك الجلد الفردي). تقدم الإبرة ، مع الحرص على البقاء في طبقة الجلد ، والخروج من الجلد ~ 20 مم من نقطة الإدراج.
    ملاحظة: لتأكيد العمق المناسب للوضع في الجلد ، يجب أن يكون شكل الإبرة مرئيا وملموسا بسهولة ، ولكن يجب إخفاء لون الإبرة. إذا كانت هناك حاجة إلى أكثر من مسبار غسيل الكلى للتجربة ، فستحتاج أي إبرتين مقدمتين إلى وضع مسافة ≥2.5 سم ووضعها قبل إدخال مسبار غسيل الكلى الدقيق. لا ينبغي وضع المجسات على طول نفس السفينة الرئيسية.
  4. ترك الإبرة في مكانها ، قم بتوصيل المسبار (عبر قفل Luer) بحقنة تحتوي على محلول Ringer المرضع. قم بتغذية الطرف المقابل للمسبار من خلال إبرة الإدخال حتى يصبح الغشاء شبه المنفذ للمسبار قريبا ولكن لا يزال خارج فتحة إبرة المقدم. قم بتسريب كمية صغيرة من محلول رينغر ببطء من خلال الألياف حتى يتم ترشيح المحلول بشكل واضح من خلال مسام الغشاء لتأكيد سلامة الغشاء.
  5. إذا كنت تستخدم مسبار غسيل الكلى المجهري من Harvard Bioscience وإبرة المقدم، فاتبع الخطوات 2.5.1-2.5.2.
    1. عند تأكيد وظيفة المسبار ، قم بتغذية المسبار من خلال إبرة الإدخال حتى يتم احتواء الغشاء بالكامل في الطبقة الجلدية من الجلد داخل إبرة المقدم.
    2. باستخدام إصبع ، ثبت المسبار في مكانه بالقرب من الإبرة ، واسحب الإبرة في الاتجاه المعاكس من الإدخال. قم بلصق الجزء الخارجي من الألياف في مكانه على الجلد لمنع إزاحة الغشاء شبه المنفذ أثناء التجربة.
  6. إذا كنت تستخدم مسبار غسيل الكلى المجهري لأنظمة التحليل الحيوي وإبرة الإدخال ، فاتبع الخطوات 2.6.1-2.6.2.
    1. عند تأكيد وظيفة المسبار ، أمسك بمحور إبرة الإدخال والجزء البعيد من مسبار غسيل الكلى الدقيق بيد واحدة ، وفي نفس الوقت اسحب الإبرة المعاكسة لاتجاه الإدخال ، وحرك مسبار غسيل الكلى الدقيق في مكانه.
    2. اضبط المسبار حسب الحاجة لضمان دفن الغشاء شبه المنفذ في الجلد تماما. قم بلصق الألياف الخارجية في مكانها على الجلد لمنع إزاحة الغشاء شبه المنفذ أثناء التجربة.

3. احتقان الدم

  1. أثناء انتظار أن تهدأ الاستجابة المفرطة لإدخال الإبرة (~ 60-90 دقيقة) ، ضع المحقنة ذات الاستخدام الواحد في صينية حامل المحقنة على مضخات التسريب الدقيقة. محلول رينغر المرضع Perfuse أو محلول ملحي أو محلول مركبة (المحلول الذي يذوب فيه العامل الدوائي التجريبي ؛ 2 ميكرولتر / دقيقة) خلال مرحلة احتقان الدم.
    ملاحظة: بينما لا يمكن إزالة مجسات غسيل الكلى الدقيقة خلال هذه المرحلة ~ 60-90 دقيقة ، يمكن للمشارك ضبط وضع جسمه أو تحريك يده ، أو يمكن إزالة قفل Luer للمسبار من المحقنة وتثبيته بشريط لاصق على ذراع المشارك للسماح لهم بنطاق حر من الحركة للوقوف لفترة وجيزة. بمجرد تجهيزها بالسخانات المحلية ومجسات قياس تدفق دوبلر بالليزر (LDF) وبمجرد بدء جمع البيانات ، لا يمكن نقل مجسات LDF.
  2. عندما يهدأ احمرار الجلد ، وهو مؤشر على الاستجابة المفرطة لصدمة الإبرة ، قم بتوصيل وحدة التسخين المحلية بالجلد الذي يغطي الغشاء شبه المنفذ عبر القرص اللاصق للمسبار ، مما يضمن محاذاة مركز السخان مع مسار مسبار غسيل الكلى الدقيق.
  3. ضع مسبار LDF في الفتحة الموجودة في وسط السخان المحلي بحيث يكون الليزر عموديا مباشرة على سطح الجلد. بمجرد وضع مجسات LDF وتأمينها ، انقر فوق ابدأ في برنامج الحصول على البيانات لتسجيل وعرض قيم تدفق خلايا الدم الحمراء باستمرار (تدفق كرات الدم الحمراء ؛ وحدات التروية ، PUs). إذا هدأ احتقان الدم تماما ، فسيكون تدفق كرات الدم الحمراء مستقرا عند ~ 5-20 PU (قد ينعكس نبض الأوعية الموجودة أسفل مسبار LDF من خلال ارتفاعات طفيفة في PU تتزامن مع دقات القلب).
  4. ضع سوار ضغط الدم التلقائي على ذراع الشخص الذي لم يتم تجهيزه.
  5. اضبط السخانات المحلية على 33 درجة مئوية لتثبيت درجة حرارة الجلد ضمن نطاق محايد حراريا25 ، وبالتالي إزالة أي اختلافات في تأثير المحفزات الحرارية. لإضافة تعليق إلى التسجيل المستمر في برنامج الحصول على البيانات للدلالة على الأحداث في التجربة ، انقر فوق مربع النص في الزاوية العلوية اليمنى من الشاشة ، واكتب تعليقا ، وحدد القنوات التي يجب أن تتلقى التعليق ، وانقر فوق إضافة.

4. بروتوكول الاستجابة لجرعة الأسيتيل كولين

  1. بمجرد استقرار تدفق كرات الدم الحمراء استجابة للحرارة المحلية البالغة 33 درجة مئوية ، ابدأ في جمع بيانات خط الأساس ، وتمييزها في ملف برنامج الحصول على البيانات من خلال تعليق يبدأ خط الأساس. مطلوب ما لا يقل عن 5-10 دقائق من خط الأساس المستقر لتحليل البيانات ؛ أعد تشغيل خط الأساس في أي وقت خلال هذه المرحلة في جمع البيانات إذا لزم الأمر ، وقم بتمييزه في ملف LabChart. في الدقيقة الأخيرة من خط الأساس ، اجمع قياس ضغط الدم ، وأدخل القيم في تعليق في ملف LabChart.
  2. في نهاية 5-10 دقائق من جمع البيانات الأساسية ، قم بقياس وتسجيل ضغط الدم الأساسي ، وأدخل خط الأساس لنهاية التعليق في برنامج الحصول على البيانات.
  3. قم بإيقاف تشغيل مضخات التسريب الدقيق ، واستبدل المحاقن المليئة بمحلول رينغر المرضع بالمحقنة المملوءة بأقل تركيز من ACh (10-10 M).
  4. ثبت المحاقن الجديدة في مكانها ، وتأكد من تروية السائل من خلال نهاية المسبار قبل تشغيل مضخات التسريب الدقيق مرة أخرى. أدخل التعليق ابدأ −10 في تسجيل برنامج الحصول على البيانات.
  5. سيتم استخدام كل تركيز من ACh لمدة 5-10 دقائق عند 2 ميكرولتر / دقيقة. في الدقيقة الأخيرة من التروية ، لكل تركيز ، قم بقياس وتسجيل ضغط الدم. بمجرد انتهاء وقت التروية لتركيز معين ، استبدل المحقنة بأعلى تركيز تالي (على سبيل المثال ، يتم استبدال محلول 10-10 M ACh بمحلول 10−9 M ACh) ، كما هو موضح في الخطوات 4.2-4.4.
  6. مباشرة بعد تعطير التركيز النهائي ل ACh (10−1 M) ، استبدل حقنة ACh بأخرى تحتوي على محلول Ringer ، وقم بزيادة درجة حرارة السخان المحلي إلى 43 درجة مئوية. بمجرد استقرار تدفق كرات الدم الحمراء ، استبدل محلول رينغر بنيتروبروسيد الصوديوم (28 مللي مول) لإنتاج كل من توسع الأوعية الموضعي الناجم عن الحرارة والمستحث دوائيا. قياس وتسجيل ضغط الدم كل ~ 3 دقيقة خلال هذه المرحلة القصوى من توسع الأوعية.
  7. بمجرد حدوث هضبة تدفق RBC القصوى (~ 5 دقائق من PU المستقر) ، قم بإنهاء التجربة. حدد إيقاف في الزاوية السفلية اليمنى من برنامج الحصول على البيانات لإنهاء جمع البيانات المستمر.

5. بروتوكول التدفئة المحلية

  1. بمجرد استقرار تدفق كرات الدم الحمراء بعد احتقان الدم ، ابدأ في جمع البيانات الأساسية ، وأشر إلى ذلك في ملف برنامج الحصول على البيانات مع تعليق. في الدقيقة الأخيرة من خط الأساس ، اجمع قياس ضغط الدم ، وأدخل القيم في تعليق في ملف برنامج الحصول على البيانات.
  2. قم بزيادة السخانات المحلية إلى 39 درجة مئوية أو 42 درجة مئوية ، حسب احتياجات البروتوكول (الموضحة في قسم المناقشة).
  3. بمجرد أن يستقر تدفق كرات الدم الحمراء استجابة لتطبيق الحرارة المحلية (~ 40-60 دقيقة تسخين) ، يثقب N G-nitro-l-arginine methyl ester (L-NAME ؛ 15 mM مذاب في محلول رينغر ؛ 2 ميكرولتر / دقيقة ؛ مثبط NO synthase) من خلال مسبار (مسابار) غسيل الكلى الدقيق.
  4. بمجرد استقرار تدفق كرات الدم الحمراء استجابة ل L-NAME (~ 15-25 دقيقة من التروية) ، قم بزيادة السخانات المحلية إلى 43 درجة مئوية.
  5. بمجرد أن يستقر تدفق كرات الدم الحمراء استجابة ل 43 درجة مئوية (تحدث هضبة ~ 2-5 دقائق بعد ~ 20-45 دقيقة من التسخين) ، يثقب نيتروبروسيد الصوديوم (28 مللي متر مذاب في محلول رينجر) من خلال مسبار (مسابار) غسيل الكلى الدقيق.
  6. بمجرد حدوث هضبة تدفق RBC القصوى (~ 5 دقائق من PU المستقر) ، قم بإنهاء التجربة. حدد إيقاف في الزاوية السفلية اليمنى من برنامج الحصول على البيانات لإنهاء جمع البيانات.

6. إزالة مجسات غسيل الكلى

  1. بعد إنهاء التجربة ، استخدم مقصا جراحيا لقطع مجسات غسيل الكلى. قم بإزالة مجسات LDF بعناية من السخانات ، وقم بإزالة السخانات من الجلد. قم بإزالة الشريط الذي يثبت المجسات في مكانها على الجلد برفق.
  2. حدد بصريا موقع البزل على جانبي المسبار الذي شكل أصغر جلطة دموية. اقطع جزء المسبار بالقرب من الموقع بجلطة أصغر ، واترك ~ 1 بوصة من المسبار خارج الجلد غير مقطوع.
  3. قم بتنظيف جزء الجلد المحيط بمواقع الدخول والخروج من المسبار باستخدام مسحة كحولية ، بالإضافة إلى ~ 1 في طول المسبار المتبقي على الموقع الأقل تخثرا.
  4. اترك الكحول يجف على الجلد. بعد ذلك ، أمسك بجزء المسبار الممتد من موقع البزل مع الجلطة الأكبر ، مقابل ~ 1 في الجزء الموجود في الطرف الأقل تخثرا. اسحب المسبار ببطء نحو الجلطة الدموية الأكبر.
  5. ضع شاشا معقما فوق أي نزيف ينتج عن إزالة المسبار ، واضغط عليه.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

بروتوكول الاستجابة لجرعة الأسيتيل كولين

يصور الشكل 1 أ مخططا يوضح بالتفصيل بروتوكول الاستجابة لجرعة ACh. يوضح الشكل 1B التتبع التمثيلي لقيم تدفق كرات الدم الحمراء (وحدات التروية ، PU ؛ متوسطات 30 ثانية) من بروتوكول الاستجابة لجرعة ACh القياسي لموضوع واحد بمرور الوقت. يوضح الشكل 1C ملف بيانات أولي لبروتوكول الاستجابة لجرعة ACh. تم الاحتفاظ بقياسات خط الأساس الإضافية في ملف البيانات الخام ،...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

تقنية غسيل الكلى داخل الأدمة هي أداة متعددة الاستخدامات في أبحاث الأوعية الدموية البشرية. قد يغير المحققون البروتوكول لزيادة تنويع تطبيقاته. على سبيل المثال ، وصفنا بروتوكول الاستجابة لجرعة ACh ، لكن التحقيقات الأخرى في آليات تضيق الأوعية أو النغمة الحركية الوعائية ، بدلا من توسع الأوعية وحده ، استخدمت نهج الاستجابة للجرعة من النورإبينفرين أو نيتروبروسيد الصوديوم26،27،28،29،

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح وليس لديهم ما يكشفون عنه.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
1 مل محاقنBDمحاقن 302100
أسيتليكولينالولايات المتحدةدستور الأدوية 1424511تشير البيانات التجريبية التي تم جمعها في مختبرنا إلى أن تجفيف الأسيتيل كولين يزيد من تباين استجابة CVC ؛ لا تجف ، تخزن في مجفف
مسحات الكحولMckesson191089
Baby Bee Syringe Driveأنظمة التحليل الحيوي ، IncorporatedMD-1001في هذه الدراسة ، تم استخدام قوس 3 محاقن اختياري (رقم catalg MD-1002)
CMA 30 مجسات غسيل الكلى المجهري الخطيHarvard ApparatusCMA8010460
Connex Spot MonitorWelchAllyn74CT-Bجهاز مراقبة ضغط الدم الآلي
لجهاز التحكم في مضخة حقنة الخليةأنظمة التحليل الحيوي ،التحكم في MD-1020المدمجة حتى 4 محركات حقنة نحل
الأطفال LabChart 8AD Instruments** يجب أن تكون أجهزة PowerLab وبرامج LabChart إصدارات متوافقة
Lactated Ringer's SolutionAvantor (VWR)76313-478
Laser Doppler Blood FlowMeterMoor InstrumentsMoorVMS-LDF
Laser Doppler Investigation InstrumentsInstrumentsCAL
Laser Doppler VP12 مسبارMoor InstrumentsVP12
مجسات غسيل الكلى المجهري الخطيأنظمة التحليل الحيوي ، Inc.MD-2000
NG< / sup>-nitro-l-arginine ميثيل إسترSigma Aldrich483125-ML-NAME
Povidone-iodine / betadineDynarex1202
PowerLab C جهاز الحصول على البياناتAD InstrumentsPLC01**
PowerLab C InstrumentInterface AD InstrumentsPLCI1**
أقراص لاصقة للتحقيقMoor Instrumentsتعلق وحدة التدفئة المحلية على الجلد
وحدة تحكم سخان الجلدMoor InstrumentsmoorVMS-HEAT 1.3
مسبار تسخين صغيرMoor InstrumentsVHP2
ستائر معقمةHalyard89731
شاش معقمDukal Corporation2085
قفازات جراحية معقمةتقدير رقم كتالوج Cardinal Health8856Nمتبوعا بالأحرف الأولى من حجم القفاز ، ثم الحرف "B" (على سبيل المثال ، 8856NMB للمتوسط)
مقص جراحيCole-ParmerUX-06287-26
أدوات Moor

المراجع

  1. Xu, J. Q., Murphy, S. L., Kochanek, K. D., Arias, E. Mortality in the United States, 2021. NCHS Data Brief. 456, (2022).
  2. Tsao, C. W., et al. Heart disease and stroke statistics-2023 update: A report from the American heart association. Circulation. 147 (8), e93(2023).
  3. Cohuet, G., Struijker-Boudier, H. Mechanisms of target organ damage caused by hypertension: Therapeutic potential. Pharmacology & Therapeutics. 111 (1), 81-98 (2006).
  4. Park, K. H., Park, W. J. Endothelial dysfunction: Clinical implications in cardiovascular disease and therapeutic approaches. Journal of Korean Medical Science. 30 (9), 1213-1225 (2015).
  5. Levy, B. I., Ambrosio, G., Pries, A. R., Struijker-Boudier, H. A. Microcirculation in hypertension: a new target for treatment. Circulation. 104 (6), 735-740 (2001).
  6. Sara, J. D., et al. Prevalence of coronary microvascular dysfunction among patients with chest pain and nonobstructive coronary artery disease. Journal of the American College of Cardiology: Cardiovascular Interventions. 8 (11), 1445-1453 (2015).
  7. Weis, M., Hartmann, A., Olbrich, H. G., Hör, G., Zeiher, A. M. Prognostic significance of coronary flow reserve on left ventricular ejection fraction in cardiac transplant recipients. Transplantation. 65 (1), 103-108 (1998).
  8. Rossi, M., et al. Investigation of skin vasoreactivity and blood flow oscillations in hypertensive patients: Effect of short-term antihypertensive treatment. Journal of Hypertension. 29 (8), 1569-1576 (2011).
  9. Pepine, C. J., et al. Coronary microvascular reactivity to adenosine predicts adverse outcome in women evaluated for suspected ischemia results from the National Heart, Lung and Blood Institute WISE (Women's Ischemia Syndrome Evaluation) study. Journal of the American College of Cardiology. 55 (25), 2825-2832 (2010).
  10. Matsuda, J., et al. Prevalence and clinical significance of discordant changes in fractional and coronary flow reserve after elective percutaneous coronary intervention. Journal of the American Heart Association. 5 (12), e004400(2016).
  11. Gupta, A., et al. Integrated noninvasive physiological assessment of coronary circulatory function and impact on cardiovascular mortality in patients with stable coronary artery disease. Circulation. 136 (24), 2325-2336 (2017).
  12. Roustit, M., Cracowski, J. L. Assessment of endothelial and neurovascular function in human skin microcirculation. Trends in Pharmacological Sciences. 34 (7), 373-384 (2013).
  13. Low, D. A., Jones, H., Cable, N. T., Alexander, L. M., Kenney, W. L. Historical reviews of the assessment of human cardiovascular function: interrogation and understanding of the control of skin blood flow. European Journal of Applied Physiology. 120 (1), 1-16 (2020).
  14. Kenney, W. L., Cannon, J. G., Alexander, L. M. Cutaneous microvascular dysfunction correlates with serum LDL and sLOX-1 receptor concentrations. Microvascular Research. 85, 112-117 (2013).
  15. Holowatz, L. A., Thompson, C. S., Minson, C. T., Kenney, W. L. Mechanisms of acetylcholine-mediated vasodilatation in young and aged human skin. Journal of Physiology. 563, 965-973 (2005).
  16. Sokolnicki, L. A., Roberts, S. K., Wilkins, B. W., Basu, A., Charkoudian, N. Contribution of nitric oxide to cutaneous microvascular dilation in individuals with type 2 diabetes mellitus. American Journal of Physiology - Endocrinology and Metabolism. 292 (1), E314-E318 (2007).
  17. DuPont, J. J., Ramick, M. G., Farquhar, W. B., Townsend, R. R., Edwards, D. G. NADPH oxidase-derived reactive oxygen species contribute to impaired cutaneous microvascular function in chronic kidney disease. American Journal of Physiology - Renal Physiology. 306 (12), F1499-F1506 (2014).
  18. Sprung, V. S., et al. Nitric oxide-mediated cutaneous microvascular function is impaired in polycystic ovary syndrome but can be improved by exercise training. Journal of Physiology. 591 (6), 1475-1487 (2013).
  19. Greaney, J. L., Saunders, E. F. H., Santhanam, L., Alexander, L. M. Oxidative stress contributes to microvascular endothelial dysfunction in men and women with major depressive disorder. Circulatory Research. 124 (4), 564-574 (2019).
  20. Stanhewicz, A. E., Jandu, S., Santhanam, L., Alexander, L. M. Increased angiotensin II sensitivity contributes to microvascular dysfunction in women who have had preeclampsia. Hypertension. 70 (2), 382-389 (2017).
  21. Greaney, J. L., et al. Impaired hydrogen sulfide-mediated vasodilation contributes to microvascular endothelial dysfunction in hypertensive adults. Hypertension. 69 (5), 902-909 (2017).
  22. Dillon, G. A., Stanhewicz, A. E., Serviente, C., Greaney, J. L., Alexander, L. M. Hydrogen sulfide-dependent microvascular vasodilation is improved following chronic sulfhydryl-donating antihypertensive pharmacotherapy in adults with hypertension. Journal of Physiology. 321 (4), H728-H734 (2021).
  23. Wong, B. J., et al. Sensory nerve-mediated and nitric oxide-dependent cutaneous vasodilation in normotensive and prehypertensive non-Hispanic blacks and whites. American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 319 (2), H271-H281 (2020).
  24. Dillon, G. A., Greaney, J. L., Shank, S., Leuenberger, U. A., Alexander, L. M. AHA/ACC-defined stage 1 hypertensive adults do not display cutaneous microvascular endothelial dysfunction. American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 319 (3), H539-H546 (2020).
  25. Gagge, A. P., Stolwijk, J. A., Hardy, J. D. Comfort and thermal sensations and associated physiological responses at various ambient temperatures. Environmental Research. 1 (1), 1-20 (1967).
  26. Greaney, J. L., Stanhewicz, A. E., Kenney, W. L., Alexander, L. M. Lack of limb or sex differences in the cutaneous vascular responses to exogenous norepinephrine. Journal of Applied Physiology. 117 (12), 1417-1423 (2014).
  27. Greaney, J. L., Stanhewicz, A. E., Kenney, W. L., Alexander, L. M. Impaired increases in skin sympathetic nerve activity contribute to age-related decrements in reflex cutaneous vasoconstriction. Journal of Physiology. 593 (9), 2199-2211 (2015).
  28. Alba, B. K., Greaney, J. L., Ferguson, S. B., Alexander, L. M. Endothelial function is impaired in the cutaneous microcirculation of adults with psoriasis through reductions in nitric oxide-dependent vasodilation. American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 314 (2), H343-H349 (2018).
  29. Greaney, J. L., Surachman, A., Saunders, E. F. H., Alexander, L. M., Almeida, D. M. Greater daily psychosocial stress exposure is associated with increased norepinephrine-induced vasoconstriction in young adults. Journal of the American Heart Association. 9 (9), e015697(2020).
  30. Nakata, T., et al. Quantification of catecholamine neurotransmitters released from cutaneous vasoconstrictor nerve endings in men with cervical spinal cord injury. American Journal of Physiology - Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 324 (3), R345-R352 (2023).
  31. Tucker, M. A., et al. Postsynaptic cutaneous vasodilation and sweating: Influence of adiposity and hydration status. European Journal of Applied Physiology. 118 (8), 1703-1713 (2018).
  32. Craighead, D. H., Alexander, L. M. Menthol-induced cutaneous vasodilation is preserved in essential hypertensive men and women. American Journal of Hypertension. 30 (12), 1156-1162 (2017).
  33. Brunt, V. E., Minson, C. T. KCa channels and epoxyeicosatrienoic acids: Major contributors to thermal hyperaemia in human skin. Journal of Physiology. 590 (15), 3523-3534 (2012).
  34. Choi, P. J., Brunt, V. E., Fujii, N., Minson, C. T. New approach to measure cutaneous microvascular function: An improved test of NO-mediated vasodilation by thermal hyperemia. Journal of Applied Physiology. 117 (3), 277-283 (2014).
  35. Johnson, J. M., Kellogg, D. L. Jr Local thermal control of the human cutaneous circulation. Journal of Applied Physiology. 109 (4), 1229-1238 (2010).
  36. Jung, F., et al. Laser Doppler flux measurement for the assessment of cutaneous microcirculation-Critical remarks. Clinical Hemorheology and Microcirculation. 55 (4), 411-416 (2013).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

الأوعية الدموية الجلديةوالخلل الوظيفي البطانيوتوسع الأوعية الدموية بأكسيد النيتريكوقياس تدفق الدم بالليزر دوبلروالتسخين الموضعيوالتشريح الدوائيوالعضلات الملساء الوعائيةووظيفة الأوعية الدموية الدقيقة
غسيل الكلى المجهري داخل الأدمة: نهج للتحقيق في الآليات الجديدة لضعف الأوعية الدموية الدقيقة لدى البشر
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.