يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

فحص حساسية الدواء الكروي في خطوط الخلايا الجذعية للورم الدبقي

1.2K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/65655

⸱

فبراير 2, 2024

 ,  ,  ,  , 
1Division of Oncology, Children’s Hospital of Philadelphia, 2Department of Pediatrics, Perelman School of Medicine at the University of Pennsylvania, 3School of Medicine, University of Pennsylvania

في هذه المقالة

ملخص

تعد شاشات حساسية الدواء في المختبر أدوات مهمة لاكتشاف تركيبات الأدوية المضادة للسرطان. تعمل الخلايا المزروعة في الكرات على تنشيط مسارات إشارات مختلفة وتعتبر أكثر تمثيلا لنماذج في الجسم الحي من خطوط الخلايا أحادية الطبقة. يصف هذا البروتوكول طريقة لفحص المختبر للخطوط الكروية.

الملخص

تعد شاشات حساسية الأدوية في المختبر أدوات مهمة في اكتشاف العلاجات المركبة للأدوية المضادة للسرطان. عادة ، يتم إجراء شاشات الأدوية المختبرية هذه على الخلايا المزروعة في طبقة أحادية. ومع ذلك ، تعتبر هذه النماذج ثنائية الأبعاد (2D) أقل دقة مقارنة بنماذج الخلايا الكروية ثلاثية الأبعاد (3D). هذا ينطبق بشكل خاص على خطوط الخلايا الجذعية للورم الدبقي. تعمل الخلايا المزروعة في الكرات على تنشيط مسارات إشارات مختلفة وتعتبر أكثر تمثيلا لنماذج في الجسم الحي من خطوط الخلايا أحادية الطبقة. يصف هذا البروتوكول طريقة لفحص المختبر للخطوط الكروية. تستخدم خطوط الخلايا الجذعية للفأر والورم الدبقي البشري كمثال. يصف هذا البروتوكول حساسية الدواء الكروي ثلاثي الأبعاد ومقايسة التآزر التي يمكن استخدامها لتحديد ما إذا كان دواء أو تركيبة دواء تؤدي إلى موت الخلايا وما إذا كان هناك دواءان يتآزران. يتم تعديل خطوط الخلايا الجذعية للورم الدبقي للتعبير عن RFP. يتم طلاء الخلايا في 96 لوحة مستديرة منخفضة التعلق ، ويسمح للكرات بالتشكل بين عشية وضحاها. تتم إضافة الأدوية ، ويتم مراقبة النمو عن طريق قياس إشارة RFP بمرور الوقت باستخدام نظام التصوير الحي Incucyte ، وهو مجهر فلوري مدمج في حاضنة زراعة الأنسجة. يتم بعد ذلك حساب نصف الحد الأقصى للتركيز المثبط (IC50) ، والجرعة المميتة المتوسطة (LD50) ، ودرجة التآزر لتقييم الحساسيات للأدوية وحدها أو مجتمعة. توفر الطبيعة ثلاثية الأبعاد لهذا الاختبار انعكاسا أكثر دقة لنمو الورم وسلوكه وحساسيته للأدوية في الجسم الحي ، وبالتالي تشكل الأساس لمزيد من الفحص قبل السريري.

المقدمة

الورم الأرومي الدبقي هو ورم مدمر عالي الجودة في الدماغ مع بقاء إجمالي لمدة خمس سنوات بنسبة5٪ 1. تمثل الأورام الدبقية عالية الدرجة (HGG) مثل الورم الأرومي الدبقي السبب الرئيسي للوفيات المرتبطة بالسرطان لدى الأطفال2 وهي واحدة من أكثر الأورام تمردا للعلاج عند البالغين أيضا3. على الرغم من التقدم الكبير في فهمنا للمحركات الجزيئية ل HGG ، إلا أن خيارات العلاج لا تزال محدودة3 ، مع التأكيد على الحاجة إلى طرق فحص الأدوية التي تتنبأ بدقة أكبر بالحساسيات العلاجية في العيادة.

تم استخدام مزارع الخلايا ثلاثية الأبعاد بشكل أساسي لنمذجة سلوك الخلية ذي الصلة من الناحيةالفسيولوجية 4. علاوة على ذلك ، يمكن تلخيص البنية ثلاثية الأبعاد للبيئة المكروية للورم في المختبر من خلال إنشاء فحوصات نمو ثلاثية الأبعاد5. ينشط النمو الكروي أيضا مسارات إشارات مختلفة ، وبالتالي يعتبر أكثر تمثيلا للنماذج في الجسم الحي 6،7 مقارنة بالثقافة ثنائية الأبعاد. تنمو الخلايا الجذعية HGG للأطفال وخطوط الخلايا الجذعية للورم الدبقي NF1 للفأر بشكل طبيعي كمجالات عصبية ، وتستخدم خطوط خلايا الورم الدبقي NF1 للفأر في شاشة دواء متوسطةالإنتاجية 8. تم اشتقاق خطوط الأطفال المستخدمة هنا من HGG للأطفال في نصف الكرة الأرضية والخط الأوسط والمخيخ وتم الحصول عليها من شبكة أورام الدماغ للأطفال (ملامح الطفرات والتعبير الجيني) وتميزت بها بالكامل9. تم تعديل هذه الخطوط للتعبير عن بروتين فلورسنت أحمر نووي (RFP) ، والذي يسمح بمراقبة الانتشار والبقاء على قيد الحياة باستخدام نظام التصوير الحي Incucyte. تمثل شدة إشارة RFP عدد الخلايا الموجودة. يمكن أيضا استخدام الفلوروفورات الأخرى ، مثل البروتين الفلوري الأخضر (GFP).

يعد العلاج الكيميائي المركب لسرطان الدم الليمفاوي الحاد في مرحلة الطفولة والأورام اللمفاوية والأورام الخبيثة الظهارية والعديد من أنواع السرطان الأخرى طريقة فعالة للقضاء على الأورام ومنع مقاومة الأدوية للعوامل الفردية10،11. ومع ذلك ، هناك معلومات محدودة حول العوامل التي يجب دمجها لتحقيق الحساسيات العلاجية في HGG ، مما يشجع على استخدام نماذج كروية أكثر دقة في اختبار المخدرات في المختبر .

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت الموافقة على جميع إجراءات البروتوكول من قبل مجلس المراجعة المؤسسية لمستشفى الأطفال في فيلادلفيا (IRB).

1. 3D طلاء الخلايا الكروية

  1. تحضير وسائط الخلايا الجذعية للورم الدبقي: لعمل الوسائط الأساسية ، أضف 50 مل من مكمل التكاثر و 5 مل من محلول البنسلين والستربتومايسين 100x (10,000 وحدة / مل) إلى الوسط القاعدي (500 مل). لعمل وسائط الخلايا الجذعية للورم الدبقي ، أضف عامل نمو البشرة (EGF) وعامل نمو الخلايا الليفية الأساسي (bFGF) إلى التركيز النهائي البالغ 20 نانوغرام / مل و 10 نانوغرام / مل ، على التوالي ، وفقا لوصف الشركة المصنعة.
    ملاحظة: يمكن استخدام وسائط الخلايا الجذعية للورم الدبقي لمدة أسبوع واحد عند تخزينها عند 4 درجات مئوية.
  2. فصل الخلايا التي تعبر عن RFP:
    ملاحظة: في هذا المثال، يتم إستخدام خط الخلايا الجذعية NF1 HGG 5746 للماوس.
    1. انقل كرات الورم الدبقي إلى أنبوب مخروطي سعة 15 مل ، وقم بتدوير كرات الورم الدبقي في جهاز طرد مركزي (150 × جم لمدة 5 دقائق). قم بإزالة المادة الطافية وأضف 300 ميكرولتر من الأكوتاز لفصل الكرات (احتضانها لمدة 5 دقائق عند 37 درجة مئوية).
    2. أضف 1 مل من وسائط الخلايا الجذعية للورم الدبقي وقم بتعطيل الكرات عن طريق سحب العينة اللطيف. الطرد المركزي للخلايا المنفصلة لمدة 5 دقائق عند 150 × جم ، وشفط المادة الطافية ، وإذابة الحبيبات في 1 مل من وسائط الخلايا الجذعية للورم الدبقي.
  3. قم بقياس تركيز الخلايا باستخدام عداد الخلايا أو مقياس كثافة الدم. عند استخدام عداد الخلايا الفلورية ، أضف 18 ميكرولتر من تعليق الخلية إلى 2 ميكرولتر من صبغة Acridine Orange / Propidium Iodide. قم بتحميل 12 ميكرولتر من هذا المعلق في مقياس كثافة الدم لحساب عدد الخلايا الحية / الميتة الموجودة في المعلق.
  4. تمييع الخلايا إلى تركيز نهائي يبلغ 2,000 خلية لكل 100 ميكرولتر من وسط الخلايا الجذعية للورم الدبقي.
    ملاحظة: قد تعتمد التعديلات على تركيز الخلية على خط الخلية ويمكن تعديلها وفقا لذلك.
  5. باستخدام ماصة متعددة القنوات، قم بتوزيع 100 ميكرولتر من تعليق الخلية (2,000 خلية لكل 100 ميكرولتر) في كل بئر من لوحة التثبيت المنخفضة القاع المستديرة المكونة من 96 بئرا عن طريق سحب العينات العكسي.
    ملاحظة: استخدم لوحات مرفقة منخفضة القاع المستديرة. ستحفز هذه الصفائح تكوين كرة واحدة من الورم الدبقي في كل بئر. يتجنب سحب العينات العكسي تكوين الفقاعات ، والتي ستتداخل مع التقاط الصور لنظام تحليل الخلايا الحية.
  6. جهاز الطرد المركزي للألواح عند 150 × جم لمدة 5 دقائق.
    ملاحظة: الطرد المركزي هو خطوة حاسمة لبدء تكوين الغلاف العصبي ثلاثي الأبعاد.
  7. احتضن بين عشية وضحاها للسماح بتكوين كرة واحدة في كل بئر.

2. إضافة أدوية لمقايسة التآزر (الشكل 1)

  1. تأكد من أن كل بئر من الصفيحة المكونة من 96 بئرا يتلقى تركيزا محددا لكل من الدواءين 1 و 2. قم بإنشاء شبكة حيث يتم دمج كل تركيز من تركيز الدواء 1 مع كل تركيز من تركيز الدواء 2 في نسختين.
  2. قم بعمل تخفيف تسلسلي للعقارين اللذين سيتم تحديد التآزر لهما (5 تخفيفات من الدواء 1 و 7 تخفيفات من الدواء 2) باستخدام وسائط الخلايا الجذعية للورم الدبقي (الشكل 1 أ).
    ملاحظة: في هذه الدراسة ، يتم استخدام سلسلة تخفيف تسلسلية بنسبة 50٪. ومع ذلك ، يمكن استخدام أي سلسلة تخفيف.
    1. يجب أن تكون سلسلة التخفيف أكثر تركيزا بمقدار 7 مرات من التركيز النهائي المطلوب في كل بئر. على سبيل المثال ، إذا كان أعلى تركيز نهائي للعقار 1 هو 1 ميكرومتر ، فقم بعمل التركيز الأول لسلسلة التخفيف للعقار 1 أو 7 ميكرومتر (1 مل ، الأنبوب B أو I في الشكل 1 أ).
    2. أضف 500 ميكرولتر من وسائط الخلايا الجذعية للورم الدبقي إلى كل أنبوب إضافي من سلسلة التخفيف (الأنبيبات C-H و J-M ، كما هو موضح في الشكل 1).
    3. لإنشاء سلسلة التخفيف ، قم بشفط 500 ميكرولتر من خليط الدواء من الأنبوب B أو الأنبوب I وأضفه إلى الأنبوب التالي في سلسلة التخفيف Tube C أو Tube J ، على التوالي (يحتوي على 500 ميكرولتر من وسائط الخلايا الجذعية للورم الدبقي). تخلط جيدا وتكرر مع الأنبوب التالي في سلسلة التخفيف. قم بإجراء عنصر تحكم DMSO (الأنبوب A) وتأكد من أن تركيز DMSO هو نفسه عبر الظروف.
      ملاحظة: يمكن إجراء تعديلات على تركيزات الدواء وسلسلة التخفيف. تأكد من إدراج تركيزات الدواء الصحيحة في الملف التكميلي 1 إذا تم تغيير سلسلة التخفيف.
  3. إلى كل بئر من ألواح الآبار البالغ عددها 96 ، أضف 20 ميكرولتر من الدواء 1 و 20 ميكرولتر من المخدرات 2 عن طريق سحب العينات العكسي ، كما هو موضح في الشكل 1 ب ، للحصول على حجم نهائي قدره 140 ميكرولتر لكل بئر ؛ يتم تقييم تركيبات الأدوية في نسختين. إذا كنت تستخدم التحليل النهائي المقدم ل IC50 و LD50 ، فاستخدم تخطيط الدواء كما هو موضح في الشكل 1 ب.
    1. في هذا الفحص ، يتم أيضا قياس تأثير كل دواء بمفرده (دون وجود الدواء الآخر). تأكد من إضافة 20 ميكرولتر من وسائط التحكم DMSO (الأنبوب A في الشكل 1 ب) إلى آبار الأدوية المفردة لرفع الحجم النهائي لكل بئر إلى 140 ميكرولتر.
    2. تأكد من أن الآبار لا تحتوي على فقاعات ، لأن ذلك سيؤثر على التصوير.
      ملاحظة: يمكن إجراء تعديلات على المجلد النهائي. ومع ذلك ، تأكد من ضبط التركيزات في النقطة 2.2.
  4. ضع الألواح في جهاز التصوير المباشر وراقب نمو كل كرة في كل بئر باستخدام الوحدة الكروية ، وإعداد الكرة المفردة ، وتصوير كل من المجال الساطع و RFP بتكبير 4x.
  5. مراقبة لوحات لمدة 72 ساعة, تصوير كل بئر من اللوحة في فاصل زمني منتظم, عادة 2 ساعة.
    ملاحظة: قم بتحميل خريطة اللوحة الصحيحة ؛ سيضمن ذلك التحليل النهائي المناسب (الشكل 1 ج).

3. حساب IC50 و LD50 ودرجة التآزر (الشكل 2 والشكل 3)

  1. قم بتحليل شدة طلب تقديم العروض لكل بئر وكل نقطة زمنية باستخدام برنامج التصوير المباشر. يتم سرد معلمات التحليل المستخدمة في الملفات التكميلية (الملف التكميلي 2).
    ملاحظة: يمكن استخدام معلمات التحليل المختلفة حسب الرغبة.
  2. قم بتصدير بيانات طلب تقديم العروض كإجمالي كثافة طلب تقديم العروض المتكاملة باللون الأحمر لكل بئر ، مع التأكد من تصدير البيانات الأولية غير المجمعة (الشكل 2 أ).
    ملاحظة: إذا كنت تستخدم النموذج المقدم (الملف التكميلي 1) لحساب IC50 و LD50 ، فمن الضروري الالتزام بالنقطة 3.2
  3. حدد المتوسط والانحراف المعياري لكل مجموعة دوائية من (1) تغيير الطية مقارنة ب DMSO فقط (لهذا الحساب ، ليست هناك حاجة إلى قيم 0 ساعة) و (2) Log2 لتغيير الطي مقارنة ب 0 ساعة عن طريق لصق البيانات الأولية في ورقة Excel المقدمة (الشكل 2 ب وانظر المثال في الملف التكميلي 1).
  4. اضبط الحد الأقصى لتركيز الأدوية 1 و 2 في جدول البيانات (الشكل 2 ب).
    ملاحظة: تأكد من ضبط تركيزات الأدوية 1 و 2 ؛ خلاف ذلك ، سيتم حساب قيم LD50 و IC50 غير الصحيحة.
  5. احسب قيم IC50 باستخدام تطبيق برمجي مناسب لتحليل البيانات (هنا ، يتم استخدام GraphPad). لحساب قيمة IC50 ، استخدم متوسط تغيير الطية وتغيير أضعاف الانحراف المعياري مقارنة ب DMSO المحدد فقط في الخطوة 3.4 ، وانسخ جداول IC50 للأدوية 1 و 2 إلى برنامج تحليل البيانات (Log (المثبط) مقابل الاستجابة الطبيعية ، المنحدر المتغير) (الشكل 3 أ).
    1. استخدم فقط البيانات من الآبار التي تمت إضافة مكونات واحدة إليها لحسابات IC50. استخدم قيم تركيز الدواء Log في برنامج تحليل البيانات، والتي يتم حسابها تلقائيا في جدول البيانات المقدم.
  6. احسب درجة التآزر:
    1. استخدم متوسط تغيير الطية مقارنة ب DMSO فقط لكل مجموعة لحساب درجة التآزر باستخدام حزمة برامج أو موقع ويب. على سبيل المثال ، https://synergyfinder.fimm.fi/ 12 (المعلمات: ملاءمة منحنى LL4 ، طريقة ZIP لحساب درجة التآزر). يقوم الملف التكميلي 1 تلقائيا بحساب القيم اللازمة لإنشاء جدول إدخال التآزر الذي يمكن تحميله إلى SynergyFinder (الشكل 3 ب). يتم توفير مثال على جدول إدخال التآزر في الملف التكميلي 3.
      ملاحظة: تشير النتيجة التي تزيد عن 10 إلى التآزر ، وتشير الدرجة الأقل من -10 إلى العداء والقيمة بين -10 تظهر تأثيرات مضافة.
  7. احسب درجة LD50:
    1. لكل تركيز من الدواء 1 ، احسب LD50 للعقار 2. يقوم الملف التكميلي تلقائيا بحساب قيمة Log2 والانحراف المعياري لكل تركيز (الشكل 3C).
    2. أدخل المتوسط والانحراف المعياري لتغيير أضعاف Log2 مقارنة ب 0 ساعة ، بالإضافة إلى عدد التكرارات في برنامج تحليل البيانات (في هذه الدراسة ، 2 ،) واحسب قيمة LD50 والانحراف المعياري LD50 عن طريق تحديد التركيز عند -1 (يمثل Log2 = -1 قيمة log2 التي يتم فقد 50٪ من الإشارة مقارنة ب 0 ساعة). في هذه العمليات الحسابية ، استخدم نموذج معلمات Log (inhibitor) مقابل الاستجابة ، المنحدر المتغير 4 المعلمات.
      ملاحظة: لا يحسب برنامج تحليل البيانات تلقائيا تركيز الدواء المقابل لقيمة log2 = -1 ؛ ومع ذلك ، يمكن إضافة هذه القيمة إلى الحسابات المبلغ عنها لبرنامج تحليل البيانات كمعادلة محددة من قبل المستخدم (الشكل 3C). تأكد من استخدام قيم تركيز السجل في برنامج تحليل البيانات، والتي يتم حسابها تلقائيا في جدول البيانات المقدم. يعرض الملف التكميلي 4 لوحتي IC50 و LD50 في برنامج GraphPad.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

على سبيل المثال ، تم تقييم التآزر بين Trametinib (مثبط MEK) و GDC-0941 (مثبط PI3K) ، والذي يثبط مسارين مستجيبين من RAS في خط الخلايا الجذعية للورم الدبقي للفأر 5746 (التعبير عن RFP) (الشكل 4). يوضح الشكل 4 أ نفس الكرة في 0 ساعة و 72 ساعة معالجة بمزيج من Trametinib و GDC-0941. تم تصدير هذه الصور مباشرة من برنامج التصوير المباشر. تم حساب IC50 و LD50 كما هو موضح في GraphPad (الشكل 4B ، D) ، تم حساب التآزر باستخدام Syne...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

يصف هذا البروتوكول فحوصات فحص الأدوية ثلاثية الأبعاد التي تم استخدامها بشكل فعال لتقييم نقاط الضعف الدوائية في النماذج الكروية للورم الدبقي8. تم تصميم نظام الفحص الكروي ثلاثي الأبعاد هذا خصيصا للسماح بإجراء تحقيق أكثر دقة قبل السريرية للعلاجات الكيميائية التوافقية لخطوط خلايا الورم الدبقي المزروعة في المجالات. بالنسبة إلى HGG ، توفر هذه الطريقة إطارا لتحديد نقاط الضعف الدوائية المحتملة لهذا المرض المدمر. ومع ذلك ، فإن التطبيقات المحتملة لهذا النظام لا تقتصر على ال...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
أنابيب الطرد المركزي سعة 15 مل CELLTREAT22941115 مل أنابيب الطرد المركزي من مادة البولي بروبيلين ، معقمة
96 - لوحةS-bioMS9096UZ96 بئر مستديرة القاع لوحة تعلق منخفضة للغاية
AccutaseSTEMCELL Technologies7922محلول انفصال الخلية
Acridine Orange / Propidium Iodide StainLogos BiosystemsF23001حي / ميت وصمة عار لعد الخلايا
bFGFSTEMCELL Technologies78003.2المؤتلف البشري bFGF
خليةعداد الشعارات BiosystemsL20001LUNA-FL خلايا مضادة للخلية المضاقة
الطرد المركزيEppendorf5810Rخلايا وألواح الطرد المركزي
DMSOPierce20688المذيب للمركبات
EGFSTEMCELL تقنيات78006.2المؤتلفة البشرية
Costar07-200-534أنابيب الطرد المركزي
الدقيقة ExcelMicrosoftMicrosoft excel
GDC-0941SelleckchemS1065Drug 1
GraphPadGraphPad GraphPad Prism 9IC50 و LD50
BiosystemsLGBD10008Luna PhotonSlide
IncucyteSartoriusS3مجهر مضان مدمج في حاضنة زراعة الأنسجة التي تصور كل بئر على فترات زمنية محددة.
برنامج IncucyteSartoriusIncucyte 2022Bتحليل بيانات الانتشار
MediaSTEMCELL Technologies5702مجموعة انتشار NeuroCult (الفأر والجرذان) التي تحتوي على الوسط القاعدي ومكملات
النمو Penicillin-Streptomycin جيبكو15140122المضادات الحيوية لإضافتها إلى وسائل الإعلام
TrametinibSelleckchemS2673Drug 2
المزدوجة أجهزة أنابيب EGF Eppendorf حساب شعارات مقياس الدم

المراجع

  1. Ostrom, Q. T., et al. CBTRUS statistical report: Primary brain and other central nervous system tumors diagnosed in the United States in 2013-2017. Neuro-Oncology. 22 (22 Suppl 2), v1-v95 (2020).
  2. Jones, C., et al. Paediatric and adult malignant glioma: close relatives or distant cousins. Nature Reviews. Clinical Oncology. 9 (7), 400-413 (2012).
  3. Wu, W., et al. Glioblastoma multiforme (GBM): An overview of current therapies and mechanisms of resistance. Pharmacological Research. 171, 105780(2021).
  4. Kenny, P. A., et al. The morphologies of breast cancer cell lines in three-dimensional assays correlate with their profiles of gene expression. Molecular Oncology. 1 (1), 84-96 (2007).
  5. Lv, D., et al. Three-dimensional cell culture: A powerful tool in tumor research and drug discovery. Oncology Letters. 14 (6), 6999-7010 (2017).
  6. Ghosh, S., et al. Three-dimensional culture of melanoma cells profoundly affects gene expression profile: a high density oligonucleotide array study. Journal of Cellular Physiology. 204 (2), 522-531 (2005).
  7. Kim, H., et al. Changes in global gene expression associated with 3D structure of tumors: an ex vivo matrix-free mesothelioma spheroid model. PLoS One. 7 (6), e39556(2012).
  8. Dougherty, J., et al. Identification of therapeutic sensitivities in a spheroid drug combination screen of Neurofibromatosis Type I associated high grade gliomas. Plos One. 18 (2), e0277305(2023).
  9. Ijaz, H., et al. Pediatric high-grade glioma resources from the Children's Brain Tumor Tissue Consortium. Neuro Oncology. 22 (1), 163-165 (2020).
  10. Chabner, B. A., Roberts, T. G. Jr Timeline: Chemotherapy and the war on cancer. Nature Reviews. Cancer. 5 (1), 65-72 (2005).
  11. Al-Lazikani, B., et al. Combinatorial drug therapy for cancer in the post-genomic era. Nature Biotechnology. 30 (7), 679-692 (2012).
  12. Ianevski, A., et al. SynergyFinder 3.0: an interactive analysis and consensus interpretation of multi-drug synergies across multiple samples. Nucleic Acids Research. 50 (W1), W739-W743 (2022).
  13. Ledur, P. F., et al. Culture conditions defining glioblastoma cells behavior: What is the impact for novel discoveries. Oncotarget. 8 (40), 69185-69197 (2017).
  14. Sazonova, E. V., et al. Drug toxicity assessment: cell proliferation versus cell death. Cell Death Discovery. 8 (1), 417(2022).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

فحص الأدوية على الكريات الخلويةالخلايا الجذعية الورمية الدبقيةمقايسة الحساسية الدوائيةنماذج الخلايا ثلاثية الأبعادالعلاج الدوائي المشتركمقايسة موت الخلايادرجة التآزرتعبير البروتين الفلوري الأحمر (RFP)التصوير الحيحساب التركيز المثبط النصفي (IC50)

تم نشر هذه المقالة

الفيديو قريباً

تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.