يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

آثار Desmodium caudatum على هرمونات الجهاز الهضمي والنباتات المعوية في الفئران المصابة بالتهاب المعدة

2.1K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/65744

⸱

مارس 1, 2024

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Key Laboratory for Quality Control and Evaluation of Traditional Chinese Medicine of Mianyang City, Mianyang Normal University, 2The Traditional Chinese Medicine Hospital of Beichuan Qiang Autonomous County

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

يصف البروتوكول الحالي طريقة تحليل النباتات المعوية باستخدام تسلسل الجينات 16S rRNA القائم على Illumina ويوفر إطارا لتقييم فعالية decoctions العشبية.

الملخص

من أجل استكشاف مبدئي لآثار Desmodium caudatum على التهاب المعدة والنباتات المعوية في الفئران ، تم إنشاء نموذج فئران التهاب المعدة المزمن باستخدام طريقة ساليسيلات الصوديوم الكلاسيكية. تم تقسيم ثمانية عشر فأرا SPF إلى ثلاث مجموعات: المجموعة الضابطة (المجموعة C) ، والمجموعة النموذجية (المجموعة M) ، ومجموعة العلاج (المجموعة T). تم أخذ الأقسام المرضية لجدار المعدة من الفئران في كل مجموعة. علاوة على ذلك ، تم تحديد تركيزات الغاسترين والمالوندالديهيد في مصل الفئران في كل مجموعة بواسطة ELISA. بالإضافة إلى ذلك ، تم استكشاف آثار D. caudatum على النباتات المعوية للفئران المصابة بالتهاب المعدة من خلال مقارنة مفصلة للمجتمعات البكتيرية المعوية في المجموعات الثلاث ، باستخدام تسلسل جين 16S rRNA القائم على Illumina. أشارت النتائج إلى أن ديكوتيون D. caudatum يمكن أن يقلل من محتوى malondialdehyde ويزيد من محتوى الغاسترين. علاوة على ذلك ، تم العثور على D. caudatum decoction لتعزيز تنوع ووفرة النباتات المعوية ، مما يمارس تأثيرا إيجابيا على علاج التهاب المعدة من خلال تنظيم واستعادة النباتات المعوية.

المقدمة

يتميز التهاب المعدة المزمن (CG) ، أحد أكثر الأمراض السريرية شيوعا ، بتغيرات التهابية مزمنة ومستمرة في ظهارة الغشاء المخاطي في المعدة ، والتي تتعرض للهجوم بشكل متكرر ومتكرر من قبل عوامل مسببة للأمراضالمختلفة 1. يحتل معدل الإصابة ب CG المرتبة الأولى بين جميع أنواع أمراض المعدة ، وهو ما يمثل 40٪ إلى 60٪ من معدل خدمة العيادات الخارجية في قسم أمراض الجهاز الهضمي2. علاوة على ذلك ، يزداد معدل الإصابة بشكل عام مع تقدم العمر ، خاصة في الأفراد الذين هم في منتصف العمر وكبارالسن 3. مما لا شك فيه أن CG يقلل بشكل كبير من نوعية حياة الناس ، مما يؤكد الحاجة الماسة لاكتشاف عوامل علاجية جديدة.

أفادت العديد من الدراسات أن حدوث وتطور CG مرتبطان بإفراز هرمونات الجهاز الهضمي ، مثل الغاسترين (GAS)4,5. يحفز GAS ، وهو هرمون ببتيد معدي معوي شائع في الجهاز الهضمي ، الخلايا على إفراز حمض المعدة عن طريق تعزيز إطلاق الهيستامين من الحمضات. بالإضافة إلى ذلك ، فإنه يحسن التغذية وإمدادات الدم من الغشاء المخاطي في المعدة ، وتعزيز انتشار الغشاء المخاطي في المعدة والخلايا الجدارية6. لذلك ، يمكن استخدام الغاسترين كمؤشر لتقييم مستوى تطوير CG. علاوة على ذلك ، يمكن لمنتجات بيروكسيد الدهون التي تسببها الأكاسيد التفاعلية تنشيط الخلايا الالتهابية ، مما يؤدي إلى CG. Malondialdehyde (MDA) ، علامة بيروكسيد الدهون ، هو مؤشر شائع الاستخدام لقياس درجة الإجهاد التأكسدي. إنه يعكس مستوى الجذور الحرة في الغشاء المخاطي في المعدة إلى حد ما. يمكن أن يشير مستوى MDA إلى هجوم الأحماض الدهنية غير المشبعة في الغشاء المخاطي في المعدة المحلية التي تسببها الجذور الحرة 7,8.

تتكون البيئة الدقيقة المعوية من ملايين الكائنات الحية الدقيقة الموجودة في الأمعاء المضيفة ، وتلعب دورا حيويا في الحفاظ على صحة المضيف وتنظيم مناعة المضيف. تعمل النباتات المعوية الصحية ، التي تتميز بالثراء العالي والتنوع ووظيفة الجراثيم المستقرة ، كحاجز وقائي ضد غزو الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض من خلال المشاركة في عملية التمثيل الغذائي. الاضطرابات في النباتات المعوية تجعل الأفراد أكثر عرضة لأمراض الجهاز الهضمي الحادة والمزمنة 9,10. في السنوات الأخيرة ، تقدم علاج الجراثيم لأمراض الجهاز الهضمي بسرعة وأظهر فعالية كبيرة11. باختصار ، فإن النظر في النباتات المعوية أمر بالغ الأهمية في فهم ومعالجة أمراض الجهاز الهضمي.

كعنصر لا غنى عنه في كنز الطب الصيني التقليدي ، تحمل المواد الطبية الشعبية أهمية كبيرة للممارسة السريرية وتحديث الطب الوطني. جذور وأجزاء كاملة من Desmodium caudatum (Thunb.) DC. على نطاق واسع لتخفيف عدم الراحة في المعدة في منطقة Beichuan Qiang في مدينة Mianyang لفترة طويلة. تشير بعض المقالات إلى الأساس العلمي لعلاج أمراض الجهاز الهضمي باستخدام D. caudatum ، مستشهدة بآثاره مثل الإرقاء ومضادات الأكسدة وحماية الجهاز الهضمي12،13،14. ومع ذلك ، بسبب عدم وجود بحث متعمق ، لم يتم إنشاء آلية الديناميكا الدوائية السريرية. تهدف هذه المقالة إلى دراسة آثار D. caudatum في علاج التهاب المعدة على أساس هرمونات الجهاز الهضمي والنباتات المعوية ، وتوفير أساس لتطبيقه السريري العقلاني.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت الموافقة على إجراءات رعاية واستخدام من قبل لجنة الأخلاقيات بجامعة ميانيانغ العادية ، وتم اتباع جميع اللوائح المؤسسية والحكومية ذات الصلة المتعلقة بالاستخدام الأخلاقي للحيوانات بدقة. بالنسبة للدراسة الحالية ، تم استخدام فئران SPF (أنواع كونمينغ ، ذكورا وإناثا ، تزن 180-220 جم). تم الحصول على من مصدر تجاري (انظر جدول المواد). تم إيواء جميع في بيئة خالية من مسببات الأمراض ووفرت الوصول إلى الغذاء.

1. إعداد الكواشف

  1. قم بإعداد محلول ساليسيلات الصوديوم بنسبة 5٪ بوزن 2.5 جم من مسحوق ساليسيلات الصوديوم (انظر جدول المواد) بميزان إلكتروني. يذوب المسحوق في كمية صغيرة من الماء المقطر ويخفف إلى حجم إجمالي قدره 50 مل.
  2. تحضير ديكوتيون من D. caudatum (12.8 جم / كجم). قم بوزن 128 جم من D. caudatum (انظر جدول المواد) ، ضعه في دورق مستدير القاع يحتوي على 1000 مل من الماء المقطر في المختبر ، وركزه إلى حجم نهائي قدره 100 مل.

2. التجميع والإدارة

  1. تقسيم الفئران إلى مجموعات مختلفة وإدارة الحلول المطلوبة داخل المعدة.
    ملاحظة: بالنسبة للدراسة الحالية ، تم تقسيم 18 فأرا (9 ذكور و 9 إناث) إلى ثلاث مجموعات: المجموعة الضابطة (المجموعة C) ، والمجموعة النموذجية (المجموعة M) ، ومجموعة العلاج (المجموعة T) ، مع 6 فئران في كل مجموعة. تلقت المجموعة الضابطة محلول ملحي ، وتلقت المجموعة النموذجية محلول ساليسيلات الصوديوم بنسبة 5٪ لمدة 5 أسابيع بجرعة 10 مل / كجم / يوم15. تمت معالجة مجموعة العلاج بمحلول ساليسيلات الصوديوم 5٪ لمدة 5 أسابيع بجرعة 10 مل / كجم / يوم ، تليها إعطاء ديكوتيون D. caudatum بجرعة 1 مل / 100 جم لمدة 10 أيام15,16.
  2. جمع البراز من الفئران في أنابيب الطرد المركزي الدقيقة الجافة والمعقمة باستخدام طريقة حملالذيل 17 في اليوم الأخير من التجربة وتجميدها في ثلاجة النيتروجين السائل ذات درجة حرارة منخفضة للغاية.
  3. بعد نهاية أخذ العينات ، التضحية بالفئران عن طريق خلع عنق الرحم (باتباع البروتوكولات المعتمدة مؤسسيا). افتح تجويف البطن بالمقص لفضح الشريان الأورطي البطني.
    1. أدخل الإبرة (23-25 جم) بالتوازي تقريبا في الشريان الأورطي البطني ، واجمع المصل ، واحتفظ به في مجمد بدرجة حرارة منخفضة للغاية. أخرج المعدة من تجويف البطن16 ونقع في محلول فورمالين 10٪ للحفظ.
      ملاحظة: في المجموعة M ، يعتبر نموذج التهاب المعدة المزمن ناجحا إذا تم توسيع الغشاء المخاطي في المعدة واحتقانه بمورفولوجيا غدية منتظمة15 ، مع ملاحظة كمية صغيرة من تسلل الخلايا الالتهابية في الصفيحة المخصوطة.

3. القسم المرضي لجدار المعدة

  1. خذ عينات جدار المعدة من الفئران في كل مجموعة للأقسام المرضية. في وقت لاحق ، أداء تلطيخ الهيماتوكسيلين يوزين الروتينية لمراقبة وتحليل التغيرات المرضية18.

4. تحديد هرمونات الجهاز الهضمي في الدم

  1. في عينة المصل ، اكتشف محتويات الغاسترين (GAS) ومالوندالديهيد (MDA)19 باستخدام ELISA باتباع تعليمات الشركة المصنعة (انظر جدول المواد). استخدم قارئ الصفائح الدقيقة للتحليل.

5. استخراج الحمض النووي الكلي للبراز وتضخيم وتنقية PCR

  1. إجراء استخراج الحمض النووي الميكروبي باستخدام مجموعة عزل الحمض النووي المتاحة تجاريا (انظر جدول المواد) وتحديد التركيز والنقاء باستخدام مقياس الطيف الضوئي للأشعة المرئية وفوق البنفسجية16. في وقت لاحق ، تقييم سلامة الحمض النووي من خلال 1 ٪ هلام الاغاروز الكهربائي18.
  2. تضخيم جين البكتيريا 16S rRNA باستخدام الاشعال 338F (5 ′-ACT CCT ACG GGA GGC AGC AG-3′) و 806R (5′-GAC TAC HVG GGG GTW TCT AT-3 ′) باستخدام نظام PCR الحراري17. يتم الحصول على الاشعال من مصادر تجارية (انظر جدول المواد).
    ملاحظة: اتبع برنامج تفاعل البوليميراز المتسلسل: تمسخ (3 دقائق ، 95 درجة مئوية) ، تليها 27 دورة (30 ثانية ، 95 درجة مئوية ؛ 30 ثانية ، 55 درجة مئوية ؛ 45 ثانية ، 72 درجة مئوية) ، وتمديد نهائي (10 دقائق ، 72 درجة مئوية). إجراء تفاعلات تفاعل البوليميراز المتسلسل مع المكونات التالية: 4 ميكرولتر من 5× عازلة بوليميراز الحمض النووي ، 2 ميكرولتر من 2.5 mM dNTPs ، 0.8 ميكرولتر من كل برايمر (5 ميكرومتر) ، 0.4 ميكرولتر من بوليميراز الحمض النووي ، و 10 نانوغرام من قالب الحمض النووي (انظر جدول المواد).
  3. قم باستخراج وتنقية وقياس منتجات تفاعل البوليميراز المتسلسل بالتتابع باستخدام 2٪ من هلام الأغاروز ، ومجموعة استخراج جل الحمض النووي المتاحة تجاريا ، ومقياس الفلور ،على التوالي 17.

6. التسلسل

ملاحظة: يتم تنفيذ الخطوة 6 والخطوة 7 باتباع الطرقالمنشورة مسبقا 20،21.

  1. استخدم منصة Illumina للتسلسل.
    ملاحظة: يكمل أحد طرفي جزء الحمض النووي قاعدة الموصل المضمن في الشريحة ، ويثبته على الشريحة. الطرف الآخر يكمل بشكل عشوائي قاعدة مفصل مدفون مجاور آخر ، ويشكل "جسرا".
  2. إجراء تضخيم PCR لتوليد مجموعات الحمض النووي. خطي مضخمات الحمض النووي في خيوط واحدة.
  3. أدخل بوليميراز الحمض النووي المعدل جنبا إلى جنب مع ثلاثي فوسفات ديوكسي ريبونوكليوتيد (dNTPs) الذي يتميز بأربع علامات فلورية متميزة. توليف قاعدة واحدة فقط لكل دورة.
  4. استخدم الليزر لمسح سطح لوحة التفاعل وتحديد أنواع النيوكليوتيدات المبلمرة أثناء التفاعل الأولي لكل تسلسل قالب.
  5. قم بشق "مجموعة التألق" و "مجموعة الإنهاء" كيميائيا لإعادة إنشاء الطرف اللزج 3 بوصات. في وقت لاحق ، تقدم إلى بلمرة النوكليوتيدات الثانية.
  6. احصل على تسلسل شظايا الحمض النووي النموذجية من خلال تحليل نتائج إشارة التألق التي تم جمعها في كل جولة.

7. معالجة بيانات التسلسل

  1. في البداية ، قم بقص قراءات بيانات fastq الأولية في أي موقع بدرجة < Q20 وتخلص من القراءات ذات القواعد غير المؤكدة. بالإضافة إلى ذلك ، اسمح باثنين من عدم التطابق في البادئات المتطابقة بدقة. بعد ذلك ، ادمج التسلسلات مع تداخل >10 bp.
  2. وحدات التصنيف التشغيلي العنقودي (OTUs) مع تشابه 97٪ باستخدام UPARSE ، وإزالة التسلسلات الخيمرية باستخدام UCHIME20,21.
  3. استخدم خوارزمية مصنف RDP لتحليل تصنيف كل تسلسل جيني 16S rRNA مقابل قاعدة بيانات Silva (SSU123) 16S rRNA ، باستخدام عتبة ثقة تبلغ 70٪.
  4. إجراء تحليل تنوع ألفا وتحليل تنوع بيتا باستخدام Mothur و Qiime ، على التوالي (انظر جدول المواد).

8. التحليل الإحصائي

  1. تحليل البيانات في هذه الدراسة باستخدام برنامج التحليل الإحصائي (انظر جدول المواد). استخدم تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA) للمقارنات بين مجموعات متعددة واستخدم اختبار الفرق الأقل أهمية (LSD) للمقارنات بين مجموعتين.
  2. ضع في اعتبارك P < 0.05 ذات دلالة إحصائية في جميع المقارنات. يعتبر P < 0.01 مهما للغاية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

يوضح الشكل 1 نتائج القسم المرضي لجدار المعدة. بالمقارنة مع المجموعة C ، أظهرت المجموعة M ضمور جدار المعدة الخفيف والتهاب خفيف. ومع ذلك ، عند مقارنتها بالمجموعة M ، لم تظهر المجموعة T أي التهاب واضح أو حؤول معوي أو ضمور. هذا يشير إلى أن D. caudatum ديكوتيون يمكن أن يحسن بشكل فعال التهاب المعدة.

يتم عرض نتائج فحص هرمون الجهاز الهضمي في الدم في الشكل 2. كان محتوى malondialdehyde (MDA) أعلى بكثير في المجموعة M منه في المجموعة C. ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

D. caudatum ، وهو دواء شعبي شائع الاستخدام من قبل جنسية تشيانغ12 ، أظهر فعالية كبيرة في علاج أمراض الجهاز الهضمي. مع تقدم البحوث الدوائية الحديثة ، يتم تحديد اختلال توازن النباتات الناتج عن اختلال توازن البيئة الدقيقة المعدية المعوية كعامل رئيسي في أمراض الجهاز الهضمي الحادة والمزمنة22,23. تلعب بعض الكائنات الحية الدقيقة في الأمعاء دورا حاسما في الحفاظ على التوازن الديناميكي في الجسم ، وتعكس الهرمونات في المصل الحالة الفسيولوجية و...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

تم تمويل هذا العمل من قبل مشاريع البحث والتطوير الرئيسية لإدارة العلوم والتكنولوجيا في مقاطعة سيتشوان (2020YFS0539).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
تحليل تنوع ألفاMothur 1.30.2
AxyPrep مجموعة استخراج هلام الحمض النووي الريبي منقوص الأكسجين (DNA)  Axygen Biosciences AP-GX-50
تحليل التنوع التجريبيQiime 1.9.1
ثلاجة مبردةForma-86C ULT فريزر
Desmodium caudatumمستشفى الطب الصيني التقليدي في مقاطعة Beichuan Qiang ذاتية الحكم
E.Z.N.A. مجموعة التربةأوميغا بيو تيكD5625-01
Illumina MiSeq PlatformIllumina Miseq PE300 / NovaSeq PE250
MultiskanSpectrum Max i3
OTU clusteringUparse 7.0.1090
OTU statisticsUsearch 7.0
PCR أداةTransGen AP221-02
PCR أداةABI GeneAmp 9700
QuantiFluor-ST مزدوجة تقطعت بهم السبل نظام الحمض النووي (dsDNA)Promega Corp.
تصنيف التسلسل التعليق التوضيحيRDP المصنف 2.11
ساليسيلات الصوديومSichuan Xilong الكيميائية المحدودة54-21-7
SPF الفئرانتشنغدو Dashuo التجريبي المحدودة
SPSS 18.0IBM

المراجع

  1. Marginean, C. M., et al. The importance of accurate early diagnosis and eradication in Helicobacter pylori infection: pictorial summary review in children and adults. Antibiotics (Basel). 12 (1), 60(2022).
  2. Sipponen, P., Maaroos, H. I. Chronic gastritis. Scandinavian Journal of Gastroenterology. 50 (6), 657-667 (2015).
  3. Wang, D. J. Methodological quality and reporting quality evaluation of chinese medicine diagnosis and treatment guidelines for chronic gastritis in China. Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica-World Science and Technology. 24 (7), 2776-2783 (2022).
  4. Burkitt, M. D., Varro, A., Pritchard, D. M. Importance of gastrin in the pathogenesis and treatment of gastric tumors. World Journal of Gastroenterology. 15 (1), 1-16 (2009).
  5. Hayakawa, Y., Chang, W., Jin, G., Wang, T. C. Gastrin and upper GI cancers. Current Opinion in Pharmacology. 31, 31-37 (2016).
  6. Zhang, C. Z., He, M. X., Jin, L. W., Liu, W. D. Effect of aluminum phosphate gel combined with atropine on patients with acute gastritis and its effect on serum gastrin and malondialdehyde levels. International Journal of Digestive Diseases. 40 (2), 137-140 (2020).
  7. Wang, Y. K., et al. Levels of malondialdehyde in the gastric juice: its association with Helicobacter pylori infection and stomach diseases. Helicobacter. 23 (2), e12460(2018).
  8. Turkkan, E., et al. Does Helicobacter pylori-induced inflammation of gastric mucosa determine the severity of symptoms in functional dyspepsia. Journal of Gastroenterology. 44 (1), 66-70 (2009).
  9. Liu, Y., Cai, C., Qin, X. Regulation of gut microbiota of Astragali Radix in treating for chronic atrophic gastritis rats based on metabolomics coupled with 16S rRNA gene sequencing. Chemico-Biological Interactions. 365, 110063(2022).
  10. Gai, X., et al. Heptadecanoic acid and pentadecanoic acid crosstalk with fecal-derived gut microbiota are potential non-invasive biomarkers for chronic atrophic gastritis. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. 12, 1064737(2023).
  11. Sgambato, D., et al. Gut microbiota and gastric disease. Minerva Gastroenterologica e Dietologica. 63 (4), 345-354 (2017).
  12. Li, J., et al. Pharmacogenetic study of Desmodium caudatum. Anais Da Academia Brasileira De Ciencias. 91 (2), e20180637(2019).
  13. Xu, Q. N., et al. Phenolic glycosides and flavonoids with antioxidant and anticancer activities from Desmodium caudatum. Natural Product Research. 35 (22), 4534-4541 (2021).
  14. Li, W., et al. Anti-inflammatory and antioxidant activities of phenolic compounds from Desmodium caudatum leaves and stems. Archives of Pharmacal Research. 37 (6), 721-727 (2014).
  15. Shao, X. H., Wang, J. G. Establishment of chronic atrophic gastritis in a rat model. Journal of Zhangjiakou Medical Collage. 19 (2), 11-13 (2002).
  16. Yu, C., et al. Dysbiosis of gut microbiota is associated with gastric carcinogenesis in rats. Biomedicine & Pharmacotherapy. 126, 110036(2020).
  17. Chen, R., et al. Fecal metabolomics combined with 16S rRNA gene sequencing to analyze the changes of gut microbiota in rats with kidney-yang deficiency syndrome and the intervention effect of You-gui pill. Journal of Ethnopharmacology. 224, 112139(2019).
  18. Li, Q., et al. Magnetic anchoring and guidance-assisted endoscopic irreversible electroporation for gastric mucosal ablation: a preclinical study in canine model. Surgical Endoscopy. 35 (10), 5665-5674 (2021).
  19. Xu, H., et al. Therapeutic assessment of fractions of Gastrodiae Rhizoma on chronic atrophic gastritis by 1H NMR-based metabolomics. Journal of Ethnopharmacology. 254, 112403(2020).
  20. Zhang, B. N., et al. Effects of Atractylodes lancea extracts on intestinal flora and serum metabolites in mice with intestinal dysbacteriosis. Proteome Science. 21 (1), 5(2023).
  21. Tian, H., et al. The therapeutic effects of Magnolia officinalis extraction on an antibiotics-induced intestinal dysbacteriosis in mice. Current Microbiology. 77 (9), 2413-2421 (2020).
  22. Wang, J., et al. Tumor and microecology committee of China anti-cancer association. Chinese expert consensus on intestinal microecology and management of digestive tract complications related to tumor treatment (version 2022). Journal of Cancer Research and Therapeutics. 18 (7), 1835-1844 (2022).
  23. Xu, W., Xu, L., Xu, C. Relationship between Helicobacter pylori infection and gastrointestinal microecology. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. 12, 938608(2022).
  24. Johnson, J. S., et al. Evaluation of 16S rRNA gene sequencing for species and strain-level microbiome analysis. Nature Communications. 10 (1), 5029(2019).
  25. Callahan, B. J., et al. High-throughput amplicon sequencing of the full-length 16S rRNA gene with single-nucleotide resolution. Nucleic Acids Research. 47 (18), e103(2019).
  26. Langille, M. G., et al. Predictive functional profiling of microbial communities using 16S rRNA marker gene sequences. Nature Biotechnology. 31 (9), 814-821 (2013).
  27. Huang, D., et al. Characteristics of intestinal flora in patients with gastric cancer based on high throughput sequencing technology. Chinese Journal of Clinical Research. 35 (3), 303-306 (2022).
  28. Shi, Y., Luo, J., Narbad, A., Chen, Q. Advances in lactobacillus restoration for β-lactam antibiotic-induced dysbiosis: a system review in intestinal microbiota and immune homeostasis. Microorganisms. 11 (1), 179(2023).
  29. Grigor'eva, I. N. Gallstone disease, obesity and the Firmicutes/Bacteroidetes ratio as a possible biomarker of gut dysbiosis. Journal of Personalized Medicine. 11 (1), 13(2020).
  30. Thorne, G. M. Diagnosis of infectious diarrheal diseases. Infectious Disease Clinics of North America. 2 (3), 747-748 (1988).
  31. Banks, M., et al. British society of gastroenterology guidelines on the diagnosis and management of patients at risk of gastric adenocarcinoma. Gut. 68 (9), 1545-1575 (2019).
  32. Roy-Lachapelle, A., et al. Evaluation of ELISA-based method for total anabaenopeptins determination and comparative analysis with on-line SPE-UHPLC-HRMS in freshwater cyanobacterial blooms. Talanta. 223, 121802(2021).
  33. Shahi, S. K., et al. Microbiota analysis using two-step PCR and next-generation 16S rRNA gene sequencing. Journal of Visualized Experiments. (152), e59980(2019).
  34. Huang, R., et al. Blocking-free ELISA using a gold nanoparticle layer coated commercial microwell plate. Sensors (Basel). 18 (10), 3537(2018).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

التهاب المعدة المزمنمستويات الغاسترينمحتوى المالونديلديهيدمقايسة إليزاتسلسل 16S rRNAميكروبيوتا الأمعاءنموذج الجرذان
آثار Desmodium caudatum على هرمونات الجهاز الهضمي والنباتات المعوية في الفئران المصابة بالتهاب المعدة
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.