استكشاف خيارات تاريخ الحياة: استخدام درجة الحرارة ونوع الركيزة كعوامل متفاعلة لتفضيلات يرقات الذبابة والإناث

Summary

هنا ، تم تفصيل بروتوكولين لتقييم مصدر الغذاء وتفضيلات وضع البيض في يرقات وإناث الذباب. وتشمل هذه أربعة خيارات مع عاملين متفاعلين: نوع الركيزة ودرجة الحرارة. تمكن المقايسات من تحديد تفضيل مصدر الغذاء لليرقات وتفضيل موقع وضع البيض للإناث.

Abstract

يقدم الذباب المنتفخ (Diptera: Calliphoridae) مجموعة واسعة من أنماط حياة اليرقات ، والتي تصنف عادة على أنها تطفل ملزم ، وتطفل اختياري ، و sapro-necrophagy كاملة. تعتبر العديد من الأنواع الطفيلية ، الملزمة والاختيارية ، ذات أهمية صحية واقتصادية ، حيث يمكن أن تسبب يرقاتها الانقباضات (غزو اليرقات في الأنسجة الحية). ومع ذلك ، من الجدير بالذكر أن الأنثى البالغة تلعب دورا حاسما لأنها تختار موقع وضع البيض ، وبالتالي ، تحدد إلى حد كبير عادة التغذية والظروف التنموية لليرقات. في هذه الدراسة ، تم اقتراح بروتوكولين لاختبار تفضيل تغذية اليرقات وتفضيل موقع وضع البيض الأنثوي مع مراعاة عاملين متفاعلين: نوع ركيزة اللحم ودرجة الحرارة. سمحت الإعدادات المعروضة هنا باختبار يرقات Lucilia cuprina والإناث الجاذبة في اختبار من أربعة خيارات مع درجتي حرارة (33 ± 2 درجة مئوية و 25 ± 2 درجة مئوية) ونوعين من ركائز اللحوم (اللحوم الطازجة المكملة بالدم واللحوم الفاسدة البالغة من العمر 5 أيام). يمكن لليرقات أو الإناث الجاذبة أن تختار الحفر أو وضع بيضها ، على التوالي ، في أي مما يلي: اللحوم الفاسدة عند 25 درجة مئوية (محاكاة حالة الأنواع الميتة) ، واللحوم الطازجة المكملة بالدم عند 33 درجة مئوية (محاكاة حالة الأنواع الطفيلية) ، واثنين من الضوابط ، اللحوم الفاسدة عند 33 درجة مئوية ، أو اللحوم الطازجة المكملة بالدم عند 25 درجة مئوية. يتم تقييم التفضيل عن طريق حساب عدد اليرقات أو البيض الموضوعة في كل خيار لكل نسخة مكررة. سمحت مقارنة النتائج المرصودة بالتوزيع العشوائي بتقدير الدلالة الإحصائية للتفضيل. أشارت النتائج إلى أن يرقات L. cuprina لها تفضيل قوي للركيزة الفاسدة عند 25 درجة مئوية. على العكس من ذلك ، كان تفضيل موقع وضع البيض من قبل الإناث أكثر تنوعا بالنسبة لنوع اللحوم. يمكن تكييف هذه المنهجية لاختبار تفضيل أنواع الحشرات الأخرى ذات الحجم المماثل. يمكن أيضا استكشاف أسئلة أخرى باستخدام شروط بديلة.

Introduction

الذباب ، وخاصة المسكوكات كاليبرات (بما في ذلك الذباب ، الذباب المنزلي ، ذباب الروبوت وذباب اللحم وغيرها) ، يظهر مجموعة واسعة من أنماط الحياة ، بما في ذلك السلوكيات الطفيلية والميتة¹. عادة ما تسبب الأنواع الطفيلية الانقباضات ، وهي غزو الأنسجة الحية بواسطة اليرقات (اليرقات)². في عائلة Calliphoridae ، تعتبر كل من الأنواع الطفيلية الإلزامية والاختيارية آفات حيوانية رئيسية مسؤولة عن الخسائر الاقتصادية وسوء رعاية الحيوانات بسبب تفشي اليرقات²،^3،4،⁵،^6،

Protocol

تم الحصول على عينات الذباب باستخدام الفخاخ وليس على الحيوانات المصابة. تم إصدار ترخيص SISBIO (67867-1) لجمع وحفظ ذباب عائلة Calliphoridae في الأسر في ظروف المختبر. عينات الحشرات معفاة من التقييم الأخلاقي في البحث في البرازيل. تم الحصول على لحوم الأبقار ودمها تجاريا ، ولم تكن هناك حاجة إلى تصريح أخلاقي.

1. تفضيل تغذية اليرقات

1. تحضير أطباق بتري التي تحتوي على 2٪ أجار
   1. تحضير أربعة أطباق بتري مع 2 ٪ أجار. للقيام بذلك ، أضف 6 غرام من أجار البكتريولوجي إلى 300 مل من الماء وقم بإذابة هذا المزيج في الميكروويف. بعد ذلك ، قسم الحجم بالتساوي إلى أربعة أطباق زجاجية بتري (150 × 20 مم) ، باستخدام حوالي 70 مل في كل طبق.
      ....

Results

لإثبات فعالية الطرق المقدمة ، أجريت التجارب باستخدام مجموعة مختبرية من Lucilia cuprina (العائلة: Calliphoridae) ، وهي ذبابة طفيلية اختيارية². يمكن العثور على مجموعة البيانات الخام الكاملة التي تم الحصول عليها لهذا النوع في الملف التكميلي S3 مع نتائج اختبارات تفضيل اليرقات والركيزة الأنثوية. لتقييم ما إذا كانت اليرقات والإناث تظهر تفضيلا لأي ركيزة ، تمت مقارنة البيانات المرصودة ب 1000 مجموعة بيانات محاكاة ، كل منها يمثل اختيارا عشوائيا (انظر الكود في الملف التكميلي.......

Discussion

يتطلب فهم تطور عادات التغذية ، لا سيما في سياق التطفل في الذباب ، فحص تفضيلات الركيزة عبر مراحل الحياة المختلفة للتغذية أو وضع البيض. لذلك ، في هذه الدراسة ، تم اقتراح طرق قوية ومباشرة للتحقيق في تفضيلات الركيزة في يرقات وإناث الذباب. تم اختبار هذه الطرق في Lucilia cuprina ، وهي ذبابة طفيلية اختيارية². ومن المثير للاهتمام ، أن التجارب كشفت النقاب عن ميل واضح للحوم الفاسدة عند 25 درجة مئوية بين يرقات L. cuprina ، بما يتماشى مع الظروف التي تستخدمها عادة الأنواع الميتة. يختلف هذا عن.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
أجار	سيجما ألدريتش	05038-500 جرام	لعلم الأحياء
الكرتون الأسود	-		70 × 50 سم
دم بقري مع مضاد للتخثر   ؛	-		50٪ دم بقري نقي مع مضاد للتخثر (3.8٪ سترات الصوديوم) + 50٪ من الماء المفلترة
البقر المفروم	-		حوالي 7-8٪ من فرشاة
	الدهون -		مصنوع من
أنبوب بلاستيكي مخروطي	Falcon أو		صليب عام - 50 مل
	مصنوعة يدويا	NA	48x48 سم ، 8 سم من الارتفاع و 8 سم من العرض
Erlenmeyer	Vidrolabor	NA	500 مل
70٪ إيثانول	موالفة	A1084.01.BL	70٪ إيثيل إيثانول مطلق + 30٪ ماء مفلتر
أسطوانة متدرجة	Nalgon أو Generic-500		مل و 50 مل
وسادة تسخين			سم الأبعاد ، 40 واط ، 127 فولت
ميزان حرارة بالأشعة تحت الحمراء	HeTaiDa	HTD8808	ميزان حرارة الجسم غير الملامس (معدل العينة: 0.5 ثانية ، الدقة: & plusmn ؛ 0.2 درجة ؛ C, قياس: 5-15 سم)
طبق بتري (زجاج)	الدقة	NA	150x20 مم الأبعاد
			(ملاحظة: يمكن أن تكون أطباق بتري بلاستيكية إذا تم استخدامها مرة واحدة فقط)
طبق بتري PS	Cralplast	18130	أبعاد 60 × 15 مم
ماصة بلاستيك باستور	-		3 مل (الحجم الإجمالي)
سينثس	سترات الصوديوم	C11033.01.AG	3.8٪ سترات الصوديوم (38 جم مخفف في 1 لتر من الماء المصفى) ملاعق
	-		أكثر من ملعقة واحدة ضرورية. استخدم واحدة لكل نوع من ركائز اللحوم. يفضل الفولاذ المقاوم للصدأ.
ملعقة من الفولاذ المقاوم للصدأ		مسطحة عامة ونهاية ملعقة
مجهر مجسم			/ 22 عدسات
ملاقط	-		معدن مصنوع ونقطة دقيقة
شرائط إضاءة LED بيضاء	NA	NA 4.8 واط ، 2x0.05 مم ² ؛ 320 لومن ، درجة حرارة اللون: 6500 كلفن (أبيض)