يمكن لجراحة المجازة الاثني عشر الصائمية (DJB) تحسين استقلاب الجلوكوز وتقليل مقاومة الأنسولين. هنا ، نقدم بروتوكولا لإنشاء نموذج ماوس مستقر وموثوق به من DJB.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
يمكن لجراحة المجازة الاثني عشر الصائمية (DJB) تحسين استقلاب الجلوكوز وتقليل مقاومة الأنسولين. هنا ، نقدم بروتوكولا لإنشاء نموذج ماوس مستقر وموثوق به من DJB.
انتشار السمنة ومرض السكري من النوع 2 هو مصدر قلق صحي عالمي خطير. السمنة هي عامل ممرض رئيسي في مرض السكري من النوع 2 وأمراض القلب والأوعية الدموية وبعض أنواع السرطان. تقدم جراحة السمنة خيارا علاجيا طويل الأمد وفعالا لكل من السمنة ومرض السكري. من المعروف على نطاق واسع أن تكميم المعدة (SG) وتحويل مسار المعدة Roux-en-Y (RYGB) هما أكثر جراحات السمنة شيوعا. بالإضافة إلى ذلك ، أظهرت العديد من جراحات السمنة الاستكشافية آثارا علاجية واعدة. أظهرت المجازة الاثني عشر والصائم (DJB) ، المصممة خصيصا لمرضى السكر الذين يعانون من انخفاض مؤشر كتلة الجسم ، نتائج أيضية مفيدة. ومع ذلك ، فإن فوائده الأيضية المستقلة عن الوزن ليست مفهومة تماما بسبب النماذج الحيوانية المحدودة. في هذه المقالة ، نصف بروتوكولات الرعاية المحسنة والتقنيات الجراحية لإجراء جراحة DJB في الفئران المصابة بداء السكري التي يسببها النظام الغذائي (DIO). يساهم استخدام نموذج الماوس في فهم أفضل لطبيعة التغييرات التي تسببها جراحة DJB مع تسهيل الممارسة السريرية ذات الصلة.
السمنة ومرض السكري من النوع 2 هي الأمراض المزمنة الأكثر شيوعا في العالم ، وانتشارها آخذ في الازدياد بين الأفراد الشباب1. جراحة السمنة هي العلاج الأكثر فعالية للسمنة ومرض السكري ، مما يسهل استقرار نسبة الجلوكوز في الدم على المدى الطويلمع تحسين المضاعفات المرتبطة بالسمنة 2,3. هناك عدة أنواع من جراحة السمنة ، مصنفة حسب ما إذا كانت تقلل من حجم المعدة أو امتصاص الأمعاء. وتشمل هذه التقييدية ، malabsorptive ، والجمع4،5.
تم تطوير المجازة الاثني عشر الصائمية (DJB) لأول مرة من قبل Rubino و Marescaux ، الذين أظهروا أنه يمكن التخفيف من مرض السكري من النوع 2 عن طريق توصيل الاثني عشر والصائم بدلا من تقليل حجم المعدة 6,7. يحافظ DJB على المعدة بأكملها ويتجاوز الاثني عشر بأكمله والصائم القريب. تنقسم الأمعاء إلى أطراف القناة الصفراوية والجهاز الهضمي والأطراف الشائعة 6,8. يشترك DJB في بعض أوجه التشابه مع جراحات السمنة ، بما في ذلك تحويل مسار المعدة Roux-en-Y (RYGB) ، والمجازة المعدية المصغرة ، والمجازة الصفراوية البنكرياسية ، وتحويل الاثني عشر ، و DJB بالإضافة إلى تكميم المعدة9. بالمقارنة مع RYGB ، لا يتطلب DJB مفاغرة الجهاز الهضمي ، مما يقلل من وقت التشغيل ويحسن معدل نجاح الإجراء. يشبه DJB RYGB في تحسين استقلاب الجلوكوز ولكنه لا يؤثر على وزن الجسم10. بعد جراحة DJB ، يحفز توصيل الطعام السريع إلى الأمعاء الدقيقة البعيدة إفراز الببتيد الشبيه بالجلوكاجون -1 (GLP-1) ، مما يؤدي إلى تحسين استقلاب الجلوكوز11,12.
يعد استخدام النماذج الحيوانية أمرا ضروريا لفهم المسارات الأيضية والخلوية والجزيئية. ساهمت النماذج الحيوانية لجراحة السمنة في فهمنا للآليات المحتملة الكامنة وراء السمنة ومرض السكري13،14. ومع ذلك ، بسبب الاختلافات الفسيولوجية بين الأنواع ، من المستحيل تكرار الأمراض البشرية بشكل مثالي في النماذج الحيوانية15. من بين النماذج الحيوانية المختلفة المتاحة لأغراض البحث ، يشبه نموذج الفأر الناجم عن السمنة (DIO) إلى حد كبير السمنة البشرية ومتلازمة التمثيل الغذائي16. تم اختيار الفئران لجراحة DJB لتحديد جدوى الجراحة وتوفير تقنيات لمزيد من البحث. تقدم هذه المخطوطة ملخصا شاملا لكل من الجوانب الفنية والتفاصيل التجريبية لجراحة DJB.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تتبع جميع خطوات البروتوكول الموضحة أدناه إرشادات لجنة رعاية واستخدام بالمستشفى العام لقيادة المسرح الجنوبي بموجب رقم الموافقة 2020112501.
1. التحضير العام قبل الجراحة
ملاحظة: تم شراء ثلاثين ذكرا من الفئران C57BL / 6 البالغة من العمر 6 أسابيع. تم إيواء الفئران في مختبر محدد خال من مسببات الأمراض (SPF) تحت دورة ضوء / ظلام مدتها 12 ساعة. درجة الحرارة ، 22 ± 2 درجة مئوية ؛ والرطوبة ، 55-65 ٪. تم منح الفئران حرية الوصول إلى الماء وتغذت على نظام غذائي يحتوي على 60٪ من الدهون لمدة 6 أسابيع للحث على السمنة. تم إعطاء حقنة داخل الصفاق بقيمة 40 ملغ/كغ من الستربتوزوتوسين لمدة 5 أيام للحث على الإصابةبمرض السكري 17. من بين الفئران الثلاثين ، تم فحص اثنين وعشرين فأرا بحثا عن جلوكوز الدم العشوائي > 300 مجم / ديسيلتر وتم تعيينهم عشوائيا إلى مجموعات DJB (ن = 15) والجراحة الوهمية (ن = 7). تم استبعاد ثمانية فئران من التجربة بسبب انخفاض مستوى الجلوكوز في الدم.
2. الالتفافية الصائمية الاثني عشر: الإجراء الجراحي

الشكل 1: إجراء المجازة الاثني عشر الصائم. (أ) موقع الصائم 5 سم البعيد عن رباط تريتز. (ب) ربط الصائم مرتين بالحرير 6-0 ، مقطوعة من منتصف الرباط. (ج) مفاغرة الصائم الصائمية. د: شق مسافة 0.5-0.6 سم، وخيط الجدار الخلفي. (إ-و) مفاغرة الصائم الصائمية الكاملة. (ز) اسحب الصائم البعيد إلى الاثني عشر 1 سم أسفل البواب. (ح) مفاغرة الاثني عشر - الصائم. (ط) قطع مفاغرة الاثني عشر والصائم بشق 0.5-0.6 سم وخياطة الجدار الخلفي بخياطة بسيطة مستمرة. (ي-ك) مفاغرة الاثني عشر الصائم الكاملة. (L) عند 2 مم من المفاغرة البعيدة إلى مفاغرة الاثني عشر - الصائم ، قم بربط الاثني عشر مرتين بالحرير 6-0 وقطع منتصف الرباط. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
3. الرعاية العامة بعد العملية الجراحية

الشكل 2: رسم تخطيطي لجراحة DJB. أ: مفاغرة الاثني عشر الصائم. ب: مفاغرة الصائم الصائمية. ج: الطرف الصفراوي البنكرياسي. د: الطرف الهضمي. ه: الطرف المشترك. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 3: تشريح جراحة DJB. أ: مفاغرة الاثني عشر الصائم. ب: مفاغرة الصائم الصائمية. ج: الطرف الصفراوي البنكرياسي. د: الطرف الهضمي. ه: الطرف المشترك. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
4. تقييم ما بعد الجراحة من المعلمات الأيضية
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الشروط العامة
كان متوسط وقت التشغيل لإجراء DJB 84.5 ± 2.6 دقيقة. خضع خمسة عشر فأرا لعملية جراحية DJB ، ونجا تسعة فئران. كما هو موضح في الجدول 1 ، حدثت غالبية الوفيات أثناء الجراحة أو في الأيام ال 7 التالية. كانت أسباب الوفاة بعد العملية الجراحية هي النزيف (ن = 2) في اليوم الأول بعد الجراحة ، والتسرب المفاغر (ن = 1) في اليوم 4 بعد الجراحة ، والانسداد المفاغر (ن = 2) في اليوم 7 بعد الجراحة ، والسبب غير المعروف (ن = 1) بعد ثلاثة أسابيع من الجراحة.
لمدة 8 أسابي...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في عام 1953 ، أجرى Varco et al.18 أول مجازة jejuno-ileal كبداية لجراحة علاج البدانة. منذ ذلك الحين ، تم إجراء العديد من جراحات السمنة من قبل الجراحين. أدت هذه العمليات الجراحية إلى فقدان الوزن وتحسين مضاعفات التمثيل الغذائي4،19،20. علاوة على ذلك ، في عام 1967 ، أجرى Mason و Ito21 أول تحويل مسار معدي Roux-en-Y (RYGB) ، والذي يمكن أن يقلل الوزن بشكل ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يعلن أصحاب البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.
ودعمت هذه الدراسة بمنحة من مشروع تخطيط العلوم والتكنولوجيا في مقاطعة غوانغدونغ الصينية (رقم 202002020069).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| ضام البطن | FST | 17000-03 | ضام كوليبري -3 سم ، نطاق الضام 1.5 سم / 3 سم طول |
| 1٪ محلول بينتوباربيتال الصوديوم | مصنع الكاشف الكيميائي قوانغتشو | / | ؛ مذاب 500 مجم من مسحوق الصوديوم البنتوباربيتال في 50 مل من محلول ملحي عادي للحصول على محلول بنتوباربيتال الصوديوم 1٪. |
| بنزيل بنسلين الصوديوم للحقن | شركة الأدوية الصينية الشمالية المحدودة | F2062121 | الكاشف الكيميائي للبنسلين |
| بوبرينورفين | قوانغتشو | / | تسكين |
| بوبرينورفين | قوانغتشو أوتسوكا للأدوية المحدودة | / | مسكن |
| حامض الستريك والصوديوم سترات عازلة | LEAGENE | R00522 | عازلة |
| براعم القطن | HaoZheng مسحات | ||
| قطنية 60220610 الطبيةمعجون مزيل الشعر | Veet | AAPR-S222 | كريم إزالة الشعر |
| بطاقة الأذن | ZEYA | SUS304 | الأذن |
| بطانية كهربائية | ZOSEN | ZS-CWDRT | وسادة حرارية |
| ميزان إلكتروني | WETTLER TOLEDO | 20060902-6 | قياس الوزن |
| مسحوق غذائي معوي | مختبرات أبوت | / | مسحوق التغذية |
| مرهم | قوانغتشو Otsuka الصيدلانية المحدودة | / | حماية |
| العينين مقياس السكر | روش | 6993788001 | تقييم نسبة الجلوكوز في الدم |
| Graphpad Prism الإصدار 9.4.1 | برنامج GraphPad | الإصدار 9.4.1 | برنامج للتحليل الإحصائي |
| نظام غذائي عالي الدهون (حمية القوارض المنقاة عالية الدسم [60FDC]Dyets | 112252 | 60kcal٪ حمية عالية | |
| مايكرو ملقط | Jinzhong الطبية | 18-1140 | ملقط صغير |
| حامل إبرة | صغيرة Jinzhong Medical | EMT-160-Z | حامل إبرة |
| مقص دقيق | Jinzhong Medical | YBC010 | مقص دقيق |
| كاميرا مجهر | LAPSUN | E 2000 | مقص فيديو |
| للعيون | Jinzhong Medical | Y00030 | مقص |
| مصنع الكاشف الكيميائي Pentobarbital | قوانغتشو | / | |
| حقن كلوريد الصوديوم | المخدر قوانغتشو Otsuka الصيدلانية المحدودة | B21L0301 | كلوريد الصوديوم 0.9٪ |
| مجهر ستيريو | ZEISS | Stemi 305 | مجهر مجهر |
| Streptozotocin | Sigma | S110910-1g | STZ |
| خياطة | خط LINGQIAO SUTURE | ZS-LQPMRZ5 / 0 | Prolene 6/0 ، Prolene 10/0 |
| ملقط الأنسجة | Jinzhong Medical | H1701 | ملقط جراحي |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.