يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

أخذ عينات دم الوريد تحت الترقوة في الفئران الواعية

5.3K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/66075

⸱

نوفمبر 3, 2023

 ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

إشعار تصحيح

Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice

ملخص

نقدم هنا مزيجا من القيود الفعالة للفئران وطرق ثقب الوريد تحت الترقوة التي تمكن من جمع الدم بسرعة وأمان وتكرار في الفئران دون تخدير.

الملخص

هناك العديد من الطرق المعمول بها للحصول على عينات دم متكررة من الفئران ، مع أكثر الطرق المستخدمة شيوعا هي أخذ عينات الوريد الجانبي بدون تخدير وأخذ عينات الوريد الوداجي مع التخدير. ومع ذلك ، فإن معظم هذه الطرق تتطلب المساعدة ومعدات التخدير وأحيانا تشكل صعوبات من حيث جمع الدم أو رداءة نوعية عينات الدم. بالإضافة إلى ذلك ، تستهلك طرق جمع الدم هذه وقتا كبيرا وموارد بشرية عندما يكون أخذ عينات الدم المتكررة مطلوبا لعدد كبير من الفئران. تقدم هذه الدراسة تقنية لأخذ عينات الدم المتكررة في الفئران غير المخدرة من قبل فرد واحد بارع. يمكن الحصول على عينات دم مرضية للغاية عن طريق ثقب الوريد تحت الترقوة. أظهرت الطريقة معدل نجاح إجمالي مثير للإعجاب بنسبة 95٪ ، مع متوسط وقت يبلغ 2 دقيقة فقط من ضبط الفئران إلى الانتهاء من جمع الدم. علاوة على ذلك ، فإن إجراء عمليات جمع دم متتالية ضمن النطاق المحدد لا يلحق أي ضرر بالفئران. هذه الطريقة تستحق الترويج لجمع الدم ، خاصة في دراسات الحرائك الدوائية واسعة النطاق.

المقدمة

الفئران هي واحدة من أكثر التجارب شيوعا ، وهناك العديد من الطرق للحصول على عينات الدم. بالنسبة للتجارب التي تتضمن جمع دم واحد في المرحلة الختامية ، يمكن الحصول على كمية كافية من الدم من خلال ثقب القلب أو جمع الدم من الشريان الأورطي البطني1. ومع ذلك ، تتطلب بعض الدراسات جمع الدم المتكرر من الفئران للدم الروتيني أو التحليل الكيميائي الحيوي ، خاصة في دراسات الحرائك الدوائية والسموم ، حيث يلزم جمع الدم المتكرر لتحديد امتصاص الأدوية وتوزيعها واستقلابها2.

حاليا ، على الرغم من أن جمع الدم في الوريد الذيل هو الطريقة الأكثر شيوعا لأخذ عينات الدم من الفئران ، على الرغم من عدم الحاجة إلى التخدير ، إلا أن ....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

التزمت هذه الدراسة بالمبادئ التوجيهية الموضحة في الطبعة الثامنة من دليل رعاية واستخدام المختبر13. حصل البحث على موافقة من لجنة الأخلاقيات في مستشفى جامعة لانتشو الثاني وتم توثيقه وفقا لإرشادات REACH 2.014. تم إيواء اثني عشر فأرا من Wistar الأصحاء (ستة ذكور تزن 290-330 جم وست إناث تزن 250-280 جم) تتراوح أعمارهم بين 12-16 أسبوعا في مختبر GLP للحيوانات بجامعة Lanzhou لمدة 3 أيام قبل التجربة الفعلية. كانت أقفاص الفئران المستخدمة من النوع R5 ، بقياس 545 مم × 395 مم × 200 مم ، وكانت مجهزة بمواد فراش معقم. تم تزويد جميع الفئران بإمكانية الوصول غير المقيد إلى كل من الطعام والماء. حافظ المختبر على متوسط رطوبة يبلغ 25٪ ، ومتوسط در....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

تظهر عينات البلازما عالية الجودة لونا أصفر باهتا ووضوحا وشفافية ، خالية من أي مسحة حمراء أو تخثر ، كما هو موضح في الشكل 2 أ. يوضح الشكل 2B انحلال الدم (الجانب الأيسر) أو التخثر (الجانب الأيمن) نتيجة لإجراءات غير لائقة ، على التوالي. على مدار 96 جلسة جمع دم في غضون 4 أيام ، كان متوسط أوقات جمع الدم الفردي للمجموعتين A و B 119.87 ± 33.62 ثانية و 123.28 ± 30.96 ثانية على التوالي. لم يكن هناك فرق كبير في أوقات جمع الدم بين المجموعتي.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

على الرغم من أن جمع الدم في الوريد الذيل هو الطريقة الأكثر شيوعا لأخذ عينات الدم المتكررة في الفئران ، إلا أنه قد يتأثر بأدوية التخدير ، وبسبب صغر حجم الوريد الذيل ، فإن كمية الدم التي يمكن جمعها في حالة واحدة محدودة ، مما يؤدي إلى مدة أطول لجمع الدم 4,5. على الرغم من أن أنظمة قياس الطيف الكتلي الترادفية (MS / MS) عالية الأداء للكروماتوغرافيا السائلة (HPLC) جنبا إلى جنب مع أخذ العينات المجهرية الشعرية (CMS) لأوردة ذيل الفئران يمكن أن تقلل من كمية الدم المستخدمة ف.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين أي مصالح مالية أو غير مالية ذات صلة للكشف عنها.

شكر وتقدير

تم دعم هذه الدراسة من قبل مشروع خطة Cuiying للمستشفى الثاني بجامعة لانتشو (Grant No. PR0121015) والمختبر الرئيسي لمقاطعة قانسو لبحوث أمراض الجهاز البولي (المنحة رقم 0412D2).

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
0.75٪ محلول ملحي عاديGansu Fuzheng Pharmaceutical Technology Co.، Ltd.و [مدش] و [مدش]محلول الهيبارين الصوديوم المحضر
1 مل ماصة باستور BiosharpBS-XG-01-NSجمع الدم
حقنة 1 مل (26 جم ، 0.45 مم × 12 مم)Shinva Medical Instrument Co.، Ltd.0.45 * 12RWLBجمع الدم   ؛
1.5 مل أنبوب EppendorfBiosharpBS-15-Mتخزين وجمع الدم
75٪ كحول طبيشاندونغ ليركون للتكنولوجيا الطبية المحدودةو [مدش] و [مدش]تطهير موقع جمع دم الفئران
حامل أنبوب الطرد المركزيBiosharpBS-05 / 15-SM60&[مدش] ؛ و [مدش]
مقياس إلكترونيشنغهاي PUCHUN قياس الصك المحدودةJE1002وزن
حقن الصوديوم الهيبارينخبى تشانغشان الكيمياء الحيوية الصيدلانية المحدودةو [مدش] و [مدش]اشطف المحقنة وأنبوب EP ؛ خفف بمحلول ملحي عادي إلى 25 وحدة / مل
أجهزة الطرد المركزي ذات درجة الحرارة المنخفضةHuNan Xiang Yi الطرد المركزي Instrument  Co., Ltd.  H1750Rفصل المصل

المراجع

  1. UCSF Office of Research Institutional Animal Care and Use Program. Blood collection: The rat IACUC Guideline. , https://iacuc.ucsf.edu/sites/g/files/tkssra751/f/wysiwyg/GUIDELINE%20-%20Blood%20Collection%20-%20Rat.pdf (2022).
  2. Hattori, N., Takumi, A., Saito, K., Saito, Y. Effects of serial cervical or tail blood sampling on toxicity and toxicokinetic evaluation in rats. The Journal of Toxicological Sciences. 4....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

تصحيح


Formal Correction: Erratum: Subclavian Vein Blood Sampling in Conscious Rats
Posted by JoVE Editors on 3/21/2024. Citeable Link.

This corrects the article 10.3791/66075

استكشف المزيد من المقالات

أخذ عينات من الوريد تحت الترقوةجمع الدم من الجرذانأخذ عينات من جرذان واعيةأخذ عينات دم متكررةتقنية تثبيت الجرذانجرذان غير مخدرةدراسات الحركية الدوائيةجودة عينة الدمجمع الدم بالحقنةتقنية الإرقاء