يصف هذا البروتوكول تحليل مخلفات مبيدات الآفات متعددة الفئات في أصناف الأفوكادو باستخدام طريقة Quick-E asy-Ch eap-E ffective-R ugged-S afe (QuEChERS) مع فورمات الأمونيوم ، تليها كروماتوغرافيا الغاز - مطياف الكتلة الترادفية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تقدير 45 مبيد حشري في أصناف الأفوكادو بطريقة QuEChERS وكروماتوغرافيا الغاز - مطياف الكتلة الترادفية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
كروماتوغرافيا الغاز (GC) قياس الطيف الكتلي الترادفي (MS / MS) يقف كأداة تحليلية بارزة تستخدم على نطاق واسع لمراقبة بقايا مبيدات الآفات في الأغذية. ومع ذلك ، فإن هذه الطرق عرضة لتأثيرات المصفوفة (MEs) ، والتي يمكن أن تؤثر على القياس الكمي الدقيق اعتمادا على تركيبة محددة من التحليل والمصفوفة. ومن بين الاستراتيجيات المختلفة للتخفيف من MEs ، تمثل المعايرة المتطابقة مع المصفوفة النهج السائد في تطبيقات بقايا مبيدات الآفات نظرا لفعاليتها من حيث التكلفة وتنفيذها المباشر. في هذه الدراسة ، تم تحليل ما مجموعه 45 مبيد آفات تمثيلي في ثلاثة أنواع مختلفة من الأفوكادو (أي كريولو وهاس ولورينا) باستخدام طريقة Quick-E asy-Ch eap-E ffective-R ugged-S afe (QuEChERS) مع فورمات الأمونيوم و GC-MS / MS.
لهذا الغرض ، تم استخراج 5 غرام من عينة الأفوكادو مع 10 مل من الأسيتونيتريل ، ثم تمت إضافة 2.5 غرام من فورمات الأمونيوم للحث على فصل الطور. بعد ذلك ، خضع الطافي لعملية تنظيف عن طريق استخراج الطور الصلب المشتت باستخدام 150 مجم من MgSO4 اللامائي ، و 50 مجم من الأمين الأولي والثانوي ، و 50 مجم من أوكتاديسيلسيلان ، و 10 مجم من أسود الكربون الجرافيتي ، و 60 مجم من مادة ماصة قائمة على أكسيد الزركونيوم (Z-Sep +). تم إجراء تحليل GC-MS / MS بنجاح في أقل من 25 دقيقة. تم إجراء تجارب تحقق صارمة لتقييم أداء الطريقة. كشف فحص منحنى معايرة مطابق للمصفوفة لكل نوع من الأفوكادو أن ME ظل ثابتا نسبيا وأقل من 20٪ (يعتبر ME ناعما) لمعظم مجموعات مبيدات الآفات / الأصناف. وعلاوة على ذلك، كانت حدود القياس الكمي لهذه الطريقة أقل من 5 ميكروغرام/كغ لجميع الأصناف الثلاثة. وأخيرا، تقع قيم الاسترداد لمعظم مبيدات الآفات ضمن النطاق المقبول من 70-120٪، مع قيم الانحراف المعياري النسبي أقل من 20٪.
المقدمة
في التحليل الكيميائي ، يمكن تعريف تأثير المصفوفة (ME) بطرق مختلفة ، ولكن التعريف العام المقبول على نطاق واسع هو كما يلي: يشير إلى التغيير في الإشارة ، وخاصة التغيير في ميل منحنى المعايرة عندما تكون مصفوفة العينة أو جزء منها موجودة أثناء تحليل مادة محددة تحليل. كجانب حاسم ، يتطلب ME إجراء تحقيق شامل أثناء عملية التحقق من صحة أي طريقة تحليلية ، لأنه يؤثر بشكل مباشر على دقة القياس الكمي للتحليلات المستهدفة1. من الناحية المثالية ، يجب أن يكون إجراء المعالجة المسبقة للعينة انتقائيا بدرجة كافية لتجنب استخراج أي مكونات من مصفوفة العينة. ومع ذلك ، على الرغم من الجهود الكبيرة ، لا يزال العديد من مكونات المصفوفة هذه ينتهي بها المطاف في أنظمة التحديد النه....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1. إعداد المخزون وحلول العمل
ملاحظة: لأسباب تتعلق بالسلامة ، ينصح بارتداء قفازات النتريل ومعطف المختبر ونظارات السلامة طوال البروتوكول.
- إعداد محاليل المخزون الفردية لكل معيار من معايير مبيدات الآفات التجارية البالغ عددها 45 معيارا (انظر جدول المواد) عند حوالي 1000 مجم / لتر في الأسيتونيتريل في قوارير حجمية سعة 10 مل.
- اجمع بين حلول المخزون الفردية المذكورة أعلاه لإعداد محلول مخزون 400 مجم / لتر في الأسيتونيتريل في دورق حجمي سعة 25 مل.
ملاحظة: سيتم استخدام هذا الحل المختلط لإعداد حلول العمل لتجارب الاسترداد والمعايرة. - تحضير محاليل مخزون من الأترازين-د5 وثلاثي فينيل ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تم إجراء التحقق الشامل من الطريقة التحليلية وفقا للمبادئ التوجيهية6 ل SANTE / 11312/2021 ، بما في ذلك تقييمات الخطية ، ME ، الاسترداد ، والتكرار.
بالنسبة لتقييم الخطية ، تم إنشاء منحنيات معايرة متطابقة مع المصفوفة باستخدام عينات فارغة مسننة عند مستويات تركيز متعددة (تتراوح من 5 إلى 600 ميكروغرام / كجم). ووجد أن معاملات التحديد (R2) لمعظم مبيدات الآفات المختارة أعلى من أو تساوي 0.99، مما يشير إلى وجود علاقة خطية عالية بين التركيز والاستجابة. واختير أدنى مستوى .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
ينشأ القيد الأساسي المرتبط بالمعايرة المتطابقة مع المصفوفة من استخدام العينات الفارغة كمعايير للمعايرة. وهذا يؤدي إلى زيادة عدد العينات التي يتعين معالجتها للتحليل وزيادة حقن مكونات المصفوفة في كل تسلسل تحليلي ، مما قد يؤدي إلى ارتفاع متطلبات صيانة الأجهزة. ومع ذلك ، فإن هذه الاستراتيجية أكثر ملاءمة من الإضافة القياسية ، والتي من شأنها أن تولد عددا أكبر بكثير من العينات المراد حقنها بسبب الحاجة إلى إجراء منحنى معايرة لكل عينة. وبالتالي ، في كلتا الحالتين ، يلزم استخدام تقنيات تحضير العينات التي تقلل من هذا الاستخراج المش.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للكشف عنه.
شكر وتقدير
نود أن نشكر جامعة EAN وجامعة لا لاغونا.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 3-Ethoxy-1،2-propanediol | Sigma Aldrich | 260428-1G | |
| Acetonitrile | Merk | 1006652500 | |
| فورمات الأمونيوم | Sigma Aldrich | 156264-1KG | |
| AOAC 20i / s جهاز أخذ العينات الآلي | Shimadzu | 221-723115-58 | |
| شاكر أوتوماتيكي MX-T6-PRO | SCILOGEX | 8.23222E + 11 | |
| Balance | OHAUS | PA224 | |
| Nest | 601002 | سعة 15 مل | |
| Eppendorf | 4610-1815 | ||
| 2 مل ، 50 مل | جهاز | Nest 602002 | |
| Z206A | MERMLE | 6019500118 | |
| Choper 2L | Oster | 2114111 | |
| العمود SH-Rxi-5sil MS ، 30 م × 0.25 مم ، 0.25 وميكرو ؛ م | Shimadzu | 221-75954-30 | MS GC column |
| Dispensette 5-50 مل | التجارية 4600361 | ||
| DSC-18 | Sigma Aldrich | 52600-U | |
| D-Sorbitol | Sigma Aldrich | 240850-5G | |
| أسيتات الإيثيل | Merk | 1313181212 | |
| GCMS-TQ8040 | Shimadzu | 211552 | |
| حقنة حقن كربونية أسود جرافيتي | Sigma Aldrich | 57210-U | |
| Shimadzu | LC2213461800 | ||
| L-Gulonic acid & gamma ؛ -lactone | Sigma Aldrich | 310301-5G | |
| Linner Splitless | Shimadzu | 221-4887-02 | |
| كبريتات المغنيسيوم anhydrus | Sigma Aldrich | M7506-2KG | |
| ميثانول | بانريك | 131091.12.12 | |
| Milli-Q فائق النقاء (النوع 1) ماء | ميليبور | F4H4783518 | |
| أطراف ماصة 10 - 100 & مايكرو ؛ L | Biologix | 200010 | |
| أطراف الماصة 100 - 1000 & L | العلامة التجارية | 541287 | |
| أطراف الماصة 20 - 200 & L | العلامة التجارية | 732028 | |
| ماصات باستور | نورماكس | 5426023 | |
| ماصة ترانسفيربت إس variabel 10 - 100 & micro; L | العلامة التجارية | 704774 | |
| ماصة ترانسفيربت S variabel 100 - 1000 & micro; L | العلامة التجارية | 704780 | |
| ماصة ترانسفيربت S variabel 20 - 200 & L | SCILOGEX | 7.12111E + 11 | |
| أمين الثانوي الابتدائي | سيجما ألدريتش | 52738-U | |
| حمض الشيكيميك | سيجما ألدريتش | S5375-1G | |
| مرشح حقنة PTFE / L 25 مم ، 0.45 & مايكرو ؛ م | نورماكس | FE2545I | |
| فوسفات ثلاثي الفينيل (QC)قارورة | سيجما ألدريتش | 241288-50G | |
| مع إدراج | سيجما ألدريتش | 29398-U | |
| Z-SEP + | سيجما ألدريتش | 55299-U | ماصة قائمة على أكسيد الزركونيوم |
| < قوية > مبيدات حشرية < / قوي > | <قوي > رقم التسجيل CAS < قوي> | ||
| 4،4 & حاد ؛ -DDD | Sigma Aldrich | 35486-250MG | 72-54-8 |
| 4،4 & -DDE | Sigma Aldrich | 35487-100MG | 72-55-9 |
| 4،4 & -DDT | Sigma Aldrich | 31041-100MG | 50-29-3 |
| Alachlor | Sigma Aldrich | 45316-250MG | 15972-60-8 |
| Aldrin | Sigma Aldrich | 36666-25MG | 309-00-2 |
| أترازين | سيجما ألدريتش | 45330-250 ملغ جرام-آر | 1912-24-9 |
| أترازين-د5 (IS) | سيجما ألدريتش | 34053-10MG-R | 163165-75-1 |
| بوبروفزين | سيجما ألدريتش | 37886-100 مجم | 69327-76-0 |
| كاربوفوران | سيجما ألدريتش | 32056-250-MG | 1563-66-2 |
| كلوربروفام | سيجما ألدريتش | 45393-250 مجم | 101-21-3 |
| كلوربيريفوس | سيجما ألدريتش | 45395-100 مجم | 2921-88-2 |
| كلوربيريفوس ميثيل | سيجما ألدريتش | 45396-250 مجم | 5598-13-0 |
| دلتاميثرين | سيجما ألدريتش | 45423-250 مجم | 52918-63-5 |
| ديكلوران | سيجما ألدريتش | 45435-250 مجم | 99-30-9 |
| ديكلوروفوس | سيجما ألدريتش | 45441-250 مجم | 62-73-7 |
| ديلدرين | سيجما ألدريتش | 33491-100 ملغ آر | 60-57-1 |
| ديفينيلامين | سيجما ألدريتش | 45456-250 مجم | 122-39 - 4 |
| إندوسلفان إيه | سيجما ألدريتش | 32015-250 مجم | 115-29-7 |
| إندرين | سيجما ألدريتش | 32014-250 مجم | 72-20-8 |
| إي بي إن | سيجما ألدريتش | 36503-100 مجم | 2104-64-5 |
| إسفينفاليرات | سيجما ألدريتش | 46277-100 مجم | 66230-04-4 |
| إيثيون | سيجما ألدريتش | 45477-250 مجم | 563-12-2 |
| فيناميفوس | سيجما ألدريتش | 45483-250 مجم | 22224-92-6 |
| فينيتروثيون | سيجما ألدريتش | 45487-250 مجم | 122-14-5 |
| فنثيون | سيجما ألدريتش | 36552-250 مجم | 55-38-9 |
| فينفاليرات | سيجما ألدريتش | 45495-250 مجم | 51630-58-1 |
| HCB | سيجما ألدريتش | 45522-250 مجم | 118-74-1 |
| إيبروديون | سيجما ألدريتش | 36132-100 مجم | 36734-19-7 |
| ليندين | سيجما ألدريتش | 45548-250 مجم | 58-89-9 |
| ملاثيون | سيجما ألدريتش | 36143-100 مجم | 121-75-5 |
| ميتالاكسيل | سيجما ألدريتش | 32012-100 مجم | 57837-19-1 |
| ميثيداثيون | سيجما ألدريتش | 36158-100 مجم | 950-37-8 |
| ميكلوبوتانيل | سيجما ألدريتش | 34360-100 مجم | 88671-89-0 |
| أوكسي فلورفين | سيجما ألدريتش | 35031-100 مجم | 42874-03-3 |
| باراثيون ميثيل | سيجما ألدريتش | 36187-100 مجم | 298-00-0 |
| بنكونازول | سيجما ألدريتش | 36189-100 مجم | 66246-88-6 |
| بيريميفوس-ميثيل | سيجما ألدريتش | 32058-250 مجم | 29232-93-7 |
| بروبيكونازول | سيجما ألدريتش | 45642-250 مجم | 60207-90-1 |
| بروبوكسور | سيجما ألدريتش | 45644-250 مجم | 114-26-1 |
| بروبيزاميد | سيجما ألدريتش | 45645-250 مجم | 23850-58-5 |
| بيريبروكسيفين | سيجما ألدريتش | 34174-100 مجم | 95737-68-1 |
| تولكلوفوس ميثيل | سيجما ألدريتش | 31209-250 مجم | 5701804-9 |
| ترياديمفون | سيجما ألدريتش | 45693-250 مجم | 43121-43-3 |
| تريفلوميزول | سيجما ألدريتش | 32611-100 مجم | 68694-11-1 |
| ألفا سداسي كلور حلقي الهكسان | سيجما ألدريتش | 33377-50 مجم | 319-86-8 |
| بيتا ؛ -سداسي كلور حلقي الهكسان | سيجما ألدريتش | 33376-100 مجم | 319-85-7 |
المراجع
- Raposo, F., Barceló, D. Challenges and strategies of matrix effects using chromatography-mass spectrometry: An overview from research versus regulatory viewpoints. Trends Analyt Chem. 134, 116068(2021).
- Rahman, M. M., Abd El-Aty, A. M., Shim, J. H.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
