يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

الاستزراع المختبري والميداني ليرقات النعال ، Crepidula fornicata

1.1K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/66208

⸱

يناير 5, 2024

1Department of Biology, Dickinson College

في هذه المقالة

ملخص

وتعرض الورقة طرقا لاستزراع يرقات بطنيات الأقدام Crepidula fornicata في نظام صغير الحجم على نطاق مختبري وفي نظام mesocosm لمياه البحر المحيطة يمكن نشره في الميدان.

الملخص

تم استخدام رخويات بطنيات الأرجل كاليبتريد، Crepidula fornicata، على نطاق واسع لدراسات علم الأحياء التنموي لليرقات، وعلم وظائف الأعضاء، والبيئة. تم جمع يرقات القطيفة الحاضنة من هذا النوع عن طريق السحب على غربال بعد الإطلاق الطبيعي من قبل البالغين ، وتوزيعها في المستزرع بكثافة 200 / لتر ، وتغذيتها ب Isochrysis galbana (سلالة T-ISO) عند 1 × 105 خلايا / مل. تم توثيق نمو القشرة واكتساب الكفاءة للتحول لليرقات الشقيقة التي تمت تربيتها في مزارع 800 مل جيدة التهوية مصممة لتحقيق التوازن مع الهواء المحيط أو لمخاليط غازات الغلاف الجوي المحددة. على النقيض من ظروف الثقافة المختبرية هذه ؛ كما تم جمع بيانات النمو والكفاءة لليرقات التي تمت تربيتها في ميزوكوزم مياه البحر المحيطة المتدفقة بسعة 15 لترا والتي تقع في مجموعة حقلية من البالغين الناضجين المتكاثرين. كانت معدلات النمو وتوقيت الكفاءة المتحولة في الثقافات المختبرية مماثلة لتلك التي تم الإبلاغ عنها في الدراسات المنشورة سابقا. نمت اليرقات التي تربى في حقل mesocosm بشكل أسرع بكثير وتحولت في وقت أقرب مما تم الإبلاغ عنه في أي دراسات معملية. هذه الطرق معا مناسبة لاستكشاف تطور اليرقات في ظل ظروف مضبوطة محددة مسبقا في المختبر وكذلك في ظل الظروف التي تحدث بشكل طبيعي في الحقل.

المقدمة

يتم تمثيل النعال ، Crepidula fornicata (Gastropoda: Calyptraeidae) ، بشكل جيد في الأدبيات البحثية الحالية والتاريخية بسبب فائدته كنموذج تنموي وبسبب تأثيراته الواسعة النطاق كنوع غازي. كان بمثابة مثال تأسيسي للتطور الحلزوني في العصر الكلاسيكي لعلم الأجنة التجريبي1 وشهد ولادة جديدة للاهتمام مع تطبيق أدوات التصوير والجينوم الحديثة لتشريح آليات التطور المبكر lophotrochozoan 2,3. في الطرف الآخر من تاريخ حياتها ، ركزت تحقيقات أخرى على تأثيرات السكان البالغين لمهندس النظام البيئي هذا في البيئات البحرية الساحلية المعتدلة البعيدة عن توزيعها الأصلي في شرق أمريكا الشمالية 4,5. بين الجنين والبالغ ، كانت يرقات veliger من هذا النوع موضوع العديد من الدراسات حول تطور اليرقات والبيئة ، وخاصة العوامل التي تؤثر على النمو واكتساب الكفاءة للتحول ، والإشارات الداخلية والخارجية التي تتوسط استقرار اليرقات ، وآثار تجربة اليرقات على أداء الأحداث6،7،8،9،10،11. كشفت الدراسات الحديثة عن مرونة يرقات وصغار C. fornicata لتحمض المحيطات ، وهو وسيلة أخرى للاستخدام البحثي المنتج لهذا12،13،14،15،16.

من مزايا C. fornicata لدراسات بيولوجيا اليرقات البحرية أنه من السهل نسبيا أن تنمو في المختبر في مياه البحر الطبيعية أو الاصطناعية على نظام غذائي unialgal من السوط Isochrysis galbana. تم تفصيل أساليب الثقافة من قبل المؤلف في منشور مطبوع سابق يركز على الأساليب17. وأسباب هذه المساهمة ذات شقين. أولا ، المناورات الجسدية الروتينية التي ينطوي عليها إنشاء الثقافات والعناية بها بسيطة للغاية من الناحية المفاهيمية ولكن من الصعب إجراؤها بشكل صحيح دون التدريب العملي أو عرض الفيديو. ثانيا، تم وصف نوعين مختلفين عن طرق الاستزراع الموصوفة سابقا وهما مناسبان بشكل خاص للدراسات المختبرية والميدانية للاستجابات للضغوط البيئية مثل تحمض المحيطات، والتخثث، واستنفاد الأكسجين. أولها نظام استزراع منخفض الحجم (800 مل) مناسب لمعالجة الأس الهيدروجيني والأكسجين المذاب في مياه البحر عبر كميات صغيرة من الغازات الفقاعية ، والثاني هو نظام ميزوكوزم أكبر حجما (15 لتر) يمكن وضعه في الحقل ويسمح بالتبادل الحر لمياه البحر المحيطة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. المناورات الروتينية لإنشاء والحفاظ على مزارع اليرقات من C. fornicata

ملاحظة: تبدأ هذه الطريقة بوعاء جالون (3.8 لتر) من مياه البحر يحتوي على C. fornicata البالغة التي أطلقت للتو يرقات veliger الحضنة. يمكن جمع البالغين ميدانيا أو الحصول عليها من مورد مذكور في جدول المواد. البالغون هم خنثى بروتاندروس يعيشون في مداخن التزاوج مع إناث حاضنة لاطئة في قاع المكدس. لا تفتت أكوام الكبار. تم وصف موسمية التكاثر وطرق تكييف البالغين للتفريخ خارج الموسمسابقا 17. من الأفضل جمع اليرقات في غضون 2-3 ساعات بعد إطلاقها عندما تكون سلبية بقوة وستركز بالقرب من سطح الجرة.

  1. اصنع غربالا عن طريق قطع الجزء السفلي من دورق بلاستيكي ثلاثي الزوايا سعة 400 مل يمكن التخلص منه واللصق على لوحة من شبكة نايلون 236 ميكرومتر. لهذا الغرض وخاصة لبناء mesocosm (أدناه) ، استخدم غراء تذوب ساخنا تمت صياغته من أجل الالتصاق جيد بالبولي إيثيلين.
  2. قم بإزالة التهوية من الجرة البالغة واتركها لمدة 15-20 دقيقة حتى يستقر الحطام ويمكن لليرقات السباحة بسهولة إلى السطح.
  3. قم بسحب اليرقات من خلال أنبوب زجاجي قصير الطول (15-20 سم) من 5 مم مثبت في نهاية أنبوب حوض السمك البلاستيكي الناعم بطول 60-80 سم في الغربال المحضر أعلاه ، معلقا في دورق زجاجي سعة 600 مل بحيث تفيض مياه البحر الزائدة على الدورق الزجاجي بينما يتم الاحتفاظ باليرقات على الغربال. الحفاظ على الجزء السفلي من الغربال تحت الماء وتجنب تقطعت بهم السبل اليرقات.
  4. ارفع الغربال لفترة وجيزة من الدورق واستخدم زجاجة بخ من مياه البحر المفلترة (FSW) لشطف اليرقات في وعاء زجاجي من FSW بحجم مناسب للتلاعب به تحت مجهر تشريح منخفض الطاقة.
    ملاحظة: تزدهر يرقات C. fornicata في مياه البحر الطبيعية المفلترة بالقرب من 30 جزء في المليون من الملوحة أو مياه البحر الاصطناعية الفورية للمحيطات التي تصل إلى 32 جزء في الألف. الملوحة ، عند 20-25 درجة مئوية17،18. الترشيح عند < 1 ميكرومتر يكفي للقضاء على الطلائعيات الوبائية الملوثة التي يمكن أن تسبب مشاكل في الثقافات المختبرية.
  5. قم بنقل وحساب العدد المطلوب من اليرقات يدويا في جرة استزراع باستخدام ماصة باستور. للحصول على أفضل النتائج، استخدم حجم مزرعة 1 يرقة/5 مل لبكتيريا C. fornicata. عد اليرقات وتجنب إغراء تقدير الأعداد.
  6. تغذية اليرقات بالحصة المرغوبة من الطحالب الدقيقة عند بدء الاستزراع واستبدال الطحالب الدقيقة كل يوم عند استبدال مياه الاستزراع.
    ملاحظة: اتباع نظام غذائي من 1 × 105 خلايا / مل Isochrysis galbana (سلالة T-ISO) هو نظام غذائي قياسي جيد ينتج عنه معدلات نمو معملية شبه قصوى. تم توفير الحصص الغذائية وطرق ثقافة T-ISO في منشور سابق17.
  7. قم بتغيير ماء الاستزراع كل يومين عن طريق سكب محتويات المستنبتة في غربال داخل دورق ، كما في الخطوة 1.3 أعلاه. ارفع الغربال واستخدم زجاجة بخ من FSW لشطف اليرقات في جرة استزراع من FSW الطازج مع طعام جديد.
    ملاحظة: أفضل الممارسات هي فصل أي أواني زجاجية تستخدم في استزراع اليرقات وتجنب أي اتصال لتلك الأواني الزجاجية بالمثبتات أو أملاح المعادن الثقيلة القابلة للذوبان أو المنظفات. من الأفضل القيام بالتنظيف الروتيني باستخدام عجينة من صودا الخبز (NaHCO3) ووسادة تنظيف من النايلون ، بينما يمكن إزالة الرواسب المعدنية بغسل حمض خفيف في الخل الأبيض أو حمض الهيدروكلوريك المخفف.

2. بناء مزارع جيدة التهوية ليرقات C. fornicata

ملاحظة: يحتوي الجرة الزجاجية الموصى بها (جدول المواد) على غطاء من مادة البولي بروبيلين ، وهو خامل لمياه البحر وله سمك مناسب لتثبيت مداخل الأنابيب الشائكة لتيار غاز التهوية.

  1. قم بحفر فتحتين مقاس 5 مم في غطاء كل جرة ثقافة (بما في ذلك البطانة الداخلية للغطاء) ، كل منهما على بعد حوالي 1.5 سم من الحافة ومقابل بعضهما البعض. (مثقاب ميكانيكي إمبراطوري مقاس 13/64 بوصة أو # 7 ASME قياسي سيجعل أيضا فتحة خلوص مناسبة).
  2. قم بتركيب محول أنابيب نايلون ملولب 1/8 بوصة × 10-32 في كل فتحة ، باستخدام صامولة نايلون 10-32 ، مع شوكة الأنبوب على السطح الخارجي للغطاء.
  3. ضع القليل من مانع التسرب المطاطي السيليكوني على فتحة الجزء الداخلي الملولب لأحد محولات الأنابيب وادفع أنبوب البولي إيثيلين بطول 20 سم من 2 مم (القطر الخارجي) عبر الفتحة من الداخل بحيث يبرز بضعة مم خارج الفتحة الخارجية لشوكة الأنبوب.
  4. سيحتوي الأنبوب الآن على سدادة صغيرة من مادة مانعة للتسرب في نهاية الحوض تبرز من خلال شوكة الأنبوب ، لكن الأنابيب الشفافة ستكون مرئية بعد نهاية الشوكة مباشرة. دع المادة المانعة للتسرب تعالج ، ثم قم بقص الطرف البارز لأنبوب البولي إيثيلين بحيث يكون متدفقا مع نهاية شوكة الأنبوب.
  5. املأ جرة الاستزراع ب FSW في حدود 1 سم من الكتف في الجزء العلوي من الجرة ، وقم بربط الغطاء لأسفل ، وقم بتوصيل هواء التهوية أو إمداد مزيج الغاز التجريبي بشوكة الأنبوب التي تحمل أنبوب تهوية البولي إيثيلين. قم بقص طول أنبوب التهوية بحيث تقع نهايته بدقة في أسفل الجرة.
  6. اضبط تدفق الهواء أو مزيج الغاز للتهوية لإنتاج تيار بطيء من الفقاعات (الشكل 1). استخدم مضخة هواء حوض السمك مع صمامات عصابة حوض السمك الشائعة لتزويد التهوية بالهواء المحيط أو استخدم وحدات التحكم في التدفق الشامل لخلطات غازات الغلاف الجوي التجريبية الأخرى14.

3. بناء مستزرع ميزوكوزم قابل للنشر الميداني ليرقات C. fornicata

  1. قطع 4 فتحات مستطيلة متباعدة بشكل متساو ، كل منها 25 سم × 14.5 سم ، في جوانب دلو قياسي من البولي إيثيلين سعة 7 جالون. ضع الجزء السفلي من كل فتحة على بعد حوالي 3.5 سم من الجزء السفلي الداخلي للدلو (الشكل 2 أ). يعتبر منشار السيف الكهربائي المحمول باليد بشفرة ذات أسنان دقيقة مثاليا لهذا الغرض. احتفظ بقطع النفايات المقطوعة وقم بتقطيعها بالطول إلى شرائح بعرض 2 سم باستخدام منشار طاولة.
  2. قم بقطع 4 ألواح من شبكة نايلون 236 ميكرومتر ، كل منها لا يقل عن 30 سم × 20 سم ، وذلك لتداخل بشكل مريح (بمقدار 2 سم على الأقل) فتحات القطع في الجرافة. قم بتأمين حافة واحدة من اللوحة الشبكية مؤقتا على حافة طويلة من الفتحة باستخدام مشابك زنبركية صغيرة أو مشابك غسيل.
  3. قم بلصق حافة اللوحة الشبكية بفتحة الجرافة باستخدام غراء تذوب ساخن مصمم للبولي إيثيلين. بمجرد تثبيت الحافة الأولى ، قم بلصق الحواف الأخرى مع الحفاظ على التوتر للحصول على سطح مشدود على اللوحة الشبكية.
  4. قم بقص أطوال شرائط قطع نفايات الجرافة من الخطوة 3.1 ، لعمل شرائط تقوية لتغطية المنطقة الملصقة بدقة حيث تتداخل الألواح الشبكية مع فتحات الجرافة. اضغط على كل شريط تغطية في مكانه بكمية كبيرة من الغراء الذائب الساخن ، واعمل بسرعة لوضع كل شريط في مكانه قبل أن يصلب الغراء.
  5. قم بتأمين نهاية كل شريط باستخدام برشام ستار من النايلون مثبت من خارج الجرافة. تقليم الغراء الزائد وشبكة من الحواف الخارجية لشرائط التسليح بسكين الحلاقة فائدة.
    ملاحظة: يتطلب كل برشام فتحة تجريبية مقاس 15/64 بوصة. تظهر الأجزاء الداخلية (العمياء) من المسامير داخل الميزوكوزم النهائي في الشكل 2 ب.
  6. انشر mesocosm في رف عائم يحمل الجزء العلوي من الدلو فوق الماء جيدا (الشكل 2C). الرف العائم الموضح مصنوع من شرائح 30 سم من أنابيب PVC 2 بوصة Schedule 40 ، مثبتة مع وصلات الكوع ونقطة الإنطلاق لإنشاء هيكل محكم الإغلاق يمكنه استيعاب صف من 4 mesocosms مكررة.
  7. اعتمادا على الظروف المحلية ، قد تصبح الألواح الشبكية فاسدة في غضون 1-2 أيام ، بطريقة تعيق تبادل مياه البحر عبر الميزوكوزم. إلى الحد الذي يحدث فيه هذا ، انقل اليرقات إلى ميزوكوزم نظيف طازج عن طريق سحب الميزوكوزم الملوث 2/3من الماء والإنقاذ بشكل متكرر من قاعه إلى الميزوكوزم الطازج باستخدام إبريق سعة 2 لتر.
  8. قم بإجراء 20-25 تكرارا لنقل معظم اليرقات ، أو حتى لا يتم ملاحظة اليرقات في الميزوكوزم الملوث. نظف الميزوكوزم الملوث عن طريق فرك الألواح الشبكية برفق باستخدام إسفنجة ناعمة محملة بعجينة من صودا الخبز (NaHCO3) وشطفها بماء الصنبور.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

تم قياس نمو اليرقات واكتساب الكفاءة للتحول في 4 تكرارات متزامنة من 800 مل من المستنبتات المهواة ، كل منها يحتوي على 160 يرقة ، مشتقة من مجموعة شقيقة من اليرقات التي فقست من كتلة بيضة واحدة والتي تم تغذيتها Isochrysis galbana بكثافة 1 × 105 خلايا / مل. كان الرقم الهيدروجيني 7.9-8.0 ، وكانت درجة الحرارة 20-21 درجة مئوية ، وكانت الملوحة 30-31 جزء في الألف. كما تم تحديد النمو والتحول مع مجموعة شقيقة مختلفة من اليرقات في تجربة واحدة من 15 L mesocosm تحتوي على 600 يرقة ، تم نشرها في خليج Buzzards ، MA ، الو...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

على الرغم من أن يرقات C. fornicata سهلة نسبيا للاستزراع مقارنة باليرقات البحرية الأخرى ذات التغذية العوالق، إلا أن الاهتمام بأساسيات ممارسة الاستزراع الجيد لا يزال ضروريا17،19. يجب أن تبدأ اليرقات السليمة في التغذية مباشرة بعد الفقس. يمكن التحقق من ذلك بسهولة في اليوم التالي للفقس من خلال مراقبة أحشائهم الكاملة ، المليئة بخلايا الطحالب ، باستخدام مجهر تشريح مع إضاءة متحولة. يجب أن تظل أصداف اليرقات السليمة نظيفة ومشرقة وخالية من التلوث المرئي من قبل الطل...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

لا يوجد تضارب في المصالح للإبلاغ عنه.

شكر وتقدير

تم دعم التطوير الأولي لنظام الاستزراع منخفض التهوية جزئيا من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم (CRI-OA-1416690 إلى كلية ديكنسون). تفضلت الدكتورة لورين مولينو بتوفير مرافق المختبرات في معهد وودز هول لعلوم المحيطات ، حيث تم جمع البيانات المقدمة لهذا النظام (الشكل 4).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
دلو ، بولي إيثيلين ، 7 جالونأمريكي بلاستيك16916للعالم
المتوسط < em>Crepidula fornicata < / em>المختبر البيولوجي البحري ، مركز الموارد البحرية760ساخن للبالغين
، إنفينيتي سوبرتاك 500Hotmelt.comإنفينيتي IM-SUPERTAC-500-12-1LBجيد لربط جرة البولي إيثيلين
، الزجاج ، 32 أونصة ، مع غطاء من مادة البولي بروبيلينUlineS-19316P-Wل 800 مل الثقافات جيدة التهوية
شبكة Nitex ، 236 & مديناميكية أكوا توريد المحدودةNTX236-136للجوز الوسيط
، سداسي ، نايلون ، 10-32 خيطا1004554441هوم ديبوتلتثبيت الأنابيب الأشواك
المسامير ، النايلون ، المكفوفين ، قطر 15/64 بوصة ، نطاق قبضة 5/32 بوصة -5/16 بوصة ، حزمة من 8قطع غيار سيارات NAPABK 66528444 عبوات مطلوبة لكل عالم متوسط
شوكة الأنابيب 1/8 بوصة × 10-32 خيطأمريكي بلاستيك655932 مطلوب لكل جرة
ثقافةأنابيب ، بولي إيثيلين ، 2.08 مم ODFisher Scientific14-170-11Gلتهوية تيار الغاز داخل جرة الاستزراع
أنابيب ، Tygon ، 1/8 بوصة × 3 / 16 بوصة × 1/32 بوصةيناسب البلاستيك الأمريكي57810الانتقادات اللاذعة لتهوية الثقافات
غراء تذوب

المراجع

  1. Conklin, E. G. The embryology of Crepidula: a contribution to the cell lineage and early development of some marine gastropods. Gasteropods. , (1897).
  2. Henry, J. J., Collin, R., Perry, K. J. The slipper snail, Crepidula: an emerging lophotrochozoan model system. Biol Bull. 218 (3), 211-229 (2010).
  3. Lyons, D. C., Henry, J. Q. Slipper snail tales: how Crepidula fornicata and Crepidula atrasolea became model molluscs. Curr Top Dev Biol. 147, 375-399 (2022).
  4. Blanchard, M. Spread of the slipper limpet Crepidula fornicata (L. 1758) in Europe. Current state and consequences. ScientiaMarina. 61 (Suppl 2), 109-118 (1997).
  5. Beninger, P., Valdizan, A., Decottigies, P., Cognie, B. Field reproductive dynamics of the invasive slipper limpet, Crepidula fornicata. J Exp Mar Biol Ecol. 390 (2), 179-187 (2010).
  6. Pechenik, J. A. The relationship between temperature, growth rate, and duration of planktonic life for larvae of the gastropod Crepidula fornicata (L.). J Exp Mar Biol Ecol. 74 (3), 241-257 (1984).
  7. Pechenik, J. A. Latent effects: surprising consequences of embryonic and larval experience on life after metamorphosis. Evol Ecol Marine Invertebrate Larvae. , 208-225 (2018).
  8. Pechenik, J. A., Gee, C. C. Onset of metamorphic competence in larvae of the gastropod Crepidula fornicata (L.), judged by a natural and an artificial cue. J Exp Mar Biol Ecol. 167 (1), 59-72 (1993).
  9. Taris, M., Comtet, T., Viard, F. Inhibitory function of nitric oxide on the onset of metamorphosis in competent larvae of Crepidula fornicata: A transcriptional perspective. Mar Genomics. 2 (3-4), 161-167 (2009).
  10. Penniman, J. R., Doll, M. K., Pires, A. Neural correlates of settlement in veliger larvae of the gastropod, Crepidula fornicata. Invertebrate Biol. 132 (1), 14-26 (2013).
  11. Meyer-Kaiser, K. S. Carryover effects of brooding conditions on larvae in the slipper limpet Crepidula fornicata. Mar Ecol Prog Ser. 643, 87-97 (2020).
  12. Noisette, F., et al. Does encapsulation protect embryos from the effects of ocean acidification? The example of Crepidula fornicata. PLoS One. 9 (3), e93021(2014).
  13. Kriefall, N. G., Pechenik, J. A., Pires, A., Davies, S. W. Resilience of Atlantic slippersnail Crepidula fornicata larvae in the face of severe coastal acidification. Front in Mar Sci. 5, 312(2018).
  14. Bogan, S. N., McMahon, J. B., Pechenik, J. A., Pires, A. Legacy of multiple stressors: Responses of gastropod larvae and juveniles to ocean acidification and nutrition. Biol Bull. 236 (3), 159-173 (2019).
  15. Pechenik, J. A., et al. Impact of ocean acidification on growth, onset of competence, and perception of cues for metamorphosis in larvae of the slippershell snail, Crepidula fornicata. Mar Biol. 166, 128(2019).
  16. Reyes, C. L., et al. The marine gastropod Crepidula fornicata remains resilient to ocean acidification across two life history stages. Front Physiol. 12, 702864(2021).
  17. Pires, A. Artificial seawater culture of the gastropod Crepidula fornicata for studies of larval settlement and metamorphosis. In: Carroll, D., Stricker, S. (eds) Developmental biology of the sea urchin and other marine invertebrates. Methods Mol Biol. 1128, 35-44 (2014).
  18. Bashevkin, S. M., Pechenik, J. A. The interactive influence of temperature and salinity on larval and juvenile growth in the gastropod Crepidula fornicata (L.). J Exp Mar Biol Ecol. 470, 78-91 (2015).
  19. Strathmann, M. F. Reproduction and Development of Marine Invertebrates of the Northern Pacific Coast: Data and Methods for the Study of Eggs, Embryos, and Larvae. , University of Washington Press. (1987).
  20. Clark, H. R., Gobler, C. J. Diurnal fluctuations in CO2 and dissolved oxygen concentrations do not provide a refuge from hypoxia and acidification for early-life-stage bivalves. Mar Ecol Prog Ser. 558, 43114(2016).
  21. Gobler, C. J., Baumann, H. Hypoxia and acidification in ocean ecosystems: coupled dynamics and effects on marine life. Biol Lett. 12 (5), 20150976(2016).
  22. Pechenik, J. A., Hilbish, T. J., Eyster, L. S., Marshall, D. Relationship between larval and juvenile growth rates in two marine gastropods, Crepidula plana and C. fornicata. Mar Biol. 125, 119-127 (1996).
  23. Padilla, D. K., McCann, M. J., McCarty Glenn, M., Hooks, A. P., Shumway, S. E. Effect of food on metamorphic competence in the model system Crepidula fornicata. Biol Bull. 227 (3), 242-251 (2014).
  24. Wallace, R. B., Baumann, H., Grear, J. S., Aller, R. C., Gobler, C. J. Coastal ocean acidification: the other eutrophication problem. Estuarine, Coast Shelf Sci. 148, 1-13 (2014).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

يرقات حلزون السور (Crepidula fornicata)استزراع اليرقاتالميزوكوزم المختبريالتطور اليرقيالكفاءة التحوليةنمو الصدفةمياه البحر المفلترةالتغذية بالطحالب الدقيقةالميزوكوزم الميدانياستقرار اليرقات
الاستزراع المختبري والميداني ليرقات النعال ، Crepidula fornicata
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.