هذا تقرير عن نموذج تجريبي لالتهاب ما حول الزرع الناجم عن الأربطة في الفئران. نحن نصف جميع الخطوات الجراحية ، من الإدارة قبل وبعد الجراحة للحيوانات ، والخلع ، ووضع الزرع ، والتهاب ما حول الزرع الناجم عن الرباط.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
هذا تقرير عن نموذج تجريبي لالتهاب ما حول الزرع الناجم عن الأربطة في الفئران. نحن نصف جميع الخطوات الجراحية ، من الإدارة قبل وبعد الجراحة للحيوانات ، والخلع ، ووضع الزرع ، والتهاب ما حول الزرع الناجم عن الرباط.
زراعة الأسنان لديها نسبة عالية من النجاح والبقاء على قيد الحياة. ومع ذلك ، فإن المضاعفات مثل التهاب ما حول الزرع (PI) يصعب علاجها للغاية. يتميز PI بالتهاب في الأنسجة حول زراعة الأسنان مع فقدان تدريجي للعظام الداعمة. لتحسين طول عمر زراعة الأسنان من حيث الصحة والوظائف ، من الأهمية بمكان فهم الفيزيولوجيا المرضية حول الزرع. في هذا الصدد ، أثبت استخدام نماذج الفئران في البحث فوائد واضحة في إعادة إنشاء الظروف السريرية. تهدف هذه الدراسة إلى وصف نموذج تجريبي لالتهاب ما حول الزرع الناجم عن الأربطة في الفئران وتحديد ما إذا كانت هناك فعالية في إحداث هذا المرض ، بالنظر إلى التغيرات الملحوظة في العظام والأنسجة. يستوعب الحث التجريبي حول الزرع الخطوات التالية: قلع الأسنان ، ووضع الزرع ، و PI المستحث بالأربطة. تم تقسيم عينة من ثمانية عشر فأرا من ذكور C57BL / 6J البالغة من العمر 3 أسابيع إلى مجموعتين ، الرباط (N = 9) والتحكم غير الرباطي (N = 9). تم إجراء تقييم العوامل السريرية والشعاعية والنسيجية. أظهرت مجموعة الأربطة فقدانا أعلى بكثير للعظام ، وزيادة وذمة الأنسجة الرخوة ، والهجرة الظهارية القمية مقارنة بالمجموعة غير الأربطة. وخلص إلى أن هذا النموذج قبل السريري يمكن أن يحفز بنجاح التهاب ما حول الزرع في الفئران.
تنتشر زراعة الأسنان بشكل متزايد كخيار مرغوب فيه لاستبدال الأسنان المفقودة1. من المتوقع أن يزداد انتشار زراعة الأسنان بين السكان البالغين في الولايات المتحدة بنسبة تصل إلى 23٪ بحلول عام 20262. استنادا إلى تقرير تحليل السوق الصادر عن Grand View Research (2022) ، كان من المتوقع أن يصل حجم السوق العالمي لزراعة الأسنان إلى حوالي 4.6 مليار دولار أمريكي في عام 2022. علاوة على ذلك ، من المتوقع أن تظهر معدل نمو سنوي ثابت يبلغ حوالي 10٪ حتى عام 20303. لسوء الحظ ، يمكن أن يؤدي استخدام زراعة الأسنان إلى مضاعفات ، مثل التهاب ما حول الزرع. تم تعريف التهاب ما حول الزرع على أنه حالة يسببها الغشاء الحيوي تتميز بالتهاب في الغشاء المخاطي حول الزرع وفقدان تدريجي لاحق للعظام الداعمة4.
وجدت مراجعة منهجية أن متوسط انتشار التهاب ما حول الزرع كان 19.53٪ (فاصل الثقة 95٪ [CI] ، 12.87 إلى 26.19٪) على مستوى المريض و 12.53٪ (95٪ CI 11.67 إلى 13.39٪) على مستوىالزرع 5. يمثل التهاب ما حول الزرع صحة عامة متنامية ، بسبب زيادة فشل الزرع ، وبالتالي تكاليف العلاج الكبيرة6.
يعد فهم التسبب في التهاب ما حول الزرع أمرا بالغ الأهمية لتطوير نهج منظم لمنع ظهوره وتقدمه وزيادة طول عمر زراعة الأسنان من حيث الجماليات والوظيفة 7,8. بهذا المعنى ، أثبت استخدام نماذج الفئران في أبحاث طب الأسنان أنه مفيد ، بالنظر إلى أن الفئران تشترك في أكثر من 95٪ من جيناتها مع البشر 9,10 ، وعدد قواعد البيانات الجينية المتاحة على الإنترنت ، والقدرة على إعادة إنتاج السيناريوهات السريرية11. تسمح جميع المزايا الموصوفة بتشريح الآليات الجينية في الأمراض المختلفة12 ، والإقامة والإدارة التي يمكن الوصول إليها ، والأجسام المضادة المتاحة على نطاق واسع كألواح بشرية ، بما يتجاوز توافر التعديل الجيني (على سبيل المثال ، الضربة القاضية والإفراط في التعبير) لتقييم الأنسجة الالتهابية ورسم خرائط المرض13. على الرغم من أنه مفيد ، إلا أن هناك القليل من المنشورات التي تتناول التهاب ما حول الزرع في الفئران. ويرجع ذلك إلى التحديات المنهجية ، من بين أمور أخرى ، بما في ذلك صعوبة الحصول على غرسات صغيرة أو تركيبها.
لتطوير التهاب ما حول الزرع في الفئران ، تم وصف العديد من البروتوكولات ، مثل التهاب ما حول الزرع الناجم عن الرباط ، أو التهاب ما حول الزرع الناجم عن البكتيريا14 ، أو التهاب ما حول الزرع الناجم عن عديد السكاريد الشحمي (LPS)15 ، أو الجمع بين LPS + التهاب ما حول الزرع الناجم عن الرباط16. هنا ، سنركز على نموذج الرباط لأنه الطريقة الأكثر قبولا على نطاق واسع للحث على التهاب دواعم السن17،18،19 ، ومؤخرا ، التهاب ما حول الزرع20،21. يحفز الرباط الموجود حول الغرسات في وضع تحت المخاطية تراكم البلاك ، وبالتالي التهاب الأنسجة. لذلك ، يعتمد تطوير هذا النهج على الإشارة إلى تقنية التكلفة والفائدة القابلة للتطبيق للتحقيقات قبل السريرية على الأمراض المحيطة بالزرع. تهدف هذه الدراسة إلى وصف نموذج تجريبي لالتهاب ما حول الزرع الناجم عن الأربطة في الفئران وتحديد ما إذا كانت هناك فعالية في إحداث هذا المرض بالنظر إلى التغيرات الملحوظة في العظام والأنسجة.
الهدف العام من هذه المقالة هو الإبلاغ عن البروتوكول المطبق للحث على التهاب ما حول الزرع في الفئران عن طريق الرباط ومراقبة فعاليته من خلال تقييم الأنسجة وفقدان العظام حول الغرسات.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تمت الموافقة على الإجراءات التي تنطوي على مواضيع حيوانية من قبل لجنة أبحاث التابعة للمستشار بجامعة كاليفورنيا ، لوس أنجلوس (رقم بروتوكول ARC 2002-125) ، والبحوث الحيوانية: الإبلاغ عن التجارب في الجسم الحي (ARRIVE) 22. لهذه الطريقة ، تم استخدام ثمانية عشر فأرا من ذكور C57BL / 6J عمرها 3 أسابيع وخضعوا لقلع الأسنان ووضع الزرع وتحريض التهاب ما حول الزرع. تم تنفيذ جميع إجراءات طب الأسنان تحت التكبير المجهري 10× وتم تنفيذها بواسطة مشغلين مدربين ومعايرين (الشكل 1 أ).
1. خطوات ما قبل الاستخراج

الشكل 1: التكيفات العملية: (أ) التكبير المجهري. (ب) نظام تخدير استنشاقي مكيف وتثبيت لفتح الفم. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
2. قلع الأسنان

الشكل 2: تسلسل الاستخراج الأولي: (أ ، ب) منطقة الفك العلوي مع الأسنان المولية 1 و 2 واستخدام مستكشف الأسنان للارتفاع والخلع. (ج) استخدام ملقط الأطراف والمستكشف للخلع وإزالة الأسنان. د: الإرقاء. (ه، واو) المظهر السنخي بعد الاستخراج. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
3. وضع الزرع

الشكل 3: تسلسل وضع الغرسة: (أ) شق باستخدام شفرة 15c متصلة بالمقبض. (ب) اللوحات كاملة السماكة باستخدام مستكشف الأسنان # 5. (ج) قطع العظم باستخدام مثقاب يدوي دقيق من الكربيد 0.3 مم متصل ب Pin Vise. د: زراعة الأسنان من التيتانيوم. (ه، واو) دعم الزرع وحامل الغرسة. (G- I) وضع الزرع باستخدام حركة الشد في اتجاه عقارب الساعة. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
4. تحريض التهاب ما حول الزرع

الشكل 4: تسلسل التهاب ما حول الزرع الناجم عن الرباط. (أ-د) الرباط الحريري (6.0) يوضع حول رأس الزرع. (E-G) إغلاق العقدة. (ح) قطع الأربطة. (ط) المثول النهائي. الصور السريرية التي تم الحصول عليها من الحية تحت التخدير. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
5. التضحية
6. التصوير المقطعي الجزئي (μCT)
7. التحليل الإحصائي
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
لهذه الطريقة ، تم استخدام ثمانية عشر فأرا من ذكور C57BL / 6J عمرها 3 أسابيع وخضعوا لقلع الأسنان ووضع الزرع وتحريض التهاب ما حول الزرع. كان هناك تسعة لكل مجموعة والتي كانت ذات دلالة إحصائية ، مع الأخذ في الاعتبار أن فقدان العظام الخطي يحقق 80٪ قوة ، وانحراف معياري 15٪ (σ) وفاصل ثقة 95٪ (α = 0.05). تم تغذية الفئران بنظام غذائي ناعم خلال التجربة. تلقت تسعة فئران رباطا (مجموعة تجريبية لالتهاب حوائط الزرع الناجم عن الرباط) ، ولم تتلق تسعة فئران الرباط (المجموعة الضابطة).
معدل نجاح ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يقدم هذا البروتوكول تقريرا وصفيا عن الإجراءات الجراحية لتحريض التهاب ما حول الزرع باستخدام نموذج الرباط في الفئران. العمل مع الفئران له مزايا ، مثل كونه فعالا من حيث التكلفة ، وتوافر مجموعة وراثية واسعة بالنظر إلى العديد من الخلفيات23 من بين جوانب أخرى24,25. على مر السنين ، نجحت العديد من الدراسات في استخدام الفئران في المجالات الطبية وطب الأسنان ، بما في ذلك التهاب ما حول الزرع26،27
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
تم دعم هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة / DE031431 NIDCR. نود أن نشكر المختبر الأساسي لعلم الأمراض الانتقالي في جامعة كاليفورنيا في لوس أنجلوس للمساعدة في إعداد الأقسام النسيجية منزوعة الكلس.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| # 5 مستكشف الأسنان | هو فريدي ، شيكاغو ، إلينوي | 392-0911 ؛ | خلع الأسنان |
| شفرة 15c ومشرط جراحي | Henry Schein Inc. ، Melville ، NY | 1126186 | شق الأنسجة |
| 6-0 أربطة حريرية | فيشر Scientific ، هامبتون ، نيو هامبشاير | NC9201232 | الرباط |
| Amoxicillin 50 & mu ؛ جم / مل | Zoetis ، سان دييغو ، CA | TS / DRUGS / 57/2003 | تعليق فموي |
| لحم الخنزير المقدد لينة النظام الغذائي | الحيوي Serve & reg ؛ ، فرينشتاون ، نيوجيرسي | 14-726-701-C57BL | |
| / 6J ذكور الفئران | مختبرات جاكسون ، بار هاربور ، ME ، الولايات المتحدة الأمريكية | 000664 | العمر: برنامج CTAn البالغ من العمر 3 أسابيع |
| V.1.16 Bruker ، Billerica ، | MA-التحليل | الحجمي | |
| برنامج دولفين | Navantis، تورنتو ، كاليفورنيا | - | تحليل العظام الخطي |
| حامل الزرع & نصيحة | D. P. Machining Inc., La Verne, CA | منتج فريد من نوعه | حامل الزرع |
| دعم الزرع | D. P. Machining Inc., La Verne, CA | منتج فريد من نوعه | التقاط الغرسة |
| إيزوفلوران | Vet One ، Boise ، ID | NDC13985-528-60 | التخدير الاستنشاقي |
| Micro-CT scan 1172 | SkyScan ، Kontich ، بلجيكا | - | & التصوير المقطعي المحوسب |
| Nrecon Software | Bruker Corporation ، Billerica ، | MA-Images | Reconstruction |
| Ø ؛ 0.3 مم - L 2.5 مم مثاقب دقيقة ؛ | أبو الهول ، هوفمان إستيتس ، IL | ART. 50699 ؛ | قطع العظم |
| Ø 0.5 مم - L 1.0mm غرسات التيتانيوم | D. P. Machining Inc. ، La Verne ، CA | منتج فريد | من نوعه - |
| زيوت تشحيم العيون | Apexa ، أونتاريو ، كاليفورنيا | NDC13985-600-03 | الدموع الاصطناعية |
| دبوس ملزمة | الأدوات العامة ، Secaucus ، NJ | 90 | قطع العظم |
| Rimadyl 50mg / ml | Zoetis ، سان دييغو ، كاليفورنيا | 4019449 | مضاد للالتهابات |
| يميل | Dynarex ، Glendale ، AZ | 4304-1 | |
| ملقط طرف | أدوات العلوم الدقيقة ، فوستر سيتي ، كاليفورنيا | 11071-10 | خلع الأسنان |
| ملقط ربط | أدوات العلوم الدقيقة ، فوستر سيتي ، كاليفورنيا | 18025-10 | وضع الرباط |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.