نقدم بروتوكولا لإنشاء نموذج أكسجة غشاء مستيقظ خارج الجسم على المدى الطويل (ECMO) في الأغنام. يتم إيلاء اهتمام خاص لإدارة وتقييم نظام التخثر أثناء نموذج ECMO.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
نقدم بروتوكولا لإنشاء نموذج أكسجة غشاء مستيقظ خارج الجسم على المدى الطويل (ECMO) في الأغنام. يتم إيلاء اهتمام خاص لإدارة وتقييم نظام التخثر أثناء نموذج ECMO.
هدفت هذه الدراسة إلى التحقيق في آثار أكسجة الغشاء خارج الجسم المستيقظة على المدى الطويل (ECMO) على نظام التخثر في نموذج الأغنام. تم تضمين ما مجموعه عشرة أغنام سليمة في الدراسة ، مع 5 أغنام في كل مجموعة. في مجموعة ECMO الشرياني الوريدي (V-A ECMO) ، تم إجراء القنية في الشريان السباتي الأيمن والوريد الوداجي الخارجي الأيمن. في مجموعة ECMO الوريدية (V-V ECMO) ، تم استخدام قسطرة مزدوجة التجويف لإدخالها في الوريد الوداجي الخارجي الأيمن. بعد بدء ECMO ، تم استرداد الأغنام من التخدير وظلت مستيقظة لمدة 7 أيام. تم تحديد هدف وقت التخثر المنشط المستهدف (ACT) عند 220-250 ثانية. في كلتا المجموعتين ، تذبذب ACT الفعلي حوالي 250 ثانية مع زيادة جرعة الهيبارين تدريجيا ، لتصل إلى ما يقرب من 60 وحدة دولية / كجم / دقيقة في نهاية التجارب. علاوة على ذلك ، كانت قيم وقت الثرومبوبلاستين الجزئي المنشط (APTT) ووقت الثرومبين (TT) أعلى بشكل ملحوظ في مجموعة V-A ECMO مقارنة بمجموعة V-V ECMO ، على الرغم من تلقي نفس الجرعات من الهيبارين. على الرغم من أن نتائج الاختبارات المعملية تذبذبت ضمن نطاق طبيعي ومعقول ، فقد لوحظت بؤر احتشاء في الكلى في كلتا المجموعتين في نهاية الدراسة.
يعمل أكسجة الغشاء خارج الجسم (ECMO) كتدخل منقذ للحياة ، حيث يوفر الدعم القلبي الرئوي للمرضى المصابين بأمراض خطيرة. يتم تصنيفه إلى شكلين أساسيين: ECMO الشرياني الوريدي (V-A ECMO) و ECMO الوريدي الوريدي (V-V ECMO) 1،2. يتم استخدام V-A ECMO للمرضى الذين يعانون من فشل الدورة الدموية ، بينما يفضل V-V ECMO لأولئك الذين يعانون من فشل في الجهاز التنفسي ولكن بدون خلل وظيفي شديد في القلب والأوعيةالدموية 3،4.
تجلط الدم والنزيف من المضاعفات السائدة لدى مرضى ECMO5. تعرض دائرة ECMO الدم للأسطح الاصطناعية ، مما يؤدي إلى استجابات تخثر معقدة6. يمكن أن تؤدي هذه العمليات إلى تلف البطانة واضطرابات دوران الأوعية الدقيقة ، مما يؤدي إلى خلل وظيفي لاحق في الأعضاءالحيوية 7،8. وبالتالي ، تعتبر الإدارة الفعالة لمضادات التخثر الجهازية أمرا بالغ الأهمية لمرضى ECMO. على الرغم من ذلك ، لا يزال هناك نقص في البينات لتوجيه استراتيجيات مضادات التخثر في مختلف البيئات السريرية المتعلقة بالإيكثرات الاقتصادية.
يمكن أن يوفر إنشاء نموذج حيواني مستقر للخسائر غير المرغوب فيها في الجسم رؤى حول تأثير ECMO على الجسم ، مما يساهم بشكل كبير في تحسين استراتيجيات إدارة ECMO ، والحد من المضاعفات المرتبطة بالخارج بالغ في الجسم ، وتحسين نتائج المرضى في الممارسة السريرية. الكبيرة ، مثل الأغنام والخنازير ، هي الخيارات الأساسية لإنشاء نماذج ECMO نظرا لمعاييرها الفسيولوجية التي تشبه إلى حد كبير تلك الخاصة بالبشر9،10. ومع ذلك ، كان لنماذج ECMO الحيوانية الكبيرة السابقة وقت صيانة أقل من 24 ساعة ، مما يجعل من الصعب إجراء تقييم شامل لتأثير ECMO على نظام التخثر11. لذلك ، هناك حاجة لإنشاء نماذج حيوانية كبيرة طويلة الأجل ECMO لاستكشاف الآليات الفيزيولوجية المرضية للخيول غير النقدية والنقدية. يمكن أن يوفر استخدام النماذج الحيوانية الكبيرة طويلة الأجل للتحقيق في آثار ECMO على نظام التخثر دليلا أكثر قوة على الممارسة السريرية.
تهدف هذه الدراسة إلى إنشاء نموذج ECMO طويل الأمد (7 أيام) في الأغنام السليمة. ينصب التركيز الرئيسي لإنشاء النموذج بأكمله وتقييمه على إدارة مضادات التخثر.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
حصل هذا البروتوكول التجريبي على موافقة من اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدامه في مستشفى فواي (رقم 0101-2-20-HX (X)). التزمت جميع الإجراءات بالمبادئ التوجيهية الموضحة في دليل المعاهد الوطنية للصحة لاستخدام المختبر ورعايتها. أجريت التجربة في مختبر بكين الرئيسي للأبحاث قبل السريرية والتقييم لمواد زراعة القلب والأوعية الدموية ، المركز التجريبي الحيواني التابع لمستشفى فواي (رقم التسجيل. CNAS LA0009). تم استخدام الأغنام السليمة التي استوفت معايير الحجر الصحي المطلوبة في المركز التجريبي للحيوان في مستشفى فواي في الدراسة. علاوة على ذلك ، اتبع هذا البحث إرشادات البحوث على: الإبلاغ عن تجارب In Vivo . تم إيواء ذكور الأغنام ذات الذيل الصغير بوزن يتراوح بين 50-65 كجم وتتراوح أعمارها بين 12 و 24 شهرا (انظر جدول المواد) في بيئة محددة خالية من مسببات الأمراض مع حرية الوصول إلى الطعام والماء لمدة أسبوع واحد على الأقل قبل الجراحة. تم تقسيم الأغنام عشوائيا إلى مجموعتين ، تتكون كل منهما من 5 أفراد: مجموعة ECMO الشرياني الوريدي (V-A ECMO) ومجموعة ECMO الوريدي (V-V ECMO). كان اختيار الأغنام السليمة مبررا بضرورة إجراء تقييم دقيق لآثار دعم ECMO على الكائن الحي. يتم سرد المعدات والكواشف المستخدمة في الدراسة في جدول المواد.
1. تحضير
2. القنية
3. بدء ECMO
4. إدارة ومراقبة ما بعد الجراحة
5. القتل الرحيم
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم تقييم ما مجموعه عشرة أغنام خلال التجربة بأكملها ، مع خمسة أغنام في كل مجموعة (الجدول 1). بعد بدء ECMO ، تعافت جميع الأغنام من التخدير وظلت مستيقظة لمدة 7 أيام. في كلتا المجموعتين ، تجاوز تدفق الأكسجين غير القابل للأمام 1.8 لتر / دقيقة. في مجموعة V-V ECMO ، تذبذب التدفق حوالي 1.8 لتر / دقيقة ، بينما في مجموعة V-A ECMO ، تراوح من 2.3 لتر / دقيقة إلى 1.8 لتر / دقيقة (الشكل 1 أ). ظلت العلامات الحيوية لكل خروف مستقرة. كان مستوى حمض اللاكتيك في الدم أقل من 1 مليمول / لتر بين 60...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تحدد هذه الدراسة إجراءات إنشاء نماذج قوية وطويلة الأجل للبقاء على قيد الحياة ل V-V و V-A ECMO في الأغنام. أظهرت جميع الباقية علامات حيوية مستقرة ، ولم تحدث أي نزيف حاد أو أحداث تخثر. ظل أداء تدفق الأكسجين والأكسجين في الأكسجين مستقرا ، مع عدم ملاحظة إصابات مرضية كبيرة. توفر الدراسة معلومات مفصلة عن إدارة مضادات التخثر.
تلعب إدارة مضادات التخثر دورا مهما في الرعاية المحيطة بالجراحة في ECMO. في البداية ، بناء على الدراسات السابقة ، تم تحديد ACT المستهدف في 180-2...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المؤلفون ليس لديهم ما يكشفون عنه.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| محلل ACT | Hemochron ، الولايات المتحدة الأمريكية | جونيور آلة | |
| Drager ، ألمانيا ؛ | الأولية | ||
| إدواردز لايف ساينس، الولايات المتحدة الأمريكية | 18-Fr | توفير إمكانية الوصول إلى الشريان لمحلل | |
| كيمياء الدم | مختبرات IDEXX، الولايات المتحدة الأمريكية . | Catalyst One | |
| Abbott ، الولايات المتحدة الأمريكية | Abbott i-STAT1 | ||
| Jiangsu STMed Technologies ، محرك | STM CP-24 | ||
| الصينية ووحدة التحكم | Jiangsu STMed Technologies ، محلل اختبار التخثر | OASSIST STM001 | |
| الصيني Beijing Successer Technology ، الصين | SF-8050 | ||
| محلل تعداد الدم الكامل | Siemens Healthcare ، ألمانيا | ADVIA 2120i | |
| مضخة الحقن الدقيقة ثنائية القناة | Zhejiang Smith Medical Instrument ، الصين | WZS-50F6 | |
| قسطرة ثنائية التجويف | MAQUET Avalon Elite ، ألمانيا | 23-Fr | توفير مدخلات العودة والصرف في الوريد الوداجي الخارجي الأيمن ل VV-ECMO |
| Flurbiprofen | Beijing Tide Pharmaceutical Co.، Ltd. ، الصين | 5 مل: 50 ملغ | |
| GraphPad البرمجيات | GraphPad ، الولايات المتحدة الأمريكية | GraphPad Prism v9.0 | التحليل الإحصائي |
| Heparin ؛ | شنغهاي شانغياو رقم 1 الكيمياء الحيوية الصيدلانية المحدودة ، الصين | 2 مل: 12500 وحدة دولية | |
| التردد الجراحة | الكهربائية COVIDIEN ، الولايات المتحدة الأمريكية | Force F | |
| جهاز مراقبة طبية متعدد المعلمات | فيليبس ، هولندا | MP60 | |
| ميدوس ، ألمانيا | Hilite 7000LT | ||
| ماكيت ، ألمانيا | BE-PLS 2050 | ||
| بروبوفول | شي an Libang Pharmaceutical Co. Ltd ، الصين | 20 مل: 0.2 جرام | |
| قسطرة وريدية مركزية أحادية التجويف | TuoRen ، الصين | 18Fr | إدراج في الشريان السباتي الأيسر لمراقبة ديناميكية الدم وأخذ عينات الدم. |
| ذيل صغير هان الأغنام | Jinyutongfeng التجارية والتجارة المحدودة ، الصين | الوزن: 50-65 كجم ، العمر: 12-24 شهرا | |
| القسطرة الوريدية المركزية ثلاثية التجويف | TuoRen ، الصين | 7Fr | إدراج في الوريد الوداجي الأيسر لإدارة السوائل عن طريق الوريد ، وحقن المخدرات ، وأخذ عينات الدم. |
| آلة الموجات فوق الصوتية | GE ، الولايات المتحدة الأمريكية | E9 | |
| القسطرة الوريدية | Edwards Lifescience ، الولايات المتحدة الأمريكية | 24-Fr | توفير وصول الصرف إلى الوريد ل VA-ECMO |
| Ventilator | Drager ، ألمانيا & nbsp ؛ | سافينا |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم نشر هذه المقالة
الفيديو قريباً