نقدم هنا بروتوكولا لتحديد طرق تربية الفئران وإجراءات التدريب على السباحة وبروتوكولات التمريض بعد التكاثر للفئران الحوامل بعد التدريب. يوفر هذا البروتوكول نموذجا حيوانيا لدراسة آثار ممارسة الأم أثناء الحمل على النسل وآلياته الأساسية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
نقدم هنا بروتوكولا لتحديد طرق تربية الفئران وإجراءات التدريب على السباحة وبروتوكولات التمريض بعد التكاثر للفئران الحوامل بعد التدريب. يوفر هذا البروتوكول نموذجا حيوانيا لدراسة آثار ممارسة الأم أثناء الحمل على النسل وآلياته الأساسية.
يسلط مفهوم الأصول التنموية للصحة والمرض الضوء على تأثير البيئات المبكرة على الأمراض المزمنة غير المعدية مثل السكري وأمراض القلب والأوعية الدموية والسرطان. بحثت الدراسات التي تستخدم النماذج الحيوانية في كيفية تأثير عوامل الأم مثل نقص التغذية والإفراط في التغذية والسمنة والتعرض للمواد الكيميائية أو نقص الأكسجة على نمو الجنين وصحة النسل ، مما يؤدي إلى مشاكل مثل انخفاض الوزن عند الولادة وارتفاع ضغط الدم وعسر شحميات الدم ومقاومة الأنسولين. ونظرا لتزايد انتشار زيادة الوزن والسمنة بين النساء في سن الإنجاب، فإن التدخلات الفعالة أمر بالغ الأهمية. برزت ممارسة الأم أثناء الحمل كتدخل رئيسي ، يفيد كل من الأم والنسل ويقلل من خطر الإصابة بالأمراض. تقارن هذه الدراسة الاختلافات بين ثلاثة نماذج تمرين على الفئران الحوامل: الجري الطوعي على العجلات ، وأجهزة المشي الآلية ، والسباحة. السباحة هي الخيار الأكثر فائدة بسبب مستويات شدتها الآمنة والخاضعة للرقابة. يفصل هذا البروتوكول طرق تربية الفئران ، والتدريب على السباحة أثناء الحمل ، وبروتوكولات التمريض بعد التكاثر. هذا النموذج ، المناسب لمختلف أنواع الفئران والفئران ، مفيد لدراسة فوائد تمرين الأم على صحة النسل والعافية بين الأجيال.
ظهر مفهوم الأصول التنموية للصحة والمرض (DOHaD) على مدى العقدين الماضيين ، والذي أظهر أن التأثيرات البيئية أثناء التطور المبكر تؤثر على خطر العمليات الفيزيولوجية المرضية اللاحقة المرتبطة بالأمراض المزمنة غير المعدية (NCD) ، وخاصة مرض السكري وأمراض القلب والأوعية الدموية وبعض أنواع السرطان1. خلال المرحلة الأكثر تجميلا من نمو الجنين ، حيث يتعرض النسل للبيئة داخل الرحم ، يعد التفاعل الجيني والبيئي والتروية الرحمية من العوامل الحاسمة لإعادة برمجة الجنين2. استخدمت الدراسات السابقة في الغالب نماذج حيوانية للتحقيق في الآثار الضارة ، مثل نقص التغذية لدى الأمهات ، أو الإفراط في التغذية ، أو السمنة أثناء الحمل ، والتعرض قبل الولادة للمواد الكيميائية أو نقص الأكسجة ، على نمو الجنين وتأثيرات النمط الظاهري طويلة المدى في النسل3. أدى ذلك إلى انخفاض الوزن عند الولادة والنمو اللاحق وأنتج آثارا ضارة على النسل ، بما في ذلك ارتفاع ضغط الدم وعسر شحميات الدم ومقاومة الأنسولين4. نظرا لأن معدل زيادة الوزن والسمنة يتزايد بسرعة بين النساء في سن الإنجاب ، فإن هناك حاجة ماسة إلى إنشاء تدخلات فعالة لمنع انتقال هذه الاضطرابات النفاسية الضارة بين الأجيال ، والتي لها تأثير مهم على صحة السكان 5,6.
منذ فترة طويلة تم التعرف على ممارسة كعلاج وقائي مهم لمرض السكري من النوع 2 وارتفاع ضغط الدم والعديد من الأمراض الأخرى7. ممارسة الرياضة أثناء الحمل لها آثار مفيدة للأم وتمنح آثارا مفيدة على النسل ، مما يقلل من انتقال الأم للمرض إلى النسل8. أظهرت عدة سنوات من الأبحاث سلامة التمرين وفوائده العميقة ، بما في ذلك التخفيضات الكبيرة في حالات الحمل الشائعة مثل داء السكري الحملي 9,10. فيما يتعلق بسلامة الأم والجنين ، فإن إجراء التدريب على التمارين الرياضية وبروتوكولات ما بعد التمريض يمثل تحديا.
ديفيد11وآخرون. وصف نماذج التمارين الحيوانية المطبقة على أبحاث صحة القلب والأوعية الدموية. نماذج التمارين الثلاثة شائعة الاستخدام ، الجري الطوعي للعجلات ، المطاحن الآلية ، والسباحة ، لها مزايا وعيوب. تحاكي العجلة الإرادية التي تعمل عن كثب السلوك الحركي للفئران ، مما يمكنها من التحرك وفقا لإيقاعها اليومي. ومع ذلك ، يحتاج هذا النوع من التمارين إلى تنظيم أكثر دقة للشدة والمدة. يمكن لجهاز المشي الميكانيكي التحكم في شدة التمرين وحجمه ومدته ، ولكنه يحتاج في بعض الأحيان إلى تحفيز كهربائي ، مما قد يؤدي إلى إجهاد جسدي في. تستخدم السباحة على نطاق واسع في دراسات القوارض بسبب قدرة السباحة المتأصلة للفئران ، والتي يمكن أن تتجنب أيضا التحفيز الكهربائي أو الأضرار الميكانيكية لأقدامها وذيولها12. في الدراسات التي أجريت على نماذج تمارين ما قبل الولادة13,14 ، تعد السباحة طريقة تمرين شائعة الاستخدام. مع تقدم الحمل وتضخم بطن الفئران ، قد تتسبب تمارين الجري على جهاز المشي والعجلات في ملامسة متكررة للبطن مع الأسطح الصلبة. في المقابل ، توفر البيئة المائية في السباحة الطفو ، مما يقلل من خطر الإصابات المرتبطة بالتمارين الرياضية للحيوانات الحامل.
يعرض هذا البروتوكول طرق تربية الفئران ، وكيفية أداء تدريب السباحة أثناء الحمل ، وبروتوكولات التمريض بعد التكاثر للفئران الحوامل بعد التدريب. يمكن تطبيق نموذج التدريب على السباحة الحوامل هذا على مجموعة واسعة من أنواع الفئران والفئران ، والتي قد توفر بالتالي نموذجا مفيدا للقوارض للتحقيق المستقبلي باستخدام النماذج القائمة على لدراسة الآليات التي تنظم الآثار المفيدة لممارسة الأم على صحة النسل وفوائد التمرين عبر الأجيال.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تمت الموافقة على جميع الطرق الموضحة هنا من قبل لجنة أخلاقيات في جامعة بكين الرياضية وتم تنفيذها وفقا لإرشادات المعاهد الوطنية للصحة (NIH) وقوانين حماية الصينية والمبادئ التوجيهية المؤسسية.
1. التزاوج وتغذية الفئران
2. برنامج تدريب السباحة قبل الولادة
3. الخصائص الفيزيائية للأجنة
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في قسم طرق تربية الفئران (الشكل 1) ، نحدد الدورة الشحمية لإناث الفئران عن طريق عمل شرائح إفراز مهبلي لزيادة معدل نجاح التكاثر. تستمر الدورة الشحمية للفئران من 4 إلى 5 أيام ، بما في ذلك البروشبق ، الشبق ، الميتروس ، والديستروس. تظهر إناث الفئران في metestrus أو diestrus سلوكيات مثل إبعاد نفسها عن الذكور. في الوقت نفسه ، فإن أولئك الذين هم في شبق على استعداد للتزاوج ، والإباضة في الفئران الإناث يحدث في الغالب في نهاية شبق. أثناء الشبق ، تحتوي عينات اللطاخة المهبلية بشكل أساسي على خلايا ظهارية ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تهدف هذه الدراسة إلى إنشاء برنامج تمرين عملي للفئران الحوامل ، بما في ذلك طرق تزاوج الفئران التفصيلية ، وبروتوكولات التدريب على السباحة ، وطرق البحث لتقييم المؤشرات الفسيولوجية في الأجنة. لقد طورنا نموذجا للتدريب على ممارسة السباحة قبل الولادة من خلال الممارسة ، مع حلول مقابلة للمشكلات المحتملة التي قد تنشأ في البروتوكول (الجدول 1). سيجعله هذا البروتوكول أكثر عملية ويساعد الباحثين في إنشاء نماذج تمارين ما قبل الولادة.
تشير نتائج بحثنا إلى أن ا...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (32071174 و 32200941 و 32371183 و 31771312).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| الفرجار | Mitutoyo أدوات القياس (شنغهاي) المحدودة | 530-101 N15 | تشريح الجنين |
| دلو الماء الدائري | Naliya | N / A | الفئران السباحة |
| أداة جراحية تجريبية ؛ | شنتشن RWD Life Technology Co.، LTD | SP0001-G | تشريح الجنين |
| المجهر الزجاجي الشرائح | Jiangsu Shitai المعدات التجريبية المحدودة | 80312-3161 | مسحة مهبلية |
| زجاج صحن بتري | Merck Life | Technologies BR455751-10EA | |
| مجفف | تربية النسل باناسونيك | EH-WNE5H | رعاية ما بعد السباحة |
| Zhongke علوم الحياة | SS3 | الفئران التزاوج | |
| Isoflurane | Shenzhen RWD Life Technology Co.، LTD | R510-22-10 | تشريح الجنين |
| المجهر الخفيف | أوليمبوس | IX71-F22PH | قفص تزاوج اللطاخة المهبلية |
| Zhongke Life Science | SS3 | الفئران التزاوج | |
| الطبية الماصة القطن | Hongxiang للمواد الصحية المحدودة | غير | الفئران الحامل توقع ولادة |
| آلة تخدير القوارض ، التخدير الغازي | شنتشن RWD Life Technology Co.، LTD | R500IE | تشريح الجنين |
| تربية القوارض | بكين Huafukang Biotechnology Co.، LTD | 1032 | الفئران الحامل التي تتغذى |
| القوارض تغذية | القوارض Beijing Huafukang Biotechnology Co.، LTD | 1022 | ذرية تربية |
| بذور عباد الشمس القوارض | جولي | JP241 | مكمل غذائي |
| قطن عازل للصوت | كوفو أداة | طبية N / A | تتوقع الفئران الحامل الولادة |
| مسحة قطنية معقمة (قطر 2 مم) | أداة طبية كوفو | N / A | مسحة مهبلية |
| شاش معقم | Kufu أداة طبية | N / A | الجنين |
| السكتة الدماغية محلول ملحي فسيولوجي (0.9٪ كلوريد الصوديوم) | شاندونغ Hualu Pharmaceutical Co.، LTD | N / A | ميزان حرارة مسحة المهبل |
| Beekman organism | N / A | سباحة الفئران | |
| Grace | N / A | رعاية ما بعد السباحة | |
| حاوية بلاستيكية شفافة | Naliya | N / A | تدريب تكيفي للسباحة |
| ضوء فوق بنفسجي | Merck Life Technologies | Z169633-1EA | رعاية ما بعد السباحة |
| سخان مياه | Haier | EC6001-Q6S | فئران السباحة |
| مقياس الوزن | Electronlc Acale | JM. A10001 | قياس وزن الجسم |
| ويستار جرذان | فيتال ريفر مختبر تكنولوجيا المحدودة | غير | متاح تجربة |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.