مقالة منهجية

نموذج فئران لانسداد / إعادة تروية الشريان الدماغي الأوسط دون الإضرار بالتركيب التشريحي للأوعية الدماغية

1.5K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/66635

⸱

مايو 17, 2024

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Neurosurgery, The Third Hospital of Hebei Medical University, 2School of Pharmacy, Key Laboratory of Molecular Pharmacology and Drug Evaluation, Ministry of Education, Collaborative Innovation Center of Advanced Drug Delivery System and Biotech Drugs in Universities of Shandong, Yantai University

في هذه المقالة

ملخص

يصف البروتوكول الحالي نموذج الفئران لانسداد / إعادة تروية الشريان الدماغي الأوسط الذي يحافظ على البنية التشريحية للأوعية الدماغية دون التسبب في ضرر.

الملخص

تعتبر السكتة الدماغية الإقفارية السبب الرئيسي للإعاقة والوفيات طويلة الأمد بين البالغين في جميع أنحاء العالم. ساهمت النماذج الحيوانية للسكتة الدماغية الإقفارية بشكل كبير في فهمنا لآلياتها المرضية وتطوير العلاجات المحتملة. في الوقت الحاضر ، هناك طريقتان شائعتان تتضمنان تقنيات الخيوط (خياطة داخل الأوعية الدموية) للحث على نماذج حيوانية لنقص التروية الدماغية. ومع ذلك ، فإن هذه الطرق لها قيود متأصلة ، مثل انخفاض نضح الدم في الدماغ ، وتلف نظام الشريان السباتي الخارجي ، وضعف تناول الطعام و / أو الماء ، والخلل الحسي في الوجه. تقدم هذه المقالة طريقة جديدة لتحفيز نموذج السكتة الدماغية الإقفارية للفئران دون المساس بتشريح الأوعية الدموية الدماغية. في هذه الدراسة ، تم الكشف عن الشريان السباتي المشترك (CCA) لفئران Sprague-Dawley ، وتم إجراء شق. ثم تم إدخال خيوط من خلال شق في الشريان السباتي الداخلي لإغلاق الشريان الدماغي الأوسط. بعد 1.5 ساعة من نقص التروية المستحث ، تمت إزالة خيوط الانسداد بالكامل من كل من الشريان السباتي الداخلي و CCA. تم خياطة الشق في CCA لاحقا باستخدام 11-0 خيوط جراحية مجهرية تحت المجهر (تكبير 4x). من خلال استخدام تقنيات الجراحة المجهرية لإصلاح CCA ، نجحت هذه الدراسة في تطوير طريقة فريدة للحث على نموذج السكتة الدماغية الإقفارية في الفئران مع الحفاظ على السلامة التشريحية للأوعية الدموية الدماغية.

المقدمة

السكتة الدماغية ، السبب الرئيسي للوفاة والخلل الوظيفي العصبي طويل الأمد لدى البالغين في جميع أنحاء العالم ، تشمل أنواعا مختلفة ، حيث تمثل السكتة الدماغية حوالي 81.9٪ من الحالات ، بينما يمثل النزيف الدماغي والنزيف تحت العنكبوتية 14.9٪ و 3.1٪ على التوالي< فئة الدعم = 'xref'>1. غالبا ما تنتج السكتة الدماغية الإقفارية عن تصلب الشرايين أو انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCA) ، مما يؤدي إلى انخفاض تدفق الدم الدماغي الموضعي وتلف الدماغ اللاحق. يؤدي هذا الانخفاض في إمدادات المغذيات للخلايا الإقفارية إلى استنفاد الطاقة ، مما يتسبب في فقدان سلامة الغشاء وتورم الخلايا والتحلل في نهاية المطاف. بالإضافة إلى ذلك ، تساهم عوامل مثل زيادة الكالسيوم داخل الخلايا ، وإطلاق الأحماض الأمينية المثيرة ، وزيادة إنتاج الجذور الحرة ، وتنشيط الخلايا الالتهابية في إصابة أنسجة المخ بعد السكتة الدماغية < فئة sup = 'xref'>2.

أهداف علاج السكتة الدماغية الإقفارية متعددة الأوجه: تقليل الضرر العصبي المستمر وتقليل الوفيات والإعاقة طويلة الأمد ؛ منع المضاعفات الناشئة عن عدم الحركة والخلل العصبي ؛ وتقليل خطر تكرار السكتة الدماغية. نظرا لتعقيد الفيزيولوجيا المرضية للسكتة الدماغية الإقفارية ، فإن نموذج السكتة الدماغية القوي ضروري للبحث والتطوير للعلاجات التي تستهدف السكتة الدماغية الإقفارية.

حاليا ، انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAo) هو نموذج حيواني شائع للسكتة الدماغية الإقفارية < sup class = 'xref'>3. عادة ما يتم إجراء MCAo عن طريق إدخال خيوط أحادية ذات رأس من السيليكون أو مخففة باللهب من خلال الأوعية العنقية حتى تصل إلى أصل الشريان الدماغي الأوسط (MCA). في عام 1986 ، طور كويزومي وزملاؤه تقنية تنطوي على إدخال خيوط أحادية ذات رأس من السيليكون من خلال شق في الشريان السباتي المشترك (CCA) ، مما يسمح لها بالوصول إلى مدخل MCA ومنع تدفق الدم < فئة sup = 'xref'>4. في عام 1989 ، أبلغت مجموعة لونجا عن طريقة MCAo أخرى تضمنت إدخال خيوط أحادية من خلال شق في الشريان السباتي الخارجي (ECA). ثم يجتاز الشعيرات الأحادية تشعب الشريان السباتي الداخلي (ICA) و ECA قبل الوصول إلى نقطة البداية لفئة MCA5.

قيود الطريقتين الحاليتين لحث MCAo واضحة. تتطلب طريقة Koizumi انسدادا دائما ل CCA المماثل ، مما يؤدي إلى تقليل نضح MCA لأن إعادة التروية تعتمد فقط على دائرة Willis4. على العكس من ذلك ، تتضمن طريقة Longa قطع ECA ، مما يؤدي إلى تلف نظام ECA وضعف لاحق في وظيفة عضلات الوجه< فئة sup = 'xref'>5. يمكن أن يؤثر هذا الضرر على تناول الطعام والماء ، وكذلك يسبب خللا حسيا للوجه ، مما يؤثر على إعادة التأهيل وتقييم الوظيفة العصبية بعد السكتة الدماغية الإقفارية < فئة الدعم = 'xref'>6.

يسعى البروتوكول الحالي إلى معالجة هذه القيود من خلال تطوير طريقة جديدة للحث على نموذج السكتة الدماغية الإقفارية دون الإضرار بالبنية التشريحية للأوعية الدماغية. يستخدم هذا النهج الجديد تقنيات الجراحة المجهرية لإصلاح CCA ، وبالتالي تجنب العيوب المرتبطة بالطرق السابقة.

البروتوكول

حصل الإجراء التجريبي على موافقة من اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدامها في جامعة يانتاي (رقم الموافقة: YTDX20230410) والتزم بإرشادات المعاهد الوطنية للصحة لرعاية واستخدام المختبر. تم استخدام ذكور فئران Sprague-Dawley التي يتراوح وزنها بين 300-350 جم في هذه الدراسة. يتم توفير قائمة شاملة بالحيوانات والكواشف والمعدات المستخدمة في جدول المواد.

< p class = "jove_title" >1. تحضير

  1. ضع في بيئة تحافظ على دورة الضوء / الظلام لمدة 12 ساعة ، ودرجة حرارة ورطوبة مضبوطة ضمان حصولهم على الغذاء والماء دون قيود.
< ص الفئة = "jove_title" >2. التخدير

  1. تخدير الفئران عن طريق الحقن داخل الصفاق بخليط يحتوي على الكيتامين (80 مجم / كجم) والزيلازين (20 مجم / كجم).
    ملاحظة: قم بإمالة رأس وجسم الفئران لأسفل. يقع موقع الحقن في الربع الأيمن السفلي من البطن للحيوان. اسحب المكبس للخلف قبل الحقن. متوسط حجم الحقن 0.4 مل.
  2. تأكيد تحريض التخدير من خلال تقييم منعكس الانسحاب للمخلب الخلفي وانعكاس الوميض. إذا لم يتم تحقيق عمق كاف للتخدير ، استكمل مع الأيزوفلوران أثناء العملية الجراحية.
< p class = "jove_title" >3. إجراء النمذجة الإقفارية

  1. تعقيم الأدوات الجراحية باستخدام الأوتوكلاف. تطهير طاولات التشغيل والمعدات ذات الصلة بنسبة 70٪ من الإيثانول.
  2. جهز موقع الجراحة عن طريق حلق الفراء حول موقع الشق المتوقع. تطهير الجلد في موقع الجراحة ثلاث مرات بالبيتادين و 70٪ الإيثانول.
  3. قم بعمل شق خط الوسط على الجانب البطني ، بطول 1.5 سم تقريبا ، وافتح اللفافة السطحية.
  4. قم بإجراء تشريح حاد وغير حاد لفضح الشريان السباتي الخارجي (ECA) والشريان السباتي الداخلي (ICA) والشريان السباتي المشترك (CCA) وفقا للطريقة الموضحة سابقا< فئة sup = "xref">7.
  5. ضع ثلاث خيوط حريرية 4-0 حول CCA وخياطة حريرية أخرى من خلال ECA بالقرب من تشعب ICA. اربط عقدة انزلاق قابلة للإطلاق على CCA القريب. شد الخيط على CCA البعيد باستخدام hemostat لمنع تدفق الدم. اربط عقدة انزلاق أخرى بشكل غير محكم حول CCA أثناء الخياطة لضمان عدم انسداد الوعاء.
    ملاحظة: تأكد من أن عقدة الانزلاق ليست ضيقة بشكل مفرط ، وكافية فقط لمنع تدفق الدم ، حيث ستحتاج إلى إطلاقها أثناء خياطة الأوعية الدموية.
  6. قم بعمل شق 0.5 مم بين خياطة الحرير القريبة والخياطة الوسطى على CCA باستخدام المقص.
    ملاحظة: تأكد من أن الشق يسمح للفتيل (الطرف المطلي بالسيليكون) بالدخول إلى CCA.
  7. أدخل خيوطا بطول 3 سم من 4-0 (طرف مطلي بالسيليكون) في CCA. شد خيوط الحرير حول CCA لتأمين الفتيل داخل اللمعة ومنع النزيف ؛ ثم قم بإزالة الخيط من CCA البعيد.
  8. استمر في إدخال الفتيل في تجويف MCA ، والتحكم في الغرز حول ECA لضمان عدم دخول الفتيل إلى ECA. عادة ما يتراوح طول الإدخال من 18 مم إلى 20 مم.
  9. ابدأ مؤقتا وسجل الوقت الذي يبدأ فيه الانسداد. قم بخياطة شق الرقبة ب 3-0 خيوط حريرية وضع بعناية في قفص الاسترداد. تطبيق 0.5 مل من المحلول الملحي العادي داخل الصفاق.
فئة

4. خياطة الجراحة المجهرية ل CCA

  1. إعادة تخدير الفئران بعد 1.5 ساعة من نقص التروية. تطهير موقع الشق ثلاث مرات باستخدام 70٪ من الإيثانول وأعد فتح الشق.
  2. اسحب خيوط الانسداد برفق حتى يظهر الطرف الأبيض بوضوح بالقرب من شق CCA. ضع مشبكا صغيرا أفقيا بالقرب من عقدة الخياطة داخل اللمعة الآمنة بالقرب من تشعب CCA.
    ملاحظة: تجنب تثبيت طرف الفتيل الأبيض لمنع انفصال السيليكون والتخثر اللاحق.
  3. حرر عقدة الخياطة المؤمنة داخل اللمعة وقم بإزالة الفتيل تماما.
  4. ضع مشبك صغير آخر بالقرب من جانب نهاية القلب من عقدة CCA القريبة. بعد ذلك ، قم بإزالة عقدة الخياطة حول CCA القريب.
    ملاحظة: يعد الوضع الصحيح للمشابك أمرا بالغ الأهمية لرفع الأوعية الثابتة في خطوات لاحقة لتسهيل خياطة الأوعية الدموية الدقيقة. ضع المشابك أفقيا على العضلات المحيطة لمنع الانزلاق.
  5. اشطف موقع الشق بمحلول ملحي عادي وجفف المنطقة بكرة قطنية معقمة لإزالة الدم وتحقيق مجال جراحي واضح.
  6. تحت المجهر (تكبير 4x) ، قم بخياطة شق CCA باستخدام 11-0 خيوط جراحية مجهرية بنمط متقطع ، وعادة ما تتطلب غرزتين اعتمادا على حجم الشق.
  7. بعد الخياطة ، قم بإزالة المشابك الدقيقة من طرفي CCA لاستعادة تدفق الدم.
  8. ضع الضغط بكرة قطنية معقمة على موقع خياطة CCA لمدة 30 ثانية. راقب CCA لمدة دقيقتين لضمان عدم حدوث نزيف. قم بخياطة شق رقبة الفئران وضع في صندوق رعاية بدرجة حرارة 35 درجة مئوية لاستعادة التخدير قبل إعادته إلى القفص.
    ملاحظة: يتم تطبيق ميلوكسيكام داخل الصفاق بجرعة 2 ملغ/كغ لتسكين الألم التالي للجراحة.
فئة < ص = "jove_title" >5. تلطيخ بكلوريد 2،3،5-ثلاثي فينيلترازوليوم (TTC)

  1. بعد ثلاثة أيام من نقص التروية وإعادة التروية ، قم بالقتل الرحيم للحيوانات تحت التخدير العميق باستخدام 4٪ من الأيزوفلوران وخلع عنق الرحم.
  2. قم بإزالة الأدمغة وتقطيعها إلى أقسام إكليلية بسمك 2 مم باستخدام شفرة مشرط < فئة sup = "xref" >8.
  3. احتضان أقسام الدماغ بنسبة 2٪ TTC لمدة 20 دقيقة عند 37 درجة مئوية.
  4. اشطف أقسام الدماغ مرتين بالفورمالين بنسبة 10٪ ، ثم ثبتها بالفورمالين بنسبة 10٪ لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة.
  5. التقط صورا رقمية للشرائح المتتالية وقم بقياس مناطق الاحتشاء كميا باستخدام برنامج Image J.
< p class = "jove_title" >6. اختبار الوظيفة العصبية

ملاحظة: تم تقييم الوظيفة العصبية باستخدام اختبار Garcia ، بعد تقرير سابق < sup class = "xref" >9.

  1. تقييم النشاط التلقائي ، والتناسق في حركة الأطراف الأربعة ، وتمدد القدم الأمامي ، والتسلق ، واستقبال الجسم ، والاستجابة للمس الاهتزاز. قم بتعيين الدرجات بناء على معايير اختبار جارسيا ، بحد أقصى 18 نقطة تشير إلى الوظيفة العصبية الطبيعية.
< p class = "jove_title" >7. التحليل الإحصائي

  1. استخدم GraphPad Prism لإجراء التحليل الإحصائي باستخدام اختبار Student's t. عبر عن البيانات كمتوسط ± الانحراف المعياري. ضع في اعتبارك الاختلافات بين المتوسطات ذات دلالة إحصائية إذا < P 0.05.

النتائج

عملية الخياطة المجهرية
تم سحب الفتيل بالقرب من شق CCA حتى ظهر طرف الفتيل الأبيض (<فئة قوية = "xfig" >الشكل 1 أ). ثم تم وضع المشابك الدقيقة على CCA (<فئة قوية = "xfig" >الشكل 1 ب). تحت المجهر بتكبير 4x ، تم خياطة شق CCA باستخدام خيوط جراحية مجهرية بنمط متقطع (<فئة قوية = "xfig" >الشكل 1C). بعد ذلك ، تمت إزالة المشابك الدقيقة من CCA ، مما أدى إلى استعادة البنية التشريحية وتدفق الدم (<فئة قوية = "xfig">الشكل 1 د).

< p class = "jove_content" >TTC تلطيخ ومعدل الوفيات
تم تقسيم ما مجموعه 12 من الجرذان البالغين بشكل عشوائي إلى مجموعتين: الوهم والنموذج (ن = 6 في كل مجموعة). لسوء الحظ ، توفي واحد في المجموعة الوهمية من جرعة زائدة من التخدير ، وتوفي واحد في المجموعة النموذجية في غضون 24 ساعة. لوحظت الاحتشاءات الناتجة عن نقص التروية الدماغي في كل من المخطط والقشرة (<فئة قوية = "xfig">الشكل 2 أ). في 3 أيام بعد السكتة الدماغية الإقفارية ، تم قياس النسبة المئوية الإجمالية للاحتشاء لتكون 29.3٪ ± 1.6٪ من نصف الكرة الأرضية (<فئة قوية = "xfig">الشكل 2 ب) ، مع معدل وفيات 16.7٪ بعد الجراحة.

تقييم الوظيفة العصبية
في 1 و 3 أيام بعد السكتة الدماغية الإقفارية ، انخفضت درجات مجموعات النماذج بشكل ملحوظ مقارنة بتلك الخاصة بالمجموعات الوهمية (17.8 ± 0.4 مقابل 8.2 ± 1.5 ، <فئة قوية = "xfig" >الشكل 3 أ ؛ 17.6 ± 0.9 مقابل 9.6 ± 1.3 ، <فئة قوية = "xfig" >الشكل 3 ب ، على التوالي).

< p class = "jove_content biglegend" fo: keep-together.within-page = "1" >figure-results-1
<فئة قوية = "xfig">الشكل 1: عملية الخياطة المجهرية. (أ) يتم سحب الفتيل من CCA. تشير الأسهم الزرقاء إلى المشابك الوعائية الدقيقة. (ب) يشير السهم الأسود إلى الشق بعد إزالة الفتيل بالكامل. تشير الأسهم الزرقاء إلى المشابك الوعائية الدقيقة. (ج) تحت المجهر (مكبر 4x) ، تم خياطة شق CCA باستخدام 11-0 خيوط جراحية مجهرية بنمط متقطع. تشير الأسهم الزرقاء إلى المشابك الوعائية الدقيقة. يشير السهم الأسود إلى الشق المخيط. (د) تتم إزالة المشابك الدقيقة واستعادة تدفق الدم ل CCA. يشير السهم الأسود إلى الموقع المخيط ل CCA. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم. < p class = "jove_content biglegend" fo: keep-together.within-page = "1" >figure-results-2
<فئة قوية = "xfig">الشكل 2: نتائج تلطيخ TTC لنموذج نقص التروية. (أ) صور تمثيلية لشرائح الدماغ الملطخة ب 2،3،5-ثلاثي فينيلترازوليوم كلوريد (TTC) بعد نقص التروية الدماغية. في الأنسجة الحية ، يتم تقليل TTC إنزيميا عن طريق نازعة الهيدروجين إلى 1،3،5-ثلاثي فينيل فورميزان ، الذي له لون أحمر. تظل الأنسجة في المناطق النخرية بيضاء بسبب عدم وجود مثل هذا النشاط الأنزيمي. (ب) النسبة المئوية للمنطقة الإقفارية في الفئران بعد 3 أيام من نقص التروية الدماغية. مقارنة بمجموعة الشام ، ** P < 0.01. يتم التعبير عن البيانات كمتوسط ± الانحراف المعياري. كان هناك خمسة فئران في كل مجموعة. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم. < p class = "jove_content biglegend" fo: keep-together.within-page = "1" >figure-results-3
<فئة قوية = "xfig">الشكل 3: تقييم الوظيفة العصبية. (أ) يسجل غارسيا 1 يوما بعد نقص التروية الدماغية. (ب) يسجل غارسيا 3 أيام بعد نقص التروية الدماغية. مقارنة بمجموعة الشام ، ** P < 0.01. يتم التعبير عن البيانات كمتوسط ± انحراف معياري. كان هناك خمسة فئران في كل مجموعة. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

المناقشة

MCAo هي طريقة مستخدمة على نطاق واسع لإنشاء نماذج حيوانية للسكتة الدماغية ، وتكرار عملية السكتة الدماغية التي لوحظت بشكل فعال في المرضى عن طريق استعادة تدفق الدم بعد نقص تروية10،11،12. طور مختبرنا نموذجا للسكتة الدماغية الإقفارية يتيح إعادة التروية من CCA دون التسبب في تلف ECA. بعد تحريض نقص التروية ، يتم إجراء إصلاح جراحي مجهري ل CCA. على الرغم من عدم إجراء القياس المباشر لتدفق الدم CCA ، لاحظ المجربون نبضات الأوعية الدموية في CCA قبل الشروع في إعادة التروية. تحافظ هذه التقنية على السلامة التشريحية لأوعية الرقبة بينما تشبه إلى حد كبير عملية السكتة الدماغية لدى المرضى. علاوة على ذلك ، أكدت تقييمات الوظيفة العصبية ومنطقة نقص تروية الدماغ صحة السكتة الدماغية الناجمة عن هذا النهج الجراحي.

يمكن أن تتأثر نماذج السكتة الدماغية الإقفارية الموصوفة سابقا بعوامل مختلفة. في طريقة Koizumi et al.4 ، يعتمد إعادة تروية الدم بشكل كبير على دائرة ويليس بسبب ربط CCA. ومع ذلك ، يمكن أن تؤثر الاختلافات في الأوعية الدموية الدماغية على حجم الاحتشاء الدماغي النهائي ، مما قد يزيد من معدل الوفيات في نموذج السكتة الدماغية بسبب انخفاض نضح الدم13،14. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن يضعف نقص تروية ECA وظيفة عضلات الوجه والأعصاب ، مما يؤثر على تقييم الوظائف العصبية المختلفة15،16.

تعالج الطريقة الحالية هذه التحديات من خلال ثلاث خطوات رئيسية: (1) الحفاظ على شق CCA صغيرا قدر الإمكان ، وكبيرا بما يكفي فقط لإدخال الفتيل ، مما يقلل من الوقت والضرر المرتبط بخياطة الأوعية الدموية. (2) وضع مشابك الأوعية الدموية الدقيقة بالقرب من تشعب CCA قدر الإمكان عند تثبيت CCA البعيد لمنع تثبيت طرف الفتيل الأبيض ، مما قد يؤدي إلى انفصال السيليكون وتجلط الدم. (3) مراقبة CCA لاستئناف النبض وعدم وجود نزيف كبير قبل خياطة شق خط الوسط في الرقبة بعد إصلاح الأوعية الدموية.

الطريقة الحالية لها العديد من القيود. أولا ، هناك إمكانية لتكوين الصمات في موقع الخياطة ، مما قد يؤدي إلى مزيد من نقص تروية الدماغ إذا انفصلا. يجب النظر في هذا الخطر بعناية وإدارته في التجارب المستقبلية. ثانيا ، لم تراقب الدراسة وزن جسم الفئران ، مما يجعل من الصعب تحديد ما إذا كانت الطريقة قد أثرت على تناولها للطعام. يعد تناول الطعام مؤشرا مباشرا على مزايا الطريقة ، ويمكن أن يوفر تقييمها رؤى قيمة. أخيرا ، تتطلب الطريقة الحالية الكفاءة الفنية في العمليات الجراحية المجهرية ، مما قد يحد من استخدامها على نطاق واسع دون التدريب والخبرة المناسبة.

باختصار ، في حين أن طريقة نمذجة MCAo توفر أهمية فسيولوجية عالية وسلامة هيكلية ، إلا أنها تأتي مع قيود يجب معالجتها من أجل تجربة أكثر قوة. يعد الحفاظ على السلامة التشريحية لأوعية الرقبة ومحاكاة عمليات السكتة الدماغية عن كثب لدى المرضى من نقاط القوة المهمة لهذه الطريقة. سيساهم هذا النهج بلا شك بشكل كبير في أبحاث السكتة الدماغية الإقفارية ، مما يحسن موثوقية ودقة النماذج التجريبية. في النهاية ، قد يؤدي هذا إلى عدد أقل من المجموعات التجريبية اللازمة لاختبار التأثيرات العلاجية ، مما يؤدي إلى نتائج تجريبية أكثر موثوقية.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين أي مصالح متضاربة محتملة للإفصاح عنها.

شكر وتقدير

تم دعم هذا العمل من قبل مشروع إدخال الاستخبارات الأجنبية في مقاطعة خبي في عام 2023. نشكر ليزا كرينر ، دكتوراه ، من Liwen Bianji ، (Edanz) (www.liwenbianji.cn) ، على تحرير النص الإنجليزي لمسودة هذه المخطوطة.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
10 ٪ formalinبكين Labgic التكنولوجيا المحدودةBL913A
11-0 خيوط جراحية مجهريةنينغبو الطبية خياطة إبرة المحدودة3/8 1 & مرات ؛ 5
2،3،5-ثلاثي فينيلترازوليوم كلوريد (TTC)SIGMAT8877
3-0 خياطة الحريرنينغبو الطبية خياطة إبرة المحدودة.3-0
4٪ إيزوفلوران    تيانجين Ringpu التكنولوجيا الحيوية المحدودة20221102
6-0 خياطة الحريرنينغبو الطبية خياطة إبرة المحدودة6-0
70 ٪ الإيثانولشاندونغ ليركانج التكنولوجيا الطبية المحدودة20230408
خيوطشينونج تكنولوجيز المحدودة2838-A5
الكيتامين   جيانغسو Hengrui الصيدلانية المحدودة230613BL
ذكور Sprague Dawley الفئرانجينان Pengyue التجريبية تربية المحدودةSCXK (Lu) 20190003
MicroclipsShanghai Jinzhong مصنع الأجهزة الطبيةW40150
مجهرZEISSS100 OPMI بيكو
صندوق التمريضBeijing Fuyi Electrical Appliance Co.، Ltd.FYL-YS-100L
زيلازينسيجماPHR3263

المراجع

  1. Tu, W. J., et al. China stroke surveillance report 2021. Mil Med Res. 10 (1), 33(2023).
  2. Wu, L., et al. Targeting oxidative stress and inflammation to prevent ischemia-reperfusion injury. Front in Mol Neurosci. 13, 28(2020).
  3. Ringelstein, E. B., et al. Type and extent of hemispheric brain infarctions and clinical outcome in early and delayed middle cerebral artery recanalization. Neurology. 42 (2), 289-298 (1992).
  4. Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. E. Experimental studies of ischemic brain edema: A new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area. Jap J Stroke. 8, 1-8 (1986).
  5. Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).
  6. Trueman, R. C., et al. A critical re-examination of the intraluminal filament MCAO model: Impact of external carotid artery transection. Transl Stroke Res. 2 (4), 651-661 (2011).
  7. Ansari, S., Azari, H., McConnell, D. J., Afzal, A., Mocco, J. Intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model for ischemic stroke with laser Doppler flowmetry guidance in mice. J Vis Exp. (51), e2879(2011).
  8. Yu, Z., et al. Icaritin inhibits neuroinflammation in a rat cerebral ischemia model by regulating microglial polarization through the GPER-ERK-NF-κB signaling pathway. Mol Med. 28 (1), 142(2022).
  9. Garcia, J. H., Wagner, S., Liu, K. F., Hu, X. J. Neurological Deficit and extent of neuronal necrosis attributable to middle cerebral artery occlusion in rats. Stroke. 26 (4), 627-634 (1995).
  10. Bracko, O., et al. 3-Nitropropionic acid-induced ischemia tolerance in the rat brain is mediated by reduced metabolic activity and cerebral blood flow. J Cereb Blood Flow Metab. 34 (9), 1522-1530 (2014).
  11. Goldmacher, G. V., et al. Tracking transplanted bone marrow stem cells and their effects in the rat MCAO stroke model. PLoS One. 8 (3), e60049(2013).
  12. Lee, H. J., et al. The therapeutic potential of human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells in Alzheimer's disease. Neurosci Lett. 481 (1), 30-35 (2010).
  13. Connolly, E. S., Winfree, C. J., Solomon, R. A. Procedural and strain-related variables significantly affect outcome in a murine model of focal cerebral ischemia. Neurosurgery. 38 (3), 523-531 (1996).
  14. Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy. J Cereb Blood Flow Metab. 13 (4), 683-692 (1993).
  15. Dittmar, M., Spruss, T., Schuierer, G., Horn, M. External carotid artery territory ischemia impairs outcome in the endovascular filament model of middle cerebral artery occlusion in rats. Stroke. 34 (9), 2252-2257 (2003).
  16. Virtanen, T., Jolkkonen, J., Sivenius, J. External carotid artery territory ischemia impairs outcome in the endovascular filament model of middle cerebral artery occlusion in rats. Stroke. 34 (9), 2252-2257 (2004).

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

TTC

مقالات ذات صلة