يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

بناء نموذج Xenograft لسرطان الرئة ذو الخلايا غير الصغيرة الذي يحاكي تطور المرض ويتنبأ بأنشطة الأدوية

2.3K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/66787

⸱

مايو 10, 2024

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Thomas J. Long School of Pharmacy, University of the Pacific

في هذه المقالة

ملخص

تقدم هذه الدراسة نموذجا لسرطان الرئة ذو الخلايا غير الصغيرة (NSCLC) يعتمد على التلقيح داخل الرئة للكرويات متعددة الخلايا لخلايا A549-iRFP الفلورية. يلخص النموذج مراحل NSCLC السريرية ويستجيب للسيسبلاتين ، وفقا للمراقبة الديناميكية في الجسم الحي للتألق طويل الطول الموجي.

الملخص

سرطان الرئة ذو الخلايا غير الصغيرة (NSCLC) هو مرض مميت للغاية مع بيئة مجهرية معقدة وغير متجانسة للورم. في الوقت الحالي ، لا تلخص النماذج الحيوانية الشائعة القائمة على التلقيح تحت الجلد لمعلقات الخلايا السرطانية البيئة المكروية للورم في NSCLC. هنا نصف نموذج xenograft لسرطان الرئة المتعامد الذي يستخدم التلقيح داخل الرئة للكرويات متعددة الخلايا ثلاثية الأبعاد (MCS). على وجه التحديد ، تم استزراع خلايا NSCLC البشرية الفلورية (A549-iRFP) في صفائح دقيقة منخفضة التعلق 96 جيدا مع الكولاجين لمدة 3 أسابيع لتشكيل MCS ، والتي تم تلقيحها بعد ذلك بشكل تفاعلي في الرئة اليسرى للفئران العارية athymic لإنشاء نموذج سرطان الرئة التقويمي.

بالمقارنة مع خط الخلايا الأصلي A549 ، استجاب MCS لخط الخلايا A549-iRFP بشكل مشابه للأدوية المضادة للسرطان. ترتبط إشارة الفلورسنت ذات الطول الموجي الطويل لخلايا A549-iRFP ارتباطا وثيقا بالعلامات الشائعة لنمو الخلايا السرطانية ، بما في ذلك حجم الكرة ، وصلاحية الخلية ، ومستوى البروتين الخلوي ، مما يسمح بالمراقبة الديناميكية لنمو السرطان في الجسم الحي عن طريق التصوير الفلوري. بعد التلقيح في الفئران ، تقدم A549-iRFP MCS xenograft بشكل موثوق عبر مراحل تشبه إلى حد كبير المراحل السريرية ل NSCLC ، بما في ذلك توسع الورم الرئيسي ، وظهور الأورام الثانوية المجاورة ، ونقائل الخلايا السرطانية إلى الرئة اليمنى المقابلة والأعضاء البعيدة. علاوة على ذلك ، استجاب النموذج لعقار سيسبلاتين القياسي المضاد لسرطان الرئة مع السمية المتوقعة وتطور السرطان الأبطأ. لذلك ، فإن نموذج xenograft التقويمي للفئران من NSCLC سيكون بمثابة منصة لتلخيص تطور المرض وتسهيل تطوير الأدوية المضادة للسرطان المحتملة.

المقدمة

من بين جميع اضطرابات الأورام ، لا يتسبب سرطان الرئة في أعلى خسارة في الأرواح فحسب ، بل يدعي أيضا ثاني أكبر عدد من المرضى الجدد كل عام في الولايات المتحدة1. يقف هذا الورم الخبيث المدمر كعقبة رئيسية في الرعاية الصحية الحديثة ، ويحث على فهم أعمق لبيولوجيته المعقدة وطرائق علاجية أكثر فعالية2. يمثل سرطان الرئة ذو الخلايا غير الصغيرة (NSCLC) 85٪ من سرطان الرئة ويميل إلى التطور إلى أورام صلبة3. أحد أهم التحديات في سرطان الرئة هو البيئة المكروية الديناميكية وغير المتجانسة للورم ، والتي تؤثر بعمق على تطور السرطان واستجاباته للتدخلات العلاجية4،5،6. إن الفهم الأعمق للتفاعل بين الخلايا السرطانية وبيئتها المكروية في مراحل مختلفة من NSCLC يستدعي نماذج مرضية محسنة تلخص السمات النسيجية لتطور NSCLC.

في هذا الصدد ، تظهر النماذج الحيوانية التقويمية كوسيلة واعدة لأبحاث NSCLC. على عكس نماذج xenograft تحت الجلد المستخدمة بشكل شائع7 ، تتميز النماذج التقويمية بالخلايا السرطانية التي يتم تلقيحها مباشرة في العضو الأصلي. بالنسبة لسرطان الرئة ، هذا يعني زرع الخلايا السرطانية مباشرة في أنسجة الرئة 8,9. وبالتالي ، فإن النماذج التقويمية لسرطان الرئة تحاكي بشكل أفضل البيئة المكروية للورم الأصلي ، بما في ذلك الأنسجة والأوعية والمكونات المناعية المجاورة ، وبالتالي تحسين أهميتها الفسيولوجية والسريرية.

تمثل الأجسام الكروية ثلاثية الأبعاد متعددة الخلايا (MCS) نهجا واعدا آخر لتلخيص ميزات بيئة الورم. تتميز معظم أنواع السرطان ببيئتها المكروية المعقدة للورم ، بما في ذلك التفاعلات المختلفة بين الخلايا والخلايا ، والمصفوفة خارج الخلية ، والتدرجات في الأكسجين والمواد المغذية10,11. تفتقر ثقافات الخلايا ثنائية الأبعاد التقليدية إلى التعقيد المكاني والهيكلي لتلخيص هذه الميزات الخاصة بالورم12. في المقابل ، يتميز MCS ذو الحجم المناسب ببنية غير متجانسة مع نواة ناقصة الأكسجين ونخرية ، والتي تلخص ليس فقط البيئة المكروية داخل الورم ولكن أيضا الحاجز الفسيولوجي ضد تغلغل الأدوية ، وهو آلية رئيسية لمقاومة الأدوية في العلاج المضاد للسرطان13،14،15.

بالاستفادة من كل من النماذج الحيوانية التقويمية وتقنيات زراعة MCS ، تم تلقيح MCS للفئران التي تعاني من ضعف المناعة لبناء نماذج تقويم العظام بنجاح لسرطان الثدي وسرطان البروستاتا16,17. هنا ، نبلغ عن المنهجية التفصيلية لبناء وتوصيف نموذج xenograft لتقويم الفئران لسرطان الرئة. تستخدم هذه الطريقة التلقيح داخل الرئة ل 3D MCS المشتق من خلايا سرطان الرئة البشرية الفلورية (A549-iRFP) 18. يوفر هذا النموذج فرصة استثنائية لمراقبة تطور سرطان الرئة في الجسم الحي من خلال مراحل توازي بشكل وثيق المراحل السريرية الأربع ل NSCLC. علاوة على ذلك ، استجاب سرطان xenograft لهذا النموذج لعقار سرطان الرئة المضاد للسرطان المنشأ سريريا ، سيسبلاتين.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تم إجراء الدراسة على بموافقة اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام (IACUC) في جامعة المحيط الهادئ (بروتوكولات 19R10 و 22R10). تم استخدام ثمانية ذكور من الفئران عارية athymic الذين تتراوح أعمارهم بين 5-6 أسابيع ، ويزن 20-25 جم ، تم تربيتها مع حمية القوارض المشار إليها وإيوائها في ظروف خالية من مسببات الأمراض (SPF) ، في هذه الدراسة. تم تعقيم الأقفاص والفراش ومياه الشرب وتغييرها بانتظام. يوضح الشكل 1 مخططا لتلقيح الورم في الفئران. انظر جدول المواد للحصول على التفاصيل المتعلقة بجميع المواد والأدوات المستخدمة في هذا البروتوكول.

1. إنشاء MCS ثلاثي الأبعاد لخلايا A549-iRFP

  1. احتضان خلايا A549-iRFP (سرطان الرئة الغدي البشري) في جو مرطب مع 5٪ CO2 عند 37 درجة مئوية وتنميتها في وسط نمو كامل DMEM يحتوي على 10٪ مصل بقري جنيني ، 1٪ بنسلين ستربتومايسين ، و 1 ميكروغرام / مل بوروميسين.
  2. قم بزرع خلايا A549-iRFP في صفيحة كروية مستديرة القاع ذات 96 بئرا منخفضة للغاية بكثافة بذر تبلغ 4000 خلية / بئر ، باستخدام 100 ميكرولتر من وسط النمو الكامل المكمل ب 0.3٪ كولاجين.
  3. أجهزة الطرد المركزي الصفائح الدقيقة عند 300 × جم لمدة 7 دقائق عند 4 درجات مئوية لتسهيل تشكيل MCS. فحص مورفولوجيا MCS تحت المجهر لضمان تجميع الخلايا بعد الطرد المركزي.
  4. بعد 48 ساعة ، أضف 100 ميكرولتر من وسط النمو الكامل إلى كل بئر لتحقيق حجم إجمالي قدره 200 ميكرولتر من وسط النمو لكل بئر.
  5. استبدل 100 ميكرولتر من وسط النمو في كل بئر بوسط نمو كامل جديد كل يوم.

2. توصيف A549-iRFP MCS

  1. مراقبة وتصوير مورفولوجيا MCS باستخدام المجهر وتقدير حجم MCS عن طريق المحاكاة باستخدام البرنامج المرجعي من MATLAB بناء على صور مجهر تباين الطور.
    1. افتح صورة MCS واحدة في برنامج ImageJ.
    2. استخدم التحديدات اليدوية لتحديد حافة MCS وإضافتها إلى مدير عائد الاستثمار.
    3. انقر فوق تحرير | الاختيار | إنشاء قناع.
    4. انقر فوق تحرير | عكس.
    5. انقر فوق ملف | حفظ باسم | المشاجرة.
    6. افتح برنامج ReViSP.
    7. افتح صورة TIFF المحفوظة بالنقر فوق استعراض.
    8. انقر فوق ابدأ لإكمال محاكاة MCS.
  2. قم بقياس إشارة الفلورسنت iRFP باستخدام نظام التصوير بالأشعة تحت الحمراء عند قناة 700 نانومتر وحدد كمية إشارة الفلورسنت باستخدام برنامج (على سبيل المثال ، Image Studio).
    1. افتح برنامج Image Studio.
    2. في علامة التبويب القنوات ، حدد 700 والكثافة = 5.
    3. في علامة التبويب عناصر التحكم في المسح الضوئي ، حدد 84 ميكرومتر، متوسط، 0.0 مم، وانعكاس الصورة. احتفظ بكل شيء آخر كإعداد افتراضي.
    4. انقر فوق ابدأ لبدء المسح.
  3. تقييم وقياس صلاحية الخلية باستخدام مقايسة صلاحية الخلية 3D وفقا لبروتوكول البائع.
  4. تقييم وقياس البروتين الخلوي باستخدام مقايسة BCA وفقا لبروتوكول البائع.

3. اختيار MCS لتلقيح الورم

ملاحظة: بعد أن يتم زرع MCS في صفائح مجهرية كروية وتنمو لمدة 2-3 أسابيع مع تبادل متوسط النمو المنتظم ، حدد MCS مع الخصائص المناسبة التالية لتلقيح الورم.

  1. راقب مورفولوجيا MCS تحت المجهر واختر MCS بشكل دائري مع حواف ناعمة بشكل عام ولكن مع 5-10 براعم خشنة (أسهم في الشكل 2F) وقطر في نطاق 700-800 ميكرومتر.
  2. قم بقياس مضان iRFP (راجع الخطوة 2.2) وحدد MCS الذي تكون إشاراته الفلورية ضمن انحراف معياري واحد عن المتوسط.

4. التلقيح MCS داخل الرئة

ملاحظة: استخدم 70٪ رذاذ كحول الأيزوبروبيل لتنظيف المحطة الجراحية والأدوات قبل التعامل مع.

  1. تخدير كل فأر بحقنة IP مقدارها 80 مغ/كغ من الكيتامين و12 مغ/كغ من الزيلازين؛ قرصة أقدام الماوس بالملقط لضمان التخدير الكامل.
  2. حقن 10 ميكرولتر من هيدروكلوريد البوبرينورفين (0.3 ملغ / مل) تحت الجلد لتقليل الألم.
  3. ضع مرهم العيون على العينين لمنع الجفاف.
  4. ضع الماوس في وضع ظهري وقم بتأمين الأطراف في وضع التمدد باستخدام الأشرطة.
  5. تعقيم الجلد الخلفي مع اليود وعصي مسحة الكحول.
  6. قطع شق 0.5-1 سم باستخدام مقص جراحي على الجانب الخلفي الأيسر (الشكل 1 ب). استخدم الملقط بعناية لفصل الأنسجة العضلية والدهنية حتى يظهر جدار الصدر وحركة الرئة.
  7. انقل MCS محددا من طبق دقيق إلى طبق زجاجي بتري يحتوي على برنامج تلفزيوني بارد ، باستخدام ماصة.
  8. قم بتوصيل إبرة 20 جم على حقنة زجاجية سعة 100 ميكرولتر ، وقم بتبريدها مسبقا على الثلج ، وارسم 20 ميكرولتر من خليط مبرد مسبقا من PBS و Matrigel (1: 1 فولت / فولت).
  9. استخدم المحقنة لاستنشاق MCS واحد بسرعة من طبق بتري في الحد الأدنى من حجم خليط PBS-Matrigel ، مع الحفاظ على MCS في الجزء المعدني من الإبرة.
    ملاحظة: حافظ على قبضة محكمة على المحقنة والمكبس لمنع MCS من الانزلاق من الإبرة.
  10. أدخل الإبرة برفق عموديا بين عظمتي ضلع إلى عمق ~ 3 مم وقم بحقن كل خليط PBS و Matrigel سعة 20 ميكرولتر الذي يحتوي على MCS برفق.
    ملاحظة: تجنب القوة المفرطة أثناء الإدخال لمنع تلف الرئة أو الأوعية الدموية أو القلب.
  11. قم بإزالة الإبرة بعناية وتطبيق مرهم مضاد حيوي ثلاثي على الجرح.
  12. ختم شق مع مقاطع جراحية, التي سيتم إزالتها بعد 2 أسابيع.
    ملاحظة: لا تقم بخياطة الشق لأن خطوط الخياطة قد تتداخل مع التصوير الفلوري. الفئران العارية قادرة على الشفاء بشكل طبيعي بعد الجراحة.
  13. ضع على وسادة حرارة بالأشعة تحت الحمراء وقم بتغطيتها بمناديل مختبرية للحفاظ على درجة حرارة الجسم. راقب لمدة 30-60 دقيقة على الأقل حتى يستيقظ ويتحرك بشكل صحيح.
  14. حقن 10 ميكرولتر من هيدروكلوريد البوبرينورفين (0.3 مجم / مل) تحت الجلد 3 مرات يوميا لأول 48 ساعة لتقليل الألم.

5. مراقبة ما بعد الجراحة

  1. قياس وزن الجسم كل 3-4 أيام.
  2. قم بقياس إشارة الفلورسنت iRFP من الطعم الخارجي للورم كل 3-4 أيام على نظام تصوير حيواني صغير عند قناة 700 نانومتر في أربعة أوضاع: اليسار واليمين والظهرية والبطنية ، بينما يتم الاحتفاظ بالفئران تحت التخدير عن طريق استنشاق الأيزوفلوران (معدل التدفق: 1.5-2 لتر / دقيقة أكسجين يحتوي على 1.5٪ إيزوفلوران) على مدى 2-3 دقائق.
  3. حدد كثافة الفلورسنت الصافية لسرطان الطعم الأجنبي في الجسم الحي باستخدام برنامج (على سبيل المثال ، Image Studio).
    1. استخدم مستطيلا ثابتا (A1 ، 200 × 125 بكسل) كنافذة لأخذ العينات لمنطقة صدر الفئران.
    2. استخدم وظيفة اليد الحرة لتتبع شكل الفئران داخل المستطيل (A1) وقياس شدة الفلورسنت (F1) في المنطقة A1.
    3. استخدم مستطيلا أصغر آخر (A2 ، 25 × 40 بكسل) لقياس مضان الخلفية (F2) للفئران في منطقة الفخذ.
    4. استخدم المعادلة (1) لحساب صافي شدة الفلورسنت لسرطان الطعم الأجنبي في كل فأر:
      figure-protocol-1(1)

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

توصيف A549-iRFP MCS
تم استزراع A549-iRFP MCS بنجاح في صفائح كروية بمساعدة الكولاجين والطرد المركزي. عندما وصل MCS إلى قطر حوالي 500 ميكرومتر بعد أسبوع 1 ، تعرض كل من A549 و A549-iRFP MCS لمجموعة متنوعة من الأدوية والتركيبات المضادة للسرطان لمدة 3 أيام ثم تم الاحتفاظ بها في وسط نمو خال من الأدوية لمدة 4 أيام إضافية. أظهر A549-iRFP MCS نمط استجابة يعكس بشكل وثيق نمط خلايا A549 الأصلية. أظهر A549 و A549-iRFP MCS منحنيات استجابة مماثلة للجرعة وقيم IC50 للسيسبلاتين ، أحد أدوية الخط الأول المضادة...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

يعد بناء A549-iRFP MCS إجراء مختبريا مباشرا وقابلا للتكرار بدرجة كبيرة ويمكن ترجمته إلى تشكيل MCS لخطوط خلايا متعددة. يظهر MCS الذي تم إنشاؤه بمساعدة الطرد المركزي والكولاجين بنية أكثر تكاملا وشبيهة بالورم الصلب في غضون 3-4 أيام. تضمن هذه الطريقة تكوين كرويات قوية تحافظ على هيكلها المتكامل لفترات طويلة ، عادة 2-3 أسابيع أو حتى أطول حتى تبدأ البراعم الصغيرة في الظهور. من خلال استخدام الطرد المركزي والكولاجين ، قمنا بتوحيد تشكيل MCS ، وضمان اتساقها وموثوقيتها في نموذجنا التجريبي. يعزز هذا النهج إمكانية استنساخ نتائجنا ويقل...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإعلان عنه.

شكر وتقدير

تم دعم هذا العمل من خلال منح SAAG و SEED من جامعة المحيط الهادئ. نشكر الدكتور ويليام تشان على منح حق الوصول إلى نظام Odyssey Infrared Imaging 205 والدكتور جون ليفيسي لمنحه حق الوصول إلى قارئ لوحة SpectraMax iD3. نشكر الدكتورة ميلاني فيلملي على المشورة الفنية بشأن بروتوكولات.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
100 وميكرو ؛ L حقنة زجاجيةهاميلتونجزء / REF # 80601
20 جرام إبرةثيرمو فيشر العلمي Inc.14 826D
96-well فائقة الصغر مرفق كروي Microplate Corning15-100-173
A549-iRFPImanis Life Sciences CL082-STAN
AIN-93M حمية القوارض الناضجة  شركة ريسيرش دايتD10012M
مختبرات نهر تشارلز عارية من الشعريةرمز الإجهاد: 490; متماثل اللواقح
BCAبيرس23227
بوبرينورفين هيدروكلوريدباترسون بيطريرقم NDC: 42023-179-05
CellTiter-Glo 3D Cell Viability AssayPromegaG9683
CollagenGibcoA1064401 
DMEMCorningMT10013CV
مصل الأبقار الجنينية (FBS)Cytiva HyCloneSH3039603
ImageJأداة مفتوحة المصدر (https://imagej.net/ij/)N / A
Image Studio LI-CORالإصدار 5.2
IsofluranePatterson VeterinaryNDC رقم: 17033-0091-25
KetaminePatterson VeterinaryNDC رقم: 50989-0161-06
المجهر  Keyence: BZ-X710
MatrigelCorningCB-40234
Odyssey Infrared Imaging 205 System LI-CORرقم الموديل: 9140
PBSCorningMT21040CV
Pearl Trilogy نظام تصوير الصغيرة  LI-CORرقم الموديل: 9430
Penicillin-Streptomycin كورنينجMT30002CI
بوروميسينثيرمو فيشر العلمي ، وشركةAAJ67236XF
برنامج ReViSP من MATLAB   ؛أداة مفتوحة المصدر على Sourceforge (https://sourceforge.net/projects/revisp/)N / A
Surgical Clips - AutoClip Systemأدوات العلوم الدقيقة12020-00
XylazinePatterson البيطريرقم NDC: 61133-6017-01
رقم الموديل

المراجع

  1. Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. Cancer statistics. CA Cancer J Clin. 70 (1), 7-30 (2020).
  2. Bray, F., et al. Global cancer statistics 2018: Globocan estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries. CA Cancer J Clin. 68 (6), 394-424 (2018).
  3. Travis, W. D., Brambilla, E., Riely, G. J. New pathologic classification of lung cancer: Relevance for clinical practice and clinical trials. J Clin Oncol. 31 (8), 992-1001 (2013).
  4. Ducote, T. J., et al. Using artificial intelligence to identify tumor microenvironment heterogeneity in non-small cell lung cancers. Lab Invest. 103 (8), 100176(2023).
  5. Lim, Z. F., Ma, P. C. Emerging insights of tumor heterogeneity and drug resistance mechanisms in lung cancer targeted therapy. J Hematol Oncol. 12 (1), 134(2019).
  6. Wang, D. C., Wang, W., Zhu, B., Wang, X. Lung cancer heterogeneity and new strategies for drug therapy. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 58, 531-546 (2018).
  7. Peterson, J. K., Houghton, P. J. Integrating pharmacology and in vivo cancer models in preclinical and clinical drug development. Eur J Cancer. 40 (6), 837-844 (2004).
  8. Madero-Visbal, R. A., et al. Bioluminescence imaging correlates with tumor progression in an orthotopic mouse model of lung cancer. Surg Oncol. 21 (1), 23-29 (2012).
  9. Mclemore, T. L., et al. Novel intrapulmonary model for orthotopic propagation of human lung cancers in athymic nude mice. Cancer Res. 47 (19), 5132-5140 (1987).
  10. Zanoni, M., et al. 3d tumor spheroid models for in vitro therapeutic screening: A systematic approach to enhance the biological relevance of data obtained. Sci Rep. 6, 19103(2016).
  11. Kim, J. B. Three-dimensional tissue culture models in cancer biology. Semin Cancer Biol. 15 (5), 365-377 (2005).
  12. Chaicharoenaudomrung, N., Kunhorm, P., Noisa, P. Three-dimensional cell culture systems as an in vitro platform for cancer and stem cell modeling. World J Stem Cells. 11 (12), 1065-1083 (2019).
  13. Mehta, G., Hsiao, A. Y., Ingram, M., Luker, G. D., Takayama, S. Opportunities and challenges for use of tumor spheroids as models to test drug delivery and efficacy. J Control Release. 164 (2), 192-204 (2012).
  14. Huang, B. W., Gao, J. Q. Application of 3d cultured multicellular spheroid tumor models in tumor-targeted drug delivery system research. J Control Release. 270, 246-259 (2018).
  15. Hirschhaeuser, F., et al. Multicellular tumor spheroids: An underestimated tool is catching up again. J Biotechnol. 148 (1), 3-15 (2010).
  16. Sethi, P., et al. 3d tumor tissue analogs and their orthotopic implants for understanding tumor-targeting of microenvironment-responsive nanosized chemotherapy and radiation. Nanomedicine. 11 (8), 2013-2023 (2015).
  17. Valta, M. P., et al. Spheroid culture of lucap 136 patient-derived xenograft enables versatile preclinical models of prostate cancer. Clin Exp Metastasis. 33 (4), 325-337 (2016).
  18. Huang, Y., et al. Intrapulmonary inoculation of multicellular spheroids to construct an orthotopic lung cancer xenograft model that mimics four clinical stages of non-small cell lung cancer. J Pharmacol Toxicol Methods. , 10.1016/j.vascn.2020.106885 106885(2020).
  19. Lemjabbar-Alaoui, H., Hassan, O. U., Yang, Y. W., Buchanan, P. Lung cancer: Biology and treatment options. Biochim Biophys Acta. 1856 (2), 189-210 (2015).
  20. Detterbeck, F. C., Boffa, D. J., Kim, A. W., Tanoue, L. T. The eighth edition lung cancer stage classification. Chest. 151 (1), 193-203 (2017).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

الكرويات متعددة الخلاياالبيئة المجهرية للأورامالتلقيح داخل الرئةالتصوير الفلوريخلايا A549-iRFPالتنبؤ بالاستجابة الدوائيةمراقبة تطور الورمتقنية الجراحة الحيوانية
بناء نموذج Xenograft لسرطان الرئة ذو الخلايا غير الصغيرة الذي يحاكي تطور المرض ويتنبأ بأنشطة الأدوية
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.