يصف هذا البروتوكول طريقة الحد من المدخول الغذائي من حمض الفوليك أو الكولين في إناث الفئران قبل الحمل بهدف التحقيق في تأثير النظام الغذائي للأم على النتائج الصحية للنسل.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تعديل مستويات حمض الفوليك أو الكولين الغذائي للأمهات لدراسة تأثير أوجه القصور على النتائج الصحية للنسل
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تلعب تغذية الأم أثناء الحمل والرضاعة دورا مهما في النمو العصبي للنسل. يلعب التمثيل الغذائي أحادي الكربون (1C) ، والذي يتمحور حول حمض الفوليك والكولين ، بالإضافة إلى فيتامينات ب الأخرى ، دورا رئيسيا أثناء إغلاق الأنبوب العصبي للجنين النامي. ومع ذلك، فإن تأثير حالات النقص التغذوية للأمهات أثناء الحمل على النتائج الصحية للنسل بعد الولادة لا يزال غير محدد نسبيا. علاوة على ذلك ، قد يؤثر نقص التغذية لدى الأمهات في حمض الفوليك أو الكولين على النتائج الصحية الأخرى في النسل - مما يجعل هذا نموذجا قيما. يهدف هذا البروتوكول إلى تحديد الإجراء الخاص بإحداث نقص في استقلاب 1C في إناث الفئران من خلال التعديلات الغذائية. يتم وضع الإناث على الوجبات الغذائية عند الفطام ، حتى عمر 2 أشهر ، لمدة 4-6 أسابيع قبل التزاوج وتبقى على النظام الغذائي طوال فترة الحمل والرضاعة. يمكن تقييم النسل من هذه الإناث لمعرفة النتائج الصحية. يمكن استخدام الإناث عدة مرات لتوليد نسل ، ويمكن جمع الأنسجة من الإناث لقياس قياسات مستقلب 1C. يقدم هذا البروتوكول لمحة عامة عن كيفية تحفيز نقص التغذية للأمهات في حمض الفوليك أو الكولين لدراسة النتائج الصحية للنسل.
المقدمة
تلعب تغذية الأم أثناء الحمل والرضاعة دورا حيويا في نمو النسل. الأيض أحادي الكربون (1C) هو شبكة أيضية رئيسية تدمج الإشارات الغذائية مع التخليق الحيوي ، وتوازن الأكسدة والاختزال ، وعلم التخلق. حمض الفوليك والكولين هي المكونات المركزية ل 1C التي تلعب دورا هاما في إغلاق الأنبوب العصبي. يوصى على نطاق واسع للنساء بتكملة حمض الفوليك والكولين خلال سنوات الإنجاب1. في حين أن الدور الحاسم لحمض الفوليك في نمو الجنين محدد بوضوح ، إلا أن الآليات الأساسية المعنية لا تزال غير واضحة. ينصح النساء في الإنجاب بتناول حمض الفوليك قبل الحمل لأن إغلاق الأنبوب العصبي يحدث خلال الأشهر الثلاثة الأولى2. الأمهات الحوامل اللواتي يعانين من نقص في حمض ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تمت الموافقة على هذا البروتوكول ، وتم استخدام جميع الموضوعات الحيوانية وفقا للمبادئ التوجيهية للجنة المؤسسية لرعاية واستخدام في جامعة الغرب الأوسط (البروتوكول 2983). تم استخدام إناث الفئران C57BL / 6J ، عمر شهرين (وزن الجسم ، ~ 20 جم) ، في هذه الدراسة. بشكل عام ، يمكن استخدام الفئران الإناث في سن الإنجاب10. لضمان تجنب آثار القمامة ، يجب استخدام العديد من الإناث لكل نظام غذائي11. يتم سرد تفاصيل الكواشف والمعدات المستخدمة في الدراسة في جدول المواد.
1. التحضير التجريبي
- الحصول على حمض الفوليك أو النظام الغذائي الذي يعاني من نقص الكولين من مصنعي أغذية الق....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
كان تركيز هذه الدراسة هو التحقيق في تأثير نقص التغذية للأمهات على حمض الفوليك أو الكولين على النتائج الصحية للنسل. تم تحديد الأوزان الأسبوعية لمراقبة الصحة العامة للإناث التي يتم الحفاظ عليها على نظام غذائي يحتوي على حمض الفوليك أو نقص الكولين. في عملنا السابق ، لم يلاحظ أي تغييرات في وزن الجسم بين المجموعات الغذائيةللأمهات 4. يصور الشكل 1 خط الأساس والأوزان الأسبوعية للإناث التي يتم الحفاظ عليها في الوجبات الغذائية التي تعاني من نقص في التحكم أو الكولين أو حمض الفولي.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
أثناء تنفيذ هذا البروتوكول في مختبرات الأبحاث ، هناك العديد من الملاحظات المهمة التي يحتاج الباحثون إلى أخذها في الاعتبار قبل بدء التجارب. أولا ، في تصنيع النظام الغذائي ، يجب إعطاء مهلة كافية لتصنيع النظام الغذائي قبل بدء الدراسة التجريبية. يمكن أن تختلف المهل الزمنية من شركة إلى أخرى ، كما يجب أخذ شحن النظام الغذائي في الاعتبار. يمكن وضع إناث الفئران التي هي في سن الإنجاب (~ 2-2.5 أشهر في العمر) على النظام الغذائي 4-6 أسابيع قبل التزاوج4،6،
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 1.5 مل أنابيب | Eppendorf | ||
| C57BL / 6 إناث الفئران | نهر تشارلز | يمكن تربية 27 | فئران في المنزل أيضا. |
| الكولين نقص النظام الغذائي | Envigo | TD.06119 | |
| التحكم في النظام الغذائي | Envigo | TD.190790 | |
| أنابيب EDTA حمض | |||
| الفوليك نقص النظام الغذائي | Envigo | TD.01546 | |
| GraphPad المنشور | https://www.graphpad.com/features | ||
| الإسكان للقوارض | منتجات المختبر ، LLC | واحد رفوف التهوية في قفص & أقفاص | |
| الكروماتوغرافيا السائلة - قياس الطيف الكتلي الترادفي (LC-MS / MS) | SCIEX ، فرامنغهام ، MA | 5500 QTrap | |
| كروماتوغرافيا سائلة فائقة الأداء (UPLC) | شيمادزو ، كولومبيا ، دكتوراه في الطب ، الولايات المتحدة الأمريكية | Nexera |
المراجع
- Van Gool, J. D., Hirche, H., Lax, H., De Schaepdrijver, L. Folic acid and primary prevention of neural tube defects: A review. Reprod Toxicol. 80, 73-84 (2018).
- Ali, S. A., Economides, D. L. Folic acid supplementation. Curr Opin Obstet Gynecol. 12 (6), 507-512 (2000).
- O....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
