يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
يصف هذا البروتوكول طريقة مباشرة لإنشاء خيوط مغلفة لنموذج انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO) في الفئران باستخدام خيوط السيليكون والنايلون وإبر المحقنة. تسمح هذه الطريقة بإنتاج خيوط ذات قطر ثابت وأطوال تغليف سيليكون مختلفة مصممة خصيصا لتلبية الاحتياجات التجريبية.
مع تقدم سكان العالم في العمر ، ارتفعت السكتة الدماغية الإقفارية لتصبح السبب الرئيسي الثاني للإعاقة والوفيات في جميع أنحاء العالم ، مما يضع عبئا هائلا على كل من المجتمع والأسر. على الرغم من أن العلاجات مثل انحلال الخثار الوريدي والتدخلات داخل الأوعية الدموية يمكن أن تحسن بشكل كبير النتائج للمرضى الذين يعانون من السكتة الدماغية الإقفارية الحادة ، إلا أن نسبة صغيرة فقط من الأفراد يستفيدون من هذه العلاجات. لتعزيز فهمنا للمرض واكتشاف علاجات أكثر فعالية ، يعمل الباحثون باستمرار على تطوير وتحسين النماذج الحيوانية. من بين هؤلاء ، يبرز نموذج انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO) باعتباره النموذج الأكثر استخداما في أبحاث أمراض الأوعية الدموية الدماغية. الفتيل المستخدم في هذا النموذج أمر بالغ الأهمية لتطويره. يحدد هذا البروتوكول طريقة لإنشاء خيوط بأقطار متسقة وأطوال متفاوتة من طلاء السيليكون. أظهر نموذج MCAO الذي تم إنتاجه باستخدام هذه الطريقة في الفئران C57 نجاحا واتساقا عاليا ، مما يوفر أداة قيمة للتحقيقات المصممة خصيصا في أمراض الأوعية الدموية الدماغية الإقفارية.
السكتة الدماغية هي واحدة من أكثر أسباب الوفيات والعجز انتشارا في جميع أنحاء العالم. السكتات الدماغية الإقفارية والنزفية هي الأنواع الأساسية للأحداث الدماغية الوعائية ، حيث تمثل السكتات الدماغية الإقفارية حوالي 87٪ من الحالات1،2،3. حاليا ، هناك طريقتان للعلاج للمرضى الذين يعانون من السكتة الدماغية الإقفارية: العلاج الدوائي باستخدام منشط البلازمينوجين المؤتلف للأنسجة (rtPA) واستئصال الخثرة الميكانيكي. ومع ذلك ، فإن النافذة العلاجية الضيقة ومعايير الاستبعاد الواسعة تحد من تطبيق هذه العلاجات ، ولا تستفيد منها سوى أقلية من المرضى. هذا يؤكد الحاجة ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
التزمت جميع الإجراءات الحيوانية بالإجراءات والمعايير التجريبية المعتمدة من قبل لجنة رعاية واستخدام المؤسسية لمستشفى مقاطعة شانشي الشعبية (رقم الموافقة: 2024 لجنة الأخلاقيات الطبية الإقليمية رقم 64). كانت الفئران المستخدمة في هذه التجربة من ذكور الفئران C57BL / 6 ، تتراوح أعمارهم بين 8 و 10 أسابيع ، ووزنها 24-26 جم. تفاصيل الكواشف والمعدات المستخدمة مدرجة في جدول المواد.
1. تحضير خيوط
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في إنشاء نموذج MCAO ، يتم عرض الأدوات الأساسية المستخدمة لتصنيع الخيوط والخيوط النهائية في الشكل 3. بعد إنتاج الخيوط ، يتم إنشاء نموذج MCAO عن طريق إدخال الفتيل من خلال الشريان السباتي الخارجي ، مع تسجيل مدة العملية. يتم تعريف النمذجة الناجحة من خلال درجة لونجا من 1-3 4 ساعات بعد سحب الفتيل. يتم مراقبة وزن الجسم يوميا بعد العملية. يتم تقييم العجز العصبي باستخدام درجات الشدة العصبية المعدلة (mNSS) في 24 ساعة و 72 ساعة بعد الجراحة. يتم تقييم الضرر الإقفاري من خلال تلطيخ TTC.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
توضح هذه الدراسة طريقة بسيطة وفعالة من حيث التكلفة لتصنيع الخيوط ، مما يؤكد جدواها في إنشاء نموذج MCAO. يمكن تعديل طول طبقة السيليكون للفتيل وفقا للاحتياجات التجريبية ، مما يوفر مرونة إضافية. حقق تحضير صمة خيوط 5 مم معدل نجاح بنسبة 100٪ دون حدوث أي نزيف تحت العنكبوتية (SAH) في الفئران. في المجموعة التي استخدمت صمات خيوط 10 مم ، كانت هناك حالات من SAH ، بينما أظهرت بقية الفئران احتشاء واضحا في منطقة MCA. كانت الخطوة الحاسمة في تقليل SAH هي سحب الفتيل قليلا عند مواجهة المقاومة أثناء العملي.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإعلان عنه.
تم دعم هذا العمل من قبل مؤسسة وو جيبينغ الطبية (320.6750.161290).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 10 مل حقنة | Haidike المنتجات الطبية المحدودة | أداة لصنع خيوط | |
| 2،3،5-كلوريد Triphenyltetrazolium (TTC) صبغة | Sigma-Aldrich | G3005 | لتلوين TTC |
| لوحة ثقافة 24 بئر | Corning ؛ | CLS3527 | وعاء لتلوين TTC |
| 26 جرام إبرة حقنة | Haidike Medical Products Co.، Ltd. | أداة لصنع الخيوط | |
| 4٪ paraformaldehyde | Servicebio | G1101 | تثبيت الأنسجة |
| 6-0 خياطة النايلون | Haidike Medical Products Co.، Ltd. | مواد لصنع خيوط | |
| نظام التخدير لشركة isoflurane | Rwd Life Science Co.، Ltd. | R610 | مخدر |
| مولد التخثير الكهربائي ثنائي القطب | Yirun Medical Instrument Co.، Ltd. | ZG300 | معدات للجراحة |
| حمام مائي بدرجة حرارة ثابتة | الربيع ؛ شركة الصك المحدودة | HH-M6 | TTC تلطيخ |
| مرهم العين | قوانغتشو الصيدلانية | H44023098 | المواد للجراحة |
| بطانية حرارية | ZH Biomedical Instrument Co.، Ltd. | الحفاظ على مزاج الجسم | |
| شركة Isoflurane | Rwd Life Science Co.، Ltd. | R510-22-10 | مخدر |
| Meloxicam | Boehringer-Ingelheim | J20160020 | تسكين للحيوان |
| مشبك الشريان الجراحي | المجهري شنغهاي Jinzhong الأدوات الجراحية المحدودة & nbsp ؛ | W40130 | أداة للجراحة |
| ملقط مشبك مرقئ الجراحة | المجهرية شنغهاي Jinzhong الأدوات الجراحية المحدودة ؛ | M-W-0022 | أداة للجراحة |
| مجموعة أدوات الجراحة المجهرية | Rwd Life Science Co.، Ltd. | SP0009-R | معدات للجراحة |
| ميزان حرارة الماوس | Hubei Dasjiaer التكنولوجيا الحيوية | FT3400 | أثناء الجراحة مراقبة درجة الحرارة |
| البنتوباربيتال الصوديوم | Sigma-Aldrich | P3761 | القتل الرحيم |
| Joyu الأجهزة الكهربائية | PHC-920 | معدات للجراحة | |
| سيليكون مانع التسرب | Kafuter | K-704 | المواد لصنع خيوط |
| المجهر المجسم | Rwd علوم الحياة المحدودة | 77001S | معدات لخيوط خياطة الجراحة |
| بإبرة (3-0) | شنغهاي بودونغ جينهوان للمنتجات الطبية المحدودة ؛ | معدات F404SUS302 | للجراحة |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم نشر هذه المقالة
الفيديو قريباً