يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

تلقيح الأوراق في الجسم الحي: طريقة بديلة لتقييم مقاومة الأمراض للمستنسخات الهجينة في تربية الحور لمرض تقرح الساق

1.5K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/67290

⸱

سبتمبر 20, 2024

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

نحن نقدم بروتوكولا خطوة بخطوة لتقييم مقاومة الحور لمسببات الأمراض الجذعية باستخدام طريقة تلقيح الأوراق في الجسم الحي . هذه الطريقة مناسبة بشكل خاص للتقييم واسع النطاق لمقاومة مرض التقرح الخلوي و Botryosphaeria dothidea في ذرية تربية الحور في الصين.

الملخص

أمراض التقرح الجذعية التي يسببها العامل الممرض Cytospora chrysosperma (Pers.) Fr.) و Botryosphaeria dothidea (Moug. ex Fr.) Ces. & de Not. هما مرضان رئيسيان للغابات في مزارع الحور في الصين ، وأحيانا يمكن أن يدمروا جميع شتلات الحور أو يلحقون أضرارا بالغة بغابات الحور الناضجة. التربية الهجينة هي الطريقة الأكثر مباشرة وفعالية للسيطرة على أمراض الأشجار وإدارتها. ومع ذلك ، فإن تقييم مقاومة الأمراض أو اختيار المستنسخة المقاومة للأمراض بناء على تلقيح الساق في المختبر غير فعال ويستغرق وقتا طويلا ومكلفا ، مما يحد من تطور التكاثر الهجين لمرض تقرح جذع الحور. في هذه الدراسة ، اقترحنا طريقة بديلة لتقييم مقاومة الأمراض لمسببات الأمراض الجذعية من خلال تلقيح الأوراق في الجسم الحي. يمكن أن تكون مواد الاختبار المستخدمة في هذه الطريقة على شتلات الحور البالغة من العمر 1 عاما أو الفروع السنوية لأشجار الحور المعمرة في الدفيئة أو الحقل. الخطوة الحاسمة لهذه الطريقة البديلة هي اختيار أوراق التلقيح: قد تكون الأوراق الناضجة حديثا 5-7 هي الأنسب. الخطوة الثانية الحاسمة لطريقة تلقيح الأوراق هي إحداث جروح على أوراق النبات من خلال ثقوب الإبر ، مما يوفر آفات كافية لقياس شدة المرض. بالنسبة للعدد الكافي من الأوراق المنتجة في المرحلة المبكرة من تربية الحور ، يساهم تلقيح الأوراق في الجسم الحي في الفحص السريع والدقيق والواسع النطاق لاستنساخ الحور المقاوم للأمراض لوقف مسببات الأمراض في التقرح. علاوة على ذلك ، ستعمل طريقة تلقيح الأوراق هذه أيضا كطريقة فعالة لفحص الأنماط المرضية لمسببات مرض تقرح الساق C. chrysosperma أو B.dothidea أو غيرها من مسببات أمراض آفة جذع الحور.

المقدمة

أمراض تقرح جذع الحور ، التي تسببها بشكل رئيسي اثنين من مسببات الأمراض الميتة ، Cytospora chrysosperma (Pers.) Fr. و Botryosphaeria dothidea (Moug. ex Fr.) Ces. & de Not. ، تهدد بشدة تطوير وبقاء مزارع الحور في الشمال الشرقي والشمال والشمال الغربي (ثلاثة شمال) من الصين. التربية المهجنة هي الطريقة الأكثر مباشرة وفعالية للسيطرة على أمراض الأشجار وإدارتها. ومع ذلك ، بالمقارنة مع التقدم المحرز في تربية المستنسخة عالية الغلة أو سريعة النمو أو غيرها من المستنسخة الهجينة من الحور ، فإن الأبحاث حول تربية المقاومة لمرض آفة الحور نادرة. تم الإبلاغ عن دراسات محدودة فقط للتكاثر الهجين المقاوم للأمراض1،....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. ثقافة فطرية لمسببات الأمراض آفة

  1. تحضير أجار سكر العنب للبطاطس (PDA ؛ استخراج البطاطس 6.0 جم ، سكر العنب 20.0 جم ، أجار 20.0 جم) وسط استزراع للسلالات الفطرية ؛ قم بإذابة المواد المذكورة أعلاه في ماء يصل إلى 1000 مل ، وقم بإذابة الوسط تماما عند 100 درجة مئوية لمدة 10 دقائق.
  2. صب وسط المساعد الرقمي الشخصي في أنابيب 25 مل (يحتوي كل منها على 15.0 مل) ؛ تعقيم جميع الأنابيب عند 121.1 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. صب الوسط في ألواح الاستزراع (قطرها 9.0 سم) وقم بتبريد الألواح في درجة حرارة الغرفة (RT).
  3. قطع أفطورة العامل الممرض الفطري ، الذي يتم استزراعه في وسط PDA عند 28 درجة مئوية لمدة 7 أيام ، إلى ~....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

في هذا البروتوكول ، تم إجراء سير العمل التخطيطي في 48 نسخة هجينة من الحور مصابة بمسببات الأمراض الجذعية C. chrysosperma (الشكل 1). المستنسخة الهجينة من الحور هي جزء من ذرية التهجين من P. deltoides ، المزروعة في الحضانة في الأكاديمية الصينية للغابات (CAF) ، بكين.

ممرض آفة الساق C. chrysosperma isolate CZC هو سلالة فطرية نموذجية (مع إمراضية متوسطة) تستخدم في البحث الفسيولوجي لمرض آفة الحور6،

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

يوفر هذا البروتوكول طريقة تلقيح سريعة وفعالة لمسببات الأمراض المقاومة لآفة الحور ، وهي مناسبة لمجالات البحث التي تتطلب فحصا واسع النطاق لمقاومة الأمراض ، مثل التربية الهجينة لمقاومة آفة الحور وفحص الإمراضية لمسببات الأمراض في تقرح الساق.

النقطة الرئيسية الأولى للطريقة هي تقييم مقاومة الأمراض عن طريق تلقيح الأوراق الناضجة حديثا بدلا من السيقان / الفروع الناضجة. نتيجة لذلك ، يمكن إجراء اختيار المستنسخة المقاومة لمرض تقرح الساق في 1-2 سنوات من تربية الحور الهجين.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

تم تمويل هذا البحث بشكل مشترك من قبل صندوق البحوث القاعدية للمؤسسة العلمية المركزية ذات المصلحة العامة التابع لمختبر الدولة الرئيسي لعلم الوراثة وتربية الأشجار (رقم المنحة CAFYBB2020ZY001-2) والمؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم المنحة 32171776) إلى Jiaping Zhao.

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
رقائق الألومنيومBiosharpBS-QT-027B
C. أحزول أحجار كريزوسبيرما < / em>جمع ثقافة الغاباتالصيني CFCC86775الفصل والحفظ من قبل مختبرنا
Cytospora chrysosperma < / em>مختبر فسيولوجيا النبات ، معهد التكنولوجيا الجديدة للغابات ، الأكاديمية الصينية للغاباترقم انضمام NCBI: MK994101 ل rRNA-ITS و MN025273 ل EF1 &alpha ؛ الجين    رقم CGMCC: 40575الفصل والحفظ من قبل مختبرنا
Epson Perfection V370 PhotoEpson & nbsp ؛الضوئي V370؛ مسح الأوراق في صورة
المساعد الشخصي الرقمي (Potato Dextrose Agar)  SolarbioP8931توفير التغذية لنمو الفطريات
بلاستيكيلإصلاح الفطريات على الأوراق
Populus alba< / em> var. Pyramidalis< / em>مختبر فسيولوجيا النبات ، معهد الغابات للتكنولوجيا الجديدة ، الأكاديمية الصينية للغاباتالمزروعة بواسطة مختبرنا
SPSSIBM برنامج تحليل البيانات
حاضنة ثرموستاتيشنغهاي كونتيان مختبر أداة المحدودةKTD-6000توفير بيئة لنمو
الفطريات كاميرا TG-6 صعبةOLYMPUSلالتقاط صور للأوراق المريضة
مركز الماسح فيلم PE

المراجع

  1. Du, K., et al. Genetic analysis and seedling selection of the poplar progenies of Aigeiros section. Journal of Huazhong Agricultural University. 28 (5), 624-630 (2009).
  2. Shi, Y. Identification of canker resistance to selection poplar clones [Mas....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

فحص مسببات الأمراضالآفات النخريةتحليل ImageJآغار بطاطس دكستروزتصنيف المرض