يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

دراسة التعرض المزمن للفئران للأشعة فوق البنفسجية B

2.4K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/67368

⸱

أغسطس 19, 2025

 ,  ,  , 
1Department of Human Genetics and Biochemistry, Faculty of Medicine, Tel Aviv University, 2The Ragon Institute of Mass General, MIT, and Harvard Main Street

في هذه المقالة

ملخص

يصف البروتوكول دراسة للتأثيرات الجلدية الجهازية والمحلية للتعرض للأشعة فوق البنفسجية B في الفئران.

الملخص

تم التعرف على الأشعة فوق البنفسجية B (280-320 نانومتر) كمادة مسرطنة منذ عام 1928 ، مما يؤدي إلى تقليل التعرض لأشعة الشمس. ومع ذلك ، تشير الدراسات الوبائية إلى أن التعرض لأشعة الشمس يرتبط بزيادة متوسط العمر المتوقع وانخفاض الإصابة بأمراض القلب والأوعية الدموية وبعض أنواع السرطان مثل سرطان القولون وبطانة الرحم. يؤثر التعرض للأشعة فوق البنفسجية أيضا على عملية التمثيل الغذائي في الكبد ، ويحمي من السمية الدهنية في الخلايا الكبدية ، ويؤثر على صحة التمثيل الغذائي. ترجع هذه التأثيرات جزئيا إلى تخليق فيتامين (د) ، على الرغم من أن بعضها مستقل عن فيتامين (د). علاوة على ذلك ، فإن العلاج بالضوء باستخدام الأشعة فوق البنفسجية له خصائص مناعية ويستخدم لعلاج الأمراض الجلدية مثل البهاق والصدفية بينما يؤثر أيضا على جهاز المناعة الجهازي. بالنظر إلى التأثيرات الفسيولوجية الواسعة للأشعة فوق البنفسجية ، هناك فجوات في فهم الآلية الكامنة وراء معظم هذه التأثيرات. أظهرنا أن التعرض اليومي للأشعة فوق البنفسجية منخفضة المستوى يعزز سلوك البحث عن الطعام لدى ذكور الفئران ولكن ليس في الإناث بسبب زيادة إفراز الجريلين من الخلايا الشحمية الجلدية. في الإناث ، يثبط هرمون الاستروجين نشاط الخلايا الشحمية p53 ، مما يمنع ارتفاع هرمون الجريلين ويظهر استجابة تعتمد على الجنس لإشعاع الأشعة فوق البنفسجية. بالإضافة إلى ذلك ، فإن تنشيط p53 الناجم عن الأشعة فوق البنفسجية في الخلايا الكيراتينية للبشرة ينشط محور ما تحت المهاد والغدة النخامية والغدد التناسلية ، مما يؤدي إلى السلوك الجنسي والمؤيدة للخصوبة في المبيض. توضح هذه الورقة بروتوكولا لدراسة التأثيرات المحلية والجهازية للإشعاع المنخفض للأشعة فوق البنفسجية باستخدام نموذج الماوس C57BL / 6J. تشمل العناصر الرئيسية المعايرة الدقيقة لجرعات الأشعة فوق البنفسجية ، وظروف السكن ، وإزالة الشعر بعناية لضمان التعرض المستمر. تخضع الفئران لنظام التعرض للأشعة فوق البنفسجية المتدرجة على مدى عدة أسابيع ، مع مراقبة التغيرات الصحية والسلوكية. كما تم تفصيل طرق التحقق من كفاءة الإشعاع من خلال قياسات التصبغ. من خلال التأكيد على معايرة جرعات الأشعة فوق البنفسجية ، والرعاية الصارمة للحيوانات ، والضوابط المنهجية ، سيسهل هذا البروتوكول دراسة الآثار الشاملة للتعرض للأشعة فوق البنفسجية ، مما يساهم في فهم دقيق لفوائده ومخاطره العلاجية.

المقدمة

تشمل ترددات الإشعاع الشمسي التي تصل إلى سطح الأرض الأشعة فوق البنفسجية (UV) والأشعة فوق البنفسجية (320-400 نانومتر) والأشعة فوق البنفسجية (280-320 نانومتر). الأشعة فوق البنفسجية هي محفز للطفرات. تم التعرف على الأشعة فوق البنفسجية كمادة مسرطنة في عام 19281 ، ومنذ منتصف القرن العشرين ، أوصى بتقليل التعرض لأشعة الشمس كإجراء احترازي لتجنب سرطانالجلد 2. على الرغم من أن الأشعة فوق البنفسجية هي من الواضح أن محفزا بيئيا لسرطان الجلد ، إلا أن الأبحاث في العقدالماضي 3 مع الدراسات الحديثة من مجموعتنا4،5،6 أظهرت أن الأشعة فوق البنفسجية لها تأثيرات واسعة على الأنظمة الفسيولوجية. كشفت دراسة أجريت على مجموعة من النساء تمت متابعتها على مدى 20 عاما أن متوسط العمر المتوقع كان أعلى بمقدار عامين لدى النساء اللواتي لم يتجنبن الشمس مقارنة بالنساء اللواتي تجنبن7. أظهرت دراسات إضافية أن التعرض لأشعة الشمس كان مرتبطا بانخفاض أمراض القلب والأوعية الدموية والوفيات الإجمالية8،9،10. كما تم الإبلاغ عن ارتباطات عكسية بين ضوء الشمس وسرطان القولون وسرطان بطانةالرحم 8. يؤدي التعرض للأشعة فوق البنفسجية أيضا إلى تحفيز عملية التمثيل الغذائي في الكبد11 ، ويحمي من السمية الدهنية للخلايا الكبدية وأمراض التمثيل الغذائي ، وله آثار إيجابية على الإندورفين والسلوكيات الجنسية3،6. تشير خطوط الأدلة هذه إلى الآثار الضارة لتجنب التعرض لأشعة الشمس على صحة الإنسان. تعزى الآثار المفيدة للتعرض لأشعة الشمس بشكل أساسي إلى تحريض إنتاج فيتامين (د) ، ومع ذلك ، فإن بعض الفوائد الصحية لأشعة الشمس على الأقل مستقلة عن مستويات فيتامين (د)4،6،12

الجلد هو أكبر عضو في الجسم ، وهو خط الدفاع الأول ضد الضغوطات البيئية. يتم فصل طبقات البشرة والجلد بطبقة بشرة قاعدية تتكون من الخلايا الكيراتينية والخلايا الصباغية غير المتمايزة والمتجددةذاتيا 10. تم العثور على الخلايا الكيراتينية في مراحل متزايدة من التمايز النهائي في طبقة البشرة العليا. تشمل الأدمة الخلايا الليفية والأوعية الدموية ، ويتكون تحت الجلد بشكل أساسي من الخلايا الشحمية. الجلد هو عضو جلدي غدد صماء حيث يتم التعبير عن مستقبلات متعددة للهرمونات ، مثل مستقبلات الأندروجين ومستقبلات الهرمونات المطلقة للكورتيكوتروبين ، في الجلد ، مما يشير إلى أن الهرمونات تؤثر على العمليات في الجلد عن طريق طرق الباراكرين والأوتوكرين13،14،15. الجلد هو أيضا منتج للهرمونات. ومع ذلك ، مع استثناءات قليلة ، لم يتم توثيق إنتاج الهرمونات في الجلد وإطلاقه في الدم ، كما أن محفزات التعبير غير معروفة (مراجعة في16).

ثبت أن الأشعة فوق البنفسجية ب لها إمكانات علاجية في الأمراض الجلدية. العلاج بالضوء ، بما في ذلك العلاج بالأشعة فوق البنفسجية الطويلة والعلاج بالأشعة فوق البنفسجية ضيقة النطاق ، هو طريقة العلاج الرئيسية للبهاقالمعمم 17. حدثت الاستجابة للعلاج بالضوء في 74٪ من المرضى في 6 أشهر و 75٪ من المرضى في 12 شهرا بعد بدء العلاج18. آلية عمل العلاج بالضوء في البهاق غير مفهومة جيدا. يتضمن عمله العلاجي مجموعة من التأثيرات على حركية دورة الخلية ، والتغيرات في التعبير عن السيتوكين ، والتأثيرات على الخلايا الصباغية ، والتعديل المناعي. فحصت العديد من الدراسات آثار العلاج بالضوء على مناعة الجلد19،20،21; ومع ذلك ، فإن الآثار الجهازية غير مفهومة جيدا ، خاصة في سياق البهاق. على عكس الصدفية ، حيث أظهرت دراسة انخفاضا في السيتوكينات المسببة للالتهابات وزيادة في الخلايا التائية التنظيمية بعد العلاج بالضوء ، في البهاق ، انخفض عدد الخلايا التائية التنظيمية مع العلاج بالضوء بالأشعة فوق البنفسجية21.

على الرغم من أن الأشعة فوق البنفسجية لها تأثيرات على الدماغ14،15 ، والغدد الكظرية22 ، والمبايض5،6 ، والخصيتين6 ، والكبد11 ، والغددالليمفاوية 23 ، إلا أن الآليات التي تعدل بها الأشعة فوق البنفسجية UVB الأنظمة الجهازية غير معروفة في الغالب. يصف بروتوكول البحث هذا نموذجا للفأر لدراسة التأثيرات الجهازية والمحلية (الجلدية) للتعرض للأشعة فوق البنفسجية التي من شأنها تسهيل دراسة الآثار الشاملة للتعرض للأشعة فوق البنفسجية. نموذج الفأر UVB له أهمية واسعة في فسيولوجيا الجلد والأمراض الجلدية وسرطان الجلد ، وخاصة الورم الميلانيني. الهدف العام من هذه الطريقة هو توفير بروتوكول بسيط ولكنه قوي وفعال لتطوير نموذج فأر UVB لأسئلة البحث العلمي المتعلقة بالجلد. يصف البروتوكول كيفية التغلب على تحديات حمامي الجلد المرتبطة بإزالة الشعر والتعرض للأشعة فوق البنفسجية في ظل الظروف الفسيولوجية وهو فعال في دراسة الآثار المحلية والجهازية للأشعة فوق البنفسجية على الجلد.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تم تنفيذ جميع الإجراءات التجريبية الموصوفة وفقا لإرشادات اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام في جامعة تل أبيب (تصريح IACUC: 01-20-043).

1. اعتياد الفئران للتجربة

  1. احصل على فئران C57BL / 6J التي تتراوح أعمارها بين 7 و 8 أسابيع إما عن طريق الشراء من بائع تجاري أو التربية داخليا ، اعتمادا على بروتوكول IACUC الخاص بالمترجم. يختبر هذا البروتوكول الفئران البالغة من العمر 15 أسبوعا في خلفية C57BL / 6J ، ولكن يجب معايرة البروتوكول على سلالات الفئران الأخرى وللأعمار الأصغر (< 7 أسابيع).
    ملاحظة: يجب الموافقة على بروتوكول استخدام الفئران المختلفة ذات الفئات العمرية من قبل IACUC التابعة للمؤسسة التي ستجري فيها التجربة. يتم توفير تفاصيل عن الحالة الصحية للحيوانات (الجدول التكميلي 1).
  2. تعويد الفئران لمدة 7 أيام على الأقل قبل بدء التجربة. التعود أمر بالغ الأهمية للفئران بعد النقل والخدمات اللوجستية.

2. إسكان الفئران

  1. قم بإيواء في أقفاص منزلية مع إمكانية الوصول إلى الطعام القياسي والماء في دورة مظلمة / إضاءة قياسية من الساعة 12:00 (ساعات الضوء: 07:00 - 19:00 ساعة ، وساعات الظلام: 19:00-07:00 ساعة) عند درجة حرارة قياسية 22 ± 1 درجة مئوية ورطوبة 32٪ -35٪.
    ملاحظة: لقد اختبرنا هذا البروتوكول على الوصول الغذائي المقيد ، وهو يعمل بشكل جيد في ظل تلك الظروف التجريبية أيضا.
  2. تأكد من أن عدد الفئران لكل قفص يتوافق مع وزن الجسم وحجم القمامة والفرضية التجريبية.

3. الحلاقة وإزالة الشعر

  1. قبل الحلاقة ، ضع الفئران في غرفة الأيزوفلوران المتصلة بمبخر التخدير على 5٪ إيزوفلوران و 1 لتر / دقيقة من الأكسجين.
    ملاحظة: يجب أن تكون المجربات الحذرات أثناء استخدام الأيزوفلوران ، لأن التعرض قد يسبب مخاطر صحية خطيرة ، ويجب على النساء الحوامل تجنبه بأي شكل من الأشكال.
  2. تأكد من أن الفئران غير متحركة وتتنفس باستمرار. استخدم مرهم العين لمنع الجفاف.
  3. قم بتشغيل ماكينة الحلاقة (أبعاد الشفرة LxWxH: 204 × 50 × 41 مم) واحتفظ بها بالتوازي مع جلد الماوس. حرك ماكينة الحلاقة برفق في ماكينة الحلاقة في الاتجاه الأمامي. لا تدفع الجهاز إلى جلد الفأر. يجب أن تحلق جولتان من الحلاقة الفئران بشكل كاف من الجانب الظهري. احلق الفئران ظهريا بحيث يتم حلق 50٪ -60٪ من المنطقة الظهرية (الشكل 1) قبل بدء التعرض للإشعاع. أعد حلق الفئران كلما كانت هناك بقع من إعادة نمو الفراء والتي عادة ما تكون حوالي 0.5 سم.
    ملاحظة: استخدم ماكينة الحلاقة بعناية حتى لا تؤذي أو تمزق جلد. يجب أن يحافظ المجرب على ماكينة الحلاقة متوازية قدر الإمكان مع الجلد قدر الإمكان. يعتمد تواتر حلاقة الشعر على السلالة ونوع العلاج التجريبي المعطى للفئران.
  4. قم بتخدير الفئران من قفص واحد في كل مرة ثم احلقها. بعد الحلاقة ، ضعي كريم إزالة الشعر (بما يكفي لتغطية قضيب الوسادة القطنية) على المنطقة المحلوقة باستخدام ضمادات قطنية. احرص على عدم تعريض كريم إزالة الشعر بالقرب من عيون. يمكن أن يؤدي القيام بخلاف ذلك إلى مضاعفات خطيرة وحكة.
  5. بعد 1-2 دقيقة ، اغسل المنطقة برفق بأنسجة مغموسة في محلول ملحي عازل للفوسفات المعقم (PBS) لإزالة آثار كريم إزالة الشعر من جسم الفأر لإزالة آثار الشعر العالق.
    ملاحظة: قد يؤدي إطالة التوقيت (> 5 دقائق) باستخدام كريم إزالة الشعر إلى الإضرار بجلد الفئران ويجب تجنبه. يرجى التأكد من أن درجة حرارة PBS محيطة بدرجة حرارة الغرفة وليست شديدة البرودة.
  6. جفف المنطقة المحلوقة بأنسجة رخوة ، متبوعا بوضع الفئران في قفص التعافي النظيف والجاف مع فراش القفص. راقب الفئران عن كثب حتى تستعيد وعياتها.
    ملاحظة: يمكن لمصباح ضوء الأشعة تحت الحمراء أن يضمن عدم انخفاض درجة حرارة جسم الفئران بشكل كبير بعد خطوات الغسيل.
  7. دع الفئران ترتاح في قفصها المنزلي مع الطعام والماء والتعافي من إجراء الحلاقة لمدة 10 أيام على الأقل قبل التعرض الأول للأشعة فوق البنفسجية.
    ملاحظة: إذا تعرضت الفئران للأشعة فوق البنفسجية قبل 10 أيام من الحلاقة ، فقد يؤدي ذلك إلى حمامي الجلد.

4. إعداد التعرض للأشعة فوق البنفسجية

  1. ارتد قميصا بأكمام طويلة وسروالا ومعطف مختبر وحذاء مغلق وقفازات مزدوجة وواقي للوجه. قم بإجراء التشعيع داخل غطاء بيولوجي مع غطاء زجاج شبكي مقاس 10 مم لمنع تعرض المجرب للأشعة فوق البنفسجية.
  2. ضع مصباح UVB على حجرة زجاج Plexi الشفافة دون تشغيله ، كما هو موضح في الشكل 2.
  3. قم بتشغيل مصباح UVB واتركه يعمل حتى تصبح الشدة ثابتة. ضع مقياس الإشعاع UVX عن طريق التشغيل كما هو مراقب باستخدام مقياس إشعاع UVX مزود برأس قياس UVB. تأكد من تشغيل مقياس الإشعاع UVX إلى 20 ميجاواط / سم2 وقراءة الإعدادات على مقياس الإشعاع. اسمح لمصباح UVB بالتسخين والاستقرار لمدة 2 دقيقة على الأقل. عندما يكون المصباح جاهزا للاستخدام ، أخرج مقياس الإشعاع UVX.
  4. استخدم قفصا نظيفا بخلاف قفص المنزل للإشعاع ، وضعه في الغطاء البيولوجي تحت مصباح الأشعة فوق البنفسجية. انقل الفئران إلى قفص التشعيع قبل العلاج باستخدام مصباح الأشعة فوق البنفسجية ON أو OFF للأشعة فوق البنفسجية أو التعرض الوهمي المعني. عالج 2 فأر فقط في المرة الواحدة لتوفير مساحة كافية.
    ملاحظة: تبلغ مساحة أرضية الغرفة 500 سم 2 وارتفاعها الداخلي 14 سم للسماح للفئران بالتحرك بحرية دون التسلق على بعضها البعض أثناء التشعيع. سبب استخدام غرفة التعرض هو تجنب تداخل الفئران مع بعضها البعض أثناء التعرض والتأكد من حصول جميع الفئران على نفس القدر من التعرض للأشعة فوق البنفسجية. سيؤدي إدخال أكثر من فأرين في الغرفة إلى سيناريو تتسلق فيه الفئران على بعضها البعض ، مما سيخلق تناقضا في جرعة الأشعة فوق البنفسجية المعطاة لكل فأر.
  5. احسب مقدار الوقت اللازم لتعريض الفئران لشدة الأشعة فوق البنفسجية المطلوبة باستخدام الآلة الحاسبة. على سبيل المثال ، إذا أظهر مقياس الإشعاع UVX 2 mW / cm2 على شاشة العرض وكان التعريض الضوئي المطلوب هو 50 mJ / cm2 ليتم إعطاؤه للفئران ، فقم بتعريض الفئران لمدة 25 ثانية في غرفة الأشعة فوق البنفسجية أثناء تشغيل مصباح الأشعة فوق البنفسجية.
    ملاحظة: قبل البدء ، تأكد من وضع معدات الحماية المناسبة كما هو مذكور في الخطوة 4.1. تراوحت مدة التعرض طوال فترة العلاج بين 20-120 ثانية. ومع ذلك ، يمكن أن تختلف المدة حسب شدة إشعاع مصباح الأشعة فوق البنفسجية ، وبالتالي يجب حسابها لكل معالجة. لا يتوقع إزالة الفئران من الدراسة حيث لا تظهر عادة أي علامات على فقدان الوزن أو إشارات الألم ، بما في ذلك حروق الجلد الشديدة أو النزيف أو الحمامي أو اللامبالاة أو صعوبة التنفس مع هذا البروتوكول.
  6. قم بتعريض الفئران من الذكور والإناث بشكل منفصل وتنظيف الغرفة بمطهر بين كل جنس لتجنب التلوث المتبادل للروائح للدراسات السلوكية. في حالة تعرض مجموعات مختلفة من الفئران التي عولجت بعلاج إضافي أو المعدلة وراثيا أو المعدلة وراثيا أو الضابطة ، قم بتنظيف الغرفة بين تعرض كل مجموعة لتجنب التلوث المتبادل لعوامل غير معروفة تختلف بين المجموعتين.

5. التعرض للأشعة فوق البنفسجية

  1. قم بتشغيل مصباح UVB وقم بإعداده من الخطوة 4.1. إلى 4.5.
  2. انقل الفئران من قفص المنزل إلى غرفة التعرض للوقت المطلوب. قم بتعريض الفئران للأشعة فوق البنفسجية مرة واحدة يوميا للأيام التجريبية المرغوبة (هنا ، قمنا بعمل 5 أيام / أسبوع) لمدة 8 أسابيع باستخدام حامل XX-15 مزود بمصابيح UVB 15 واط و 302 نانومتر.
    ملاحظة: مدة التعرض ذاتية وتعتمد على السؤال العلمي. يجب ألا تصاب بحمامي جلدية. في حالة الحمامي ، توقف فورا عن التعرض وأبلغ الطبيب البيطري. استخدمنا 5 أيام / أسبوع من التعرض ، باستثناء عطلات نهاية الأسبوع. يمكن تقليل تكرار جرعة الأشعة فوق البنفسجية في ظل ظروف مشابهة لهذا البروتوكول ، لكن التعرض الإضافي سيتطلب معايرة من المجرب.
  3. تعريض الفئران لجرعة UVB تبلغ 50 مللي جول / سم2 ، وهي جرعة حمامية فرعية في سلالة الفأر C57BL / 6J.
    ملاحظة: جرعة الأشعة فوق البنفسجية 50 مللي جول / سم2 هي جرعة حمامية فرعية ، وقد استخدمنا هذه الجرعة لمدة 8 أسابيع في الفئران التجريبية. في تجارب أخرى ، استخدمنا تعريضا واحدا للأشعة فوق البنفسجية بمقدار 200 مللي جول / سم2 لدراسة تلف الحمض النووي4.
  4. ضع الفئران المحلوقة للإشعاع الوهمي (غير المعرضة للأشعة فوق البنفسجية) في غرفة الإشعاع لفترة متساوية من الوقت دون تشغيل مصباح الأشعة فوق البنفسجية واستخدمها كعنصر تحكم في التعرض للأشعة فوق البنفسجية.
    ملاحظة: نظرا لأن الفئران مصابة برهاب الجدد ، يجب أن يكون للتجارب التي تشمل الفئران دائما المجموعة الضابطة ، والتي تخضع لنفس العلاج الزائف مثل العلاج التجريبي.

6. تحليل التعرض للأشعة فوق البنفسجية

ملاحظة: تم القتل الرحيم للفئران باستخدام اختناق ثاني أكسيد الكربون2 وفقا لإرشادات AVMA.

  1. للتحقق من كفاءة الإشعاع ، قم بقياس تصبغ الأذن والذيل (الشكل 2) باستخدام مقياس الطيف الضوئي الجلدي أو أداة مماثلة أو عن طريق تلطيخ خزعات الجلد المناعية متبوعة بتلوين فونتانا ماسون ، كما هو موضحسابقا 4.
  2. التحقق من الصحة باستخدام مقياس الطيف الضوئي الجلدي: معايرة مقياس الطيف الضوئي الجلدي لضبط خط الأساس باستخدام ورق أبيض نظيف وعادي. بمجرد الانتهاء من المعايرة ، ضع مستشعر القياس على أذن الماوس أو ذيله ولاحظ قراءات شدة الميلانين. تظهر مستويات الميلانين على الفئران الوهمية المشعة بالأشعة فوق البنفسجية والأشعة فوق البنفسجية في الشكل 3.
  3. التحقق من الصحة من خلال التألق المناعي: قم بإصلاح خزعات جلد الفئران (2 سم × 2 سم) في 4٪ بارافورمالدهيد وتضمينها في كتل البارافين. شرائح الأنسجة الملطخة بسماكة 10 ميكرومتر مع جسم مضاد مضاد ل CPD (يستخدم بتركيز 1: 100) 24 بين عشية وضحاها عند 4 درجات مئوية ، تليها الأجسام المضادة الثانوية المسماة بالفلورسنت (الجسم المضاد المضاد الثانوي المترافق Alexa-594 للماعز بتركيز 1: 1000) 24 لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة. قم بمضاد تلطيخ الأنسجة باستخدام DAPI واحصل على الصور باستخدام الفحص المجهري الفلوري.
  4. التحقق من الصحة من خلال تلطيخ فونتانا ماسون: قم بإصلاح خزعات جلد الفأر في 4٪ بارافورمالدهيد وقم بتضمينها في كتل البارافين. بقع شرائح مناديل من 10 ميكرومتر للميلانين باستخدام بروتوكول تلطيخ فونتانا ماسون4 مع نترات الفضة ومحلول كلوريد الذهب. قم بتصطيم خزعات الأنسجة باستخدام محلول أحمر سريع نووي وقم بتركيبها باستخدام حامل الأنسجة ، متبوعا بالتقاط صورة المجال الساطع في المجهر.

7. رعاية

  1. إجراء التجارب على وفقا لإرشادات اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدامه.
  2. قم بوزن الفئران أسبوعيا لتقييم حالتها الصحية الأساسية. إزالة مع انخفاض الوزن > 15٪ بين القياسات من التجربة. قم بإزالة التي تظهر عليها إشارات الألم ، بما في ذلك حروق الجلد الشديدة أو النزيف أو الحمامي أو اللامبالاة أو صعوبة التنفس بسبب التعرض للأشعة فوق البنفسجية ، والتضحية وفقا لإرشادات اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدامها.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

تذكر ورقة الطريقة هذه الإجراء المفصل خطوة بخطوة لإنشاء نموذج الماوس المعرض للأشعة فوق البنفسجية. يوضح الشكل 1 بوضوح المنطقة المحلوقة للفأر التمثيلي C57BL / 6J على الجانب الظهري قبل التعرض للأشعة فوق البنفسجية ، مما يدل على حلق 50٪ -60٪ من المنطقة الظهرية. لا يظهر بروتوكول الحلاقة أي علامة على حمامي الجلد ، وهو أمر في غاية الأهمية للدراسات الجلدية. يوضح الشكل 2 إعداد التعرض للأشعة فوق البنفسجية للفئران باستخدام مصابيح الأشعة فوق البنفسجية في غرفة التعرض للأشعة فو...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

منذ فترة طويلة تم التعرف على الأشعة فوق البنفسجية كعامل خطر بيئي لسرطانات الجلد. ومع ذلك ، فقد أضاءت الدراسات الحديثة مجموعة أوسع من تأثيرات الأشعة فوق البنفسجية3. هناك حاجة لدراسات توفر فهما أعمق للتأثيرات الجهازية للأشعة فوق البنفسجية. تعقد الجرعات المختلفة المستخدمة في الأبحاث الأساسية مقارنة بالإعدادات السريرية فهمنا لتأثيرات الأشعة فوق البنفسجية ، مما يؤكد أهمية البحث الذي يسد هذه الفجوات.

يحتوي بروتوكول التعرض للأشعة فوق البنفسجية...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

لا يوجد تضارب في المصالح بين المؤلفين.

شكر وتقدير

تعترف C.L. بدعم المنحة من مجلس البحوث الأوروبي في إطار مبرمج البحث والابتكار Horizon 2020 التابع للاتحاد الأوروبي (اتفاقية المنحة رقم 726225) ، ومركز I-CORE لتنظيم الجينات في الأمراض البشرية المعقدة (رقم 41/11) ، ومؤسسة العلوم الإسرائيلية (ISF ؛ منحة 129/13).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
مطهر أميتي الدوليةلا ينطبق
غرفة التعرضصنع في المنزللا ينطبق
كريم إزالة الشعرفيتلا ينطبق
ماكينة حلاقة الشعرهاينيجر707-303 120 فولت الولايات المتحدة
Isoflurane بيرامال للرعاية الحرجةلا ينطبق
نظام الأيزوفلورانكينت العلميةفيتفلو -1210 إس
برنامج تلفزيونيسيجما ألدريتشTMS-012
غرفة زجاجية شبكيصنع في المنزللا ينطبق
مصباح UVBمنتجات الأشعة فوق البنفسجيةسلسلة XX - 15 وات
مقياس إشعاع UVXمنتجات الأشعة فوق البنفسجية97-0015-02

المراجع

  1. Findlay, G. M. Ultra-violet light and skin cancer. The Lancet. 212 (5491), 1070-1073 (1928).
  2. Linares, M. A., Zakaria, A., Nizran, P. Skin Cancer. Prim Care. 42, 645-659 (2015).
  3. Fell, G. L., Robinson, K. C., Mao, J., Woolf, C. J., Fisher, D. E. Skin β-endorphin mediates addiction to UV light. Cell. 157 (7), 1527-1534 (2014).
  4. Parikh, S., et al. Food-seeking behavior is triggered by skin ultraviolet exposure in males. Nat Metab. 4 (7), 883-900 (2022).
  5. Parikh, R., et al. Seasonal AMH variability implies a positive effect of UV exposure on the deterioration of ovarian follicles. Steroids. 200, 109307(2023).
  6. Parikh, R., et al. Skin exposure to UVB light induces a skin-brain-gonad axis and sexual behavior. Cell Rep. 36 (8), 109579(2021).
  7. Lindqvist, P. G., et al. Avoidance of sun exposure as a risk factor for major causes of death: a competing risk analysis of the Melanoma in Southern Sweden cohort. J Intern Med. 280 (4), 375-387 (2016).
  8. Epstein, E., Lindqvist, P. G., Geppert, B., Olsson, H. A population-based cohort study on sun habits and endometrial cancer. Br J Cancer. 101 (3), 537-540 (2009).
  9. Miguet, M., Venetis, S., Rukh, G., Lind, L., Schiöth, H. B. Time spent outdoors and risk of myocardial infarction and stroke in middle and old aged adults: Results from the UK Biobank prospective cohort. Environ Res. 199, 111350(2021).
  10. Weller, R. B. Sunlight has cardiovascular benefits independently of Vitamin D. Blood Purif. 41 (1-3), 130-134 (2016).
  11. Ferguson, A. L., et al. Exposure to solar ultraviolet radiation limits diet-induced weight gain, increases liver triglycerides and prevents the early signs of cardiovascular disease in mice. Nutr Metab Cardiovasc Dis. 29 (6), 633-638 (2019).
  12. Agarwal, S., Krishnamurthy, K. Histology, Skin. , StatPearls Publishing. (2024).
  13. Zouboulis, C. The human skin as a hormone target and an endocrine gland. Hormones. 3 (1), 9-26 (2004).
  14. Arck, P. C., Slominski, A., Theoharides, T. C., Peters, E. M. J., Paus, R. Neuroimmunology of stress: Skin takes center stage. J Invest Dermatol. 126 (8), 1697-1704 (2006).
  15. Slominski, A. T., Zmijewski, M. A., Plonka, P. M., Szaflarski, J. P., Paus, R. How UV light touches the brain and endocrine system through skin, and why. Endocrinology. 159, 1992-2007 (2018).
  16. Zouboulis, C. C. The skin as an endocrine organ. Dermatoendocrinol. 1 (5), 250-252 (2009).
  17. Bouceiro Mendes, R., Alpalhão, M., Filipe, P. UVB phototherapy in the treatment of vitiligo: State of the art and clinical perspectives. Photodermatol Photoimmunol Photomed. 38 (3), 215-223 (2022).
  18. Zubair, R., Hamzavi, I. H. Phototherapy for Vitiligo. Dermatol Clin. 38 (1), 55-62 (2020).
  19. Tang, X., Yang, T., Yu, D., Xiong, H., Zhang, S. Current insights and future perspectives of ultraviolet radiation (UV) exposure: Friends and foes to the skin and beyond the skin. Environ Int. 185, 108535(2024).
  20. Ullrich, S. E. Immune modulation by phototherapy: why immune suppression. Expert Rev Dermatol. 3 (1), 7-9 (2008).
  21. Yu, Z., Wolf, P. How it works: The immunology underlying phototherapy. Dermatol Clin. 38 (1), 37-53 (2020).
  22. Skobowiat, C., Slominski, A. T. Ultraviolet B (UVB) activates hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis in C57BL/6 Mice. J Invest Dermatol. 135 (6), 1638-1648 (2015).
  23. Tse, B. C. Y., et al. Exposure to solar ultraviolet radiation establishes a novel immune suppressive lipidome in skin-draining lymph nodes. Front Immunol. 13, 1045731(2022).
  24. Malcov-Brog, H., et al. UV-protection timer controls linkage between stress and pigmentation skin protection systems. Mol Cell. 72 (3), 444-456.e7 (2018).
  25. D’Orazio, J., Jarrett, S., Amaro-Ortiz, A., Scott, T. UV radiation and the skin. Int J Mol Sci. 14 (6), 12222-12248 (2013).
  26. Li, Y., et al. Assessment of efficacy and safety of UV-based therapy for psoriasis: a network meta-analysis of randomized controlled trials. Ann Med. 54 (1), 159-169 (2022).
  27. Mehta, D., Lim, H. W. Ultraviolet B phototherapy for Psoriasis: Review of practical guidelines. Am J Clin Dermatol. 17 (2), 125-133 (2016).
  28. Maliah, A., et al. Crosslinking of Ly6a metabolically reprograms CD8 T cells for cancer immunotherapy. Nat Commun. 15 (1), 8354(2024).
  29. Parikh, S., et al. Food-seeking behavior is triggered by skin ultraviolet exposure in males. Nat Metab. 4 (7), 883-900 (2022).
  30. Parikh, R., et al. Skin exposure to UVB light induces a skin-brain-gonad axis and sexual behavior. Cell Rep. 36 (8), 109579(2021).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

التعرض المزمن للأشعة فوق البنفسجية ب (UVB)نموذج الفأرتصبغ الجلدمعايرة جرعة الأشعة فوق البنفسجية بالقياس الطيفي الجلديإفراز الغريلينالاستجابة المعتمدة على الجنستنشيط p53العلاج الضوئي
دراسة التعرض المزمن للفئران للأشعة فوق البنفسجية B
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.