يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

استخراج وتوصيف روتين الفلافونويد من الطب الصيني التقليدي Flos sophorae immaturus

1.2K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/67417

⸱

أكتوبر 31, 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1School of Chinese Materia Medica, Beijing University of Chinese Medicine

في هذه المقالة

ملخص

يمثل الطب الصيني التقليدي كنزا غنيا من خيارات العلاج الطبيعي ويلعب دورا مهما في تلبية الاحتياجات الصحية المتنوعة في جميع أنحاء العالم. تقدم هذه الدراسة تحقيقا تجريبيا شاملا حول الاستخراج والفصل والخصائص الفيزيائية والكيميائية للروتين ، المكون النشط الرئيسي ل Flos sophorae immaturus.

الملخص

لطالما كان الطب الصيني التقليدي (TCM) بمثابة مستودع غني للحلول العلاجية الطبيعية ، حيث يلعب دورا محوريا في تلبية احتياجات الرعاية الصحية المتنوعة في جميع أنحاء العالم. من بين الأعشاب المختلفة المستخدمة في الطب الصيني التقليدي ، تشتهر Sophora flavescens بمجموعة واسعة من الخصائص الطبية. يعود تطبيقه إلى قرون مضت ولا يزال يحظى بتقدير كبير في الطب الحديث ، لا سيما لفوائده العلاجية في علاج أمراض القلب والأوعية الدموية. روتين ، مركب مركب فلافونويد نشط بيولوجيا ، موزع على نطاق واسع في جميع أنحاء المملكة النباتية ، مع أعلى تركيز موجود في Flos sophorae immaturus. تم الإبلاغ عن روتين لتقليل نفاذية الشعيرات الدموية غير الطبيعية والهشاشة ويعمل كعامل وقائي للأوعية الدموية والأوعية الدموية الدماغية. تقدم هذه الدراسة بروتوكولا تجريبيا مفصلا لاستخراج وفصل وتوصيف الخصائص الفيزيائية والكيميائية للروتين المشتق من Flos sophorae immaturus. بالإضافة إلى ذلك ، يتم تقديم ووصف بروتوكول استخراج مركبات الفلافونويد من الطب الصيني التقليدي باستخدام طريقة استخراج القلويات والترسيب الحمضي.

المقدمة

كان Flos sophorae immaturus (FSI) ، برعم الزهرة المجففة ل Sophora japonica L. ، حجر الزاوية في الطب الصيني التقليدي (TCM) لعدة قرون. وتشمل مكوناته النشطة الرئيسية الروتين, isoquercitrin, Sophorae فلوس, وغيرها من مركبات الفلافونويد والصابونين. تمنح هذه المكونات بشكل جماعي مجموعة متنوعة من التأثيرات الدوائية ، مثل إزالة الحرارة وإزالة السموم وتبريد الدم والإرقاء وخفض ضغط الدم. في الممارسة السريرية ، يتم تقييم FSI في المقام الأول لقدرته على حماية نفاذية الشعيرات الدموية1 ، والحفاظ على وظيفة نظام القلب والأوعيةالدموية 2 ، وتبريد الدم ، وإيقاف النزيف ، وتنظيم حريق الكبد3. تعزى خصائصه العلاجية إلى تركيز عال من الروتين (كيرسيتين -3-روتينوسيد) ، وهو فلافونويد نشط بيولوجيا يشكل ما يصل إلى 20٪ -30٪ من وزنه الجاف4.

روتين هو مركبات الفلافونويد الموزعة على نطاق واسع في النباتات. اسمها الكيميائي هو Que-3-O-rutin (C27H30O16) (الشكل 1). في درجة حرارة الغرفة ، يظهر الروتين على شكل مسحوق بلوري أصفر فاتح إلى أصفر وأخضر. تختلف نقطة انصهاره باختلاف شكله البلوري والنقاوة ، وتتراوح عادة بين 125 درجة مئوية و 195 درجة مئوية. يظهر روتين خصائص قطبية واضحة: فهو قابل للذوبان قليلا في الماء البارد ، وقابل للذوبان بدرجة عالية في المذيبات العضوية القطبية مثل الإيثانول والميثانول ، وغير قابل للذوبان تقريبا في المذيبات غير القطبية مثل الأثير والكلوروفورم. بالإضافة إلى ذلك ، فإن قابليته للذوبان حساسة للأس الهيدروجيني وتزداد بشكل كبير في ظل الظروف القلوية بسبب تفكك مجموعات الهيدروكسيل الفينولية التي تشكل أملاح الصوديوم أو البوتاسيوم. ترتبط هذه الخصائص الفيزيائية ارتباطا وثيقا بمجموعات البولي هيدروكسيل والجليكوسيد في تركيبها الجزيئي5 ، مما يؤثر بشكل مباشر على عملية الاستخراج والتطبيقات في الطب والغذاء والصناعات الأخرى6. روتين ، على الرغم من وجوده في كل مكان في النباتات ، إلا أنه أكثر وفرة في FSI ويظهر العديد من الأنشطة الدوائية ، بما في ذلك تثبيت الشعيرات الدموية7 ، ومضاد للالتهابات ، ومضاد للأكسدة8 ، ومضاد للميكروبات9 ، والتأثيرات التنظيمية الأيضية10.

على الرغم من إمكاناته السريرية11 ، فإن ضعف الذوبان المائي للروتين واستقراره يشكلان تحديات للاستخراج والصياغة5. لمعالجة هذه القيود ، ظهرت طريقة ترسيب الأحماض القلوية (AEAP) كبديل فعال ، مستفيدة من السلوك المعتمد على الأس الهيدروجيني لمجموعات هيدروكسيل الفينول.

استنادا إلى الخصائص الفيزيائية للروتين ، أصبحت طريقة AEAP تقنية موحدة لعزل الروتين عن FSI ، باستخدام قابليته للذوبان في المحاليل القلوية والتبلور اللاحق في ظل الظروف الحمضية12. يستغل AEAP التأين القابل للتحويل بدرجة الحموضة لمجموعات هيدروكسيل الفينول لتحسين الإنتاجية وتحقيق استخراج روتين عالي النقاء من FSI. في ظل الظروف القلوية (الرقم الهيدروجيني >10) ، تنزع المجموعات الفينولية -OH لتكوين أيونات O- محبة للماء ، مما يتيح الذوبان الكامل من الأنسجة النباتية مع تقليل التدهور التأكسدي. يؤدي التحمض إلى درجة الحموضة 2-3 إلى عكس هذا التأين ، مما يؤدي إلى ترسيب الفينولات المستهدفة مع الحد الأدنى من الترسيب المشترك للشوائب القطبية. باعتباره مادة البوليفينول ذات قابلية الذوبان المعتمدة على الأس الهيدروجيني ، يذوب الروتين بسهولة في المحاليل القلوية (على سبيل المثال ، هيدروكسيد الصوديوم) ولكنه يترسب في ظل ظروف حمضية بسبب بروتون مجموعة الهيدروكسيل. يوفر AEAP بديلا فعالا من حيث التكلفة وقابلا للتطوير وصديقا للبيئة ، يتماشى مع مبادئ الكيمياء الخضراء عن طريق تجنب المذيبات السامة13. إنه يعكس اتجاها أوسع في كيمياء المنتجات الطبيعية التي تفضل تقنيات الفصل التي تعتمد على الأس الهيدروجيني14. يتم استخدام طرق مماثلة لعزل الكركمين (من الكركم) والبربارين (من القبطين chinensis) ، واستغلال تغيرات الذوبان عند قيم الأس الهيدروجيني المحددة للاستخراج الانتقائي. تعتبر طريقة AEAP مثالية لإنتاج روتين عالي الإنتاجية من مصادر غنية بالفلافونويد مثل FSI ، ولا تتطلب فقط معدات مختبرية أساسية (على سبيل المثال ، مقاييس الأس الهيدروجيني ، أجهزة الطرد المركزي). بالنسبة للمصفوفات النباتية ذات المحتوى المنخفض من الروتين أو المركبات المتداخلة المعقدة ، يمكن التفكير في المعالجة المسبقة للتحلل المائي الأنزيمي في المستقبل لتعزيز كفاءة الاستخراج.

في الختام ، يمثل AEAP نهجا مناسبا لاستخراج روتين ، وتحقيق التوازن بين الفعالية والسلامة وقابلية التوسع. يسلط دورها في تحديث الطب الصيني التقليدي الضوء على قدرتها على ربط الممارسات التقليدية بالمعايير الصيدلانية المعاصرة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

الروتين عبارة عن فلافونويد يحتوي على مجموعات هيدروكسيل فينولية متعددة وقابل للذوبان في المحاليل القلوية الساخنة ، يليه التحمض والهطول الأمطار. يمكن استخراجه باستخدام عملية ترسيب حمض استخراج القلويات. يتم سرد الكواشف والمعدات المستخدمة في هذه الدراسة في جدول المواد.

1. التحضير التجريبي

  1. احصل على المواد التالية: Flos sophorae immaturus (20 جم) ، البوراكس (0.8 جم) ، عدة أكواب ، مسحوق الجير (1.5 جم) ، حمض الهيدروكلوريك المركز ، ميزان الحرارة ، وشرائط اختبار الأس الهيدروجيني. انظر الشكل 2 للحصول على نسخة أكبر من هذه الصورة.

2. استخراج روتين

ملاحظة: استخدم نسبة البوراكس إلى الماء من 0.8 جم من البوراكس إلى 200 مل من الماء. استخدم نسبة حليب الليمون من 1.5 جرام من مسحوق الليمون إلى 10 مل من الماء. اضبط الرقم الهيدروجيني بسرعة ودقة. جدد المياه المفقودة حسب الحاجة.

  1. استخراج القلويات
    ملاحظة: قم بالتصفية باستخدام ورق ترشيح دائري مقاس 6 سم.
    1. أضف 250 مل من الماء و 0.8 جم من البوراكس إلى دورق سعة 500 مل. يسخن حتى الغليان ، ثم يضاف 20 جم من Flos sophorae immaturus. استمر في الغليان لمدة 2-3 دقائق.
    2. بعد الغليان ، اضبط الرقم الهيدروجيني على 8-9 مع حليب الليمون تحت التحريك. استمر في التسخين لمدة 20 دقيقة. قم بالتصفية من خلال الشاش وهو ساخن للحصول على مرشح أصفر وبني.
  2. استخراج الترسيب الحمضي
    1. اضبط المستخلص على درجة الحموضة 2-3 باستخدام حمض الهيدروكلوريك المركز واتركه يستقر. يشير التغيير من محلول أصفر بني شفاف إلى محلول عكر ، إلى جانب التكوين التدريجي لراسب ندف برتقالي أصفر في قاع الحاوية ، إلى فصل روتين فعال.
    2. بعد الوقوف لمدة 6 ساعات ، قم بإخضاع الراسب لترشيح شفط الضغط الجوي. اجمعها وجففها للحصول على الروتين الخام.
      ملاحظة: قم بقص فيلم المرشح وفقا لحجم قمع برينل المستخدم (قطر 150 مم).
    3. اغسل الراسب بالماء حتى يصبح محايدا أثناء ترشيح شفط الضغط الجوي.

3. تكرير روتين

  1. بعد الوزن الخشن ، أعد بلورة الروتين باستخدام الماء الساخن بنسبة ذوبان 1: 200. اغلي المحلول المائي لمدة 30 دقيقة ثم صفيه وهو ساخن. تأكد من أن الحجم النهائي لمحلول روتين هو 210 مل.
  2. قم بتصفية البقايا. اترك المرشح يقف دون إزعاج ، ثم قم بالتصفية مرة أخرى وجففه تحت الفراغ في فرن عند 60-70 درجة مئوية للحصول على روتين مكرر (الشكل 3).
    ملاحظة: قم بقص فيلم المرشح وفقا لحجم قمع برينل المستخدم (قطر 150 مم).

4. التحديد الفيزيائي والكيميائي للروتين

  1. تفاعل ملح هيدروكلوريد والمغنيسيوم - تحديد نوى الفلافونويد الأم
    1. قم بإذابة 1-2 مل من العينة في الميثانول وأضف 50 مجم من مسحوق المغنيسيوم.
    2. أضف بضع قطرات من حمض الهيدروكلوريك المركز. رج العبوة برفق. يجب أن يتحول لون المحلول إلى اللون الأحمر (الشكل 4).
  2. تفاعل موليش - تحديد مركبات السكر
    1. أضف محلول الإيثانول بنسبة 10٪ من α-naphthol ورجها. قم بإمالة أنبوب الاختبار وأضف حمض الكبريتيك المركز بعناية باتجاه قطري على طول الجدار الداخلي.
    2. لاحظ تكوين حلقة بنية اللون عند الواجهة (الشكل 5).
  3. تخضير تفاعل حمض الزركونيا وحمض الستريك
    1. أضف 1-2 مل من محلول α نفثول بنسبة 10٪ إلى محلول الإيثانول للعينة. رج العبوة جيدا. أضف ببطء 10 قطرات من H2SO4 المركز على طول جدار الأنبوب دون اهتزاز.
    2. أضف محلول ميثانول حامض الستريك 2٪. يجب أن يفتح لون المحلول (الشكل 6).
  4. تمييز الطبقة الرقيقة
    1. استخدم كلا من معيار الروتين والروتين المكرر.
    2. استخدم الكلوروفورم: الميثانول: حمض الفورميك (15: 5: 1) كعامل تطوير ، ومحلول إيثانول 1٪ من AlCl3 كعامل كروموجيني. راقب التألق تحت مصباح الأشعة فوق البنفسجية عند 365 نانومتر.

5. فحص TLC للروتين

ملاحظة: تم استخدام طريقة كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة (TLC) لتقييم نقاء الروتين. تم استخدام صفيحة هلام السيليكا كمرحلة ثابتة.

  1. ضع عينة الروتين المكررة ومعيار الروتين (1 مجم / مل في الميثانول) على اللوحة. قم بتطوير اللوحة في مرحلة متحركة تتكون من أسيتات الإيثيل: حمض الفورميك: الماء (8: 1: 1 ، v / v / v).
  2. بعد التجفيف ، تخيل اللوحة تحت ضوء الأشعة فوق البنفسجية عند 254 نانومتر.
  3. احسب عامل الاحتفاظ (Rf) لبقعة العينة ومقارنته بالمعيار.
    ملاحظة: تشير البقعة الواحدة ذات قيمة التردد اللاسلكي المتطابقة (حوالي 0.35-0.50 في ظل هذه الظروف) إلى نقاء عال ، بينما تشير البقع الإضافية إلى وجود شوائب.

6. تحديد نقاء روتين بواسطة HPLC

ملاحظة: تم تحليل نقاء الروتين كميا بواسطة الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء (HPLC). كانت شروط التحليل على النحو التالي: عمود كروماتوغرافي- (250 مم × 4.6 مم ، 5 ميكرومتر) ؛ أسيتونيتريل الطور المتحرك (A) و 0.2٪ محلول مائي من حمض الخليك (B). برنامج شطف التدرج الخطي: 0-15 دقيقة ، 20٪ -30٪ أ ؛ 15-30 دقيقة ، 30٪ -60٪ A. معدل التدفق -1 مل / دقيقة. حجم الحقن -10 ميكرولتر. الطول الموجي للكشف -355 نانومتر. درجة حرارة العمود -40 درجة مئوية.

  1. قم بوزن 0.1 جرام من مسحوق عينة روتين بدقة وانقله إلى أنبوب طرد مركزي سعة 10 مل. أضف 5.0 مل من محلول الإيثانول بنسبة 60٪ ورجها جيدا.
  2. اضبط حمام مائي بدرجة حرارة ثابتة أو فرن عمود على 30 درجة مئوية وقم بتصوير العينة بالموجات فوق الصوتية لمدة 30 دقيقة.
  3. قم بالطرد المركزي للعينة عند 55,900 × جم لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. استخدم المادة الطافية كحل اختبار لتحليل HPLC.

7. تحديد روتين بواسطة LC-MS

ملاحظة: تم تحديد المركبات المعزولة بواسطة قياس الطيف الكتلي السائل (LC-MS). تطابق شروط LC مع طريقة HPLC. تم إجراء قياس الطيف الكتلي باستخدام التأين بالرش الكهربائي (ESI) في وضع الأيونات السالبة بجهد شعري يبلغ 3.5 كيلو فولت. درجة حرارة الذوبان -350 درجة مئوية ؛ نطاق المسح الشامل M / Z 100-1000.

  1. تزن 10 مجم من عينة روتين المنقاة وانقلها إلى أنبوب طرد مركزي دقيق سعة 2 مل. أضف 0.6 مل من DMSO المصنوع من الوسائط الديناميكية المادية باستخدام ماصة حتى تذوب العينة تماما. قم بإعداد محاليل روتين القياسية باستخدام نفس الإجراء.
  2. تحليل العينات والمعايير المعالجة باستخدام التحليل الطيفي بالرنين المغناطيسي النووي للبروتون (1H NMR).
  3. معالجة البيانات الطيفية باستخدام برنامج متوافق15.
  4. قارن البيانات الطيفية مع الأدبيات أو مراجع قاعدة البيانات مثل NIST أو PubChem للتحقق.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

في تجربة التعريف الفيزيائية والكيميائية للروتين ، تحول المحلول إلى اللون الأحمر بعد إضافة مسحوق المغنيسيوم وكمية صغيرة من حمض الهيدروكلوريك المركز ، متبوعا بالاهتزاز ، مما يشير إلى وجود نواة أصل فلافونويد. في تفاعل موليش ، تشكلت حلقة أرجوانية عند الواجهة ، مما يشير إلى نتيجة إيجابية ووجود شقوق السكر في التركيب الجزيئي. تحول محلول العينة إلى اللون الأصفر الفاتح عند إضافة كاشف أكسدة الكلورو بنسبة 2٪ في الميثانول ، مما يشير إلى وجود هياكل فلافون تحتوي على مجموعات 3-OH أو 5-OH. عند الإضافة اللاحقة ل 2٪ من حامض الستريك في الم...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

يعتمد استخراج الروتين بشكل أساسي على طريقة ترسيب الحمض القلوي (AEAP)6 ، والتي توفر مزايا متطلبات المعدات البسيطة ، وسهولة التشغيل ، والكفاءة العالية ، والتكلفة المنخفضة. غالبا ما يتم استكمال هذه التقنية بالاستخراج بمساعدة الميكروويف (MAE)7 والاستخراج بمساعدة الموجات فوق الصوتية (الإمارات العربية المتحدة)8 ، مما يقلل من استهلاك الكاشف ، ويسرع وقت الاستخراج ، ويحسن العائد الإجمالي.

أظهرت الد...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن مؤلفو هذه الورقة بموجبه أنهم كشفوا عن أي وجميع تضارب المصالح الذي قد يكون قد نشأ أثناء إجراء هذا البحث وكتابة هذا المقال. نؤكد أنه ليس لدينا علاقات مالية أو شخصية أو مهنية يمكن أن تتحيز تفسيرنا للنتائج أو الاستنتاجات المقدمة في هذا العمل. على وجه التحديد ، ليس لدينا أي علاقات بأي شركات أدوية أو مؤسسات بحثية أو كيانات أخرى يمكن أن تستفيد من النتائج الواردة هنا. أخيرا ، نؤكد أن النتائج والاستنتاجات التي توصلنا إليها تستند فقط إلى البيانات والتحليلات المقدمة في هذه الورقة ولا تتأثر بأي عوامل خارجية. نظل ملتزمين بأعلى معايير النزاهة الأكاديمية والسلوك الأخلاقي في جميع أنشطتنا البحثية.

شكر وتقدير

نود أن نعرب عن امتناننا العميق لمختبر الكيمياء الصيدلانية في جامعة بكين للطب الصيني لتوفير المنصة التجريبية. كان دعمهم ومواردهم لا تقدر بثمن في إجراء أبحاثنا وتجاربنا. نحن نقدر بشدة تفانيهم في التميز العلمي والتزامهم بتعزيز تطوير الباحثين الشباب.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
1-نفثولماكلينC16245764
حمض الخليكماكلينC12662811
الأسيتونيتريلماكلينC16129374
كلوريد الألمنيومماكلينC16485922
حمض الستريكماكلينC16429480
DMSOشركة فوتشن (تيانجين) للمواد الكيميائية للمواد المحدودة20230306
ايثانولشركة فوتشن (تيانجين) للمواد الكيميائية للمواد المحدودة20250102
أسيتات الإيثيلشركة فوتشن (تيانجين) للمواد الكيميائية للمواد المحدودة20240318
Flos sophorae immaturusبكين تونغرينتانغ10092026329782
حمض الفورميكشركة فوتشن (تيانجين) للمواد الكيميائية للمواد المحدودة20150402
‌ MestReNovaأبحاث مسترلاب/
الميثانول  الإينوشمC16365684
جل السيليكا 60F254ستيما20210222
إكسكاليبرثيرمو فيشر العلمي/
أوكتاهيدرات كلوريد الزركونيلماكلينC15350627

المراجع

  1. Drew, A. K., et al. Chinese herbal medicine toxicology database: Monograph on Radix Sophorae Flavescentis, "ku shen". J Toxicol Clin Toxicol. 40 (2), 173-176 (2002).
  2. Chua, L. S. A review on plant-based rutin extraction methods and its pharmacological activities. J Ethnopharmacol. 150 (3), 805-817 (2013).
  3. Huang, R., et al. Evaluation of the synergetic effect of Yupingfeng San and Flos Sophorae Immaturus based on free radical scavenging capacity. Biomed Pharmacother. 128, 110265(2020).
  4. Li, R., Wang, C., Lei, P., Huang, L., Yuan, S. Chemical constituents in Flos sophorae carbonisatus. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 35 (5), 607-609 (2010).
  5. Ghorbani, A. Mechanisms of antidiabetic effects of flavonoid rutin. Biomed Pharmacother. 96, 305-312 (2017).
  6. Calabrese, E. J., et al. Rutin, a widely consumed flavonoid, that commonly induces hormetic effects. Food Chem Toxicol. 187, 114626(2024).
  7. Li, R. R., Yuan, S. T., Li, Z. H., Qin, H. L. Studies on chemical constituents in Flos sophorae carbonisatus. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 30 (16), 1255-1257 (2005).
  8. Nikfarjam, B. A., Adineh, M., Hajiali, F., Nassiri-Asl, M. Treatment with rutin - a therapeutic strategy for neutrophil-mediated inflammatory and autoimmune diseases: Anti-inflammatory effects of rutin on neutrophils. J Pharmacopuncture. 20 (1), 52-56 (2017).
  9. Singh, S., et al. Rutin protects t-butyl hydroperoxide-induced oxidative impairment via modulating the Nrf2 and iNOS activity. Phytomedicine. 55, 92-104 (2019).
  10. Cushnie, T. P., Lamb, A. J. Antimicrobial activity of flavonoids. Int J Antimicrob Agents. 26 (5), 343-356 (2005).
  11. Budzynska, B., et al. Rutin as neuroprotective agent: From bench to bedside. Curr Med Chem. 26 (27), 5152-5164 (2019).
  12. Tan, Y. Q., et al. Pharmacological properties of total flavonoids in Scutellaria baicalensis for the treatment of cardiovascular diseases. Phytomedicine. 107, 154458(2022).
  13. Tobar-Delgado, E., Mejía-España, D., Osorio-Mora, O., Serna-Cock, L. Rutin: Family farming products' extraction sources, industrial applications and current trends in biological activity protection. Molecules. 28 (15), 5864(2023).
  14. Wang, S., et al. Effect of combined ultrasonic and enzymatic extraction technique on the quality of noni (Morinda citrifolia L.) juice. Ultrason Sonochem. 92, 106231(2023).
  15. Dos Santos Dantas, T., et al. Phytochemical profile analysis by LC-ESI-MS(n) and LC-HR-ESI-MS and validated HPLC method for quantification of rutin in herbal drug and products from leaves of Croton blanchetianus. Biomed Chromatogr. 37 (9), e5665(2023).
  16. Santiago, M., Strobel, S. Thin layer chromatography. Methods Enzymol. 533, 303-324 (2013).
  17. Ravber, M., et al. Hydrothermal degradation of rutin: Identification of degradation products and kinetics study. J Agric Food Chem. 64 (48), 9196-9202 (2016).
  18. Zhang, Z., et al. Effect of pH regulation on the components and functional properties of proteins isolated from cold-pressed rapeseed meal through alkaline extraction and acid precipitation. Food Chem. 327, 126998(2020).
  19. Lv, H., et al. Extraction and separation of vitisin D, ampelopsin B and cis-vitisin A from Iris lactea Pall. var. chinensis (Fisch.) Koidz by alkaline extraction-acid precipitation and high-speed counter-current chromatography. J Chromatogr Sci. 54 (5), 744-751 (2016).
  20. Yang, Y., Chu, X., Li, Y., Meng, H., Qin, L. Alkali-extracted rhamnogalactoarabinan from Chaetomorpha linum: Characterisation and anti-type 2 diabetic effect. Carbohydr Polym. 356, 123388(2025).
  21. Gao, S., et al. Unveiling polysaccharides of Houttuynia cordata Thunb.: Extraction, purification, structure, bioactivities, and structure-activity relationships. Phytomedicine. 138, 156436(2025).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

الفيديو قريباً
اتصل بنا
أوصِ بها للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

2026 © حقوق الطبع والنشر MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.