نقدم هنا بروتوكولا لإنشاء نموذج فأر لاعتلال عضلة القلب السكري وجهاز تثبيت الوخز بالإبر الكهربائية للفأر لاستخدام الوخز بالإبر الكهربائية في الفئران ، والذي يمكنه إصلاح الفئران بلطف أكبر أثناء العلاج.
مقالة منهجية
* These authors contributed equally
نقدم هنا بروتوكولا لإنشاء نموذج فأر لاعتلال عضلة القلب السكري وجهاز تثبيت الوخز بالإبر الكهربائية للفأر لاستخدام الوخز بالإبر الكهربائية في الفئران ، والذي يمكنه إصلاح الفئران بلطف أكبر أثناء العلاج.
اعتلال عضلة القلب السكري (DCM) هو أحد مضاعفات مرض السكري التي يمكن أن تتطور إلى قصور القلب وتقتصر على استخدام الأدوية. الوخز بالإبر الكهربائية هو وسيلة فعالة كطريقة علاج خارجية للطب الصيني التقليدي لعلاج اعتلال عضلة القلب السكري. يمكن لجهاز تثبيت الوخز بالإبر الكهربائية للفأر إصلاح الفئران بسهولة وبلطف أثناء علاج الوخز بالإبر الكهربائية وكشف نقاط الوخز بالإبر على بطن وأطراف الفئران. توضح هذه المقالة الطرق المستخدمة لتصنيع جهاز تثبيت الوخز بالإبر الكهربائية للفأر بجميع الخطوات والاحتياطات ، وإنشاء نموذج فأر لاعتلال عضلة القلب السكري مع تدابير شاملة لتسجيل التغيرات في المؤشرات الكيميائية الحيوية للدم مثل جلوكوز الدم. أجريت التجربة على 3 مجموعات: مجموعة ضابطة ، ومجموعة نموذجية ، ومجموعة معالجة مسبقة ، مع 10 فئران في كل مجموعة. تم علاج مجموعة المعالجة المسبقة عن طريق الوخز بالإبر الكهربائي لنقاط الوخز بالإبر بالإبر مرة واحدة كل يوم بديل لما مجموعه 7 جلسات. بعد الوخز بالإبر الكهربائية ، أظهرت الفئران في مجموعة المعالجة المسبقة انخفاضا في نسبة الجلوكوز في الدم مصحوبا بانخفاض في أعراض مرض السكري.
اعتلال عضلة القلب السكري (DCM) هو أحد المضاعفات الشائعة لداء السكري الذي يتميز بتغيرات في بنية القلب والوظيفة الانبساطي البطيني والانقباضي لآفة معينة ، مما يتطور إلى قصور في القلب. إنه أحد الأسباب الرئيسية للوفاة لدى مرضى السكري1،2 ، وقد اجتذب انتشاره المتزايد اهتماما واسعا في السنوات الأخيرة3. لقد وجد أن التسبب في هذا المرض يشمل بشكل أساسي مقاومة الأنسولين ، والاستجابة الالتهابية ، والتمثيل الغذائي غير الطبيعي للدهون ، والإجهاد التأكسدي ، وتلف الميتوكوندريا4،5.
في الوقت الحاضر ، يعتمد العلاج السريري لاعتلال عضلة القلب السكري بشكل أساسي على الأدوية عن طريق الفم للتحكم في نسبة الجلوكوز في الدم وتخفيف أعراض أمراض القلب ، ولكن له قيود معينة ، مثل تفاعلات الدواء ، وتأثيرات وظائف الكلى ، والاعتماد على الأدوية طويلةالأمد 6. الوخز بالإبر ، كطريقة علاج خارجية للطب الصيني التقليدي ، له تأثير منظم بشكل أفضل على نسبة الجلوكوز في الدم ودهون الدم والاستجابة الالتهابية لدى مرضى اعتلال عضلة القلب السكري ، والفعالية السريرية رائعة7. الوخز بالإبر ليس له آثار سلبية على وظائف الجهاز الهضمي والكلى ، والعلاج طويل الأمد لا ينتج عنه الاعتماد. تعد نظرية نقاط الوخز بالإبر طريقة مهمة لاختيار واستخدام نقاط الوخز بالإبر في النظرية التقليدية للوخز بالإبر8. يحدد نقاط الوخز بالإبر التي يمكن أن تحسن أعراض الأمراض مثل نقاط الوخز ببياو ، وتسمى نقاط الوخز بالإبر التي يمكن أن تنظم الوظائف الأساسية للجسم المتعلقة بالأمراض وتعالج الأسباب الجذرية للأمراض بنقاط الوخز بالبن. يمكن أن يؤدي تحفيز نقاط الوخز بالإبر Biao و Ben Cuppoints في نفس الوقت مع الوخز بالإبر إلى تحقيق الغرض من علاج الأمراض وكذلك زيادة مقاومة الجسم للأمراض ومنع تفاقم وتكرار الأمراض9. يمكن أن يمنع تفاقم المرض وتكراره. أثبتت الأبحاث الحديثة أن الوخز بالإبر باستخدام نقاط الوخز بالإبر Biaoben فعال لمرض السكري ومضاعفاته العديدة ، بما في ذلك أمراض القلب السكرية ، واعتلال الكلية السكري ، واعتلال الشبكية السكري ، والقدم السكرية ، وما إلىذلك 10،11. يتمثل مخطط اختيار نقاط الوخز بالإبر بما يتماشى مع نظرية نقاط الوخز بالإبر Biaoben في اختيار PC6 (Neiguan) ، والذي يمكنه تنظيم وظائف القلب وتحسين الاستجابة الالتهابية مثل نقطة البر Biao12 ، و ST36 (Zusanli) ، والتي يمكن أن تحسن حالة الجلوكوز في الدم والسكر في الدم ، وتحسين مقاومة الأنسولين ، وتقليل الإجهاد التأكسدي ، مثل نقطة الوخز بالإبرBen 13.
تعد النماذج الحيوانية أداة مهمة في دراسة اعتلال عضلة القلب السكري لأنه ثبت تجريبيا أن نماذج الفئران أو الفئران تحاكي بشكل جيد التشوهات الهيكلية والتغيرات الوظيفية للقلب الناجمة عن اعتلال عضلة القلب السكري وتوفر العينات المطلوبة لمؤشرات الكشف الكيميائي الحيوي لاعتلال عضلة القلب السكري14،15. يمكن أن يؤدي استخدام الأعلاف عالية السكر والدهون جنبا إلى جنب مع محلول Streptozotocin لتحفيز الفئران على تكوين نماذج لمرضى السكري في 4-5 أسابيع ، مما يؤدي إلى تقصير وقت النمذجة بشكل فعال وتحسين معدل النجاح ، ولا توجد متطلبات خاصة لبيئة التربية16،17. اعتلال عضلة القلب السكري هو نوع من اعتلال عضلة القلب الناجم عن تلف بنية القلب ووظيفته الناجمة عن ارتفاع السكر في الدم المستمر. مع إطالة مسار المرض ، يمكن تطوير نموذج أمراض القلب السكري بشكل طبيعي بواسطة نموذج السكري تحت ارتفاع السكر في الدم على المدىالطويل 18،19،20. يشير العلاج المسبق للوخز بالإبر إلى المعالجة المسبقة للفئران بعد تكوين مرض السكري وقبل تكوين إصابة عضلة القلب الواضحة. ومع ذلك ، بعد التحفيز التجريبي المتكرر ، غالبا ما تصبح الفئران متحركة ويصعب شمولها ، وقد تتسبب تقنيات التلاعب التجريبي العنيف في إصابة الفئران أو جعلها مهووسة أو مكتئبة21. لذلك ، هناك حاجة إلى طريقة مناسبة لشل حركة الفئران. تشمل الطرق الشائعة الاستخدام لتثبيت الفأر التخدير والربط22. على الرغم من أن طريقة التخدير يمكن أن تكشف نقاط الوخز بالإبر بشكل أفضل ، إلا أنها قد تؤثر على التوصيل العصبي وتؤثر في النهاية على النتائج التجريبية. طريقة الربط هي طريقة الشلل الجسدي ولا تنتج نفس التأثيرات الفسيولوجية مثل التخدير ، لكن الفئران المقيدة ستعاني من توتر كبير ، وزيادة قوة العضلات ، وتحسين التغوط22،23. بالإضافة إلى ذلك ، لا يمكن للإبرة الوصول بسهولة إلى الموضع المطلوب. هنا ، نقدم جهاز تثبيت الوخز بالإبر الكهربائية للفأر الذي يمكن استخدامه لضمان عدم تحرك الفئران وكذلك تعريض نقاط الوخز بالإبر أثناء علاج الوخز بالإبر الكهربائية بحيث يمكن إجراء علاج الوخز بالإبر الكهربائية بشكل مريح وآمن وغير عنيف وبدون عواقب.
توضح هذه المقالة بالتفصيل تصنيع جهاز تثبيت الوخز بالإبر الكهربائي بالفأر وإنشاء نموذج فأر لاعتلال عضلة القلب السكري. عالجنا اعتلال عضلة القلب السكري عن طريق المعالجة المسبقة للوخز بالإبر الكهربائي لنقاط الوخز بالإبر Biaoben ، وأظهرنا كيف تم تحقيق عمليته على جهاز تثبيت الفئران ، وقمنا بتقييم التأثير العلاجي للوخز بالإبر الكهربائي لنقاط الوخز بالإبر Biaoben على اعتلال عضلة القلب السكري عن طريق قياس المؤشرات المتعلقة باستقلاب الجليكوليبيد.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تتوافق جميع التجارب على مع مبدأ 3Rs لأخلاقيات وقد تمت مراجعتها والموافقة عليها من قبل لجنة أخلاقيات التجارب على بجامعة هوبى للطب الصيني التقليدي (رقم التصريح الأخلاقي HUCMS00309300). هنا ، تم الحصول على 30 فأرا من فئة SPF من مركز مقاطعة هوبى لمكافحة الأمراض والوقاية منها (شهادة الجودة رقم 42010200009690).
1. تصنيع جهاز تثبيت الوخز بالإبر الكهربائية
2. إنشاء نموذج فأر لاعتلال عضلة القلب السكري
3. تلطيخ الهيماتوكسيلين يوزين (HE)
4. ملاحظات على الفئران
5. التحليل الإحصائي
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
اتبعنا الإجراء الموصوف أعلاه وأنشأنا نموذجا للفأر لاعتلال عضلة القلب السكري. كما يتضح من الصور الملطخة ب HE(الشكل 4) ، كان لدى الفئران في المجموعة الضابطة بنية أنسجة عضلة القلب سليمة ، وترتيب منتظم لخلايا عضلة القلب ، ولا توجد آفات واضحة. في المجموعة النموذجية ، تم ترتيب خلايا عضلة القلب بشكل غير منتظم ، وتضررت بعض خلايا عضلة القلب وتفككت (السهم الأسود) ، ولوحظ تسلل واضح للخلايا الالتهابية في الخلالي (السهم الأصفر). يقترح أن الفئران في المجموعة النموذجية مصابة بإصابة عضلة القلب. في مجموعة ال...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
في هذه الدراسة ، تم الحصول على الفئران التي كانت تعاني من ارتفاع نسبة الجلوكوز في الدم وظهرت عليها علامات مرض السكري عن طريق الحقن داخل الصفاق لمحلول Streptozotocin ، وهي طريقة فعالة ومعترف بها لنمذجة27. تم اختيار PC6 كنقطة بياو ، وتم اختيار ST36 كنقطة بن وفقا لنظرية نقاط الوخز بالإبرBiaoben 28. كل هذه النقاط موجودة على أطراف الفأر ، لذا فإن أنابيب الأكريليك التي يمكن أن تعرض البطن وتشل حركة الأطراف مناسبة تماما لإبرة هذه النقاط. تم إدخال ا...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المؤلفون ليس لديهم ما يكشفون عنه.
هذا العمل مدعوم بمنحة من المشروع المشترك لمؤسسة هوبى للعلوم الطبيعية 2022CFD024 ؛ المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين ، رقم 81704142 ؛ جامعة هوبى للطب الصيني التقليدي 2023 مشروع بحث علمي خاص مزدوج من الدرجة الأولى ، 2023ZZXT005 ؛ دراسة آلية الوخز بالإبر الكهربائي لنقاط الوخز بالإبر في بياوبين على تنظيم البتلات الحديدية لخلايا عضلة القلب في الفئران المصابة بإصابة نقص تروية عضلة القلب (MIRI) في إطار المشروع الرئيسي لإدارة مقاطعة هوبى للطب الصيني التقليدي ZY2025D001 ؛ مشروع الابتكار المعرفي التابع لمكتب ووهان للعلوم والتكنولوجيا، رقم 2023020201010172؛ مشروع هندسة المواهب في هوبى شي تشن ، إي وي هان [2024] 256.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| أكريليك بلاستيك مجوف | Henan Zhike | ZK-GDQ | |
| إبرة الوخز بالإبر | Hwato | 0.3 مم × 13 مم | |
| C57BL / 6 الفئران | مركز مقاطعة هوبى لمكافحة الأمراض والوقاية منها حامض | ||
| الستريك أحادي الهيدرات | Sigma | C1909 | |
| أداة علاج الوخز بالإبر | الكهربائية Hwato | SDZ-V | |
| التوازن الإلكتروني | Henan Zhike | ZK-DST | |
| مقاييس الجلوكوز | LifeScan | OneTouch VerioVue | |
| شريط اختبار الجلوكوز | LifeScan | OneTouch Verio | |
| ستربتوزوتوسين | Sigma | S0130 | |
| سترات ثلاثي الصوديوم ثنائي هيدرات | Sigma | W302600 | |
| ملاقط | Labshark | 130302001 |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه
طلب إذن