يصف البروتوكول تطوير نموذجين للقوارض يحاكيان العلاجات الهرمونية المؤكدة للجنس من خلال الإعطاء تحت الجلد لهرمون التستوستيرون أو الاستراديول بالإضافة إلى أسيتات سيبروتيرون (المستخدم في العلاجات البشرية للأشخاص المتحولين جنسيا): تحديد الجرعات ، وتحديد المؤشرات الحيوية ذات الصلة ، وتقييم التأثيرات.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
إنشاء نماذج للفئران تحاكي العلاجات الهرمونية المؤكدة للجنس
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
المتحولون جنسيا هم أفراد لا تتطابق هويتهم الجنسية وجنسهم المحدد عند الولادة. غالبا ما يخضعون للعلاج الهرموني المؤكد للجنس (GAHT) ، وهو تدخل طبي يسمح باكتساب خصائص جنسية ثانوية أكثر انسجاما مع هويتهم الجنسية الفردية ، مما يوفر نتائج متسقة في تحسين العديد من المتغيرات الاجتماعية والنفسية. ومع ذلك ، يستهدف GAHT أنظمة الجسم المختلفة ، ويتم تسجيل بعض الآثار الجانبية ، على الرغم من عدم تحديدها وتوصيفها بشكل كامل. لذلك ، يمكن اعتبار الأشخاص TG الذين يخضعون لGAHT مجموعة فرعية معرضة للإصابة بالسكان ويجب إيلاء اهتمام خاص في إطار تقييم المخاطر ، على سبيل المثال ، من خلال استخدام النماذج الحيوانية المستهدفة. يصف العمل الحالي الإجراءات الموضوعة لتنفيذ نموذجين من الفئران يحاكي GAHT: نموذج إزالة التأنيث (dMF) الذي يحاكي GAHT لنساء TG ونموذج التغوية الذكورية (dFM) الذي يحاكي GAHT لرجال TG. تم تنفيذ النماذج من خلال إعطاء نفس الهرمونات المستخدمة في GAHT البشري ، وهي β-استراديول بالإضافة إلى أسيتات سيبروتيرون ل dMF والتستوستيرون ل dFM ، بنفس طرق التعرض لمدة أسبوعين. يتم فحص الفئران يوميا أثناء العلاج لتقييم الحالة الصحية والسلوكيات العدوانية المحتملة. عند التضحية ، تم أخذ عينات من الدم والأنسجة المستهدفة وتخزينها للتحليل الكيميائي الحيوي والجزيئي والنسيجي. كما تم تقييم المعلمات الخاصة بالجنس ، وهي عدد المنوية وأبعاد البظر. بالإضافة إلى ذلك ، يتم تحديد الأشكال الإسوية CYP450 ، التي يتم التعبير عنها حصريا و / أو تفضيليا في كبد الفئران من الذكور والإناث ، ووصفها بأنها مؤشرات حيوية جديدة للتحقق من نجاح GAHT ووضع النموذج. كما تم استكشاف إصابة الغدة الدرقية كهدف رئيسي في نظام الغدد الصماء.
المقدمة
يسمى التصور النفسي للفرد لكونه ذكرا أو أنثى أو لا أو كليهما أو في مكان ما بين1 بالهوية الجنسية. يمكن أن يتطابق مع الجنس البيولوجي (متوافق مع الجنس) أو يمكن أن يكون مختلفا (المتحولين جنسيا - TG). رجل TG هو فرد يولد كأنثى ولكنه يعرف نفسه على أنه رجل. تولد امرأة TG كذكر ولكنها تعرف نفسها على أنها امرأة2. تشير التقديرات إلى أن هناك في الوقت الحاضر 25 مليون شخص في جميع أنحاء العالم3 ، يعاني معظمهم من اضطراب الهوية الجنسية ، وهي حالة نفسية تتميز بعدم التوافق بين جنسهم والنوع الذي تم تعيينهم له عندالولادة 4 ، مما قد يؤدي إلى التمييز الاجتماعي والص....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
يتم إجراء الدراسات وفقا للتوجيه 2010/63 / EU ، والمرسوم التشريعي الإيطالي رقم 26 بتاريخ 4 مارس 2014 ، ومبادئ منظمة التعاون الاقتصادي والتنمية للممارسات المختبرية الجيدة (GLP). تمت الموافقة على بروتوكول الدراسة من قبل وزارة الصحة الإيطالية (التفويض رقم 806/2021-PR). هنا ، يتم شراء 16 فأرا شابا ناضجا جنسيا من Sprague-Dawley من كلا الجنسين (304 ± 13 جم من ذكور الفئران و 190 ± 7 جم من إناث الفئران ، تتراوح أعمارهن بين 8 و 9 أسابيع) ووضعها في قفصين في ظل ظروف معملية قياسية (22 ± 0.5 درجة مئوية ، 50٪ -60٪ رطوبة نسبية ، 12 ساعة من التناوب بين الضوء الداكن مع 12-14 تغيير هواء في الساعة) مع الماء والغذاء المتاح بشكل مجاني. في جميع الأ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
كما أوضح Tassinari et al.14 و Tammaro et al.33 ، أظهرت النتائج التالية نجاح GAHT على الفئران ومدى ملاءمة النماذج.
لم يتم تسجيل أي وفيات أو سلوك غير طبيعي ، مثل العدوانية ، ولم يتم ملاحظة أي علامات سريرية للسمية أو المعاناة (على سبيل المثال ، انخفاض النشاط ، والانتصاب ، والمظهر غير المريح)14.
تراكيز T في البلازما في ذكور الفئران الإناث الإناث أثناء الشبق والبروستيروكس هي 5.71 ± 0.84 نانوغرام / مل.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
يعد تنفيذ نماذج القوارض التي تحاكي GAHT أمرا بالغ الأهمية لدراسة القابلية المحتملة للإصابة والضعف لدى الأشخاص المصابين ب TG والنتائج طويلة المدى للعلاجات ، والتي عادة ما تستمر طوال حياتهم.
بالنظر إلى العدد النادر من الدراسات المماثلة في الأدبيات ، فإن النقطة الحاسمة في هذه التجربة هي اختيار الجرعات لتعيين النماذج. يجب أن تكون هذه الجرعات منخفضة بما يكفي لتكون متوافقة مع الإدارة طويلة الأمد في دون التسبب في آثار ضارة و / أو سمية و / أو وفاة. نقطة حرجة أخرى هي أ.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
وأعلن المؤلفون أن البحث أجري دون أي علاقات تجارية أو مالية يمكن أن تخلق تضاربا في المصالح.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| الميزان التحليلي ABJ 320-4NM | Kern | Z741091 | |
| Bouin | Biooptica | 05-M01008 | |
| طرد مركزي 5415 R | Eppendorf | ل eppendorf | |
| Cyproterone Acetate | Sigma-Aldrich | C3412 | |
| D-MEM متوسط | Gibco | ||
| ExcelTaq 2X Fast Q-PCR Master Mix (SYBR ، ROX) ، 200 RXN | سموبيو | TQ1210 | |
| محلول الفورمالين ، مخزن محايد ، 10٪ | Sigma-Aldrich | HT501128 | |
| برنامج GraphPad Prism الإصدار 5.0 لبرنامج | GraphPad | ||
| Hematoxylin | Biooptica | 05-06002 / L | |
| Heosin | Biooptica | 05-10007 / L | |
| برنامج التصوير | نيكون | NIS-BR | |
| JMP 10 البرمجيات الإحصائية | معهد SAS | ||
| ميكروم | حراري علمي | HM 325 | |
| مجهر | نيكون ميكروفوت FX | ||
| ماوس / جرذ التستوستيرون ELISA | Biovendor | RTC001R 96T | |
| NanoDrop 1000 مقياس الطيف | الضوئي الحراري العلمي | ND-1000 | |
| بارافينا | Biooptica | 087910 | |
| موازين محمولة الكشافة STX2202 | OHAUS | 30253064 | |
| Primers | Life Technologies | صممه PrimerBlast | |
| Rat Estradiol ELISA | Biovendor | RTC009R | 96T |
| Rat TSH (هرمون تحفيز الغدة الدرقية) ELISA Kit | ELK Biotechnology | ELK2283 | 96T |
| Rat TSH (هرمون تحفيز الغدة الدرقية) ELISA Kit | ELK Biotechnology | ELK2283 | 96 ت |
| مجموعة التوليف SensiFASTcDNA | Bioline | BIO-65053 | 50 تفاعل |
| زيت السماء | ACROS | AC241000010 | |
| فئران Sprague Dawley ؛ ذكر وأنثى | Envigo | 8/9 أسابيع من العمر | |
| حمية قياسية Mucedola | 4RF18 | ||
| T4 (هرمون الغدة الدرقية) ELISA Kit | ELK التكنولوجيا الحيوية ELK التكنولوجيا الحيوية | ELK8716 | 96T |
| التستوستيرون إينونثات | سيجما ألدريتش | T3006 | |
| خط التدوير الحراريجين 9600 بالإضافة إلى معالج الأنسجة Bioer | Aurogene | ||
| Shandon Excelsior ES ، Thermo Scientific) | |||
| مجموعة تنقية الحمض النووي الريبي | Norgen | 17200 | 50 عمود |
| Victor 3 قارئ متعدد التسميات | بيركين إلمر | ||
| بيتا استراديول 17 فاليرات | سيجما ألدريتش | E1631 |
المراجع
- Rokach, A., Patel, K. Human sexuality: Function, dysfunction, paraphilias, and relationships. , Academic Press. (2021).
- American Psychological Association. Guidelines for psychological practice with transgender and gender nonconforming people. Am Psychol. 70 (9), 832-864 (2015).
- Ammari, T., Sluiter, E. C., Gast, K., Kuzon, W. M.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
