إن عزل الخلايا الجذعيةالجذعية العاليةمن BAMBIMFGE8 ، وهي واحدة من المجموعات الفرعية الرئيسية الثلاث التي تشكل الخلايا الجذعية الجذعية السرطانية البشرية غير المتجانسة ، مفيد في الفهم الكامل لخصائص ووظائف هذا النوع الفرعي لتطبيقه المستقبلي لتحسين الفعالية السريرية في أمراض معينة. هنا ، نقدم طريقة لفرز BAMBIعاليةMFGE8 UC-MSCs.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
عزل الخلايا اللحمية الوسيطة المشتقة من الحبل السري البشريBAMBI HighMFGE8
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تقدم الخلايا اللحمية / الجذعية الوسيطة المشتقة من الحبل السري (UC-MSCs) مناعة منخفضة وتأثيرات مناعية قوية لعلاج الأمراض المختلفة. الخلايا الجذعية الجذعية السرطانية البشرية هي مجموعة غير متجانسة تتكون من ثلاث مجموعات سكانية فرعية رئيسية ذات أشكال مختلفة من الخلايا ، ومعدلات التكاثر ، وقدرات التمايز ، والوظائف التنظيمية المناعية. في السابق ، تم العثور على BAMBIhighMFGE8 UC-MSCs ، وهي أول مجموعة فرعية معزولة بنجاح من UC-MSCs ، لتفشل في التخفيف من التهاب الكلية الذئبي. ومن ثم ، فإن الوظيفة والآلية الأساسية لهذه المجموعة الفرعية في علاج MSC للأمراض لا تزال غير معروفة. من الضروري عزل وإجراء مزيد من التحقيق في UC-MSCsعاليةMAMPGE8 من BAMBI من حيث نمطها الظاهري والتمثيل الغذائي والوظيفة لفهم طبيعة هذه المجموعة الفرعية MSC تماما. في هذا البروتوكول ، نصف طريقة مفصلة لعزل السكان الفرعيينالمرتفعينمن BAMBI MFGE8 عن UC-MSCs البشرية. يتم تصنيف السكان الفرعيين ل UC-MSCs بعلامتين سطحيتين ، BAMBI و MFGE8 ، عن طريق فرز قياس التدفق الخلوي. يتم زراعة الخلايا المعزولة والتحقق منها عن طريق تحليل قياس التدفق الخلوي. يتم تحديد الجينات المحددة المعبر عنها في BAMBIعاليةMFGE8 UC-MSCs بواسطة RT-qPCR. ينتج عن هذا البروتوكول فرز خلوي عالي الكفاءة ونقاء ويصف ملفات تعريف العلامات ل BAMBIعاليةMFGE8 UC-MSCs.
المقدمة
الخلايا اللحمية / الجذعية الوسيطة البشرية (MSCs) هي أسلاف جسدية قادرة على التمايز إلى خلايا عظمية ، وخلايا شحمية ، وخلايا غضروفية ، وأنواع أخرى منالخلايا 1. تم عزل الخلايا الجذعية الجذعية لأول مرة من نخاع العظام وهي مشتقة على نطاق واسع من الحبل السري والأنسجة الدهنية والأنسجة الأخرى2. نظرا لأنه يمكن الحصول على الخلايا الجذعية الجذعية السرطانية بسهولة وتظهر تأثيرات مناعية منخفضة ومثبطة للمناعة ، يتم تطبيقها على نطاق واسع في التجارب السريرية لعلاج الأمراض المختلفة3،4،5. على الرغم من أن علاج MSC يظهر إمكانات واعدة لعلاج الأمراض ، إلا أن التأثيرات العلاجية غير متسقة عبر الأفراد6. ومع ذلك ، لا يزال سبب عدم استقرار علاج MSC غير واضح.
تشتمل التقلبات الجزيئية ، والتشكل ، والقدرة على التمايز ، والوظيفة العلاجية من عدم تجانس MSC. افترضت بعض الدراسات أيضا أن الخلايا الجذعية الجذعية تشكل مجموعات سكانية فرعية ذات وظائف مختلفة7،8 واستكشفت عدم تجانس MSC عبر تسلسل الحمض النووي الريبي أحادي الخلية (scRNA-seq) 9،10. كشفت النتائج أن UC-MSCs البشرية لها مجموعات سكانية فرعية مميزة ذات سمات نسخية محددة ، في حين أن القليل من الدراسات نجحت في عزل ما يسمى بمجموعات MSC الفرعية. لقد قمنا سابقا بتشريح UC-MSCs البشرية إلى ثلاث مجموعات فرعية وفقا لتوقيعاتها عبر scRNA-seq وتحليل المعلوماتية الحيوية ، حيث تم تنقية مجموعة السكان الفرعيين العاليةل BAMBI MFGE8 واختبارها وظيفيا11. ومع ذلك ، فشلت هذه المجموعة الفرعية في التخفيف من التهاب الكلية الذئبي. وبالتالي ، من الضروري اختبار التأثيرات العلاجية ل BAMBIعاليةMFGE8الخلايا الجذعية الجذعية في اضطرابات أخرى لفهم وظائفها الأصيلة.
يصف هذا البروتوكول طرق عزل المجموعة الفرعيةالعالية BAMBI MFGE8 العالية من UC-MSCs البشرية عبر فرز الخلايا المنشطة بالفلورة (FACS) عن طريق قياس التدفق الخلوي وخصائصالمجموعة الفرعية العالية BAMBIعالية MFGE8.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
أجريت هذه الدراسة وفقا للمبادئ المنصوص عليها في إعلان هلسنكي لعام 1989 ووافقت عليها لجنة الأخلاقيات في مستشفى برج الطبل التابع لكلية الطب بجامعة نانجينغ (رقم الموافقة: 202019701). تم الحصول على الحبال السرية البشرية من الأمهات الأصحاء في مستشفى برج الطبل التابع لكلية الطب بجامعة نانجينغ بعد المخاض الطبيعي ، اللواتي أعطن موافقتهن المستنيرة على استخدامها في هذا العمل. تم عزل UC-MSCs الأولية من الحبل السري البشري كما تم الإبلاغ عنهسابقا 11.
1. ثقافة UC-MSC وتحديد الهوية قبل العزلة
- بمجرد أن تصل الخلايا الجذعية الجذعية إلى 70-80٪ من التقاء (P0) ، اغسل الخلايا مرة واحدة باستخدام PBS وأضف 1 مل من 0.25٪ تريبسين-EDTA لمدة دقيقتين عند 37 درجة مئوية. بعد ذلك ، أضف 9 مل من الوسط الكامل لتحييد التربسين ، وانقل تعليق الخلية إلى أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل ، وجهاز طرد مركزي عند 300 × جم لمدة 5 دقائق لجمع الخلايا. تخلص من المادة الطافية وأضف الوسط الكامل المناسب لإعادة تعليق الخلايا. انقل الخلايا الموجودة في كل طبق إلى ثلاث قوارير T75 (P1) وزراعتها في حاضنة خلية عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيدالكربون 2.
- بعد اجتياز UC-MSCs 2x عبر التربسينية ، في P3 ، قم بحصاد الخلايا عبر نفس الخطوات الموضحة في الخطوة 1.1. بعد الطرد المركزي ، تخلص من المادة الطافية. أعد تعليق الخلايا في المخزن المؤقت لتلوين FACS (1x PBS يحتوي على 2٪ FBS) وقم بحسابها. أضف المخزن المؤقت لتلوين FACS إلى التركيز النهائي من 5-10 ×10 6 خلايا / مل واحتفظ بتعليق الخلية على الجليد.
- توزيع 100 ميكرولتر لكل أنبوب من معلق الخلية هذا في أنابيب مختلفة 1.5 مل. أضف عناصر تحكم النمط المتماثل والأجسام المضادة ل FACS ضد CD29 و CD73 و CD90 و CD105 و CD14 و CD34 و CD45 و CD79 و HLA-DR (كل ذلك عند 1: 200) إلى الخلايا عند 4 درجات مئوية لمدة 30 دقيقة.
- اغسل الخلايا 2x باستخدام عازل تلطيخ FACS وجهاز الطرد المركزي عند 300 × جم لمدة 5 دقائق. تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق الرواسب في 200 ميكرولتر من مخزن تلطيخ FACS لتحليل قياس التدفق الخلوي لتحديد علامات MSC.
2. عزل BAMBIعالية MFGE8 UC-MSCs عن طريق قياس التدفق الخلوي
- زراعة UC-MSC بكثافة تقارب 5-10 × 106 خلايا عند عزل BAMBIعاليةMFGE8 UC-MSCs. قم بفصل الخلايا ب 0.5 ملي مولار EDTA لمدة 5 دقائق حتى تبدأ في الحصول على مورفولوجيا دائرية ، وأضف الوسط الكامل لنقل الخلايا إلى أنبوب مخروطي سعة 15 مل ، وقم بسحب تعليق الخلية لأعلى ولأسفل عدة مرات لتحضير معلق أحادي الخلية. استخدم 10 ميكرولتر من معلق الخلية لحساب الخلايا وحساب العدد الإجمالي للخلايا التي تم حصادها. الطرد المركزي الأنبوب المخروطي مع تعليق الخلية عند 300 × جم لمدة 5 دقائق لجمع الخلايا.
- أعد تعليق الخلايا في 1 مل من الوسط الكامل إلى تركيز نهائي من 5-10 × 106 خلايا / مل واحتفظ بتعليق الخلية على الجليد.
- قسم الخلايا إلى أربعة أنابيب طرد مركزي دقيقة سعة 1.5 مل (خلايا فارغة فقط ؛ الخلايا المسماة بامبي. الخلايا المسماة MFGE8 ؛ وكل من الخلايا المسماة BAMBI و MFGE8).
- أضف الأجسام المضادة الأولية بتركيزات مناسبة (MFGE8 و BAMBI ، كلاهما عند 1: 100) إلى الأنابيب ، واخلطها واحتضانها في درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة.
- اغسل الخلايا الملصقة مرة واحدة باستخدام 1x PBS ، وجهاز طرد مركزي عند 300× جم لمدة 5 دقائق. تخلص من المادة الطافية. أعد تعليق الخلايا في 1 مل من الوسط الكامل ، وأضف الأجسام المضادة الثانوية الفلورية المترافقة (الماعز المضاد للأرانب IgG H & L Alexa Fluor 488 و Alexa Fluor 647 ، كل ذلك عند 1: 1,000) إلى الخلايا ، واخلطها واحتضانها في درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة في الظلام.
- اغسل الخلايا المسماة مرة واحدة باستخدام 1x PBS ، كما هو موضح في الخطوة 2.5. أعد تعليق الخلايا في 500 ميكرولتر من الوسط الكامل ، وقم بالتصفية من خلال مصفاة خلية 70 ميكرومتر للتخلص من التكتلات والحطام ، ونقل المرشح إلى أنبوب 15 مل لفرز قياس التدفق الخلوي.
- قم بتشغيل أنبوب الخلية الفارغة دون إضافة جسم مضاد (تحكم سلبي) واضبط التشتت الأمامي (FSC) والمبعثر الجانبي (SSC) لبوابة مقياس السكان السالبين بتلطيخ الأجسام المضادة.
- قم بتشغيل أنابيب الخلايا المفردة المسماة بالأجسام المضادة (على سبيل المثال ، MFGE8 + الماعز المضاد للأرانب IgG H & L Alexa Fluor 488 ، أو BAMBI + الماعز المضاد للأرانب IgG H & L Alexa Fluor 647) كعنصر تحكم في البوابات لتحديد أين تبدأ الإيجابية في المؤامرة.
- قم بتشغيل أنبوب (أنبوب) العينة التجريبية لفرز وجمع مجموعة الخلاياالعالية BAMBIعاليةMFGE8.
- قم بلوحة الخلايا الجذعيةالعليا BAMBIعاليةMFGE8 في صفيحة 24 بئرا وقم بزراعة الخلايا في حاضنة خلية عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيدالكربون 2.
- عندما نمت الخلايا الجذعيةالعليا BAMBIعاليةMFGE8 التي تم فرزها لممرين للحصول على خلايا كافية ، قم بفصل الخلايا وإجراء تحليل ما بعد الفرز لضمان نقاء مجموعات الخلايا المصنفة عن طريق قياس التدفق الخلوي ، كما هو موضح في الخطوات 2.1-2.9. بدلا من ذلك ، افحص نقاء الخلايا التي تم فرزها باستخدام التألق المناعي التقليدي مقابل تعبير BAMBI و MFGE8 البشري إذا كان عدد الخلايا التي تم جمعها صغيرا جدا.
3. توصيف MSCsعالية BAMBI MFGE8 عالية
- قم بزراعة الخلايا الجذعيةالعليا BAMBIعاليةMFGE8 في صفيحة مكونة من 12 بئرا ، وافحص مورفولوجيا الخلايا تحت المجهر ، وقارنها بتلك الموجودة في الخلايا الجذعية الجذعية غير المصنفة.
ملاحظة: بشكل عام ، تنمو الخلاياالعالية BAMBIعاليةMFGE8 بشكل أسرع من الخلايا الجذعية الجذعية UC-MSCs غير المصنفة. - عندما تكون الخلايا ملتقية بنسبة 90٪ تقريبا في الصفيحة المكونة من 12 بئرا ، قم بشفط وسط زراعة الخلية ، واغسل الخلايا مرة واحدة باستخدام 1x PBS ، وأضف 500 ميكرولتر من كاشف استخراج الحمض النووي الريبي إلى الخلايا. رج الطبق ببطء في درجة حرارة الغرفة (RT) لمدة 5 دقائق.
- قم بعرض الخليط وانقله إلى أنبوب خال من RNase و DNase. أضف 100 ميكرولتر من الكلوروفورم، وقم بتغطية الأنبوب، ورج الخليط بقوة عن طريق الدوامة لمدة 15 ثانية. ثم اترك الأنبوب يقف عند RT لمدة 3 دقائق.
- الطرد المركزي الأنبوب لمدة 15 دقيقة عند 11,000 × جم و 4 درجات مئوية.
- انقل ما يقرب من 200 ميكرولتر من الطبقة المائية العليا إلى أنبوب جديد. أضف نفس الحجم من الأيزوبروبانول والماصة جيدا لأعلى ولأسفل عدة مرات. ثم اترك الخليط يقف عند RT لمدة 10 دقائق.
- جهاز طرد مركزي لمدة 15 دقيقة عند 11,000 × جم و 4 درجات مئوية. تخلص من المادة الطافية.
- أضف 500 ميكرولتر من 75٪ إيثانول إلى الحبيبات الموجودة في الأنبوب واقلب الأنبوب برفق عدة مرات.
- جهاز الطرد المركزي للأنبوب لمدة 5 دقائق عند 6,000 × جم و 4 درجات مئوية. تخلص من المادة الطافية. كرر الطرد المركزي مرة واحدة لمدة 10 ثوان عند 6,000 × جم ، وشفط السائل المتبقي بعناية عبر الماصة ، وجفف الأنبوب عند RT.
- أضف 10 ميكرولتر من الماء الخالي من RNase لإذابة حبيبات الحمض النووي الريبي ، وقم بقياس تركيز الحمض النووي الريبي باستخدام مقياس الطيف الضوئي.
- اتبع تعليمات الشركة المصنعة لتصنيع (كدنا) الأول من 1 ميكروغرام من إجمالي الحمض النووي الريبي.
- استخدم مجموعة qPCR لاكتشاف التعبير الجيني وتحديده كميا ، وفقا لتعليمات الشركة المصنعة.
ملاحظة: يتم سرد تسلسل بادئات الحمض النووي المستخدمة في الجدول 1.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
يوضح الشكل 1 ملفات تعريف تعبير علامات سطح الخلية ل UC-MSCs البشرية. كانت الخلايا الجذعية الجذعية المزروعة إيجابية بقوة لتعبير CD44 و CD73 و CD90 و CD105 وسلبية لتعبير CD14 و CD34 و CD45 و CD79 و HLA-DR. تم فرز الخلايا الجذعيةالعليا من BAMBIعاليةMFGE8 من UC-MSCs البشرية المزروعة ، وأعيد تحليل تعبير BAMBI و MFGE8 عن طريق قياس التدفق الخلوي بعد التوسع ل 3-4 مقاطع (الشكل 2). في هذه العملية ، تذبذب تواتر الخلايا الجذعيةالجذعيةالعالية ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
يصف هذا البروتوكول كيفية عزل وإثراء السكان الفرعيينالمرتفعينمن BAMBI MFGE8 من UC-MSCs البشرية. هذه الطريقة مهمة لمزيد من الدراسة لمورفولوجيا ونمو ووظيفة هذه المجموعة الفرعية MSC. بعض الخطوات حيوية للعزل الناجح والعائد العالي للخلاياالعالية BAMBIعاليةMFGE8.
أولا ، الجانب التقني الأكثر أهمية الذي يجب مراعاته هو استخدام حل مناسب لتفكك الخلايا في البروتوكول الحالي. على الرغم من استخدام التربسين التقليدي بنسبة 0.25٪ EDTA ...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ويعلن أصحاب البلاغ أنه ليس لديهم تضارب في المصالح.
شكر وتقدير
تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (المنحة رقم 82271843).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 0.6 مل أنبوب الطرد المركزي الدقيق | Corning | Axygen MCT-060-A | |
| 1.5 مل أنابيب الطرد المركزي الدقيقة Beijing | Labgic Technology | MCT-001-150 | |
| طبق ثقافة الخلايا 100 مم | Beijing Labgic Technology | 12311 | |
| 12 لوحة بئر | Beijing Labgic Technology | 11210 | |
| 15 مل أنبوب الطرد المركزي | نانجينغ فازيم تكنولوجيا المواد | TCF00115 | |
| 24 لوحة بئر | Beijing Labgic Technology | 11310 | |
| 50 مل أنبوب الطرد المركزي | نانجينغ فازيمي تكنولوجيا المواد | TCF00150 | |
| 5 مل أنابيب مستديرة القاع | Corning | FALCON 352003 | |
| 70 & mu ؛ مصفاة الخلايا m | Falcon | 352350 | التخفيف: 1: 1000 |
| APC مضاد للإنسان CD79a (Ig & alpha ؛) الأجسام المضادة | BioLegend | 333505 | 581 التخفيف: 1:200 |
| APC / Cyanine7 المضادة للإنسان CD73 (Ecto-5'-nucleotidase) الأجسام المضادة | BioLegend | 344022 | G46-6 التخفيف: 1: 200 |
| APC-Cy7 Mouse IgG1 ، & kappa ؛ التحكم في النمط المتشابه | BD Bioscience | 557873 | MOPC-31C (التحكم في النمط المنظو) التخفيف: 1: 200 |
| BAMBI الجسم المضاد | Bioss | bs-12418R | |
| Brilliant Violet 510 المضاد للفأر / الإنسان CD44 الأجسام المضادة | BioLegend | 103044 | 5E10 التخفيف: 1: 200 |
| Brilliant Violet 510 Rat IgG2b ، & kappa ؛ النمط المتماثل Ctrl الأجسام المضادة | BioLegend | 400646 | MOPC-21 (التحكم في النمط المتماثل) التخفيف: 1: 200 |
| CD105 (Endoglin) الجسم المضاد أحادي النسيلة ؛ APC | eBioscience | 17-1057-42 | HM47 التخفيف: 1:200 |
| غرفة عد الخلايا | شنغهاي QIUJING | XB-K-25 | |
| أجهزة الطرد المركزي | بكين BAIYANG | BY-320C | |
| ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix | Vazyme | Q711-02 | |
| Chloroform | XILONG Scientific | 13700908 | |
| DMEM / F-12 (1: 1) أساسي (1x) | Gibco | C11330500BT | |
| EDTA (0.5 M) ، درجة الحموضة 8.0 ، | Invitrogen | AM9260G | Rnase التخفيف: 1: 1000 |
| Ethanol ؛ | XILONG 12803405 | ||
| مصل الأبقار الجنينية (FBS) | Gibco | 10099-141C & nbsp ؛ | |
| FITC ماوس مضاد للإنسان CD34 | BD Bioscience | 555821 | IM7 تخفيف: 1:200 |
| FITC Mouse Anti-Human CD45 | BD Bioscience | 555482 | AD2 التخفيف: 1:200 |
| FITC Mouse Anti-Human HLA-DR | BD Bioscience | 555811 | SN6 التخفيف: 1: 200 |
| مقياس التدفق الخلوي | BD Bioscience | FACSAria & trade ؛ III Cell SorterAria | |
| Flowjo | BD Bioscience | V10 | |
| كاشف تفكك الخلايا اللطيف | STEMCELL Technologies | 100-0485 | |
| الماعز المضاد للفأر IgG H& L (Alexa Fluor 488) | abcam | ab150113 | HI30 التخفيف: 1: 200 |
| الماعز المضاد للأرانب IgG H& L (AlexaFluor 594) | abcam | ab150080 | التخفيف: 1: 1000 |
| HiScript II Q RT SuperMix ل qPCR (+ ممسحة gDNA) | مجاهر مقلوبة Vazyme | R223-01 | |
| نيكون | كليس Ts2 | ||
| كحول الأيزوبروبيل | XILONG 12802505 | ||
| المضادة العلمية MFGE8 | Biorbyt | orb388429 | التخفيف: 1:100 |
| جهاز طرد مركزي دقيق | Thermo Fisher Scientific | FRESCO 21 | |
| Mouse IgG1 kappa التحكم في النمط النظيري APC | eBioscience | 17-4714-42 | P3.6.2.8.1 (التحكم في النمط المنظو) التخفيف: 1: 200 |
| ماوس IgG1 كابا التحكم في النمط النظيري FITC | eBioscience | 11-4714-42 | eBMG2b (التحكم في النمط المنظوى) التخفيف: 1: 200 |
| ماوس IgG2b kappa التحكم في النمط النظيري FITC | eBioscience | 11-4732-42 | RTK4530 (التحكم في النمط المتماثل) التخفيف: 1: 200 |
| PBS (10x) | Sangon Biotech (شنغهاي) | E607016-0500 | |
| PE-Cy5 ماوس مضاد للإنسان CD90 ؛ | BD Bioscience | 555597 | P3.6.2.8.1 (التحكم في النمط المتماثل) التخفيف: 1: 200 |
| PE-Cy5 Mouse IgG1 & kappa ؛ التحكم في النمط المتشابه | BD Bioscience | 550618 | |
| البنسلين الستربتومايسين 100x | Cytiva | SV30010 | التخفيف: 1:100 |
| نظام PCR في الوقت الحقيقي | الأنظمة الحيوية التطبيقية بواسطةThermo Fisher Scientific | Q6 | |
| RNase ماء | خال من RNase QIAGEN | 129112 | |
| مقياس الطيف | Thermo Fisher Scientific | NanoDrop One (840-317400) | |
| نصائح الماصة الدقيقة المعقمة | تخفيف: | 1:100 | |
| قارورة ثقافة الخلايا T75 | Beijing Labgic Technology | 13212A | |
| Thermal Cycler | Applied Biosystems byThermo Fisher Scientific | Veriti | |
| Tri reagent | Sigma Aldrich | T9424 | |
| Typsin-EDTA | Bio-Channel Solution Bio-Channel Bio-Technology | BC-CE-005 | |
| CO2 حاضنة | ثيرمو فيشر العلمي | 3111 |
المراجع
- Liechty, K. W., et al. Human mesenchymal stem cells engraft and demonstrate site-specific differentiation after in utero transplantation in sheep. Nat Med. 6 (11), 1282-1286 (2000).
- Zhou, T., et al. Challenges and advances in clinical applications of mesenchymal stromal cells. J Hematol Oncol. 14 (1), 24(2021).
- Xie, Z., et al. Tnf-alpha-mediated m(6)a modification of elmo1 triggers directional migration of mesenchymal stem cell in ankylosing spondylitis. Nat Commun. 12 (1), 5373(2021).
- Mcguire, J. J., et al. Mesenchymal stem cell-derived interleukin-28 drives the selection of apoptosis resistant bone metastatic prostate cancer. Nat Commun. 12 (1), 723(2021).
- Yuan, X., et al. Mesenchymal stem cell therapy induces flt3l and cd1c(+) dendritic cells in systemic lupus erythematosus patients. Nat Commun. 10 (1), 2498(2019).
- Wang, D., et al. Umbilical cord mesenchymal stem cell transplantation in active and refractory systemic lupus erythematosus: A multicenter clinical study. Arthritis Res Ther. 16 (2), R79(2014).
- Ortiz, L. A., et al. Mesenchymal stem cell engraftment in lung is enhanced in response to bleomycin exposure and ameliorates its fibrotic effects. Proc Natl Acad Sci U S A. 100 (14), 8407-8411 (2003).
- Phinney, D. G. Functional heterogeneity of mesenchymal stem cells: Implications for cell therapy. J Cell Biochem. 113 (9), 2806-2812 (2012).
- Wang, Z., et al. Single-cell transcriptome atlas of human mesenchymal stem cells exploring cellular heterogeneity. Clin Transl Med. 11 (12), e650(2021).
- Chen, P., et al. Single-cell and spatial transcriptomics decodes wharton's jelly-derived mesenchymal stem cells heterogeneity and a subpopulation with wound repair signatures. Adv Sci (Weinh). 10 (4), e2204786(2023).
- Chen, H., et al. Dissecting heterogeneity reveals a unique bambi(high) mfge8(high) subpopulation of human uc-mscs. Adv Sci (Weinh). 10 (1), e2202510(2022).
- Tsuji, K., et al. Effects of different cell-detaching methods on the viability and cell surface antigen expression of synovial mesenchymal stem cells. Cell Transplant. 26 (6), 1089-1102 (2017).
- Lai, T. Y., et al. Different methods of detaching adherent cells and their effects on the cell surface expression of fas receptor and fas ligand. Sci Rep. 12 (1), 5713(2022).
- Avinash, K., Malaippan, S., Dooraiswamy, J. N. Methods of isolation and characterization of stem cells from different regions of oral cavity using markers: A systematic review. Int J Stem Cells. 10 (1), 12-20 (2017).
- Galvao, I., et al. Rock inhibition drives resolution of acute inflammation by enhancing neutrophil apoptosis. Cells. 8 (9), 964(2019).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
