يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

تقييم البلعمة الدبقية الدقيقة لبقايا المايلين في المختبر تحت التحفيز المغناطيسي المتكرر

1.6K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/67642

⸱

يونيو 17, 2025

 ,  ,  ,  , 
1Department of Rehabilitation Medicine, The Affiliated Suzhou Hospital of Nanjing Medical University, 2Rehabilitation Medicine Center, The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, 3Department of Children's Rehabilitation, Linyi People's Hospital, 4Department of Endocrinology, People's Hospital of Dongxihu District, 5Department of Rehabilitation, Hengyang Medical School, The First Affiliated Hospital, University of South China

في هذه المقالة

ملخص

تم وضع البروتوكول الحالي لتقييم تأثير التحفيز المغناطيسي المتكرر على قدرة الخلايا الدبقية الصغيرة على البلعمة بقايا المايلين. وقد أنشئ نظام للاستزراع المشترك للحطام المايلين والخلايا الدبقية الصغيرة في المختبر للقيام بذلك.

الملخص

تلعب الخلايا الدبقية الصغيرة ، وهي الخلايا البلعمية المقيمة في الجهاز العصبي المركزي (CNS) ، دورا محوريا في الحفاظ على سلامة الجهاز العصبي المركزي والتوازن عن طريق إزالة الخلايا التالفة والحطام الخلوي وبقايا المايلين. يشارك تراكم بقايا المايلين في مجموعة من اضطرابات الجهاز العصبي المركزي ، بما في ذلك التصلب المتعدد ومرض الزهايمر وإصابات الدماغ الرضحية وإصابة الحبل الشوكي. لا يؤدي وجود بقايا المايلين إلى تفاقم الالتهاب العصبي فحسب ، بل يعيق أيضا القدرة التجددية للمايلين. لذلك ، فإن تعزيز قدرة الخلايا الدبقية الصغيرة على إزالة بقايا المايلين من خلال البلعمة يمثل استراتيجية علاجية واعدة. ظهر التحفيز المغناطيسي كطريقة علاجية مبتكرة لأمراض الجهاز العصبي المركزي ، مع أدلة متزايدة تشير إلى قدرته على تعزيز البلعمة الدبقية الدقيقة ودعم التعافي من الجهاز العصبي المركزي. لتوضيح تأثيرات التحفيز المغناطيسي بشكل أكبر على إزالة الخلايا الدبقية الصغيرة لحطام المايلين ، قمنا بتصميم تجربة في المختبر تتضمن الزراعة المشتركة للخلايا الدبقية الصغيرة وحطام المايلين. تعرضت الثقافة المشتركة لتحفيز مغناطيسي متكرر لتقييم تأثيرها على نشاط البلعمة الدبقية الدقيقة في سياق أمراض الجهاز العصبي المركزي.

المقدمة

المايلين عبارة عن هيكل غشائي أنبوبي مستقر يحيط بالمحاور التي تنتجها الخلايا قليلة التغصن في الجهاز العصبي المركزي (CNS). يلعب غمد المايلين هذا دورا مهما في تسهيل الانتشار السريع والفعال لإمكانات الفعل1. ومع ذلك ، يمكن أن تؤدي الاضطرابات العصبية المختلفة ، مثل التصلب المتعدد (MS) والسكتة الدماغية والإصابات الرضحية ، بما في ذلك إصابة الحبل الشوكي (SCI) وإصابات الدماغ الرضحية (TBI) ، إلى فقدان سلامة المايلين. ينتج عن هذا توليد حطام المايلين بسبب تعطيل غمد المايلين والأضرار المباشرة لهياكل المايلين2،3،4. لا يؤدي تراكم بقايا المايلين إلى إعاقة إعادة تكوين الميالين والتعافي الوظيفي فحسب ، بل يؤدي أيضا إلى تفاقم الالتهاب العصبي5،6. لذلك ، فإن الإزالة الفعالة لحطام المايلين ضرورية لحل الالتهاب العصبي ، وتعزيز التجدد المحوري ، واستعادة التوازن في الجهاز العصبي بعد الأمراض العصبية.

يتم إزالة حطام المايلين بشكل أساسي بواسطة الخلايا البلعمية ، مثل البلاعم والخلايا الدبقية الصغيرة في الجهاز العصبي المركزي (CNS). الخلايا الدبقية الصغيرة ، الخلايا المناعية المقيمة في الجهاز العصبي المركزي ، تقوم باستمرار بمسح بيئتها بحثا عن التهديدات المحتملة وحماية الجهاز العصبي المركزي عن طريق إزالة حطام المايلين والمايلين التالف. علاوة على ذلك ، يلعب البلعمة الدبقية الدقيقة دورا مهما في تعزيز تكوين الخلايا العصبية من خلال إزالة الحطام7،8. تشير الأدلة المتزايدة إلى أن تعزيز البلعمة الدبقية الدقيقة لحطام المايلين يمكن أن يخفف من الآثار الضارة للالتهاب ، ويقلل من تلف الجهاز العصبي المركزي ، ويعزز التجديد المحوري بعد إصابة الأعصاب. 4،9،10.

اكتسب العلاج بالتحفيز المغناطيسي ، وهو تقنية تعديل عصبي غير جراحية ، استخداما واسع النطاق في علاج الاضطرابات العصبيةالمختلفة 11. والجدير بالذكر أن التحفيز المغناطيسي المتكرر عبر الجمجمة (rTMS) أظهر وعدا كنهج علاجي لمرض الزهايمر (AD) وإصابات الدماغ والسكتة الدماغية12،13،14. أظهرت دراسة حديثة أن rTMS يمكن أن يعزز البلعمة الدبقية الدقيقة للأميلويد بيتا (Aβ) والبروتين الشحمي E (ApoE) ، وبالتالي تثبيط التقدم المرضي لمرض الزهايمر في النماذج الحيوانية15. وبالمثل ، وجد عملنا الأخير أن التحفيز المغناطيسي المتكرر عبر العمود الفقري (rTSMS) يعزز البلعمة الدبقية الدقيقة لحطام المايلين بعد إصابة الحبل الشوكي في الفئران16.

ومع ذلك ، فقد تم إثبات تأثير التحفيز المغناطيسي المتكرر على الخلايا الدبقية الصغيرة في الغالب من خلال النماذج التجريبية في17،18،19. في الواقع ، ثبت أن التحفيز المغناطيسي يعدل استثارة الخلايا العصبية من خلال تحريض التيارات20. وبالتالي ، لا يمكن تجاهل أن التفاعل بين الخلايا العصبية والخلايا الدبقية الصغيرة قد يؤثر على وظيفة الخلايا الدبقية الصغيرة. وبالتالي ، فإن التجارب في المختبر ضرورية للتأكد مما إذا كان تأثير التحفيز المغناطيسي على الخلايا الدبقية الصغيرة مستقلا عن التغيير في استثارة الخلايا العصبية. حددت الدراسات الحديثة تأثيرا تعديليا للتحفيز المغناطيسي المتكرر على الخلايا الدبقية الصغيرة في النماذج التجريبية. أظهرت بعض الدراسات أن التحفيز المغناطيسي المتكرر يمكن أن يعزز استقطاب الخلايا الدبقية الصغيرة نحو M219،21. ومع ذلك ، لا يزال يتعين توضيح المزيد من الاستكشاف في وظيفة الخلايا الدبقية الصغيرة. والجدير بالذكر أن Amelie Eichler et al. تدخل في شرائح أنسجة المخ في المختبر باستخدام التحفيز المغناطيسي 10 هرتز ووجد أن التحفيز المغناطيسي 10 هرتز كان قادرا على تعزيز إطلاق السيتوكينات من الخلايا الدبقية الصغيرة للتأثير على الاستثارة العصبية واللدونة22. في حين أن هذه الدراسة وسعت فهم تأثيرات التحفيز المغناطيسي على الخلايا الدبقية الصغيرة ، إلا أن إجراء مزيد من التحقيق على المستوى الخلوي ضروري لتوضيح آلياته بالكامل.

وبالتالي ، أنشأنا بروتوكولا للتحقق مما إذا كان التحفيز المغناطيسي يمكن أن يعزز البلعمة لحطام المايلين في المختبر. على عكس بقايا المايلين بعد المرض أو تلف الأنسجة ، وهو نتاج الإصابة ، فإن بقايا المايلين المستخدم في هذه التجربة هو شكل غمد المايلين بعد تحلله. بالإضافة إلى ذلك ، فإن مفهوم حطام المايلين هو نتاج تفكك المايلين. باعتبارها الخلايا البلعمية الأولية في الدماغ ، تلعب الخلايا الدبقية الصغيرة دورا محوريا في إزالة الخلايا التالفة وحطام المايلين23 ، والذي يرتبط بأمراض مثل التصلب المتعدد ومرض الزهايمر24،25. ثبت أن تراكم بقايا المايلين يؤدي إلى تفاقم الالتهاب العصبي وإعاقة التجدد26. الهدف من الدراسة هو التحقيق في إمكانات التحفيز المغناطيسي لتعزيز البلعمة الدبقية الدقيقة لحطام المايلين ، وبالتالي تقليل الالتهاب العصبي ودعم التعافي من الجهاز العصبي المركزي في الحالات التنكسية العصبية والصدمة. باختصار ، تستخدم الدراسة نهج الزراعة المشتركة ، حيث يتم استزراع الخلايا الدبقية الصغيرة بشكل مشترك مع بقايا المايلين ويتم إجراء التحفيز المغناطيسي المتكرر من أجل التحقق من تأثير التحفيز المغناطيسي المتكرر على القدرة البلعمية للخلايا الدبقية الصغيرة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

هنا ، تم استخدام ثلاث إناث فئران SD (تتراوح أعمارهن بين 2-3 أسابيع) لاستخراج بقايا المايلين عن طريق الطرد المركزي المتدرج للسكروز. تم شراء جميع الفئران من منشأة الأساسية بجامعة نانجينغ الطبية ، نانجينغ ، الصين (رخصة: SYXK (Su) 2021-0023). تم تربية جميع الفئران في ظل ظروف التحكم (درجة الحرارة 22 ± 2 درجة مئوية ، فترة ضوء / ظلام 12 ساعة / 12 ساعة ، 55٪ ± 5٪ رطوبة نسبية). تمت الموافقة على جميع التجارب على من قبل لجنة رعاية واستخدام بجامعة نانجينغ الطبية (رقم 1). IACUC-1903031 ورقم. IACUC-2005001) وكان يهدف إلى تقليل المعاناة وعدد المستخدمة.

1. عزل المايلين

ملاحظة: تم استخراج حطام المايلين كما هو موضح سابقا ، وتم إجراء بعض التعديلات27. تأكد من تنفيذ جميع الخطوات عند 4 درجات مئوية وفي ظل ظروف معقمة.

  1. عزل المايلين الخام
    1. استخراج أنسجة المخ
      1. بعد التخدير بالبنتوباربيتال (50 مجم / كجم ، الحقن داخل الصفاق) ، قم بتقييم عمق التخدير عن طريق استجابة قرصة إصبع القدم. قطع رأس إناث الفئران. قم بتشريح الرأس بالكامل على الجليد وقم بتقسيم الجمجمة بالمقص لكشف الدماغ بالكامل وتسهيل إزالة الدماغ بالكامل.
      2. استئصال الأغشية والمخيخ والحصين بالمقص والملقط بطريقة دقيقة ومعقمة لمنع تلوث خليط السكروز في أنسجة المخ. نظف الدماغ 3 مرات باستخدام PBS لإزالة أي دم أو أنسجة متبقية.
      3. انقل الأدمغة التي تم تنظيفها إلى 10 مل من محلول السكروز المعقم 0.32 م وقم بتقطيع أنسجة المخ بمقص الجراحة المجهرية إلى 5 مم3 قطع للحصول على خليط سكروز أنسجة المخ.
    2. تجانس أنسجة المخ
      1. انقل خليط السكروز في أنسجة المخ إلى الخالط المعقم سعة 50 مل وأضف 30 مل من محلول السكروز المعقم 0.32 م. استخدم الخالط الزجاجي سعة 50 مل للتجانس لمدة دقيقتين للحصول على تجانس أنسجة المخ الملساء.
      2. قم بتخفيف أنسجة المخ المتجانسة إلى 90 مل بمحلول سكروز معقم 0.32 م ، واخلطه ، ووزعه ببطء في الجزء العلوي من ستة أنابيب طرد مركزي معقمة من مادة البولي بروبيلين رقيقة الجدران سعة 38.5 مل تحتوي على 20 مل من محلول السكروز المعقم 0.83 M. أضف 15 مل من الجانس إلى كل أنبوب طرد مركزي ثم قم بتسويته بمحلول سكروز معقم 0.32 متر.
    3. جمع حطام المايلين الخام
      1. قم بتبريد دوار الطرد المركزي الفائق عند 4 درجات مئوية ، وقم بالطرد المركزي للعينة عند 75,000 × جم لمدة 45 دقيقة. بعد عملية الطرد المركزي ، اجمع بقايا المايلين من الواجهة بين كثافتي السكروز باستخدام أنبوب باستور معقم.
        ملاحظة: من الضروري أثناء عملية التجميع توخي الحذر وتجنب جمع المكونات الأخرى للعينة الملوثة عن غير قصد.
  2. أول فصل وتنقية متساوي التوتر
    1. انقل محلول بقايا المايلين الذي تم جمعه إلى أنبوب طرد مركزي سعة 50 مل واضبط الحجم على 35 مل باستخدام محلول ملحي معقم مخفض بالفوسفات (PBS) المبرد مسبقا. انقل المحلول إلى الخالط المعقم الجديد سعة 50 مل وقم بتجانس لمدة دقيقتين للحصول على تجانس.
    2. قم بتوزيع حطام المايلين بالتساوي في ستة أنابيب طرد مركزي فائقة معقمة من مادة البولي بروبيلين رقيقة الجدران سعة 38.5 مل ، مع إضافة عازلة معقمة PBS. قم بإخضاع الأنابيب للطرد المركزي عند 75,000 × جم لمدة 45 دقيقة عند 4 درجات مئوية.
  3. الفصل والتنقية متساوي التوتر الثاني
    1. بعد الطرد المركزي ، تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق الحبيبات البيضاء الصلبة في 10 مل من المخزن المؤقت PBS المعقم المبرد مسبقا من أجل الحصول على تعليق حطام المايلين. قم بتوزيع التعليق بالتساوي في أنبوبين معقمين من مادة البولي بروبيلين ذات الجدران الرقيقة سعة 38.5 مل ، مع موازنة الحجم عن طريق إضافة عازلة PBS معقمة.
    2. جهاز الطرد المركزي للعينات عند 4 درجات مئوية عند 75,000 × جم لمدة 45 دقيقة.
  4. مجموعة المايلين المنقى
    1. بعد الطرد المركزي ، تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق الحبيبات البيضاء الصلبة في 6 مل من المخزن المؤقت المعقم PBS. قسم تعليق حطام المايلين إلى ستة أنابيب طرد مركزي سعة 1.5 مل ثم يخضع للطرد المركزي عند 4 درجات مئوية و 12,000 × جم لمدة 10 دقائق.
    2. بعد الطرد المركزي ، تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق الحبيبات البيضاء الصلبة في 100 ميكرولتر من محلول ملحي معقم مخفض بالفوسفات المبرد مسبقا (PBS).
  5. القياس الكمي لحطام المايلين
    1. خذ 3 ميكرولتر من معلق بقايا المايلين لتقدير محتوى البروتين باستخدام مجموعة قياس كمية بروتين BCA. قم بتخزين معلق حطام المايلين المتبقي عند -80 درجة مئوية.

2. وضع العلامات الفلورية على حطام المايلين

  1. حضانة كربوكسي فلوريسين ثنائي الأسيتات N-succinimidyl ester
    1. قم بإذابة بقايا المايلين المطلوبة عند 4 درجات مئوية أو الماء المثلج وأجهزة الطرد المركزي عند 12,000 × جم لمدة 10 دقائق عند 4 درجات مئوية. تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق بقايا المايلين في 200 ميكرولتر من محلول كربوكسي فلوريسين ثنائي الأسيتات N-succinimidyl ester (CFSE ؛ 50 ميكرومتر).
    2. احتضن في درجة حرارة الغرفة في الظلام لمدة 30 دقيقة. بعد فترة الحضانة ، جهاز الطرد المركزي عند 12,000 × جم لمدة 10 دقائق عند 4 درجات مئوية.
    3. تخلص من المادة الطافية واغسل العينات 3x باستخدام 500 ميكرولتر من المخزن المؤقت المعقم PBS. بعد عملية الغسيل ، أعد تعليق حطام المايلين في 100 ميكرولتر من المخزن المؤقت المعقم PBS المبرد مسبقا من أجل الحصول على تعليق من حطام المايلين المسمى بالفلورسنت ، والذي يمكن تخزينه عند -80 درجة مئوية.

3. ثقافة الخلايا الدبقية الصغيرة

  1. زراعة خلايا BV-2 في 5٪ ثاني أكسيد الكربونالمرطب عند 37 درجة مئوية في وسط النسر المعدل (DMEM) من Dulbecco مكمل بنسبة 10٪ (v / v) FBS والبنسلين (100 وحدة / مل) والستربتومايسين (100 وحدة / مل). قم بزرع ما يقرب من 50٪ من خلايا Bv-2 في الصفيحة المكونة من 12 بئرا ولوحة 24 بئرا لمزيد من الاختبارات.

4. في المختبر التحفيز المغناطيسي المتكرر

  1. قم بإجراء تدخل التحفيز المغناطيسي المتكرر في المختبر مع الإعداد التالي: تردد العلاج 20 هرتز ، شدة العلاج 1٪ من أقصى شدة إخراج (أي 0.035 تسلا) ، وقت التحفيز 5 ثوان ، فترة راحة 20 ثانية. قم بإدارة 600 نبضة مع وقت معالجة واحد يبلغ 2.5 دقيقة.
  2. أثناء التحفيز المغناطيسي ، ضع مركز الملف في محاذاة مع مركز لوحة الثقافة وتأكد من أن الملف يتناسب بشكل مريح مع الجزء السفلي من لوحة الثقافة.
    1. حدد مسبقا معلمات التحفيز المغناطيسي وحدد اتجاه ملف التحفيز المغناطيسي ليكون عموديا على الأرض وموجه في اتجاه تصاعدي. تعقيم ملف التحفيز المغناطيسي بالكحول لمنع التلوث من الخلايا.
    2. بعد ذلك ، استرجع لوحة زراعة الخلية من الحاضنة وضعها فوق ملف التحفيز المغناطيسي للتحفيز المغناطيسي. عقم الطبق عن طريق رش الكحول عليه ، ثم أعده إلى الحاضنة. حافظ على اللوحة مغطاة طوال العملية.

5. اختبار البلعمة الدبقية الدقيقة لحطام المايلين

  1. علاج التحفيز المغناطيسي المتكرر لمجموعة LPS + rMS
    1. استخدم CFSE (50 ميكرومتر) لتسمية بقايا المايلين لتقييم البلعمة. لوحة 1 × 104 خلايا BV-2 في ألواح 24 بئرا بين عشية وضحاها. قم بتغيير الوسط إلى وسط خال من المصل وعالج الخلايا بعديد السكاريد الدهني (LPS ؛ 1 ميكروغرام / مل) لمدة 12 ساعة. قم بشفط الوسط القديم برفق باستخدام قضيب ثم أضف الوسط الجديد الخالي من المصل على الفور باستخدام الماصة.
    2. بعد فترة 12 ساعة من تدخل LPS ، أضف بقايا المايلين (100 ميكروغرام / مل) إلى الوسط للزراعة المشتركة في ظل الظروف المظلمة. إخضاع الخلايا لتدخلات التحفيز المغناطيسي المتكررة كما هو موضح في الخطوة 4.2.
  2. التألق المناعي والتصوير
    1. اغسل بقايا المايلين غير الممتزة باستخدام PBS برفق وقم بإصلاح الخلايا بنسبة 4٪ PFA لمدة 15 دقيقة. قم بسد الخلايا التي تحتوي على PBS التي تحتوي على 10٪ ألبومين مصل الحمار و 0.3٪ Triton X-100 لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة ، ثم اغسلها باستخدام PBS واحتضانها بالجسم المضاد الأولي (IBA-1 ، 1: 200) عند 4 درجات مئوية بين عشية وضحاها.
    2. احتضان الخلايا بالأجسام المضادة الثانوية (1: 300 ، الفأر) لمدة ساعتين في درجة حرارة الغرفة. التقط الصور باستخدام مجهر متحد البؤر بمعدل 40x و 20x.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

في هذه الدراسة ، قمنا في البداية بتغذية خلايا الخلايا الدبقية الصغيرة BV-2 في المختبر عن طريق استخراج بقايا المايلين المشتق من الدماغ واستخدام التحفيز المغناطيسي المتكرر لتعزيز قدرتها على البلعمة. بعد ذلك ، تم زراعة خلايا الخلايا الدبقية الصغيرة BV-2 وإخضاعها لتدخل LPS قبل التحفيز المغناطيسي ، وبالتالي محاكاة الحالة في الجسم الحي للخلايا الدبقية الصغيرة تحت التحقق العصبي الصارم. بعد ذلك ، تم تطبيق تدخل rMS بعد تحفيز LPS. للتحقق من صحة البلعمة في الخلايا ، تم استخدام التألق المناعي ، باستخدام IBA-1 لتسمي...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

التحفيز المغناطيسي المتكرر (rMS) هو تقنية تحفيز عصبي غير جراحية تم تطبيقها على نطاق واسع في علاج العديد من الاضطرابات العصبية والنفسية ، بما في ذلك الإعاقات الإدراكية ومرض الزهايمر (AD) والسكتة الدماغية وإصابات الدماغ وإصابة الحبل الشوكي (SCI). يستخدم rMS مجالا مغناطيسيا نابضا لتعديل إمكانات الغشاء للخلايا العصبية ، مما يؤثر بشكل انتقائي على الاستثارة العصبية داخل الجهازالعصبي 11. بالإضافة إلى تأثيراته على الخلايا العصبية ، فقد ثبت أن rMS ينظم وظيفة الخلايا الدبقي...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

المؤلفون ليس لديهم ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

تم دعم هذا العمل من خلال منح من المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (82302877 ، 82172541) ، ومؤسسة العلوم الطبيعية في مقاطعة هونان (2023JJ30549).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
وسيط تركيب مضاد للبهتان مع DAPIBeyotime ، الصينP0131
BCA KitThermoFisher Scientific ، أمريكا23227
Bv-2 cellATCCCBP60922
زراعة الخلايا 12 بئر لوحاتBiofil ، الصين
ثقافة الخلايا 24 لوحة بئرBiofil ، الصين
المسح بالليزر متحد البؤر مجهرزايس ، ألمانيا800
حاضنة درجة حرارة ثابتةThermoFisher Scientific ، أمريكا
CFSEMedChemExpress ، أمريكاHY-158820
DMEM-Culture mediumKeyGen ، الصينKGL1202-500
FBSGibco ، أمريكا16250078
Iba1Abcam ، أمريكاab48004
جهاز التحفيز المغناطيسيYiruide ، الصينCCY-IA
ملف التحفيز المغناطيسيYiruide ، الصين
ParaformaldehydeBioSharp ، الصين
PBSKeyGen ، الصينKGL2210-500
البنسلين StreptomycinGibco ، أمريكا15140-122
السكروزMedChemExpress ، أمريكاHY-B1779
TrypsinKeyGen ، الصينKGL2107-100
جهاز طرد مركزي فائقبيكمان ، أمريكاL-100XP

المراجع

  1. Osso, L. A., Hughes, E. G. Dynamics of mature myelin. Nat Neurosci. 27 (8), 1449-1461 (2024).
  2. Gao, R., et al. Myelin debris phagocytosis in demyelinating disease. Glia. 72 (11), 1934-1954 (2024).
  3. Kopper, T. J., Gensel, J. C. Myelin as an inflammatory mediator: Myelin interactions with complement, macrophages, and microglia in spinal cord injury. J Neurosci Res. 96 (6), 969-977 (2018).
  4. Yu, F., et al. Phagocytic microglia and macrophages in brain injury and repair. CNS Neurosci Ther. 28 (9), 1279-1293 (2022).
  5. Filbin, M. T. Myelin-associated inhibitors of axonal regeneration in the adult mammalian CNS. Nat Rev Neurosci. 4 (9), 703-713 (2003).
  6. Sen, M. K., Mahns, D. A., Coorssen, J. R., Shortland, P. J. The roles of microglia and astrocytes in phagocytosis and myelination: Insights from the cuprizone model of multiple sclerosis. Glia. 70 (7), 1215-1250 (2022).
  7. Jia, J., et al. The role of microglial phagocytosis in ischemic stroke. Front Immunol. 12, 790201(2021).
  8. Kettenmann, H., Hanisch, U. K., Noda, M., Verkhratsky, A. Physiology of microglia. Physiol Rev. 91 (2), 461-553 (2011).
  9. Shen, S., et al. Neutrophil nanovesicle protects against experimental autoimmune encephalomyelitis through enhancing myelin clearance by microglia. ACS. 16 (11), 18886-18897 (2022).
  10. Cignarella, F., et al. TREM2 activation on microglia promotes myelin debris clearance and remyelination in a model of multiple sclerosis. Acta Neuropathol. 140 (4), 513-534 (2020).
  11. Dufor, T., Lohof, A. M., Sherrard, R. M. Magnetic stimulation as a therapeutic approach for brain modulation and repair: Underlying molecular and cellular mechanisms. Int J Mol Sci. 24 (22), 16456(2023).
  12. Martin, D. M., McClintock, S. M., Forster, J. J., Lo, T. Y., Loo, C. K. Cognitive enhancing effects of rTMS administered to the prefrontal cortex in patients with depression: A systematic review and meta-analysis of individual task effects. Depress Anxiety. 34 (11), 1029-1039 (2017).
  13. Kamo, T., et al. Repetitive peripheral magnetic stimulation for impairment and disability in people after stroke. Cochrane Database Syst Rev. 9 (9), CD011968(2022).
  14. Wang, Y., Wang, L., Ni, X., Jiang, M., Zhao, L. Efficacy of repetitive transcranial magnetic stimulation with different application parameters for post-stroke cognitive impairment: A systematic review. Fron Neurosci. 18, 1309736(2024).
  15. Chu, F., et al. Transcranial magneto-acoustic stimulation attenuates synaptic plasticity impairment through the activation of Piezo1 in alzheimer's disease mouse model. Research. 6, 0130(2023).
  16. Zhai, C., et al. Repeated trans-spinal magnetic stimulation promotes microglial phagocytosis of myelin debris after spinal cord injury through LRP-1. Exp Neurol. 379, 114844(2024).
  17. Qin, T., et al. Repetitive transcranial magnetic stimulation ameliorates cognitive deficits in mice with radiation-induced brain injury by attenuating microglial pyroptosis and promoting neurogenesis via BDNF pathway. Cell Comm Signal. 22 (1), 216(2024).
  18. Qian, F., et al. Microglia and astrocytes responses contribute to alleviating inflammatory damage by repetitive transcranial magnetic stimulation in rats with traumatic brain injury. Neurochem Res. 49 (9), 2636-2651 (2024).
  19. Luo, J., et al. Repetitive transcranial magnetic stimulation improves neurological function and promotes the anti-inflammatory polarization of microglia in ischemic rats. Front Cell Neurosci. 16, 878345(2022).
  20. Jannati, A., Oberman, L. M., Rotenberg, A., Pascual-Leone, A. Assessing the mechanisms of brain plasticity by transcranial magnetic stimulation. Neuropsychopharmacol. 48 (1), 191-208 (2023).
  21. Luo, L., et al. Intermittent theta-burst stimulation improves motor function by inhibiting neuronal pyroptosis and regulating microglial polarization via TLR4/NFκB/NLRP3 signaling pathway in cerebral ischemic mice. J Neuroinflammat. 19 (1), 141(2022).
  22. Eichler, A., et al. Microglial cytokines mediate plasticity induced by 10 Hz repetitive magnetic stimulation. J Neurosci. 43 (17), 3042-3060 (2023).
  23. Kent, S. A., Miron, V. E. Microglia regulation of central nervous system myelin health and regeneration. Nat Rev Immunol. 24 (1), 49-63 (2024).
  24. Yong, V. W. Microglia in multiple sclerosis: Protectors turn destroyers. Neuron. 110 (21), 3534-3548 (2022).
  25. Sarlus, H., Heneka, M. T. Microglia in Alzheimer's disease. J Clin Invest. 127 (9), 3240-3249 (2017).
  26. Cantuti-Castelvetri, L., et al. Defective cholesterol clearance limits remyelination in the aged central nervous system. Science. 359 (6376), 684-688 (2018).
  27. Norton, W. T., Poduslo, S. E. Myelination in rat brain: Method of myelin isolation. J Neurochem. 21 (4), 749-757 (1973).
  28. Gordon, S. Phagocytosis: An immunobiologic process. Immunity. 44 (3), 463-475 (2016).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

الزراعة المشتركة في المختبرالجهاز العصبي المركزيالخلايا الدبقية الصغيرة BV-2المجهر البؤريالمعالجة بليبوبوليسكريدعزل حطام الميالينالالتهاب العصبي
تقييم البلعمة الدبقية الدقيقة لبقايا المايلين في المختبر تحت التحفيز المغناطيسي المتكرر
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.