يصف البروتوكول الحالي طريقة تدريجية لتحليل ميكانيكا الجهاز التنفسي لنموذج الفئران خارج الجسم الحي باستخدام تقنية التذبذب القسري (FOT).
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
يصف البروتوكول الحالي طريقة تدريجية لتحليل ميكانيكا الجهاز التنفسي لنموذج الفئران خارج الجسم الحي باستخدام تقنية التذبذب القسري (FOT).
تعد ميكانيكا الجهاز التنفسي مجالا رئيسيا للدراسة في تحديد وعلاج أمراض الرئة من خلال تقييم سعة الرئة الوظيفية. يمكن تقييم ميكانيكا الرئة من خلال مناورات الرئة المختلفة التي تتضمن أشكال موجية تذبذبذبية مختلفة. عند تطبيقها على الرئتين ، تقيس هذه المناورات متغيرات متعددة ، مثل الضغط والحجم والتدفق ، بناء على الاستجابة لأشكال الموجة. ثم يتم حساب هذه الإشارات وتحليلها لتحديد معلمات مثل التعقيم والمقاومة والامتثال وتخميد الأنسجة ومرونة الأنسجة ، مما يوفر تقييما مفصلا لوظيفة الرئة الإجمالية. يعد تحليل ميكانيكا الجهاز التنفسي مهما بشكل خاص في تقييم رئتي المتبرعين لزراعة الرئة. البروتوكول الحالي هو الأول من نوعه ، حيث يقدم طريقة تدريجية شاملة وقابلة للتكرار لتقييم ميكانيكا الجهاز التنفسي باستخدام نموذج الفئران خارج الجسم الحي . ويتضمن تفاصيل عن النموذج الحيواني المختار ، واستعادة الرئة ، والتخزين والحفظ ، والتجريب باستخدام نظام قائم على تقنية التذبذب القسري. بالإضافة إلى ذلك ، فإنه يحدد تحليل البيانات والأهمية السريرية وتطبيقات تقنية التذبذب القسري في دراسة نموذج خارج الجسم الحي .
تمثل زراعة الرئة العلاج الدائم الوحيد لأمراض الرئة في المرحلة النهائية. يتلقى ما يقرب من 4,600 شخص عمليات زرع الرئة كل عام في جميع أنحاء العالم ، لكن ما يقرب من 600 مريض يموتون في قائمة الانتظار الثانوية لنقص رئتي المتبرعين المناسبين 1,2. في الجهود المبذولة لزيادة مجموعة الرئتين المتاحة ، يتم تعديل أنظمة تخصيص المتبرعين باستمرار ، مما أدى إلى سفر الجراحين لمسافات أبعد لتأمين أعضاءالمتبرعين 3. تزيد المسافات المتزايدة دائما من الوقت الإقفاري البارد ، مما يمثل حاجة إلى طرق إضافية للحفاظ على الأعضاء.
المعيار الحالي للحفاظ على الأ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تمت الموافقة على هذه الدراسة من قبل لجنة البحوث الحيوانية وفقا لدليل المعاهد الوطنية للصحة لرعاية واستخدام المختبر. تم استخدام C57Bl / 6 فئران من النوع البري ، تتراوح أعمارهم بين 6-8 أسابيع ووزنها بين 18-28 جراما. يتم توفير تفاصيل الكواشف والمعدات في جدول المواد.
1. التحضير
2. استخراج رئتي المتبرعين
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يتم توفير تصوير رسومي للتصميم التجريبي لنموذج الماوس (الشكل 1). تم تضخيم الرئتين باستخدام نظام التنفس الصناعي الصغير القائم على تقنية التذبذب القسري المتاح تجاريا لتقييم ميكانيكا الجهاز التنفسي للأنسجة المانحة في ظل ظروف مختلفة (الشكل 2). عند مقارنة النتائج بين مجموعات رئتي المتبرعين المحفوظة ، وجد أن مجموعات رئتي المتبرعين التي تم تخزينها عند 10 درجات مئوية تعمل بشكل أفضل من جميع المجموعات المخزنة عند 4 درجات مئوية في جميع المعلمات. في مجموعات التخزين 10 درجات .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الأهمية والتطبيقات المحتملة
تستخدم ميكانيكا الجهاز التنفسي بشكل روتيني في تطبيقات مختلفة لدراسة أمراض الرئة وإصابة الرئة. تم وصف دراسة ميكانيكا الجهاز التنفسي عدة مرات لتطور الأمراض مثل متلازمة الضائقة التنفسية الحادة وفي حالات التهوية المساعدة ولكن تم وصفها بشكل أقل بكثير في الأدبيات فيما يتعلق بزراعة الأعضاء15،16،17،18،
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وأعلن المؤلفون أن البحث أجري دون أي علاقات تجارية أو مالية يمكن أن يساء تفسيرها على أنها تضارب في المصالح.
يود المؤلفون أن يشكروا صوفي باكزينزي على استخدام نظام التنفس الصناعي ، وكولين ويلش على مساعدته. تم إنشاء الشكل 1 باستخدام biorender.com. تم دعم هذا البحث بمنحة من معهد ساوث كارولينا السريري والتحويلي (المعاهد الوطنية للصحة / المركز الوطني لتطوير العلوم الانتقالية) تحت رقم الجائزة UL1-TR001450.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 18 جرام قسطرة أنجيو | ب. براون | 4251687-02 | محور مستقيم |
| 24 جرام قسطرة أنجيو | ب. براون | 4251601-02 | محور مستقيم |
| 3 مل حقنة | فيشر ساينتفيك | 14-823-41 | |
| 3-0 خياطة حريرية | Medex | ETH-A304H | |
| 50 مل أنابيب مخروطية | Thermo Fisher | 339652 | |
| 70٪ EtOH | غرفة تحريض التخدير BP82031GAL | ||
| التخدير | فيشر العلمي جهاز هارفارد | 75-2030 | غرفة تحريض محكمة الغلق للفئران |
| آلة التخدير | جهاز هارفارد | 75-0238 | نظام تخدير متحرك مع الكسح السلبي |
| قناع التخدير | جهاز هارفارد | 59-8255 | قناع تخدير الفئران |
| ملقط صغير | حاد العالم أدوات دقيقة | 501217 | ملقط خلع الملابس ، 12.5 سم ، مستقيم ، مسنن |
| C57Bl / 6 فئران | تشارلز ريفر | سلالة كود 027 ؛ | النوع البري ، 6-8 أسابيع ، 18-28 جم |
| مقياس الوزن الرقمي | نظام Fisher Scientific | S72422 | |
| FlexiVent | Scireq | NC2926059 | التنفس الصناعي القوارض الصغيرة القائم على تقنية التذبذب القسري |
| حقنة الأنسولين ، 1 مل | فيشر Scientific | 14-841-33 | |
| Isoflurane ، USP | Piramal Critical Care | NDC 66794-017-25 | |
| مجهر التشغيل أو العدسات الجراحية | AmScope | SM-3BZ-80S | 3.5x - 90x مجهر ستيريو |
| محلول Perfadex | Xvivo | 19811 ، 19850 | |
| أطباق بتري | فيشر FB0875714 | العلمي | |
| مسحات قطنية معقمة | Puritan | 25-806 1WC | |
| إسفنج شاش معقم | فيشر Scientific | 22-037-902 | |
| مقص جراحي | الدقة العالمية | 1962C | مقص Metzenbaum |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تم نشر هذه المقالة
الفيديو قريباً