مقالة منهجية

التلقيح داخل الأدمة للمفطرة الطيئة في أذن الفأر

2.3K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/67675

⸱

يوليو 3, 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Center for Global Infectious Disease Research, Seattle Children's Research Institute, 2Department of Pediatrics, University of Washington School of Medicine, 3Department of Global Health, University of Washington

في هذه المقالة

ملخص

نقدم هنا بروتوكولا لإجراء جرعة منخفضة من التلقيح داخل الأدمة ل Mycobacterium avium في أذن الفأر لتعكس الظروف الشبيهة بالتعرض.

الملخص

على عكس التعرض الطبيعي للبكتيريا الفطرية غير السلية (NTM) أو الالتهابات التي يعتمد أمراضها على كائن حي بطيء التكاثر ، يمكن أن تتسبب عدوى الهباء الجوي في نموذج الفأر في انتشار مرتفع لنمو البكتيريا في الرئتين. يمكن علاج الهباء الجوي المزمن والالتهابات الجهازية بالأدوية المضادة للبكتيريا الفطرية ، والتي يمكن أن تعكس أيضا التعرض السابق ، لكن هذه الإجراءات طويلة وأقل تمثيلا للتعرض الطبيعي. الهدف من هذا البروتوكول هو تطوير نموذج فأر أقل توغلا لظروف شبيهة بالتعرض ل NTM والتي تكون أكثر ترجمة. هنا ، نصف طريقة لتحدي الفئران قبل السريرية داخل الجلد من خلال أنسجة الأذن باستخدام المتفطرة الطيرية (M. avium) لتقليد التعرض وتمكين الاستجابات المناعية للبكتيريا دون مرض واضح. في هذه المقالة ، نصف طريقة الحقن داخل الأذن ونؤكد وجود عدوى فطرية مستمرة ومحتوية ، مما يوفر مزيدا من الفرص لاستجواب الاستجابات المناعية في هذا النموذج في الجسم الحي .

المقدمة

البكتيريا الفطرية غير السلية (NTM) هي قائمة موسعة من الأنواع التي تشمل مجموعة فرعية من البكتيريا المسببة للأمراض التي يصعب علاجهاغالبا 1،2. يمكن العثور على NTM في المصادر البيئية مثل التربة والمياه والهباء الجويالمائي 3،4،5. على الرغم من الاتجاهات المبلغ عنها التي تشير إلى ارتفاع إصابات NTM ، كمجموعة ، يتم الإبلاغ عنها بشكل روتيني في أقل من 20 ولاية في جميع أنحاء الولايات المتحدة 6،7. الأفراد الذين يعانون من أمراض مصاحبة محددة ، بما في ذلك الأشخاص المصابين بالتليف الكيسي أو الأفراد الذين يتناولون الأدوية المثبطة للمناعة ، معرضون بشكل متزايد لخطر الإصابة الإنتاجية بأنواع NTM المسببة للأمراض2. ومع ذلك ، يفترض أن الأفراد الأصحاء يتعرضون بشكل متكرر ومستمر ل NTM من خلال مصادر بيئية دون أن يؤدي إلى التهابات قوية أو مزمنة. هناك بعض الأدلة على أن التعرض ل NTM قد "يشرب" الاستجابة المناعية الإجمالية لمستضدات البكتيريا الفطرية في اللقاحات8 ، والنتائج بعد التعرض للبكتيريا الفطرية الأخرى ، والاختباراتالتشخيصية 9 ، ولكن حتى الآن ، كانت النمذجة قبل السريرية لهذا النوع من التعرض صعبة.

لا تمثل الالتهابات الرئويةالمزمنة 10 والعلاجات التي يتم الاستفادة منها لدراسات فعالية اللقاح الخاص بممرضات التعرض البيئي غير الضار نسبيا ، والاستجابات المناعية الناتجة المختلفة المفترضة. الالتهابات المزمنة ، على سبيل المثال ، يمكن أن تسبب الأنسجة المتضررة بشدة وانتشارالمرض 10. كان هناك زخم حديث لمعالجة هذه الفجوة البحثية ، بما في ذلك نموذج الفأر الذي يوفر التعرض ل NTM عن طريق مياه الشرب ، من مختبر Henao-Tamayo11 ، حيث تم استجواب الاستجابة المناعية لهذا التعرض بشكل مطول. السل الكامن (TB) هو حالة مرضية أخرى للعدوى الفطرية التي كان من الصعب نمذجتها في قبل السريرية. كان مختبر كوفمان رائدا في التهابات الأذن داخل الأدمة مع المتفطرة السل في الفئران C57BL / 612 و NOS2 - / - 13 لتقليد عدوى السل الكامنة وإعادة تنشيطها وتوصيف آليات الأورام الحبيبية الناقصة للأكسجة. استفاد Nemeth et al. من نموذج الأذن داخل الأدمة الموجود لتقليد التعرض المسبق ل M. tuberculosis ، وتميز الاستجابات المناعية المميزة ، من أجل تحديد كيفية تأثير ذلك على نتائج التحدياللاحقة 14. تم الإبلاغ عن نموذج الأذن داخل الأدمة بنجاح باستخدام 104 وحدات تشكيل مستعمرة (CFU) من سلالات M. tuberculosis H37Rv و Erdman ، ولكن حتى الآن ، لم يتم اختباره باستخدام عزلات NTM.

الهدف العام من هذه الطريقة هو إنشاء نموذج تحدي الأذن NTM قابل للتكرار يحد من المرض الناجم عن طرق التحدي الأخرى ، والذي يمكن دراسته بشكل أكبر فيما يتعلق بالاستجابة المناعية للتعرض. يؤدي تعريض الفئران C57BL / 6 المعرضة لجرعات عالية من M. avium في مياه الشرب إلى ظروف شبيهة بالعدوى أكثر من التعرض11. لذلك ، فإن الأساس المنطقي لتطوير هذه التقنية يشمل النجاح المسبق باستخدام M. tuberculosis ككائن حي تحدي لأدمة الأذن بجرعة تحدي أعلى نسبيا12،13،14. هنا ، هدفنا إلى تقييم ما إذا كان يمكن تكييف النموذج بنجاح مع M . أفيوم عزل بنصف تركيز البكتيريا الذي تم الإبلاغ عنه سابقا12،13،14 (102 CFU). نتوقع أن يساعد تطوير نماذج جديدة للتعرض ل NTM ، وليس العدوى ، في معالجة الأسئلة البيولوجية المعلقة حول هذا التأثير على الصحة وديناميكيات العدوى / التطعيم المستقبلية.

البروتوكول

تم شراء أنثى C57BL / 6 من مختبر إمداد نموذج البحث في 6-7 أسابيع من العمر. تم إيواء الفئران في منشأة السلامة البيولوجية من المستوى 2 (BSL-2) التابعة لمعهد سياتل لأبحاث الأطفال (SCRI) في ظل ظروف خالية من مسببات الأمراض وتم التعامل معها وفقا للبروتوكولات التجريبية التي وافقت عليها لجنة رعاية واستخدام المؤسسي SCRI (IACUC). تم تنفيذ جميع الأساليب وفقا للمبادئ التوجيهية واللوائح ذات الصلة فيما يتعلق برعاية. يعمل المعهد بموجب شهادة وزارة الزراعة الأمريكية # 91-R-0061 و PHS Assurance #A4337-01. يتم سرد تفاصيل الكواشف والمعدات المستخدمة في الدراسة في جدول المواد.

1. تحضير المخزونات البكتيرية للتلقيح

  1. في خزانة السلامة الحيوية التي تساعد على العمل البكتيري ، قم بإزالة قارورة مخزون من المتفطرة الطيئة (ATCC 25291) من التخزين -80 درجة مئوية وقم بإذابة الثلج في درجة حرارة الغرفة.
    ملاحظة: يتم تحديد تركيزات مخزون M. avium مسبقا ، كأفضل ممارسة مع جميع مواد المخزون ، عن طريق طلاء التخفيفات التسلسلية على ألواح أجار 7H10 وعد وحدات تشكيل المستعمرة (CFU).
  2. باستخدام إبرة بحجم 26 جم ، قم بإعادة تعليق عينة المخزون عن طريق تمرير السائل لأعلى ولأسفل المحقنة سعة 1.0 مل 10 مرات أو أكثر لإنشاء تعليق موحد.
  3. تحقق من تركيز M. avium عن طريق طلاء 100 ميكرولتر من التخفيفات التسلسلية 1:10 للتعليق على ألواح أجار 7H10. احتضان الصفائح لمدة 3 أسابيع عند 37 درجة مئوية وعد المستعمرات للتأكد من دقة تركيزات اللقاح.
  4. اضبط تركيز M. avium على الجرعة المفضلة عن طريق تخفيف العينة باستخدام PBS معقم. يحفظ في درجة حرارة الغرفة حتى يصبح جاهزا للاستخدام.
    ملاحظة: في هذه التجربة ، تم استخدام 102 CFU لكل جرعة 10 ميكرولتر.

2. تحضير وتخدير

  1. قبل إعطاء التخدير ، قم بإعداد سطح دافئ ، مثل وسادة التدفئة ، حيث يمكن الاحتفاظ بأقفاص الفئران الملقحة في محاولة لتنظيم درجة حرارة أجسامها أثناء التعافي.
  2. حقن كوكتيل الكيتامين (100 مجم / مل) والزيلازين (20 مجم / مل) في الفئران عبر الطريق داخل الصفاق.
  3. بمجرد التخدير ، قم بإجراء قرصة إصبع القدم للتأكد من أن الفئران مخدر بشكل كاف للتلاعب بالإجراء.
  4. ضع زيوت تشحيم العين بشكل ثنائي.

3. منصة التلقيح وإعداد المواد

  1. استخدم لوح رغوي لإنشاء حافة يمكن أن يستقر عليها الماوس أثناء التلاعب به.
    ملاحظة: سيساعد الشريط على الوجهين على تثبيت الأذن لأسفل على المنصة في اتجاه مسطح. يجب ألا تكون المادة اللاصقة قوية جدا للحفاظ على صحة أنسجة الأذن.
  2. رتب عدسة مكبرة مضاءة لعرض المنصة.
  3. اجمع حقنة هاميلتون معقمة ومستحضر M. avium يعمل في مكان قريب.

4. تلقيح أدمة الأذن

  1. ضع الماوس في وضع ضعيف فوق الحافة بحيث يمكن وضع الأذن على شريط على الوجهين.
  2. استخدم ضغطا لطيفا لتسطيح الأذن على الشريط وتأكد من عدم تحرك الأذن.
    ملاحظة: يمكن استخدام مناديل الكحول المبللة على الأذنين قبل الحقن للمساعدة في الحد من التلوث المتبادل والعدوى بالجلد بعد العدوى. ومع ذلك ، لم يتم ملاحظة مثل هذه العدوى في الدراسات التجريبية دون استخدام مناديل الكحول.
  3. ارسم 10 ميكرولتر من مستحضر M. avium يحتوي على 100 CFU في حقنة هاميلتون المعقمة.
    ملاحظة: قم بتدوير تعليق M. avium قبل رسم حجم 10 ميكرولتر للتأكد من تجانسه.
  4. أمسك المنصة بيد وحقنة هاميلتون في اليد الأخرى ، مع التأكد من توجيه الجانب المائل للإبرة لأعلى (الشكل 1).
  5. ضع حقنة هاميلتون تحت أدمة الأذن باستخدام ضغط خفيف جدا. تأكد من أن الإبرة لا تمر بالكامل عبر أنسجة الأذن الرقيقة.
  6. بمجرد وضع الإبرة في مكانها ، اضغط على مكبس المحقنة بوتيرة تدريجية وبطيئة.
  7. راقب لون الأذن أثناء الإعطاء.
    ملاحظة: ستظهر الإدارة الناجحة كارتفاع معتم في موقع الحقن ، مثل الفقاعة.
  8. بمجرد إعطاء الجرعة بالكامل ، تحقق من أذن الماوس والشريط بحثا عن أي علامات على التسرب.
    ملاحظة: في حالة حدوث تسرب ، يمكن إعطاء جرعة مفقودة تقديرية للأذن المقابلة. كحد أدنى ، يجب وضع علامة على وتسجيله على أنه ربما تم إعطاؤه جرعة أقل من الهدف.
  9. عندما تكون الجرعة ناجحة ، تأكد من إعادة وضع الفأر في قفص منزله ليتم تعريضه للسطح الدافئ أثناء مراقبته حتى يستيقظ بنجاح من التخدير.

5. تقييم العبء البكتيري

  1. القتل الرحيم للحيوانات وفقا للبروتوكولات المعتمدة من لجنة رعاية المؤسسي واستخدامه.
    1. هنا ، يكتمل القتل الرحيم بطريقتين على الأقل لكل تضحية. بالنسبة لهذا الإجراء ، فإن الطريقتين المختارتين هما استخدام ثاني أكسيد الكربون2 الاختناق وخلع عنق الرحم.
    2. أولا ، قم بتمديد أنبوب لتوزيع غاز ثاني أكسيد الكربون2 في القفص المنزلي للفئران وإدارة الغاز حتى تختفي علامات الحركة من الفئران. احرص على استخدام قفص لا يسمح للغاز بالتسرب.
    3. بعد ذلك ، قم بخلع فقرات عنق الرحم من خلال التلاعب اليدوي.
  2. تشريح الأذنين من M. avium التي تحدت بعد أربعة أسابيع من التعرض (28 يوما ، مطابقة للدراسات السابقة12). تشريح آذان 2 فئران باستخدام أدوات معقمة. أدخل الأذنين في أنابيب مخروطية تحتوي على عازلة CFU (PBS + 0.05٪ Tween80) واستخدم مجانس الأنسجة للتجانس حتى يتم تشكيل تعليق موحد. تتم أيضا معالجة الآذان التي لا منازع لها وتقديمها كعناصر تحكم.
    ملاحظة: يمكن استخدام أي نقاط زمنية وأجهزة ما بعد التعرض للضوء. في هذه التجربة ، تم أيضا جمع الرئة والطحال والعقدة الليمفاوية المستنزفة وأعضاء الدماغ.
  3. أضف 100 ميكرولتر من التجانس إلى 700 ميكرولتر من المخزن المؤقت CFU في كتلة بئر عميقة كتخفيف 1/8 أضعاف. كرر عبر الكتلة بحيث يتم إنشاء ما لا يقل عن 5 تخفيفات تسلسلية. أضف 50-100 ميكرولتر من التخفيفات المتجانسة أو التسلسلية الأنيقة (التخفيفات من 0 إلى 5 المستخدمة هنا) إلى ألواح أجار ثلاثية 7H10 ، ووزعيها بالتساوي باستخدام موزعات T ، واحتضانها عند 37 درجة مئوية مع 5٪ ثاني أكسيد الكربون2 لمدة 2-3 أسابيع.
  4. عد وحدات تشكيل المستعمرة (CFU) وتحويلها إلى سجل10 لأغراض التحليل في برنامج جداول البيانات.

النتائج

استخدمنا البروتوكول المفصل أعلاه لتحديد ما إذا كان يمكن إنشاء نموذج تحدي NTM قابل للتكرار باستخدام أدمة الأذن كطريق للعدوى أو التعرض. تم جمع الأذنين من حيوانين في 28 يوما بعد النقطة الزمنية للتحدي ، متجانسة ومطلية كما هو موضح في وسائط 7H10 الانتقائية للبكتيريا الفطرية. لاحظنا أن M. avium استمر لمدة 28 يوما في الأذنين التي تم تحديها داخل الجلد وغياب M. avium في الأذن التي لا تتعارض معها (الشكل 2).

على الرغم من أننا لم نلاحظ الانتشار في الأذن الخالية من المنازع بعد 28 يوما من الإصابة ، فقد لاحظ آخرون يستخدمون نموذج أدمة الأذن هذا لنمذجة السل الكامن انتشاره إلى مواقع الأعضاء البعيدةالأخرى 14. افترضنا أن جرعة أقل من التحدي واستخدام عزل المتفطرة الطيرية قد يقلل من الانتشار إلى نقاط زمنية لاحقة قد تعكس بشكل أفضل التعرض مقابل العدوى المزمنة. لذلك ، تم إجراء القتل الرحيم على مجموعات من n = 5 M. الطيور التي تحدت الفئران في 28 و 56 و 90 و 132 يوما بعد الإصابة. تم تجانس الأعضاء التالية بنفس البروتوكول الموصوف لأنسجة الأذن: الرئة والطحال وتصريف العقدة الليمفاوية (DLN) والدماغ. أدى مسار التحدي هذا إلى انتشار متقطع بمرور الوقت ، حيث أظهر أقل من نصف CFU يمكن عدها في الأعضاء التي تم اختبارها بواسطة 56 أو 90 يوما بعد الإصابة (الجدول 1). بحلول 132 يوما بعد التحدي ، كان لدى جميع الفئران بكتيريا M. avium يمكن اكتشافها في طحالها (ن = 5/5 تم تقييمها) ولكن يبدو أنها تؤوي الحد الأدنى (ن = 1/5 في DLN) أو لا (ن = 0/5 في الرئتين أو الدماغ) في الأعضاء الأخرى بحلول هذه النقطة الزمنية (الجدول 1).

figure-results-1
الشكل 1: اتجاه إبرة مع الجانب المائل لأعلى. قبل إدخال الإبرة ، يجب أن يكون الجانب المائل متجها لأعلى لإدارة اللقاح بشكل صحيح. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

figure-results-2
الشكل 2: استعمار أنسجة الأذن بواسطة M. avium بعد 28 يوما من التحدي. تم تحدي إناث الفئران C57BL / 6 في الأذن مع 102 CFU من المتفطرة الطيور. تمت مقارنة الأذن الصعبة (+) بالأذن التي لا منازع لها (-) في 28 يوما ، و n = 2 فردية من تجربة واحدة موضحة ، مع كل بلون ورمز مختلفين. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الوقت (اليوم)سجل الأعضاء10 CFU
رئةطحالDLNدماغ
283.08 ، ND ، ND ، ND ، ND2.81 ، ND ، ND ، ND ، NDإن دي، إن دي، ند، ند، ند، إن دي0.78 ، 0.90 ، إن دي ، إن دي ، إن دي
562.30 ، ND ، ND ، ND ، ND1.53 ، 3.43 ، ND ، ND ، ND2.78 ، ND ، ND ، ND ، ND1.20 ، ND ، ND ، ND ، ND
90إن دي، إن دي، ند، ند، ند، إن دي0.60 ، 3.35 ، 3.26 ، ND ، NDإن دي، إن دي، ند، ند، ند، إن دي0.60 ، ND ، ND ، ND ، ND
132إن دي، إن دي، ند، ند، ند، إن دي4.03, 3.58, 3.58, 4.03, 3.692.41 ، ND ، ND ، ND ، NDإن دي، إن دي، ند، ند، ند، إن دي
DLN = تصريف العقدة الليمفاوية ، ND = لم يتم اكتشافه

الجدول 1: نشر المتفطرة من الأذن بمرور الوقت بعد التحدي. تم حصاد الرئتين والطحال والعقدة الليمفاوية المستنزفة (DLN) والدماغ من n = 5 فئران لكل نقطة زمنية بعد التحدي. تم طلاء الأنسجة المتجانسة وتقييمها لنمو البكتيريا. قدم CFU للأعضاء على أنه سجل10 القيم المحولة حيث تم حساب البكتيريا ولم يتم اكتشافها (ND) حيث لم يلاحظ أي CFU في أي تركيز مطلي. ممثلة بيانات الدورة الزمنية لتجربة واحدة.

المناقشة

لقد أوضحنا هنا كيفية تحدي الفئران المصابة بالبكتيريا الفطرية بشكل متكرر في نموذج الأذن داخل الأدمة. من الضروري ، عند تنفيذ هذا الإجراء ، اتباع احتياطات العقم وتجنب إصابات وخز الإبرة. باستخدام طريقة التلقيح هذه ، من الأهمية بمكان أن يكون لديك محطة إعداد مناسبة وإضاءة جيدة لضمان استهداف مساحة الأدمة وعدم ثقبها من خلال الأذن بالكامل. إذا حدث ذلك ، اعتمادا على الدراسة ، يمكن إجراء محاولة ثانية في الأذن الأخرى. يمكن أيضا استخدام الأذنين غير المعالجة داخل نفس الماوس كتحكم لكل ماوس. يجب أن تكون هذه الطريقة في متناول الباحثين الذين لديهم الحد الأدنى من الاحتياجات للمعدات أو الوقت. يساعد تخصيص الفئران والوقت للتدريب في معدل نجاح التلقيح للبروتوكول. الأخطاء الأكثر شيوعا في هذه التقنية هي عدم دخول الفراغ داخل الأدمة مع المحقنة (والثقب من خلال الأذن) أو الضغط على المحقنة بسرعة كبيرة ، مما يتسبب في توصيل غير متسق أو انزلاق الإبرة من الفراغ داخل الأدمة. يمكن أن تساعد الإضاءة والتكبير الجيد في الوضع الصحيح للإبرة للتطعيم.

نحن نستفيد من منهجية الظروف "الشبيهة بالتعرض" ل NTM. الغالبية العظمى من M. avium موجودة داخل الأذن أو DLN. ومع ذلك ، فإن أحد قيود هذه المنهجية هو أنه لوحظ الانتشار على الأعضاء الجهازية ، أي الطحال ، في جميع التي تم تقييمها بعد 132 يوما من التحدي. قد تكون هناك عتبة للتلقيح البكتيري يمكن أن تقلل من كمية أو تكرار الانتشار، وهو ما يمكن تحقيقه من خلال دراسة المعايرة بالتحليل الحجمي. هذا الإجراء قابل لتعديل كل من الكائن الحي ، على سبيل المثال ، أنواع NTM الأخرى ، والجرعة التي يتم تسليمها ، اعتمادا على سؤال البحث.

قد يلعب السلوك البشري (عدم وجود معالجة مناسبة لمياه الشرب ، والتلوث ، والتدخين) ، وزيادة أعداد الأشخاص الذين يعانون من تدهور صحتهم بسبب سن15 عاما والأمراض المصاحبة الأخرى ، ونقص الاختبارات التشخيصية المناسبة ، وتغير المناخ16 دورا في ارتفاع معدلات الإصابة ب NTM ، ومن المرجح أن يزداد هذا الاتجاه في المستقبل القريب. نقترح أن نماذج مثل توصيل الغشاء المخاطي عن طريق مياه الشرب11 أو التهابات الأذن داخل الأدمة مع NTM في الفئران توفر فرصة لتحديد تأثير هذا التعرض المتزايد على التطعيم اللاحق وفعالية اللقاح. على الرغم من أننا قمنا بتكييف هذه المنهجية لنموذج الأذن المحتوى ل M. avium ، إلا أننا نقترح أنه يمكن استخدامه بنجاح لأنواع NTM الأخرى كتقنية تعرض.

الإفصاحات

ويعلن المؤلفان أنه ليس لديهم تضارب في المصالح.

شكر وتقدير

يعرب المؤلفون عن امتنانهم لموظفي الفيفاريوم الملتزمين لرعايتهم الاستثنائية للحيوانات طوال هذه الدراسة. يود المؤلفون أيضا أن يشكروا مختبر Henao-Tamayo في جامعة ولاية كولورادو لمشاركة سلالة M. avium المستخدمة في هذه الدراسة. يود المؤلفون أن يشكروا أعضاء مختبري Aderem و Urdahl في معهد أبحاث الأطفال في سياتل على التدريب على المنهجية الأصلية. تم تمويل هذا المشروع كليا أو جزئيا بأموال فيدرالية من المعهد الوطني للحساسية والأمراض المعدية ، والمعاهد الوطنية للصحة ، ووزارة الصحة والخدمات الإنسانية ، بموجب العقد رقم 75N93021C00029 (إلى RNC) ، والمنح R01AI125160 و R01AI183642 (إلى RNC و SLB).

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
0.05٪ Tween80SigmaP6224
1 مل حقنةفيشر15-823-434
7H10 أجار ثلاثية الألواحمولتوكس21-40S234
26G إبرة حادةفيشرNC0981254
خزانة السلامة الحيويةNuaireNU-543-400
CO2< / sub> حاضنةفيشر العلمية15-103-0513
شريط على الوجهينسكوتش3136
هاميلتون 701N حقنة ميكرولترفيشر14-824-16
نصائح أومني للأنسجة الصلبةفيشر15-340-102
وسادة تسخينكينت ScientificHTP-1500
إبرة الأنسولينفيشرNC1551333
الكيتامينباترسون بيطري07-890-8598
عدسة مكبرة مضاءةبرايتيكB07MMZ27QK
PBSThermoFisher10010072
خالط الأنسجةOmniTH115
حامل خالط الأنسجةOmniS1000
XylazinePatterson البيطري07-808-1947

المراجع

  1. Abdelaal, H. F. M., et al. Mycobacterium abscessus: It's Complex. Microorganisms. 10 (7), (2022).
  2. Baldwin, S. L., et al. The complexities and challenges of preventing and treating nontuberculous mycobacterial diseases. PLoS Negl Trop Dis. 13 (2), p. e0007083(2019).
  3. Falkinham, J. O. 3rd Environmental sources of nontuberculous mycobacteria. Clin Chest Med. 36 (1), 35-41 (2015).
  4. Honda, J. R. Environmental sources and transmission of nontuberculous mycobacteria. Clin Chest Med. 44 (4), 661-674 (2023).
  5. Pfaller, S., et al. Occurrence revisited: Mycobacterium avium and Mycobacterium intracellulare in potable water in the USA. Appl Microbiol Biotechnol. 106 (7), 2715-2727 (2022).
  6. Mercaldo, R. A., et al. Environmental risk of nontuberculous mycobacterial infection: Strategies for advancing methodology. Tuberculosis (Edinb). 139, 102305(2023).
  7. Marshall, J. E., et al. Nontuberculous mycobacteria testing and culture positivity in the United States. BMC Infect Dis. 24 (1), 288(2024).
  8. Ghasemi, F., et al. Effects of non-tuberculous mycobacteria on BCG vaccine efficacy: A narrative review. J Clin Tuberc Other Mycobact Dis. 36, 00451(2024).
  9. Njagi, L. N., et al. Attenuated tuberculin skin test responses associated with Mycobacterium intracellulare sputum colonization in an adolescent TB prevalence survey in Western Kenya. Tuberculosis (Edinb). 147, 102514(2024).
  10. Larsen, S. E., et al. Subunit vaccine protects against a clinical isolate of Mycobacterium avium in wild type and immunocompromised mouse models. Scientific Reports. 11 (1), 9040-9040 (2021).
  11. Dutt, T. S., et al. Mucosal exposure to non-tuberculous mycobacteria elicits B cell-mediated immunity against pulmonary tuberculosis. Cell Rep. 41 (11), 111783(2022).
  12. Kupz, A., et al. A Mouse Model of Latent Tuberculosis Infection to Study Intervention Strategies to Prevent Reactivation. PLoS One. 11 (7), e0158849(2016).
  13. Reece, S. T., et al. Serine protease activity contributes to control of Mycobacterium tuberculosis in hypoxic lung granulomas in mice. J Clin Invest. 120 (9), 3365-3376 (2010).
  14. Nemeth, J., et al. Contained Mycobacterium tuberculosis infection induces concomitant and heterologous protection. PLoS Pathogens. 16 (7), e1008655(2020).
  15. Jarchow-MacDonald, A., et al. Changing Incidence and Characteristics of Nontuberculous Mycobacterial Infections in Scotland and Comparison With Mycobacterium tuberculosis Complex Incidence (2011 to 2019). Open Forum Infect Dis. 10 (1), ofac665(2023).
  16. Thomson, R. M., et al. Influence of climate variables on the rising incidence of nontuberculous mycobacterial (NTM) infections in Queensland, Australia 2001-2016. Sci Total Environ. 740, 139796(2020).

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

نموذج أذن الفأرالمتفطرات غير السليةطريقة الحقن في الأذنتحليل الاستجابة المناعيةزراعة التخفيف المتسلسلتجنيس الأنسجةالوحدات المكونة للمستعمراتالعدوى المتفطرة المزمنة
التلقيح داخل الأدمة للمفطرة الطيئة في أذن الفأر
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.