Method Article

طريقة QuEChERS-HPLC المعدلة للكشف عن الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات في أجنة أسماك الزرد المعرضة للجسيمات الدقيقة

DOI:

10.3791/67757

⸱

June 13th, 2025

 ,  ,  ,  , 
1Suzhou Industrial Park Center for Disease Control and Prevention, 2Suzhou Medical College of Soochow University, 3MOE Education Key Laboratory of Geriatric Diseases and Immunology

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

قمنا بتطوير طريقة QuEChERS-HPLC المعدلة لتقييم المستويات الداخلية ل 16 هيدروكربوكرية في أجنة أسماك الزرد.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم ربط تعرض الأمهات للجسيمات الدقيقة (PM2.5) ، التي يبلغ قطرها الديناميكي الهوائي 2.5 ميكرومتر أو أقل ، بالإجهاض التلقائي والأمراض الخلقية المختلفة لدى البشر. ومع ذلك، لا تزال الآليات الأساسية غير واضحة. تستخدم أجنة أسماك الزرد على نطاق واسع لدراسة السمية التنموية ل PM2.5 ، لكن قياس المستويات الداخلية للهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات (PAHs) ، وهي المكونات السامة الأساسية ل PM2.5 ، يشكل تحديا. في هذه الدراسة ، قمنا بتطوير طريقة كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء سريعة وسهلة ورخيصة وفعالة ومتينة وآمنة (QuEChERS-HPLC) لتقييم المستويات الداخلية ل 16 هيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات المدرجة في قائمة الملوثات ذات الأولوية لوكالة حماية البيئة الأمريكية (EPA). تمت معالجة أجنة أسماك الزرد بمواد عضوية قابلة للاستخراج (EOM) من PM2.5 لمدة 2-72 ساعة بعد الإخصاب (HPF). تم استخدام طريقة QuEChERS لإعداد العينة ، وتم استخدام HPLC-FLD / DAD (HPLC مع كاشف التألق وكاشف مصفوفة الصمام الثنائي) للتحليلات النوعية والكمية ل PAHs. لقد نجحنا في اكتشاف ستة هيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات (الفينانثرين والأنثراسين والفلورين والأسينافثين والفلورانثين والبيرين) في أجنة أسماك الزرد المعرضة ل PM2.5. هذه الطريقة ضرورية للتحقيق في آليات السمية التنموية الناجمة عن PM2.5.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الجسيمات الدقيقة (PM2.5) ، بقطر ديناميكي هوائي يبلغ 2.5 ميكرومتر أو أقل. هو عامل خطر بيئي رئيسي. نظرا لصغر حجمه ، فإن PM2.5 قادر على دخول نظام الدورة الدموية واختراق حاجز الأم والجنين. ربطت الدراسات الوبائية بين تعرض الأمهات ل PM2.5 والإجهاض التلقائي والأمراض الخلقيةالمختلفة 1،2،3،4. ومع ذلك ، فإن الآليات الأساسية للسمية الجنينية ل PM2.5 ليست مفهومة جيدا. الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات ، المكون السام الأساسي ل PM2.5 ، شديدة السمية للإنسان بسبب خصا....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. معالجة العينة

  1. مجموعة PM2.5
    1. اجمع PM2.5 على مرشحات غشاء الكوارتز مقاس 47 مم.
      ملاحظة: تم جمع PM2.5 في المناطق الحضرية في سوتشو ، الصين.
  2. استخراج EOM
    1. نقطع الفلتر إلى قطع ونضعه في قارورة زجاجية مخروطية الشكل مع 150 مل من الأسيتونيتريل.
    2. الموجات فوق الصوتية قارورة عند 35 درجة مئوية لمدة 1 ساعة ونقل المستخلص إلى أربعة أنابيب 50 مل.
    3. جهاز طرد مركزي عند 7,000 × جم لمدة 20 دقيقة ، ثم انقل المادة الطافية إلى مبخر دوار ومركزها إلى حوالي 5 مل.
    4. يتبخر حتى يجف تحت تدفق النيتروجين في حمام مائي 35 درجة ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يتم توضيح الإجراء الكامل للتعرض ل EOM وإعداد العينة واكتشاف الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات في الشكل 1. وبالنسبة ل HPLC-FLU/DAD، اعتبرت نسبة الإشارة إلى الضوضاء البالغة 3:1، مع نطاق الكشف من 0.3 إلى 5.0 نانوغرام/مل، مقبولة. وتراوحت حدود طريقة الكشف من 3.0 × 10-4 إلى 5.0 × 10-3 نانوغرام/كائن حي. أظهرت جميع منحنيات المعايرة خطية عالية (ص2 > 0.999). كانت قيم الدقة المحددة باستخدام المستخلصات التي تم الحصول عليها من عينات المصفوفة أقل من 5٪. تراوحت معدلا.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تعتبر أجنة أسماك الزرد نموذجا قويا للفقاريات لدراسات السمية التنموية ، لكن صغر حجمها يعقد اكتشاف المركبات العضوية شبه المتطايرة (SVOCs) مثل الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات أثناء تحضير العينة ، يعد منع تلوث أجنة الزرد أمرا بالغ الأهمية. يعد التنظيف السليم للعينات خطوة أساسية لتجنب ترحيل المركبات من وسط التعرض إلى مستخلص العينة. يمكن أن يؤدي الغسيل غير المكتمل إلى المبالغة في التقدير ، في حين أن الغسيل المفرط يمكن أن يتسبب في فقدان المواد من داخل الأجنة ، مما يؤدي إلى التقليل من التق.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعلن أصحاب البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم دعم هذا العمل ماليا من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم المنحة: 81972999) وخطة تطوير العلوم والتكنولوجيا في سوتشو (البحوث الأساسية في التطبيقات الطبية ، SKY2023036 و SKY2023115).

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
16 الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات الحلول القياسية المختلطة o2si الحلول الذكية (ساوث كارولينا ، الولايات المتحدة الأمريكية)110124-0616 محلولا قياسية مختلطة من الهيدروكربونات العطرية متعددة الحلقات تشمل النفثالين (Nap) ، الأسينافثيلين (Acy) ، الآس النفثين (Ace) ، الفلورين (Flo) ، الفينانثرين (Phe) ، الأنثراسين (النمل) ، الفلورانثين (الأنفلونزا) ، البيرين (Pyr) ، بنزو [أ] أنثراسين (BaA) ، الكريسين (Chr) ، بنزو [ب] الفلورانثين (BbF) ، بنزو [ك] الفلورانثين (BkF) ، بنزو [أ] بيرين (BaP) ، إندينو [1،2،3-cd] بيرين (IcdP) ، ديبنز [أ ، ح] أنثراسين (DahA) ، بنزو [ز ، ح ، أنا] بيريلين (BghiP).
1260 Infinity II LC SystemAgilent Technologies (سانتا كلارا، الولايات المتحدة الأمريكية)FLD(G1321A); DAD SL (G1315C)
AcetonitrileScharlab (برشلونة ، إسبانيا)AC03661000المذيب
CNWBOND HC-C18 SPE & nbsp ؛ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc. (شنغهاي ، الصين)SBEQ-CA0801C18 عبارة عن تعبئة ذات مرحلة عكسية مع توازن جيد بين الماء والكارهة للماء ، والتي يمكنها امتصاص وفصل المركبات العضوية القطبية وغير القطبية جيدا.
Agilent Technologies، Inc (سانتا كلارا ، الولايات المتحدة الأمريكية)12214013لفصل وتنقية وإزالة الشوائب العضوية ؛
Dispersive SPE 15 مل ، ENAgilent Technologies، Inc (سانتا كلارا ، الولايات المتحدة الأمريكية)5982-5056تنقية العينة
ANPEL Laboratory Technologies (شنغهاي) Inc. (شنغهاي ، الصين)SCAA-104مرشح إبرة الطور العضوي (نايلون) ، 0.22 وميكرو ؛ م
هكسانشارلاب (برشلونة ، إسبانيا)HE02481000مذيب
ميليبورميرك (نيو جيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية)تحضير تنظيم المياه فائقة النقاء
- N-EVAP تنظيم مبخرات النيتروجين(ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية)تبخير المذيبات
Sorvall ST4 PlusThermo Fisher Scientific (والثام ، الولايات المتحدة الأمريكية)الطرد
المركزي  Vortex- Genie 2 (G560E)الصناعات العلمية (نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية)Vortex
ZORBAX Eclipse PAHAgilent Technologies، Inc (سانتا كلارا ، الولايات المتحدة الأمريكية)959990-918هذا العمود بشكل شائع في أنظمة HPLC لتحقيق تحليل دقيق وموثوق به للهيدروكربونات العطرية المتعددة الحلقات
التعبئة شركة مرشح يستخدم

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Wang, H., et al. Association of maternal exposure to ambient particulate pollution with incident spontaneous pregnancy loss. Ecotoxicol Environ Saf. 224, 112653(2021).
  2. Grippo, A., et al. Air polluti....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

QuEChERS HPLCPolycyclic Aromatic HydrocarbonsZebrafish EmbryosFine Particulate MatterPAH DetectionSample PreparationFluorescence DetectorDiode Array DetectorExtractable Organic MatterDevelopmental Toxicity

Related Articles