يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

تصميم والتحقق من صحة طابعة حيوية بالبثق الحجمي للطباعة الحيوية لمستخلص الغشاء القاعدي القابل للذوبان للبحوث الانتقالية

970 مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/67788

⸱

مارس 28, 2025

 ,  ,  , 
1Laboratory of Biological Structure Mechanics (LaBS), Department of Chemistry, Materials and Chemical Engineering "Giulio Natta", Politecnico di Milano

في هذه المقالة

ملخص

مستخلصات الغشاء القاعدي القابلة للذوبان هي المصفوفات البيولوجية الأكثر استخداما في أبحاث السرطان ، لكن سلوكها الريولوجي المعقد يجعل الطباعة الحيوية صعبة مع أنظمة الطباعة الحيوية المتاحة تجاريا. يقدم هذا العمل استراتيجية طباعة حيوية مخصصة لإنتاج تركيبات مصفوفة نقية بدقة جيدة للشكل في كل من الطبقات المفردة والمتعددة.

الملخص

في البحث الانتقالي ، تعتبر النماذج ثلاثية الأبعاد في المختبر ضرورية لتعزيز الفهم العلمي والتطوير العلاجي. لهذا الهدف ، تلعب مستخلصات الغشاء القاعدي القابلة للذوبان (SBMes) ، المشتقة من خلايا ساركوما الفأر ، الدور الرئيسي في تكرار الميزات الميكانيكية والكيميائية الحيوية للبيئة المكروية في الجسم الحي . إنها ذات قيمة خاصة في مجموعة متنوعة من المجالات البحثية ، من هندسة الأنسجة إلى اختبار الأدوية. على وجه الخصوص ، أصبحت أساسية في أبحاث السرطان حيث يمكن لثقافات الخلايا ثنائية الأبعاد التقليدية ، المستخدمة على نطاق واسع في هذا المجال ، أن توفر معلومات مضللة لأنها لا تلتقط البنية ثلاثية الأبعاد (ثلاثية الأبعاد) والبيئة الدقيقة للورم.

في أبحاث السرطان ، تعد النماذج ثلاثية الأبعاد الفعالة في المختبر ضرورية لفهم تطور السرطان بشكل أفضل وتوقع التحديات ، مثل آليات مقاومة الأدوية. ظهرت العضيات كنماذج واعدة ثلاثية الأبعاد في المختبر ، مما يوفر تمثيلا أكثر دقة لبيولوجيا الورم. أنها تنمو في SBMes لأنها تخلق بيئة حيث الخلايا يمكن أن تنمو وتنظم ذاتيا في هياكل ثلاثية الأبعاد. ومع ذلك ، يمثل SBMe تحديات كبيرة ، بما في ذلك الخصائص الميكانيكية المنخفضة والسلوك الريولوجي المعقد ، مما يمنع استخدامه مع أنظمة الطباعة الحيوية بالبثق الهوائي المتاحة تجاريا.

لمعالجة هذه القيود ، قمنا بتطوير نظام طباعة حيوي منخفض التكلفة يتم التحكم فيه عن طريق الحجم وبروتوكول محدد لهياكل الطباعة باستخدام SBMe. يعتمد هذا النظام على آلة بثق حجمية ويتغلب على قيود الأساليب التقليدية التي تحركها الهواء المضغوط. بمجرد تجميعه وبرمجته باستخدام رمز g محدد ، يمكن للنظام الطباعة الحيوية لكل من SBMe النقي والمخفف للحصول على كل من التركيبات أحادية ومتعددة الطبقات. يوفر هذا النهج طريقة أكثر موثوقية وقابلية للتطوير لإنتاج نماذج زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد ، مما يمهد الطريق لبحث أكثر فعالية في العلاجات الجديدة واختبار الأدوية.

المقدمة

في البحث الانتقالي ، يعد إنشاء نماذج ثلاثية الأبعاد في المختبر تكرر عن كثب البيئة في الجسم الحي أمرا ضروريا لتعزيز الفهم العلمي والتطوير العلاجي1. أحد المكونات الرئيسية في بنائها هو استخدام نظائر المصفوفة خارج الخلية (ECM) ، مثل مستخلصات الغشاء القاعدي القابلة للذوبان (SBMes) ، والتي تعكس بشكل أفضل تعقيدات الأنسجة الطبيعية. تعتبر SBMes ذات قيمة خاصة في مجموعة متنوعة من مجالات البحث ، من هندسة الأنسجة إلى اختبار المخدرات2،3. على وجه الخصوص ، أصبحت أساسية في أبحاث السرطان ، لأنها تكرر السمات الميكانيكية والكيميائية الحيوية للبيئة المكروية للورم ، مما يتيح تطوير نماذج تعكس بشكل أفضل نمو الورم ، والورم الخبيث ، واستجابات العلاج.

في الواقع ، على الرغم من التقدم الكبير على مدى العقود القليلة الماضية ، لا تزال العديد من العلاجات تفشل ، مما يؤدي إلى فشل العلاج المتكرر في البيئات السريرية. غالبا ما يعزى هذا الفشل إلى آليات مقاومة الأدوية الناجمة عن مستويات عالية من عدم تجانس الخلايا4،5. تعد النماذج الفعالة في المختبر ، القادرة على تلخيص تعقيدات الأورام البشرية بدقة ، أمرا بالغ الأهمية لفهم تطور السرطان بشكل أفضل وتوقع هذه الظاهرة.

كانت مزارع الخلايا ثنائية الأبعاد التقليدية أساسية في أبحاث السرطان ولكنها يمكن أن تؤدي إلى معلومات مضللة حول فعالية الدواء وسلوك الورم ، لأنها تفشل في التقاط الهيكل ثلاثي الأبعاد والبيئة الدقيقة للأورام الفعلية6،7،8. في المقابل ، ظهرت النماذج ثلاثية الأبعاد في المختبر كبدائل واعدة ، حيث تقدم تمثيلا أكثر دقة للبيئة الدقيقة للورم والسلوك البيولوجي من خلال محاكاة التعقيد ثلاثي الأبعاد9،10.

في أبحاث السرطان ، تستخدم العضيات على نطاق واسع كنماذج ثلاثية الأبعاد لدراسة المرض وفعالية الأدوية ، لأنها توفر نماذج أكثر دقة وصلة بالأنسجة والأعضاء البشرية. كان استخدام SBMe ، المشتق من خلايا ساركوما الفأر Engelbreth-Holm-Swarm ، محوريا في النهوض بأبحاثالسرطان 11،12. إنه يوفر ركيزة تشبه الهلام يمكن للخلايا أن تنمو وتتكاثر وتنظم ذاتيا في هياكل عضوية ، مما يضمن التطور والنمو السليمين13،14.

ومع ذلك, SBMe يطرح عددا من التحديات بسبب خصائصه الفريدة والمعقدة. كسائل غير نيوتوني ، يظهر SBMe خصائص ترقق القص ، مما يعني أن لزوجته تنخفض مع زيادة إجهاد القص ، مما يجعل التعامل معه وتطبيقه غير متسقين تحت القوى المتغيرة. بالإضافة إلى ذلك ، يضيف سلوكه متغير الانسيابية إلى التعقيد ، حيث يمكنه استعادة لزوجته بمرور الوقت عند إزالة إجهاد القص15،16. هذه الخصائص ، جنبا إلى جنب مع القوة الميكانيكية المنخفضة (مع قيم معامل التخزين التي تتراوح من 10 باسكال إلى 5,000 باسكال اعتمادا على تركيز البروتين) والسلوك الحساس للحرارة ، تؤدي إلى تفاقم هذه التحديات ، مما يتطلب تحكما دقيقا أثناء التحضير والاستخدام بالإضافة إلى الطباعة الحيوية نقية.

تفشل أنظمة الطباعة الحيوية القياسية التي تعمل بالهواء المضغوط في التحكم بشكل صحيح في توزيع SBMe لأن تطبيق الضغط يسبب سلوكا لا يمكن السيطرة عليه بعد طرده من المحقنة. يتأثر بظاهرة مشابهة لتأثير "الطفرة" الموصوف للذوبان البوليمري ، حيث يزداد معدل التدفق فجأة فوق قيمة ضغط حرجةمعينة 17،18،19. كما ورد في عملنا السابق16 ، تسمح استراتيجية الاستغناء عن التحكم الحجمي بفصل بثق SBMe عن الضغط المتولد في الموزع ، والذي يعتمد على الخصائص الانسيابية للمصفوفة وظروف العمل وهندسة الفوهة. في السنوات الأخيرة ، بذلت عدة محاولات في السوق لاستغلال نفس المبدأ ، مع قيادة Matribot من Corning. يسمح بالتعامل مع SBMe والأحبار الحيوية الأخرى الحساسة لدرجة الحرارة وترسبها بفضل ظروف درجة الحرارة التي يتم التحكم فيها. ومع ذلك ، قد يكون مكلفا ، مما يحد من إمكانية الوصول إلى المختبرات الصغيرة.

في ورقتنا السابقة ، قدمنا بديلا مخصصا منخفض التكلفة - نظام طباعة حيوية مدفوعبالحجمي 16. استند هذا الإصدار إلى طابعة ثلاثية الأبعاد معدلة للمبتدئين مع آلة بثق مطبوعة ثلاثية الأبعاد مخصصة. على الرغم من فعاليتها في الطباعة الحيوية ، إلا أنها قدمت بعض القيود في تكرار الطباعة. نظرا لكونه مشتقا من طابعة ثلاثية الأبعاد للمبتدئين ، فقد واجهت بعض المشاكل مع حركات Z والتوجيه التلقائي. لتلبية هذه الاحتياجات ، قمنا بتطوير نسخة متتقدمة من نظام الاستغناء الحجمي المخصص منخفض التكلفة وبروتوكول محدد لهياكل الطباعة الحيوية باستخدام SBMe.

هنا ، نقدم بروتوكولات لبناء واستخدام هذا النظام. وهي تتألف من آلة بثق مخصصة يتم التحكم فيها بالحجم, بناء على دراستنا السابقة16, علبة طابعة حيوية, ونظام تحكم. يتم الإنتاج والتجميع لكل وحدة. عند تجميعه وبرمجته باستخدام ملف gcode محدد ، باتباع وصف البروتوكول لمعالجة المصفوفة ، يكون النظام قادرا على الطباعة الحيوية للتركيبات النقية أو المخففة باستخدام SBMe بدقة جيدة للشكل في كل من الطبقات المفردة والمتعددة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

طباعة 1. 3D وتجميع الطابعة الحيوية الحجمية

  1. إعداد مكونات الطابعة الحيوية وطباعتها ثلاثية الأبعاد.
    1. قم بتنزيل *. ملفات تصميم STL من الملف التكميلي 1.
    2. حمل*. STL في برنامج التقطيع الخاص لتحديد اتجاه القطع على لوحة الطباعة وجميع الخيارات المطلوبة للطابعة ثلاثية الأبعاد. اطبع القطع باستخدام حمض البولي لاكتيك (PLA) مع خيارات متوسطة الجودة (حجم فوهة 0.4 مم ، قطر خيوط 1.75 مم ، درجة حرارة الطارد 220 درجة مئوية ، درجة حرارة لوحة سرير الطباعة 50 درجة مئوية ، ارتفاع طبقة 0.2 مم ، سرعة طباعة 300 مم / ثانية).
      ملاحظة: قد تختلف خيارات الجودة المتوسطة وفقا للطابعة المستخدمة لطباعة القطع.
    3. افصل القطع المطبوعة عن سرير الطابعة ثلاثية الأبعاد. قم بإزالة الهياكل الداعمة المطبوعة ، إن وجدت ، وتلميع الأسطح عند الحاجة.
  2. قم بتجميع الطارد (الشكل 1).
    1. أدخل محملين كرويين خطيين (LM4UU) في الفتحات الرأسية لكتلة الدافع. أدخل أيضا صمولة لولبية T8 في الفتحة المركزية الخلفية وثبتها بأربعة براغي (M3x10).
    2. قم بتوصيل أداة توصيل عمود صلبة بمحرك السائر ثم اربطه بمبيت محرك الطارد باستخدام أربعة براغي (M3x6).
      ملاحظة: قم بتوجيه محرك السائر وفقا للأخدود الموجود في مبيت محرك الطارد للسماح بالوضع المناسب للمقبس للكابلات.
    3. اربط محرك السائر ، الذي تم تجميعه في الخطوة 1.2.2 ، ببرغي T8 (150 مم) باستخدام أداة توصيل العمود الصلب التي تم إدخالها مسبقا. تأكد من تأمين كل كتلة بشكل صحيح باستخدام مسامير الضبط.
    4. قم بتوصيل محمل شفة ذاتي المحاذاة (قطر داخلي 8 مم) في الجزء السفلي من قاعدة الطارد ببراغي (M4x8).
    5. أدخل محملين كرويين (4 × 9 × 4 مم) في الفتحات المحددة أعلى قاعدة الطارد والفتحتين الأخريان في الفتحات الموجودة في القسم السفلي.
    6. أدخل الجزء المجمع (الخطوة 1.2.1) في قاعدة الطارد من خلال التجويف الموجود في الجزء العلوي من الهيكل. قم بتوصيل المحامل الكروية الأربعة (الخطوة 1.2.5) بقضيبين مقاس 4 مم ، واحد لكل جانب. دع القضبان تمر عبر المحامل الكروية الخطية في الجزء المجمع في الخطوة 1.2.1.
      ملاحظة: من الممكن أيضا إدخال القضبان أولا على المحامل الكروية العلوية ثم وضعها في قاعدة الطارد حتى تصل إلى المحمل الكروي السفلي ويتم تأمين كل شيء في الفتحات المحددة.
    7. أدخل الجزء المجمع في الخطوة 1.2.3 في الفتحة المركزية لقاعدة الطارد. قم بتدوير المسمار لتمرير الجوز اللولبي والوصول إلى محمل شفة المحاذاة الذاتية. استخدم براغي التثبيت في المكون لقفل المسمار اللولبي واثنين من المسمارين (M3x8) لتأمين مبيت محرك الطارد في الجزء العلوي من قاعدة الطارد.
    8. استخدم براغي أخرى (M3x40) وصواميل M3 لتوصيل مثبت شفة برميل المحقنة بالجزء السفلي من قاعدة الطارد ، لقفل شفة برميل المحقنة (أدخل الاتجاه من أعلى إلى أسفل). استخدم براغي أخرى (M3x30) وصواميل M3 لتوصيل مثبت مكبس المحقنة بالفتحات العلوية لكتلة الانتهازي (أدخل الاتجاه من الأسفل إلى الأعلى) لقفل شفة المكبس.
    9. أدخل براغي (M4x80) في زنبركين واتركهما يمران عبر الفتحات الموجودة في الجزء السفلي من قاعدة الطارد وكتلة المحقنة. قم بلف الصواميل مع ترك مساحة المحقنة لتجنب انزلاق كتلة المحقنة.
      ملاحظة: يجب أن تنتقل البراغي من الخلف إلى الأمام.
  3. قم بتجميع المحور X (الشكل 2).
    1. أدخل أربعة محامل كروية خطية (LM8UU × 24 مم) في X_Left_Block وأجزاء X_Right_Block في الفتحات العلوية والسفلية ، اثنان لكل منهما. قم أيضا بتوصيل كتلتين من الحزام أعلى كتلتين X اليمنى و X اليسرى بمسامير (M2x10) مع ترك مساحة للحزام.
    2. أدخل محملين كرويين (5 × 16 × 5 مم) في الفتحات المركزية ل X_Right_Block ، واحد على كل جانب. ضع بكرة (تجويف 5 مم) في التجويف الداخلي X_Right_Block وقم بتوصيل المحامل الكروية بقضيب 5 مم (طول 35 مم) ، واتركها تمر عبر البكرة.
      ملاحظة: استخدم قضيبا أطول للتجميع للحصول على معالجة أفضل. بعد وضع القطع في مكانها ، قم بقص القضيب بالطول المطلوب.
    3. قم بتوصيل مفتاح حد ب X_motor_housing ببراغي (M3x8). أدخل محرك NEMA 17 في مبيت المحرك واستخدم أربعة براغي (M3x8) لتثبيت غطاء X_block_1 في مبيت المحرك والمحرك.
    4. قم بتوصيل بكرة (تجويف 5 مم) بالمحرك وقفلها بمسامير التثبيت ثم قم بربط الجزء المجمع معا في الخطوة 1.3.3 إلى X_block_1 بأربعة براغي (M5x8). قم أيضا بتوصيل مفتاح حد في الجزء السفلي من X_Left_Block ببراغي (M3x8).
      ملاحظة: يجب أن يكون القطر الخارجي للبكرات في الخطوتين 1.3.2 و 1.3.4 هو نفسه.
    5. ضع محملين كرويين خطيين (LM8UU × 45 مم) في الفتحات الموجودة أعلى وأسفل X_slider.
    6. قم بتوصيل الأجزاء المجمعة في الخطوتين 1.3.2 و 1.3.4 بقضيبين 8 مم (طول 200 مم) واتركها تمر عبر الجزء المجمع في الخطوة 1.3.5.
      ملاحظة: قطع قضبان الطول المطلوب قبل التجميع.
    7. قم بقفل أحد طرفي الحزام على X_slider_belt_connection باستخدام كتلة الحزام واثنين من المسمارين (M2x8). قم بتشغيل الحزام حول البكرة في الجزء المجمع 1.3.4 ، ثم حول البكرة في الجزء المجمع 1.3.2 وقم بتثبيت طرف الحزام الآخر على الوصلة X_slider_belt باستخدام كتلة الحزام الثانية واثنين من البراغي الأخرى (M2x8). تأكد من إحكام الحزام بشكل صحيح للحصول على الحركة الصحيحة.
      ملاحظة: خلال هذه الخطوة ، يجب تحريك X_slider نحو أحد طرفي هيكل المحور X لتجنب التداخل.
    8. قم بربط X_slider_belt_connection X_slider بمسمار واحد (M6x20).
    9. قم بتوصيل الطارد ب X_slider وقم بإصلاحه بأربعة براغي (M5x10).
  4. قم بتجميع المحور Y (الشكل 3).
    1. ضع كتيفة التثبيت في جزء الطابعة الحيوية الخلفية العلوية باستخدام أربعة براغي (M3x10) وأربعة صواميل.
      ملاحظة: يمكن تكييف موضع كتيفة التثبيت للحصول على الشد المناسب للحزام والسماح بإدخال محرك السائر
    2. أدخل محرك السائر في كتيفة التثبيت وقم بلفه بأربعة براغي (M3x8). بعد ذلك ، ضع بكرة (تجويف 5 مم) على العمود المرفقي وقم بإصلاحها بمسامير مثبتة.
      ملاحظة: يمكن توصيل البكرة بالعمود المرفقي قبل وضع المحرك في كتيفة التثبيت لتجنب بعض التداخل بين المكونات.
    3. حدد موقع بكرتين (القطر الداخلي 8 مم) على قضيب 8 مم الأمامي وقفلهما على القضيبين (2.5 سم بعيدا عن النهاية). كرر هذه العملية للقضيب الخلفي وأضف بكرة أخرى ، على بعد 5 سم من الطرف الأيمن.
    4. قم بتوصيل 12 محامل شفة ذاتية المحاذاة (قطر 8 مم) بالأجزاء العلوية الداخلية للطابعة الحيوية.
    5. قم بتوصيل جزأين من الطابعة الحيوية الأمامية وجزأين من الطابعة الحيوية في الخلف العلوي (الاتجاه إلى اليسار / اليمين) باستخدام القضبان المجمعة في الخطوة 1.4.3 وقفلهما بمحامل شفة ذاتية المحاذاة (قطر 8 مم). قم بتأمين الجزأين المجمعين في جميع التقاطعات بمسامير (M3x8).
      ملاحظة: عند وضع القضيب الخلفي ، ضع حزاما مغلقا يربط البكرة على محرك السائر بالبكرة الداخلية على القضيب.
      ملاحظة: قم بتأمين محرك السائر الذي يشد الصواميل لضمان عدم وجود حركة للمحرك وشد مناسب للحزام.
    6. قم بتوصيل الجزأين المجمعين في الخطوة 1.4.5 باستخدام أربعة قضبان مقاس 8 مم. دع القضبان تمر عبر المحامل الكروية الخطية الموجودة في الجزء المجمع 1.3 وقفلها على محامل شفة ذاتية المحاذاة (قطر 8 مم). قم بتأمين الجزأين المجمعين في جميع التقاطعات بمسامير (M3x8).
    7. قم بتثبيت طرف حزام مفتوح في الجزء العلوي من X_block_1 باستخدام كتلة الحزام وكرر هذه العملية X_block_2. قم بتشغيل الحزام حول البكرات الخلفية على اليسار ، ثم حول البكرة الأمامية ، وقم بتثبيت نهاية الحزام الأخرى مرة أخرى على X_block_1 باستخدام كتلة حزام أخرى. كرر هذه العملية للحزام الثاني.
      ملاحظة: يجب شد الأحزمة بشكل صحيح للحصول على الحركة الصحيحة وبنفس الطول لتجنب الانحناء أو التداخل في حركات Y.
  5. قم بتجميع المحور Z (الشكل 4).
    1. قم بربط أجزاء علبة الطابعة الحيوية السفلية معا (M4x8).
    2. قم بتوصيل محمل شفة ذاتي المحاذاة (قطر 8 مم) بأرضية الجزء السفلي من الجزء المجمع في الخطوة 1.5.2.
    3. قم بتثبيت محامل كروية خطية ذات حواف (LMH8UU) في الفتحات الخارجية الموجودة في Z_slider وصمولة لولبية واحدة في الفتحة المركزية بمسامير (M3x8).
    4. قم بتثبيت مفتاح حد على الجانب الأيسر Z_plane باستخدام براغي (M3x8).
    5. اربط محرك السائر بوصلة عمود صلب. قم بتوصيل محرك متدرج ب Z_block بأربعة براغي (M3x20) وقضيب ملولب بأداة توصيل العمود الصلبة. تأكد من تأمين كل كتلة بشكل صحيح باستخدام مسامير الضبط.
    6. قم بتوصيل الجزء المجمع في الخطوة 1.5.5 بقاعدة الطابعة الحيوية باستخدام قضيبين مقاس 8 مم. دعهم يمرون عبر الجزء المجمع في الخطوة 1.5.3.
    7. ثبت Z_block على اللوحة الخلفية باستخدام براغي (M5x8).
    8. قم بتوصيل Z_plane Z_slider باستخدام أربعة براغي (M3x25). أدخلها في الفتحات Z_plane من أعلى إلى أسفل ، وقم بتمرير الزنبرك بين Z_plane و Z_slider ، وثبتها بالمكسرات. اضبط شد الزنبرك لتسوية المستوى.
    9. قم بتوصيل أربعة أقدام قابلة للتعديل تحت هيكل الطابعة الحيوية في التجويف المحدد. قم بتسوية الطابعة الحيوية عن طريق ضبط القدمين.
    10. قم بتوصيل الجزء المجمع بالجزء المجمع في الخطوة 1.4.6 بثمانية براغي (M4x12).
    11. قم بتوصيل مفصلتين في مقدمة الهيكل في مواقع محددة ومغناطيس واحد في الجزء الأيمن في المكان النسبي بمسامير (M2x8). قم بربط الهيكل العام بألواح زجاج شبكي شفافة 2 مم لإغلاق الفتحات.
      ملاحظة: قم بربط لوحة زجاج شبكي أمامية بالمفصلات وضع برغي آخر بالتوافق مع المغناطيس للحصول على باب أمامي.
  6. اعرض التجميع (الشكل 5 أ).
    1. دع الأسلاك المتصلة بالشاشة تمر عبر الفتحة السفلية وقم بتوصيل الشاشة بمبيت الشاشة بأربعة براغي (M3x3).
      ملاحظة: يجب أن يتم هذا المقطع بدون غطاء مقبض LCD. يمكن أن يكون موجودا على المقبض المثبت مسبقا بعد التثبيت على مبيت الشاشة.
    2. أغلق الهيكل بالغطاء باستخدام أربعة براغي (M2x6).
    3. أدخل بطاقة SD في الفتحة اليسرى.
    4. دع الأسلاك تمر عبر الفتحة الموجودة أعلى الهيكل. قم بربط الجزء المجمع في الجزء العلوي من الطابعة الحيوية ببراغي (M3x8).
      ملاحظة: ستعمل جميع الأسلاك (المحركات ومفاتيح الحد والعرض) بالقرب من الحائط وتخرج من الفتحة اليسرى السفلية. يتم تثبيتها بمشابك الكابلات لتجنب التداخل مع الأجزاء الميكانيكية.
  7. تجميع الإلكترونيات (الشكل 5 ب)
    1. ثبت المقبس في الجزء الخارجي من العلبة الإلكترونية ببراغي (M3x10).
    2. قم بتوصيل اللوحة الأم بالجزء الداخلي من العلبة الإلكترونية بأربعة براغي (M3x10).
    3. قم بتوصيل الجزء السفلي من مصدر الطاقة بالجزء الداخلي من العلبة الإلكترونية بأربعة براغي (M3x8).
    4. قم بتمرير الأسلاك من خلال الفتحة الدائرية الموجودة على الغطاء وقم بتوصيلها باللوحة الأم. أغلق العلبة الإلكترونية بغطاءها باستخدام أربعة براغي (M3x10).
      ملاحظة: من الممكن توصيل علبة الإلكترونيات بهيكل الطابعة الحيوية أو تركها على المكتب في حالة وجود مساحات عمل صغيرة.
      يوضح الشكل 6 جميع توصيلات الكابلات الإلكترونية. يمكن أن تكون مختلفة قليلا وفقا للوحة الأم للطابعة ثلاثية الأبعاد المستخدمة.

2. إعداد البرنامج وعملية إنشاء gcode

  1. إعداد إعدادات برنامج التقطيع
    1. افتح برنامج التقطيع.
      ملاحظة: قد تختلف التعليمات حسب البرنامج المستخدم أو الإصدار.
    2. سجل الدخول إلى المنصة.
    3. انتقل إلى خيارات الإعدادات . حدد الطابعة ثم إضافة طابعة غير متصلة بالشبكة. حدد طابعة FFF مخصصة وفي المربع اسم الطابعة ، اكتب اسم الطابعة. انقر فوق إضافة.
      ملاحظة: إذا كان هذا هو أول تثبيت للبرنامج، فتح لوحة إضافة طابعة تلقائيا بعد تسجيل الدخول.
    4. في نافذة إعدادات الجهاز ، قم بتغيير الإعدادات الافتراضية x وy وz إلى 176 و120 و45 مم.
    5. قم بإلغاء تحديد خيار سرير مدفأ إذا لم يتم إلغاء تحديده بالفعل.
    6. أدخل في لوحتي بدء g-code و إنهاء g-code الأسطر النصية التي تم الإبلاغ عنها في الملفات المعنونة "JoVE_Starting_G-code.txt" و "JoVE_Ending_G-code.txt" في الملف التكميلي 2.
      1. قم بتعديل القيمة 150 في السطر "M92 E150" في ملف g-code لبدء التشغيل وفقا لمعدل التدفق المراد تطبيقه. قم بتقدير القيمة المناسبة باستخدام الصيغة التالية:
        figure-protocol-1
        حيث Q هو معدل التدفق المطلوب [μL / min].
        ملاحظة: تم الحصول على هذه الصيغة تجريبيا باستخدام النظام الموصوف. قد يكون الأمر مختلفا إذا كانت هناك تغييرات في المكونات الميكانيكية أو الكهربائية. قد يكون البديل المحتمل هو إصلاح القيمة وفقا للنظام المستخدم وإنشاء كود MATLAB مخصص لإنشاء ملف gcode المطلوب.
    7. قم بتغيير قيمة قطر المادة المتوافقة في لوحة الطارد 1 إلى 1,75 ثم أغلقها.
    8. انتقل إلى Marketplace ، وحدد المكون الإضافي Z Offset Setting وقم بتثبيته. في نهاية العملية ، أعد تشغيل البرنامج لوضع اللمسات الأخيرة. بمجرد إعادة فتحه، حدد الإعدادات | طابعة | إدارة الطابعات على شريط الأدوات. في نافذة التفضيلات ، انقر فوق الإعدادات وقم بتنشيط جميع الخيارات عن طريق تحديد خيار التحقق من الكل وإغلاقه.
    9. قم بتكوين الإعداد بالنقر فوق إعدادات الطباعة (الزر الثالث) في قائمة المرحلة ، والتي تحتوي على لوحة التكوين . أدخل النسبة المئوية للتعبئة في ملف تعريف الطباعة الحالي في لوحة التكوين . حدد الزر مخصص لتعديل إعدادات الطباعة الحالية وملف التعريف جيد في القائمة المنسدلة. اضبط سرعة الطباعة على 10 مم/ثانية.
  2. إعداد gcode
    1. قم بتنزيل *. ملف تصميم المحكمة الخاصة بلبنان، بعنوان "JoVE_Square"، من الملف التكميلي 2 من هذه الورقة.
    2. حمل. STL في برنامج التقطيع.
    3. حدد موقع القطعة على السطح المسطح وانتقل إلى الإحداثيات 65 ، 42.5 ، 0 (X ، Y ، Z) مم. قم بإنشاء نسختين بالنقر فوق ملف . اسم ملف STL في قائمة الكائنات وتحديد الخيار مضاعفة المحدد . انقلها إلى الإحداثيات التالية: 16 ، 42.5 ، 0 مم و -33 ، 42.5 ، 0 مم (X ، Y ، Z).
      ملاحظة: لا يمكن تحديد ترتيب الطباعة تلقائيا ما لم يتم تعديله يدويا مباشرة في ملف gcode النهائي. يتم تحديد الإحداثيات للوحة متعددة الآبار.
    4. انتقل إلى إعدادات الطباعة في قائمة المرحلة. في قسم الجدران، ضع 0 كعدد خطوط الجدار. ضع 0 كقيمة سماكة علوية / سفلية في القسم العلوي / السفلي. في لوحة Infill، أدخل القيم التالية: Infill Pattern: Grid، مسافة خط Infill: 5 مم، اتجاهات خط Infill: [0].
      ملاحظة: من الممكن تقليل سرعة السير في قسم سرعة الطباعة لتحسين دقة المحور X.
    5. قم بتعطيل التراجع في قسم السفر وطباعة التبريد في قسم التبريد .
    6. في قسم التصاق لوحة البناء، حدد لا شيء كنوع التصاق لوحة البناء، بينما في قسم الأوضاع الخاصة، حدد خيار واحد في كل مرة كتسلسل الطباعة.
    7. انقر فوق الزر Slice لإنشاء g-code.
    8. افتح ملف g-code باستخدام تطبيق Notepad وقم بإزالة الأسطر "M104 S200" و "M105" و "M109 S200" في السطر 12 بعد العبارة "؛ تم إنشاؤه باستخدام Cura_SteamEngine 4.9.0 بوصة.
    9. أضف "G1 Z25" قبل السطر التالي "؛ شبكة: JoVE_Square_rev. STL(6)" وقسم التالي إلى قسمين: (1) G0 F3600 X142.46 Y7.499 و (2) G1 Z0.3.
      ملاحظة: إحداثيات X و Y هي مجرد أمثلة.
    10. قم بتعديل قيمة Z إلى Z25 في كل سطر موجود بعد "؛ TIME_ELAPSED "التعليق على كل تعليمات الطبقة الأخيرة لكل قطعة.
      ملاحظة: لطباعة قطعة واحدة فقط، لا يلزم اتباع الخطوة 2.3.10.

3. اختبار التورم / التدهور

  1. الخطوات التحضيرية
    1. خذ حقنة زجاجية معقمة سعة 1 مل (طرف TL) وفوهة مخروطية معقمة 25 جرام. قم بتجميعها ووضع المحقنة المجمعة في الثلاجة.
    2. ضع أطراف الماصة وقارورة مصفوفة SBMe في الثلاجة طوال الليل في اليوم السابق للتجربة.
    3. اطبع ثلاث شبكات من جيش التحرير الشعبى الصينى (Φ = 20 مم) بحجم مسام دائري 1 مم × 1 مم وعمود رأسي جانبي للإمساك بها.
  2. بنيات الطباعة
    1. خذ المحقنة المجمعة وقارورة مصفوفة SBMe من الثلاجة. استنشق 500 ميكرولتر من مصفوفة SBMe وضعها في الحاضنة لمدة 15 دقيقة للسماح بالتبلور.
    2. خذ المحقنة من الحاضنة وضعها في رأس طباعة الطابعة الحيوية. تأكد من أن مكبس الحقنة على اتصال صحيح بكتلة الانتهازي.
    3. قم بتأمين مكبس تثبيت الحقنة وشفة برميل الحقنة باستخدام مثبتات مكبس الحقنة ، وبرميل الحقنة بمشبك الحقنة.
    4. قم بمعايرة النظام باستخدام إعداد المنزل التلقائي في قائمة الطابعة الحيوية لاكتشاف أصل المحاور تلقائيا.
    5. حرك الطارد باستخدام الأمر Move Axes حتى يلامس طرف الإبرة شبكة PLA لتعريف Z0 يدويا.
    6. ابدأ الطباعة عن طريق تحديد ملف g-code لطباعته في قائمة الطابعة الحيوية.
    7. ضع اللوحة متعددة الآبار في الحاضنة لمدة 2 دقيقة للسماح ل SBMe بالاستقرار بعد البثق.
    8. خذ اللوحة متعددة الآبار وضع 2 مل من وسط زراعة الخلايا في الآبار الثلاثة التي تحتوي على الشبكات المطبوعة بيولوجيا. ضع اللوحة متعددة الآبار في الحاضنة.
    9. في كل نقطة زمنية (t0 ، 1 ساعة ، 2 ساعة ، 3 ساعات ، 4 ساعات ، 1 ، 3 ، 7 ، 10 ، و 14 يوما) ، خذ كل شبكة من اللوحة وجففها بورق نظيف لإزالة الفائض من الوسط والوزن على الميزان. ضع الشبكة مرة أخرى في اللوحة ثم في الحاضنة لمواصلة التجربة. تقدير نسبة التورم ومعدل التدهور باستخدام الصيغ التالية:
      figure-protocol-2
      حيث Wt هو وزن التركيبات في كل نقطة زمنية و Wt0 وزن التركيبات المجففة.
      figure-protocol-3
      حيث Wi هو الوزن في نهاية اختبار التورم.

4. الطباعة الحيوية لتركيبات SBMe

  1. الخطوات التحضيرية
    1. خذ حقنة زجاجية معقمة سعة 1 مل (طرف TL) وفوهة مخروطية معقمة 25 جم وقم بتجميعها أسفل خزانة السلامة الحيوية. ضعها في صندوق معقم في الثلاجة.
    2. ضع أطراف الماصة وقارورة مصفوفة SBMe في الثلاجة طوال الليل (4 درجات مئوية على الجليد) في اليوم السابق للتجربة.
    3. أضف 20 ميكرولتر من التريبان الأزرق إلى أنبوب طرد مركزي سعة 1.5 مل.
    4. اضبط جهاز الطرد المركزي على 345 × جم ، 4 درجات مئوية واتركه يبرد (~ 3-4 ساعات).
    5. خذ 5 مل من الماء في أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل كتوازن لجهاز الطرد المركزي.
    6. محلول عازلة الفوسفات الدافئ (PBS) والوسائط في حمام مائي.
      ملاحظة: يتكون وسط زراعة الخلايا من وسط النسر المعدل بالكامل من Dulbecco (DMEM) المكمل بنسبة 10٪ مصل الأبقار الجنيني (FBS) والبنسلين والستربتومايسين و L-glutamine.
    7. ضع الطابعة الحيوية تحت خزانة السلامة البيولوجية. تعقيم تحت ضوء الأشعة فوق البنفسجية لمدة 20 دقيقة.
      ملاحظة: لضمان الأداء السليم للطابعة الحيوية ، قم بتنفيذ وظيفة المنزل التلقائي وتحقق من الحركات المناسبة لكل محور وعمل مفاتيح الحد.
  2. تحضير Bioink
    1. خذ القارورة في الحاضنة التي تحتوي على خلايا سرطان البروستاتا التجارية في الفئران وضعها تحت خزانة السلامة الحيوية.
    2. قم بإزالة وسط زراعة الخلية من القارورة.
      ملاحظة: تنطبق الأحجام التي تم الإبلاغ عنها في هذا البروتوكول على قوارير T25 Cell Culture.
    3. اغسل الخلايا مرة واحدة ب 2 مل من PBS ثم استنشقها.
    4. أضف 500 ميكرولتر من التربسين وضع القارورة في الحاضنة لمدة 5 دقائق للسماح بانفصال الخلية عن اللوحة.
    5. افحص الخلايا بحثا عن التربسينية وإذا لزم الأمر ، اضغط برفق على قاع القارورة.
    6. أضف 4.5 مل من الوسط إلى القارورة. اغسل اللوحة بعناية للتأكد من أن جميع الخلايا المنفصلة تطفو في وسط زراعة الخلية.
    7. استنشق الوسط وأضفه إلى أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل.
    8. خذ 20 ميكرولتر واخلطها مع التربان الأزرق. ثم ضع 10 ميكرولتر من هذا الخليط في غرفة عد الخلايا لحساب الخلايا الحية باستخدام الصيغة التالية:
      figure-protocol-4
      حيث f هو عامل التخفيف لتعليق التريبان الأزرق (نسبة 1: 1) ؛ V هو حجم تعليق الخلية [مل].
    9. جهاز طرد مركزي التعليق الخلية المتبقية لمدة 5 دقائق (345 × جم ، 4 درجة مئوية).
    10. قم بإزالة المادة الطافية وإعادة تعليقها في مصفوفة SBMe الباردة بكثافة الخلية المطلوبة (106 خلايا / مل)
    11. استنشق 800 ميكرولتر من معلق المصفوفة الذي يحتوي على خلايا بحقنة باردة.
    12. قم بإزالة فقاعات الهواء التي قد تكون محاصرة في المحقنة وضعها في صندوق معقم. ثم ضعه في الحاضنة لمدة 15 دقيقة للسماح بالتبلور.
  3. عملية الطباعة الحيوية
    1. خذ المحقنة من الحاضنة وضعها في رأس الطباعة الحيوية. تأكد من أن مكبس الحقنة على اتصال صحيح بكتلة الانتهازي.
      ملاحظة: يجب أن يكون النموذج ووحدة التخزين نفس المحقنة المستخدمة في التجربة.
    2. قم بتأمين مكبس تثبيت الحقنة وشفة برميل الحقنة باستخدام مثبتات مكبس الحقنة ، وبرميل الحقنة بمشبك الحقنة.
    3. استخدم صواميل M4 في الجزء السفلي من الطارد لضبط ضغط الزنبرك وقفل المحقنة في مكانها.
      ملاحظة: الخطوات من 4.3.1 إلى 4.3.4 موضحة في الشكل 7.
    4. قم بمعايرة النظام باستخدام إعداد المنزل التلقائي في قائمة الطابعة الحيوية لاكتشاف أصل المحاور تلقائيا.
      ملاحظة: يضمن هذا المقطع دائما الإعدادات الأولية المناسبة بشكل مستقل عن نوع الدعم الذي نستخدمه للطباعة.
    5. ضع لوحة متعددة الآبار 6 على مستوى الطباعة.
    6. حرك الطارد باستخدام الأمر Move Axes حتى يلامس طرف الإبرة قاع البئر لتحديد Z0 يدويا.
    7. حدد ملف gcode في خيار القائمة في قائمة الطابعة الحيوية وابدأ الطباعة. ستتم طباعة شبكة مربعة من ست طبقات (جانب 2.6 سم) في كل بئر.
    8. بعد عملية الطباعة الحيوية ، استخدم مجهرا مقلوبا للتأكد من نجاح عملية الطباعة ووضع اللوحة متعددة الآبار في الحاضنة لمدة دقيقتين للسماح ل SBMe بالاستقرار بعد البثق.
    9. ضع 2 مل من وسط زراعة الخلايا في كل بئر.
      ملاحظة: يجب أن يغطي الحجم التركيبات بالكامل.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

في هذه المقالة ، نقدم بروتوكولا لتركيبات الطباعة الحيوية المصنوعة من SBMe باستخدام طابعة حيوية حجمية منخفضة التكلفة وحسب الطلب. نحن نقدم وصفا مفصلا وطباعة ثلاثية الأبعاد *. ملفات STL لبناء النظام ونثبت استخدامه المحتمل في أبحاث السرطان من خلال طباعة هياكل أحادية ومتعددة الطبقات. تم تنظيف كل مكون مطبوع ثلاثي الأبعاد بشكل صحيح من هيكل الدعم أو بقايا الطباعة غير المرغوب فيها قبل التجميع. يوضح الشكل 8 وجهات نظر مختلفة للتجميع الشامل. هناك خياران مختلفان: (أ) مع قطع منفصلة للحصول...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

في البحوث الانتقالية, SBMes ذات قيمة خاصة في مجموعة متنوعة من مجالات البحث, من هندسة الأنسجة إلى اختبار المخدرات 2,3. على وجه الخصوص ، أصبحت أساسية في أبحاث السرطان ، لأنها تكرر السمات الميكانيكية والكيميائية الحيوية للبيئة المكروية للورم ، مما يتيح تطوير نماذج تعكس بشكل أفضل نمو الورم ، والورم الخبيث ، واستجابات العلاج. SBMe هي المصفوفة البيولوجية الأكثر استخداما ، خاصة بالنسبة للعضيات ثلاثية الأبعاد13

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإعلان عنه.

شكر وتقدير

تم تمويل هذا العمل جزئيا من خلال جائزة المسرع رقم A26815 بعنوان: "تطور سرطان الخلية المفردة في العيادة" بتمويل من شراكة بين Cancer Research UK و Fondazione AIRC (رقم 22790) والاتحاد الأوروبي - الجيل القادم من الاتحاد الأوروبي ، المهمة 4 ، المكون 1 ، CUP D53D23003310006.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
12-لوحة متعددة الآبارSigma-AldrichCLS351143
طابعة 3D FDMطابعة FlashforgeAdventurer 5M Pro
طابعة ثلاثية الأبعاد اللوحة الأمGEETECHGT2560 REV A +
6-multiwell لوحةSigma-AldrichM8687
مقبس التيار المترددHiLetgohttps://www.amazon.it/HiLetgo-Terminal-Socket
-حامل التبديل / موانئ دبي / B0814PT3YG / المرجع = sr_1_1?__
mk_it_IT = ٪ C3٪ 85M ٪ C3٪ 85٪ C5٪ BD٪ C3٪
95٪ C3٪ 91 & crid = 2TRIBP34VJ61A
& dib=eyJ2IjoiMSJ9.zW6_VmeiudR
I4yMpjJqJm7OdeoctTKW2mrEzml
BAyJVa1hkM4PiJT3pLY0mXdxm1
AZQxa2_f5J4q4d5v3vUeqLkjJ6BM
kWHAoeEfbEQJNuZaQ3NjmUlqWy
_1AfQpnRp4VqJ2m3bkWsChztCa
Ok-ZdQJlobGxJaMKg7WbV352
Hyo.0tEw2GYoPQJ4SdNYXO1XM
Jrl2yXMvRey55Hj7GhISkk& علامة dib_
= se & الكلمات الدالة = AC + مقبس + HiLetgo & nsdOpt
OutParam=true& QID = 1734702097 & sprefix = AC +
مقبس + hiletgo٪ 2Caps٪ 2C173 & sr = 8-1		15 A 250
V قدم قابل للتعديلEXIN DEHCENhttps://www.amazon.it/gp/product/
B0CPLTSNQB / ref = ppx_yo_dt_b_
search_asin_title ?ie = UTF8 & psc = 1		ارتفاع 27-40 مم
محمل كروي 4 ممQUARKZMAN684ZZالأبعاد 4 × 9 × 4 مم
محمل كروي 5 ممXiKe625-2RSالأبعاد 5 × 16 × 5 مم
حزام مغلقTurmberg3Dhttps://www.amazon.it/gp/product/
B09B2FJQBV / ref = ppx_yo_dt_b_
search_asin_title?ie = UTF8 & psc = 1		عرض 6 مم
حزام مفتوحFajoedahttps://www.amazon.it/gp/product/
B09QCTVPTH / ref = ppx_yo_dt_b_
search_asin_title?ie = UTF8 & ث = 1		عرض 6 مم
فوهة الطباعة الحيويةفيشر 17780789 العلمCorning   ؛ فوهات الطباعة الحيوية المخروطية القياسية
B & uuml. غرفة عد الخلايا RKERGLASWARENFABRIK KARL HECHT
جهاز طرد مركزيEppendorf5702 R
أنبوب الطرد المركزيSigma-AldrichCLS43147015 مل
أنبوب الطرد المركزيSigma-AldrichEP00301200861.5 مل
عرضSigma-AldrichBR718905
DMEM & nbsp ؛Gibco Thermofisher11965092
FBSSigma-AldrichF7524
محمل كروي خطي ذو حوافخريطة المصادرhttps://www.amazon.it/gp/product/
B07S6LZHM7 / ref = ppx_yo_dt_b_
search_asin_title?ie= UTF8 & psc = 1		LMF8UU
حقنة زجاجيةفيشر ساينتفيك11520062هاميلتون غاز محكم 1 مل (محطة TLL)
مفصلاتYASQZhttps://www.amazon.it/gp/product/
B09DNXGDGG / ref = ppx_yo_dt_b_
search_asin_title?ie = UTF8 & psc = 1
حاضنةفيشر 15481374 العلميEppendorf   ؛ جالاكسي 48 R CO2  حاضنة ، 48 لتر ، الفولاذ المقاوم
مقلوب المجهرنيكونEclipse Ti2-U
أسلاك العبورIverntechhttps://www.amazon.it/Iverntech-XH2
-54-Terminale-Stampante-Stepper / dp /
B07Q12B6K5 / ref = pd_ci_mcx_mh_
mcx_views_0_image?pd_rd_w = cb2r
J& معرف المحتوى = amzn1.sym.57a351cf-
ba07-47e8-b302-aa2aa1a3f209٪3
Aamzn1.symc.ca948091-a64d-450e-
86d7-c161ca33337b & pf_rd_p = 57a3
51CF-BA07-47E8-B302-AA2AA1A3F209
& pf_rd_r=YHY9RFYZJK7PYAY2RXX
D& pd_rd_wg = 7 واط XB & pd_rd_r = 8239
66CB-4977-48CE-B095-0DCEDF8C372F &
pd_rd_i=B07Q12B6K5& ث = 1
وحدة LCDParadisetronic.comhttps://www.amazon.it/Display-controller
-conduttori-adattatore-stampante / dp / B01
DUR4064 / ref = sr_1_9?__mk_it_IT = ٪ C3
٪ 85M ٪ C3٪ 85٪ C5٪ BD٪ C3٪ 95٪ C3
٪ 91 & crid = 1OAHVIIRA16X3 & dib = eyJ2Ij
oiMSJ9. 07V2Jf7RzJjTUlIuFobUJFjUzG4
8633KkdcMXSEfnWLRX41d5vAF7xPBJ
maniVxDoXecfihZzzOXlP3v-e29cUjoGLf
GDyv5DoDVwp7ndohNTYvYzoi3gWkF-
Hsd 2YbT7tjb1Dra1afqSn26CbFdEvJ84y
qyX7Gi3-7DHh8yMwdd6_7quiuW_mjsm
w1nu0YQG68GZ0XM7unOsvyddQ__R_
3dndxb3mOjgGjklEgu_KEbZJPOZDIdSo
oU3nrrKHj56hCfk9ACwYpB80QGCbTPK
0p-fE0g9h02WPmtHV38UU3m5AdZsTQ
HqvnVlJg703qGT-8ze8fQItw2rtbgl_J86H
RMReJOhVLQBkqNwxh57CQ.yNbeFmZ
ZBEUhadz2dQa8NxpZD9g4P6ighRU_97
yxgnw& dib_tag=se& الكلمات الرئيسية = العرض٪
2B3D ٪ 2Bprinter ٪ 2Bprusa ٪ 2Bi3 & nsdO
ptOutParam=true& QID = 1734714093 & s =
الصناعية & sprefix = display٪ 2B3d ٪ 2B
طابعة ٪ 2Bprusa ٪ 2Bi3٪ 2C الصناعية ٪
2C143 & ريال سعودي = 1-9 & ث = 1		وحدة LCD قديمة Prusa i3. رابط إلى البديل
المتاح تجاريا Leadscrew M8RS PRO280-408
Leadscrew nut M8Comiokehttps://www.amazon.it/dp/B0C7QB13C4?
ref = ppx_yo2ov_dt_b_fed_asin_title& ث = 1		صامولة لمسامير M8
صامولة Leadscrew T8Aipaidehttps://www.amazon.it/gp/product/B086QJCX1M/ref
= ppx_yo_dt_b_search_asin_title?ie = UTF8 & psc = 1		صامولة لمسامير T8
Leadscrew T8VBESTLIFEhttps://www.amazon.it/gp/product/B07CXRB52Y/ref
= ppx_yo_dt_b_search_asin_title?ie = UTF8& ث = 1		طول 15 مم
L-GlutammineSigma-AldrichG7513
مفتاح الحدCESFONJERhttps://www.amazon.it/gp/product/B07SPX492J/ref
= ppx_yo_dt_b_search_asin_title?ie=UTF8& psc = 1
محمل كروي خطي (LM4UU)ABSOPROhttps://www.amazon.it/gp/product/B0CB3M5GHJ/ref
= ppx_yo_dt_b_search_asin_title?ie = UTF8 & psc = 1		الأبعاد 4 × 8 × 12 مم
محمل كروي خطي (LM8LUU)Fdithttps://www.amazon.it/LM8LUU-Linear
-Motion-cuscinetti-stampante / dp / B07N
58W3GZ / ref = sr_1_1_sspa?__mk_it_IT
=٪ C3٪ 85M ٪ C3٪ 85٪ C5٪ BD٪ C3٪
95٪ C3٪ 91& crid = 33VNCCCSIFJRP&
dib=eyJ2IjoiMSJ9._JJ2doXI33C2JagX
8x6E2Bz2ILo10852tBi1erWqGn363ku
zbcvknbMtsK6wm5jdR1P5XwC6Ovui
at3kGIJPpYFOG_FiIBYT8xLkkbiphhR
4ncR6R9tPPyeN--_3RxFgKMh5tMO_
jesAcu7Anp87Qb91ruM85CKqduV-y6
HQJtAvVSXmfG4yE4N7d4_dDVKsR7
UkEmDIznJE0HIhvvI2R6vX2tMN5yMc
_ZrUbUB0gPF6SgXHVJmKRizCRqL7J
64WRD-XnMSpVHY_LUVJ7gn9kJQ35
_zQw8vLD-_kRyvxwvE.4IVMdKzF1Ax
mQHQhWEi6LH12UI4CmMgi288_g3zG
CPY& dib_tag=se& الكلمات الدالة=LM8LUU+
Fdit& nsdOptOutParam = صحيح & QID = 17347
04494& s = الصناعية & sprefix = lm8luu + fdit +
٪ 2C industrial٪ 2C136 & SR = 1-1-spons & sp
_csd=d2lkZ2V0TmFtZT1zcF9hdGY& psc = 1		الأبعاد 8 × 15 × 45 مم
محمل كروي خطي (LM8UU)ARCELIhttps://www.amazon.it/gp/product/
B07BV3YBP2 / ref = ppx_yo_dt_b_
search_asin_title?ie= UTF8 & psc = 1		الأبعاد 8 × 15 × 24 مم
مغناطيسOCEUMAOAhttps://www.amazon.it/gp/product/
B0CB6C2RF4 / ref = ppx_yo_dt_b_
search_asin_title?ie= UTF8 & ال = 1		8 × 3 مم
MatrigelGibco ThermofisherLOT 0202003SBMe
سائق المحرك Longrunerhttps://www.amazon.it/gp/product/
B071P41ZBW / ref = ppx_yo_dt_b_search
_asin_title?ie = UTF8 & psc = 1		سائق A4988
PBSMicroGem ، VWRTL1006-500ML
Penicillin-StreptomycinGibco Thermofisher15070063
نصائح ماصةSigma-AldrichZ740058العلامة التجارية   ؛ نصائح المرشح ، أرفف ، TipBox (الحجم 50-1000 مو ؛ L)
صفائح زجاجشبكي MVQPERhttps://www.amazon.it/MVQPER-trasparenti-
زجاج شبكي - تراسبرنت - ديكورازيون / dp / B0CF
Q4BHQZ / ref = sr_1_14?dib = eyJ2IjoiMSJ9.bf7
Mp7I5m2qAR1Fp1V6DoYF2erUlNQUK_NuF
ZLz9A7uJKGa_RNeni6NiO4YQfAjVHBtZgdzI
356XVc3BIuKVpV8Pfg0rImqNXgxG-kfklAYrb
rXv4tV6RL1ShFwgLzfQh8R0sEoFJPcLF2f2E
EcGMlvEwOuCv6qRnS1MQ-VaA0sLPnM0ts
wdL4sLVxsonWcfSrHAUrgWh4fpVNMA4Kwh
0UaeQhfexFY0dNWhPYftXvvz9LLj1uMID2E
Gi_ScmYqY5LahbYOmKVVPPiPIgCVdLjaM8
yqNp2ZJGV9Fge2xa6OAHxmMeaQUqGkoQ
88x9GkX7 EWuOwYO0dEUYSzHCdGONWo
eZLfSJOR3C6-knjzKrOQ0ziouJfo-ktbak7v3A
H53BtIOiXbT57cKqh-uc9wI_j_lHN-8okAe2yO
6upc61MoydZujuxnfLG7hwytqHQG2.. ApKq8
MVs8Xihn_zcA39nML-2lpjnagGhXIx0clcJN_
E & dib_tag=se& الكلمات الدالة=lastra + زجاج شبكي +
2 + مم & nsdOptOutParam = صحيح & QID = 1734702823 & sr = 8-14		2 مم سماكة ، لوح شفاف ، 21 × 32.5 سم
صفائح زجاج شبكيMVQPERhttps://www.amazon.it/MVQPER-trasparenti
-plexiglass-trasparente-decorazione / dp / B0C
FQ4BHQZ / ref = sr_1_14?dib = eyJ2IjoiMSJ9.b
f7Mp7I5m2qAR1Fp1V6DoYF2erUlNQUK_N
uFZLz9A7uJKGa_RNeni6NiO4YQfAjVHBtZ
gdzI356XVc3BIuKVpV8Pfg0rImqNXgxG-kfk
lAYrbrXv4tV6RL1ShFwgLzfQh8R0sEoFJPc
LF2f2EEcGMlvEwOuCv6qRnS1MQ-VaA0s
LPnM0tswdL4sLVxsonWcfSrHAUrgWh4fpV
NMA4Kwh0UaeQhfexFY0dNWhPYftXvvz9
LLj1uMID2EGi_ScmYqY5LahbYOmKVVPP
iPIgCVdLjaM8yqNp2ZJGV9Fge2xa6OAHx< br/> mMeaQUqGkoQ88x9GkX7EWuOwYO0dE
UYSzHCdGONWoeZLfSJOR3C6-knjzKrO
Q0ziouJfo-ktbak7v3AH53BtIOiXbT57cKqh-
uc9wI_j_lHN-8okAe2yO6upc61MoydZujux
nfLG7hwytqHQG2.ApKq8MVs8Xihn_zcA3
9nML-2lpjnagGhXIx0clcJN_E& dib_tag=se
& الكلمات الدالة = lastra + زجاج شبكي + 2 + مم & nsd
OptOutParam=true& QID = 1734702823 & sr = 8-15		2 لوح شفاف ، سمك 2 مم ، 20 × 20 سم
صفائح زجاج شبكيMVQPERhttps://www.amazon.it/MVQPER-trasparenti
-plexiglass-trasparente-decorazione / dp / B0C
FQ4BHQZ / ref = sr_1_14?dib = eyJ2IjoiMSJ9.
bf7Mp7I5m2qAR1Fp1V6DoYF2erUlNQUK_
NuFZLz9A7uJKGa_RNeni6NiO4YQfAjVHB
tZgdzI356XVc3BIuKVpV8Pfg0rImqNXgxG-
kfklAYrbrXv4tV6RL1ShFwgLzfQh8R0sEoFJ
PcLF2f2EEcGMlvEwOuCv6qRnS1MQ-VaA
0sLPnM0tswdL4sLVxsonWcfSrHAUrgWh
4fpVNMA4Kwh0UaeQhfexFY0dNWhPYft
Xvvz9LLj1uMID2EGi_ScmYqY5LahbYO
mKVVPPiPIgCVdLjaM8yqNp2ZJGV9Fge
2xa6OO ahxmMeaQUqGkoQ88x9GkX7E
WuOwYO0dEUYSzHCdGONWoeZLfSJO
R3C6-knjzKrOQ0ziouJfo-ktbak7v3AH53B
tIOiXbT57cKqh-uc9wI_j_lHN-8okAe2yO6
upc61MoydZujuxnfLG7hwytqHQG2.ApKq
8MVs8Xihn_ zcA39nML-2lpjnagGhXIx0clcJ
N_E& dib_tag=se& الكلمات الدالة=lastra + plexigl
ass + 2 + مم & nsdOptOutParam = صحيح & QID = 1
734702823& sr = 8-16		2 ورقة شفافة ، سمك 2 مم ، 20 × 30 سم
خيوط حمض البولي لاكتيك (PLA)FlashforgeBlack 100102
مزود الطاقةSQUADOhttps://www.amazon.it/SQUADO-Alimentatore
-stabilizzato-dissipatore-efficienza
/ dp / B0DMTG6SJD / ref = sr_1_6?dib
= eyJ2IjoiMSJ9.1vVze6Zt6fhKCvFb
eAOSiRe57N6a1mlBnkLdHiEym4
ugHzueF6_FdOodb3sftCXb5raTg< br / > eerMMUbL5KcaI_SDa_2j7s2XohI
B01QMJDyq0xQ5Gp3KLIZozDHV
fGBdSrvwgyOl-BXSDy_ocZlj2TL5
e21p3K6qpvSaT5yo8WA5tngS93
Eqe8s8D6mjpnnPFrb9RpQpj299Y
nNRYgr_YF3NCt3mH0r0FocKcCa
LNpKtfGLCbnz_yB-360tp5SAi7A7
cgBf5I4NzQ5iQTTXAG727x0Hml
mG-eaFBSJv6M1LPooZiT2aT7dx
o_7tzyU6MQ9vAEozXkLTaTTMX
RA_svPp96sxp93NRLReI64xpFd
S3Zh1y_JPQijbMAIuvuYflhh6JlPB
W6-fpW6QXl9v5wNEs_YwjzP9Sf
RKxRmchzZhgsK-34XJeaEmjbRq
H3piM0Zx.MfPYUNvCEhDBqLDh
C-iqBEu-vjIVgsrQmOjeLuGo9YQ&
dib_tag=se& الكلمات الدالة = الطاقة + SUP
طبقة + تيار متردد + مدخل٪ 3A + 110-220 فولت٪ 2
C + DC + الإخراج٪ 3A + 12V + 15A & n
sdOptOutParam=true& QID = 173471
4722 & sr = 8-6		مصدر طاقة Old Prusa i3 (مدخل التيار المتردد: 110-220 فولت ، خرج التيار المستمر: 12 فولت 15 أمبير). رابط إلى البكرة البديلة المتاحة تجاريا
5 ممVooGenzekhttps://www.amazon.it/gp/product/
B0B8H16KWX / ref = ppx_yo_dt_b_
search_asin_title?ie= UTF8 & psc = 1		تجويف 5 مم ، مساحة حزام العرض 6 مم
بكرة 8 ممYxtaiihttps://www.amazon.it/gp/product/
B07X852RFN / ref = ppx_yo_dt_b_
search_asin_title ?ie = UTF8 & ث = 1		تجويف 8 مم ، مساحة حزام العرض 6 مم
كابلات الشريطQUARKZMANhttps://www.amazon.it/sspa/click?ie
= UTF8 & spc=MTo0NDgyNTkwNzU
wNjM5NzM5OjE3MzQ3MTQ1OTE6
c3BfbXRmOjMwMDEyMjk4NTMzN
TYzMjo6MDo6& url=٪2FQUARKZM
AN-connettore-Lunghezza-Comput
er-confezione٪2Fdp٪2FB0CQRM
DQNG٪2Fref٪3Dsr_1_15_sspa٪
3F__mk_it_IT٪3D٪25C3٪2585M
٪25C3٪2585٪25C5٪25BD٪25
C3٪2595٪25C3٪2591٪26crid٪3
D3BZ8Q05YA50TX٪26dib٪3Dey
J2IjoiMSJ9.zoYnL2ViiarlDS_7165D
ldxu-TTbVbWUVAP3pCybFB-bjGl
wSgrpnkMhhsJj3NRo8Mvht8ev5H
vGQ-UUpPom12OcOcwyRVXLAR
UvMyTm8mpAdZSaOritwHRgwu2
JuW9UoS4jlCbA-gzP2FEAAH47K
fFOWN6FEhc5r0YGBcSIsA6_QV6
_LA1k_ifj3c2BFm2Fj8YjW-auz7Yiy
ULfZusvGX28S1K5kJdTa_YOwJY
YC0Y__s-CCchHKiZgDhFjtFogUz0
Tonob4HQZiO_hkrnm3ixpNj9rgE-
hvVq1FK1uD9M.. kkP89x1SJ0SLxZ
sv3YomYEfmkhpvP4WQf2TtC76K
YAE٪26dib_tag٪3Dse٪26keywords
٪3DCavo٪2Bflessibile٪2Ba٪2Bna
stro٪2Bpiatto٪2Bper٪ 2Bstampant
e٪2B3D٪2Ba٪2B10٪2Bpin٪26n
sdOptOutParam٪3Dtrue٪26qid٪
3D1734714591٪26s٪3Dindustrial
٪26sprefix٪3Dcavo٪2Bflessibile
٪2Ba٪2Bnastro٪2Bpiatto٪2Bper< br / > ٪2Bstampante٪2B3d٪2Ba٪2B10
٪2Bpin٪252Cindustrial٪252Cindustrial٪252C170
٪26sr٪3D1-15-spons٪26sp_csd٪
3Dd2lkZ2V0TmFtZT1zcF9tdGY٪26psc٪3D1		كابل الشريط 2651 28AWG 10 دبابيس
اقترانعمود صلبGwolfhttps://www.amazon.it/gp/product/
B088R8CW5Z / ref = ppx_yo_dt_b_
search_asin_title ?ie = UTF8 & psc = 1		اقتران من 5 إلى 8 مم   ؛
قضبان 4 مممكونات RS682-810قطر 4 مم
قضبان 5 ممSourcingmapa14010200ux0214قطر 5 مم
قضبان 8 مممكونات RS682-078قطر 8 مم
مساميرBnnrjia281-984M2x6 - مسامير ذات رأس مسطح
INCREWAYhttps://www.amazon.it/INCREWAY-
assortite-portatili-accessori-
riparazione/dp/B07KN37M5J/
ref=sr_1_20?__mk_it_IT=٪C
3٪85M٪C3٪85٪C5٪BD٪
C3٪95٪C3٪91& crid = 12BH
MAWD8SK4Z & dib = eyJ2IjoiM
SJ9. SjXKoxV0NYqENPoUeS4
2-rj1Af398uiCLXDxFs0C9HfS
8vwEPmsfAMPwIMfllkAfWNY
TIEU4KXhJRgRHInNI3U_aow
0EPyfufQKlA4wHz1eOJBvYO
ND-5obbXfRPn7VXQ8kzBXM
VfUHLAIFlJhTO8AXclkwgjB-z
pRvQ6oE5Fr_1sO7lFnzURtD1
YBf65O58M3hrDXf5r_8MIz1c
Asct-2P8AyWWBZAB1buYoyP
gnnOiBL5EBS7twJWqcDU86m
h1ywyufiUitm6kIwNuMx32D0h
0jkHna481aaYP_Q7kHgDxxrR
_ fFXj5gV2XqEesqGkxPCmHfF
WVMqvB_YBdEAuTeL08EP_p
TY50uT4UeWgdJuT58kB7Gv-
Y5fPMPRS_JEQdO-oJ9DlO9n
0OszkmYwrPh-AivwVN6xh4hN
2pseXannS_on9aiNv1lh3x-f2PZ
0R.jCyNdxQiJSAsGVm7ZPhDK
eFxQGBAu-M_42ZLTSSBiDg& d
ib_tag=se& الكلمات الدالة = viti + M3x3&
nsdOptOutParam=true& QID = 1734
711519& sprefix = viti + m3x3٪ 2Cap
s٪ 2C169 & sr = 8-20		M2x8 -
مساميرمسطح INCREWAYhttps://www.amazon.it/INCREWAY
-assortite-portatili-accessori-ripara
zione / dp / B07KN37M5J / ref = sr_1_2
0?__mk_it_IT = ٪ C3٪ 85
٪ C5٪ BD٪ C3٪ 95٪ C3٪ 91& crid =
12BHMAWD8SK4Z & dib = eyJ2IjoiM
SJ9. SjXKoxV0NYqENPoUeS42-rj1
Af398uiCLXDxFs0C9HfS8vwEPms
fAMPwIMfllkAfWNYTIEU4KXhJRg
RHInNI3U_aow0EPyfufQKlA4wHz
1eOJBvYOND-5obbXfRPn7VXQ8
kzBXMVfUHLAIFlJhTO8AXclkwgjB
-zpRvQ6oE5Fr_1sO7lFnzURtD1YB
f65O58M3hrDXf5r_8MIz1cAsct-2P8
AyWWBZAB1buYoyPgnnOiBL5EBS
7twJWqcDU86mh1ywyufiUitm6kIwN
uMx32D0h0jkHna481aaYP_Q7kHg
DxxrR_fFXj5gV2XqEesqGkxPCmHf
FWVMqvB_YBdEAuTeL08EP_pTY50
uT4UeWgdJuT58kB7Gv-Y5fPMPRS
_JEQdO-oJ9DlO9n0OszkmYwrPh-
AivwVN6xh4hN2pseXannS_on9aiN
v1lh3x-f2PZ0R.jCyNdxQiJSAsGVm
7ZPhDKeFxQGBAu-M_42ZLTSSB
iDg& dib_tag=se& الكلمات الدالة=viti+M3
x3& nsdOptOutParam = صحيح & QID = 17
34711519& sprefix = viti + m3x3٪ 2Ca
ps٪ 2C169 & sr = 8-20		M2x10 -
مساميرمسطح INCREWAYhttps://www.amazon.it/INCREWAY-
assortite-portatili-accessori-riparazi
one / dp / B07KN37M5J / ref = sr_1_20?
__mk_it_IT = ٪ C3٪ 85M ٪ C3٪ 85٪
C5٪ BD٪ C3٪ 95٪ C3٪ 91 & CRID = 12
BHMAWD8SK4Z& dib = eyJ2IjoiMSJ
9. SjXKoxV0NYqENPoUeS42-rj1Af3
98uiCLXDxFs0C9HfS8vwEPmsfAM
PwIMfllkAfWNYTIEU4KXhJRgRHIn
NI3U_aow0EPyfufQKlA4wHz1eOJB
vYOND-5obbXfRPn7VXQ8kzBXMV <7br / > fUHLAIFlJhTO8AXclkwgjB-zpRvQ6
oE5Fr_1sO7lFnzURtD1YBf65O58
M3hrDXf5r_8MIz1cAsct-2P8AyWW
BZAB1buYoyPgnnOiBL5EBS7twJ
WqcDU86mh1ywyufiUitm6kIwNuM
x32D0h0jkHna481aaYP_Q7kHgDx
xrR_fFXj5gV2XqEesqGkxPCmHfF
WVMqvB_YBdEAuTeL08EP_pTY5
0uT4UeWgdJuT58kB7Gv-Y5fPMPRS
_JEQdO-oJ9DlO9n0OszkmYwrPh-Ai
vwVN6xh4hN2pseXannS_on9aiNv1l
h3x-f2PZ0R.jCyNdxQiJSAsGVm7Z
PhDKeFxQGBAu-M_42ZLTSSBiDg
& dib_tag=se& الكلمات الدالة = viti + M3x3& n
sdOptOutParam=true& QID = 1734711
519 & sprefix = viti + m3x3٪ 2Caps٪ 2
C169 & sr = 8-20		M3x3 - مسامير ذات رأس مسطح
مكونات RS281-978M3x6 - مسامير ذات رأس مسطح
مكوناتRS 281-978M3x10 - مسامير ذات رأس مسطح
مكونات RS281-978M3x20 - مسامير ذات رأس مسطح
Faankitonhttps://www.amazon.it/Faankiton-600-
M3-Incassato-Cilindrica/dp/B0CFY6V
3HV/ref=sr_1_3_sspa?crid=29NMQZ
B1QM7EW& dib = eyJ2IjoiMSJ9. aiGS-
zo819G6hZmghT7TFDH1TL5lzRsjT
R5PBvqoHbKOBLipyX-kuevmqqPpW
m_7Ngng-Wa6aLoDuXMtoqexgeNpr
Qn2cISsCatqzhc8fxhJ0yIN4s3YEpD
KzIroWWVNzswptkWthnGkLXwHck
m4wqLr1sf0qyK9oYYlZdKo_Ypa9RQ
s3aYPNd_f-DWpT5rdsG1GL3rd3b9c
fLSqXxMd8QnnK3hDcg10Uz9otPwo
zJC2QAQFce__CkNwDfBp5Vvgmy1
DLX4a7PolnNePrJiObgjHMJLlfwizGx
fie28RAYQ.03Epc_ RrVWlBUqUbHU
TPDcoDUxaKBHep1CuTOhFj-fI& dib
_tag=se& الكلمات الدالة = m3x25٪ 2Bviti & n
sdOptOutParam=true& QID = 17347118
59 & s = الصناعية & sprefix = M3x25٪ 2Ci
ndustrial ٪ 2C185 & SR = 1-3-spons & sp_
csd = d2lkZ2V0TmFtZT1zcF9hdGY& ث = 1		M3x25 - مسامير مسطحة
الرأس Faankitonhttps://www.amazon.it/Faankiton-600
-M3-Incassato-Cilindrica / dp / B0CFY6
V3HV / ref = sr_1_3_sspa?crid = 29NMQ
ZB1QM7EW& dib = eyJ2IjoiMSJ9. aiG
S-zo819G6hZmghT7TFDH1TL5lzRsj
TR5PBvqoHbKOBLipyX-kuevmqqPp
Wm_7Ngng-Wa6aLoDuXMtoqexgeN
prQn2cISsCatqzhc8fxhJ0yIN4s3YEp
DK5 zIroWWVNzswptkWthnGkLXwHc
km4wqLr1sf0qyK9oYYlZdKo_Ypa9R
Qs3aYPNd_f-DWpT5rdsG1GL3rd3b9
cfLSqXxMd8QnnK3hDcg10Uz9otPwo
zJC2QAQFce__CkNwDfBp5Vvgmy1D
LX4a7PolnNePrJiObgjHMJLlfwizGxfie
28RAYQ.03Epc_ RrVWlBUqUbHUTPD
coDUxaKBHep1CuTOhFj-fI& dib_tag=s
e & الكلمات الدالة = m3x25٪ 2Bviti & nsdOptO
utParam=true& QID = 1734711859 & s = ind
ustrial & العبيضة = M3x25٪ 2Cindustrial٪ 2
C185 & SR = 1-3-spons & sp_csd=d2lkZ2V
0TmFtZT1zcF9hdGY& th = 1		M3x30 - مسامير الرأس المسطحة
AERZETIXhttps://www.amazon.it/AERZETIX-
carbonio-fissaggio-cacciavite-mont
aggio / dp / B0BDYZZ8LQ / ref = sr_1_4
?__mk_it_IT = ٪ C3٪ 85M ٪ C3٪ 85
٪ C5٪ BD٪ C3٪ 95٪ C3٪ 91 & CRID =
217010XNB7ZXP & dib = eyJ2IjoiMSJ
9. e5QjA-q9hEvlleIzwY3ssA3x7vIBF
Hpcg73tKkBJu9QbDwMwlC5L9-9u
7my7ZG5hZij0WyaijakqAoX4rIZ3rv
EgvlPtN6bwKTBgqAK-3uu3GBy6K
EPQ2iIEUWx_U73nonJy5IzmTDH
Xijn-kRg1iCOM999 S5upSWbmmazg
8lctsyXlg_tmXHjHn63WsIo7WcBuL
rtVpPW8oMsZCndwh33pNQXBnk1
iStT81spopzrw3gScK1Wdz6RttH6j
YL611rNBdkd-PEP2CYhDKeSKHE
AqmABjHGLyG6p40k20npHqkg8g-
9Msl3fZZiS4rRxNFOHBjEdVTLBrn
PjRjxTspBfZSEKQnqsGm1WPlz8cS
khCs.ujWHAL4y-RNahay-1AJl34uN
hUj-f6mZ7X1_KZaACvU& dib_tag=s
e & الكلمات الدالة = m3x50٪ 2Bviti & nsdOp
tOutParam=true& QID = 1734711964 &
s = صناعي & sprefix = m3x50٪ 2Bviti
٪ 2Cindustrial٪ 2C136 & ريال سعودي = 1-4 & ث = 1		M3x50 -
مساميرمسطح JOCAHULFXhttps://www.amazon.it/Incassato-
Esagonale-Rondelle-Esagonali-
Inossidabile/dp/B0DF7P5CC2/ref=sr_
1_6?__mk_it_IT=٪C3٪85M٪C3٪8
5٪C5٪BD٪C3٪95٪C3٪91& crid = 2
7B231M7SRJ3R & dib = eyJ2IjoiMSJ9. 3
bij8nHLQAebjY8LHQS6V1GsAE07H
cFGUpHAh7jA1oQIxjoTJmxjNuwg0y
H14oz-YUvzD0eqVRASqAZTK2spiQ
saX0pug7rWgGfENeGhztno5lMcJDT
XQfe9H6ocLZANpAFv_p0dRbO6ggA
vZN0TfyiuR4focFMAjr6VFGVbprEQO
eaS1KRs8loF3FgL0rsmP81K806Gv5
zeSurK_sp8GEelqtm1G3J059zUdPaJ
z7zJQEFPSH0TXv3lml5u9lnvnAbM0j
ClF03nG5ZjB-6WUPfS41Os5DgzTpS
zUTR-YZc1HnRUxy6l5grDPFmDiNZn
0Ie9MrlkcPI2A8dubQZm3d8pYVpg6Y
2OqzifmZzNsQM.Zuh5Ko4bf20Bz46c
NFRHJvcyPfJyglpcvN1uM16-yOI& dib
_tag=se& الكلمات الدالة=M4+VITI+TESTA+SV
ASATA& nsdOptOutParam = صحيح & QID = 17
34712054& s = الصناعية & sprefix = m4 + v
iti + testa + svasata ٪ 2Cindustrial٪ 2C12
8 & sr = 1-6		M4x8 - مسامير الرأس المسطحة
JOCAHULFXhttps://www.amazon.it/Incassato-Esagonale
-Rondelle-Esagonali-Inossidabile / dp / B0DF
7P5CC2 / ref = sr_1_6?__mk_it_IT = ٪ C3٪ 85
M٪ C3٪ 85٪ C5٪ BD٪ C3٪ 95٪ C3٪ 91& ج
rid=27B231M7SRJ3R& dib = eyJ2IjoiMSJ9.
3bij8nHLQAebjY8LHQS6V1GsAE07HcFG
UpHAh7jA1oQIxjoTJmxjNuwg0yH14oz-YU
vzD0eqVRASqAZTK2spiQsaX0pug7rWgG
fENeGhztno5lMcJDTXQfe9 H6ocLZANpAF
v_p0dRbO6ggAvZN0TfyiuR4focFMAjr6VF
GVbprEQOEaS1KRs8loF3FgL0rsmP81K8
06Gv5zeSurK_sp8GEelqtm1G3J059zUdP
aJz7zJQEFPSH0TXv3lml5u9lnvnAbM0jCl
F03nG5ZjB-6WUPfS41Os5DgzTpSzUTR
- YZc1HnRUxy6l5grDPFmDiNZn0Ie9Mrlkc
PI2A8dubQZm3d8pYVpg6Y2OqzifmZzNs
QM. Zuh5Ko4bf20Bz46cNFRHJvcyPfJyglp
cvN1uM16-yOI& dib_tag=se& الكلمات الدالة = M4
+ VTI + TESTA + SVASATA & nsdOptOutParam=tru
e & QID = 1734712054 & s = الصناعية & البادئة =
m4 + viti + testa + svasata٪ 2Cindustrial٪ 2C1
28 & sr = 1-6		M4x12 -
مسامير مسطحةالرأس Globstarhttps://www.amazon.it/testa-svasata-
impronta-Phillips-acciaio / dp / B083RH
5JYL / ref = sr_1_9?__mk_it_IT = ٪ C3٪
85M ٪ C3٪ 85٪ C5٪ BD٪ C3٪ 95٪ C
3٪ 91 & crid = XEVGIE9R1K2F & dib=ey
J2IjoiMSJ9.sYNfljBDPU1N2px8nueT
zi6D61Z46HD98MSuIwqXNKrfkSOM
GYgywNTC8-dsYqNXiZEMS42kGB4
QdBtz_TVFLvgLCFQVl9W5n7Bo4fQS
_VKHh9VLmA_RjdF75wPsSbRPIdSA
nidi0pehfkRoBIrEtYVn-cUq4TXH0P1D
pGLc_4J88tU02ieLVee-YarMxZLKeLYt
kK6B2CmM6d_AE0K7UJofwnOCOLp
3R72KpMTltjkJutf0WxBFsNQhYG8Wz
0q1o_3uRs_aNM0wJtGeSohS3fABN8C
z-kYxdfOikF1zi4nE1wn8YUw8lfsCxeUI
ioUp4Lz0GaXhHkkXxC5jssOsuOyW_6
CeDYrx0AOAy1URHBY.4xc_PNzUrZe
FFz0FV9hV7uu_-Es6f3jhi6koImPVcgw
& dib_tag=se& الكلمات الدالة=m4x70٪2Bvi
ti٪2Btesta٪2Bsvasata & nsdOptOutPa
ram=true& QID = 1734712182 & s = industri
al& amp البادئة = m4x70٪ 2Bviti ٪ 2 بيستتا ٪ 2 < br / > Bsvasata ٪ 2C الصناعية ٪ 2C134 & ريال سعودي = 1-9 & th = 1		M4x70 - مسامير مسطحة
الرأس Aerzetixhttps://www.amazon.it/AERZETIX-cilin
drica-impronta-intaglio-montaggio / dp / B
0BLNJ9PTX / ref = sr_1_8?__mk_it_IT=٪
C3٪ 85M ٪ C3٪ 85٪ C5٪ BD٪ C3٪ 95
٪ C3٪ 91& crid = 3AESCF6VKG6B6 & di
b=eyJ2IjoiMSJ9.: 3HlweLtFpKk8huuM4
tfcAbDSl2biH6iWGO7PXpXKxzQnVM
cKVrvCI0CkZanzuaduqvaeCs8DLxlFs
c_s4-qvSDCE8dvXDhuO4nHPwIhPAl
BnL5G6tLMycq0ZS0ZN83GAj_VOUc
GVLq4fdcfeurabYdPzrWf3PpwM6_-y
OlEOLVvl. zzBKgQWO7fiMSCFuGA6
X4j8xVlNzobgrSfsnDNqZpEgH289rp
AslvAA9D2YEmvJSm0CRqWecsKPJ
iB8yNhelz01MCT-qy3s6utg4_Thec18s
iTwIY2bFdQ5XYhkTzBxAF86lr6VMXZ
3Ym26ZiedQE1_7ceB7jYcyQ5mOMR
fx0d8pYVpg6Y2OqzifmZzNsQM._rEh
uS8xCOyhS7xqQQe9H3kwn-ppl22Rf
VmzFpFpyW0& dib_tag=se& الكلمة الرئيسية
s=m4x80٪2Bviti٪2Btesta٪2Bsvasat
a& nsdOptOutParam = صحيح & QID = 17347
12214 & s = الصناعية & sprefix = m4x80٪
2Bviti ٪ 2 Btesta ٪ 2Bsvasata ٪ 2Cindu
strial ٪ 2C141 & ريال سعودي = 1-8 و th = 1		M4x80 - مسامير مسطحة
الرأس Globstarhttps://www.amazon.it/testa-svasata-
impronta-Phillips-acciaio / dp / B083RJ
S9NT / ref = sr_1_30?__mk_it_IT=٪ C3
٪ 85M٪ C3٪ 85٪ C5٪ BD٪ C3٪ 95٪
C3٪ 91& crid = 15MBBIPYCF06S & dib
= eyJ2IjoiMSJ9.: wHpVBrZH8GsdSIko
N0T0-2663KN2Tr-H4orSaQtmYf64T
nTN15zshBEbfwlrPNyJaD4F1cXZvO
Evle2B5qQb_Un-tR8WzVwAxQFWe
SMPaYKjM5ZgpbhFaaS6Zj0BQntEIA
hyT. nvnLg4IBEE9y-4jQ66ZIkmXcWFo
zXK-eTFnle6uFI4nXhbCXTWjM5MP_
sNolDP0O4HS7Bnxk_wanuwC9zEuH
ZeVNsejl6gwYR0IlJK5iu0V9Y-bgFcr1-
iTBhrARDKG7-0Nc5188TSaN9snT7K
6yO2J3ctfC24PTGnaZAFYKMvrNqz< br / > OAihVBKIW8xOhIx0ZRipPa9ggsMs
_pe1VgY2dCXtUrE_bo1dd4oGlUuw
.v5iiMZ2rMQlZlZs2WDyqM_mo1utvu
PD71Jyb-O7BY1Y& dib_tag=se& الكلمات الرئيسية
= m5x8 + viti + testa + svasata & ns
dOptOutParam=true& QID = 17347123
79 & s = الصناعية & sprefix = m5x8 + viti +
testa + svasata ٪ 2Cindustrial٪ 2C201
& sr = 1-30		M5x8 - مسامير الرأس المسطحة
Globstarhttps://www.amazon.it/testa-svasata-
impronta-Phillips-acciaio / dp / B083RH
M4BY / ref = sr_1_30?__mk_it_IT = ٪ C3
٪ 85M ٪ C3٪ 85٪ C5٪ BD٪ C3٪ 95٪
C3٪ 91 & crid = 15MBBIPYCF06S & dib =
eyJ2IjoiMSJ9. wHpVBrZH8GsdSIkoN
0T0-2663KN2Tr-H4orSaQtmYf64Tn
TN15zshBEbfwlrPNyJaD4F1cXZvO
Evle2B5qQb_Un-tR8WzVwAxQFW
eSMPaYKjM5ZgpbhFaaS6Zj0BQnt
EIAhyTnvnLg4IBEE9y -4jQ66ZIkmX
cWFozXK-eTFnle6uFI4nXhbCXTW
jM5MP_sNolDP0O4HS7Bnxk_wan
uwC9zEuHZeVNsejl6gwYR0IlJK5iu
0V9Y-bgFcr1-iTBhrARDKG7-0Nc5
188TSaN9snT7K6yO2J3ctfC24PTG
naZAFYKMvrNqzOAihVBKIW8xOhI
x0ZRipPa9ggsMs_pe1VgY2dCXtUr
E_bo1dd4oGlUuw.v5iiMZ2rMQlZzs
2WDyqM_mo1utvuPD71Jyb-O7BY
1Y& dib_tag=se& الكلمات الدالة=m5x8٪
2Bviti٪2Btesta٪2Bsvasata & nsdOpt
OutParam=true& QID = 1734712379 & s
= صناعي & sprefix = m5x8٪ 2Bviti٪ 2
Btesta ٪ 2Bsvasata ٪ 2Cindustrial٪ 2
C201 & ريال سعودي = 1-30 و ث = 1		M5x10 - مسامير مسطحة
الرأس Globstarhttps://www.amazon.it/testa-svasata-
impronta-Phillips-acciaio / dp / B083RH
9SYZ / ref = sr_1_30?__mk_it_IT = ٪ C3
٪ 85M ٪ C3٪ 85٪ C5٪ BD٪ C3٪ 95٪
C3٪ 91 & crid = 15MBBIPYCF06S & dib
=eyJ2IjoiMSJ9.: wHpVBrZH8GsdSIko
N0T0-2663KN2Tr-H4orSaQtmYf64T
nTN15zshBEbfwlrPNyJaD4F1cXZv
OEvle2B5qQb_Un-tR8WzVwAxQF
WeSMPaYKjM5ZgpbhFaaS6Zj0BQ
ntEIAhyTnvnLg4IBEE9y- 4jQ66ZIkm
XcWFozXK-eTFnle6uFI4nXhbCXT
WjM5MP_sNolDP0O4HS7Bnxk_w
anuwC9zEuHZeVNsejl6gwYR0IlJK5
iu0V9Y-bgFcr1-iTBhrARDKG7-0Nc5
188TSaN9snT7K6yO2J3ctfC24PTG
naZAFYKMvrNqzOAihVBKIW8xOhIx
0ZRipPa9ggsMs_pe1VgY2dCXtUrE
_bo1dd4oGlUuw.v5iiMZ2rMQlZlZs2
WDyqM_mo1utvuPD71Jyb-O7BY1Y
& dib_tag=se& الكلمات الدالة=m5x8٪2Bvi
ti٪2Btesta٪2Bsvasata & nsdOptOutP
aram=true& QID = 1734712379 & s = indus
trial & sprefix = m5x8٪ 2Bviti ٪ 2Btesta ٪
2Bsvasata ٪ 2C Industrial ٪ 2C201 & SR =
1-30 & ث = 1		M6x20 - بطاقة SD مسطحة
الرأس SanDiskhttps://www.amazon.it/SanDisk-Ultra-
Scheda-memoria-classe/dp/B08GYG6
T12/ref=sr_1_8?crid=3ETH6HJL8VKD
A& dib = eyJ2IjoiMSJ9. 5omqicizrizfHo8r
pPQ6sWJ_C0sfwUqPQv6VrziwK-SCX
4-aSgFGois1pfvTwB0SuDxdNjByo2zU
fBonWwUKAf3clazXEIGNl0GhojQmvj
Bt_6RS31QcAM5Y50BpAdndMXIHy9
iGTswgYEwnbt9uj56G_soC6OdPiTvr
W3M8jwtTxQDUl8UcHZZ eRMPq0T8sd
v4hskHGmipFItAzE1lyDiy0otrqUhz-ph
OggXBAM6gMyGf0qBtU1AFwfj81Shl
HS2qojCiRq_JLKyBkc_Y4P_V1YtsGc
MxnoG6YzYowwEYbX7uTFWJB-Wvc
B_ vYw-D5s0B-HDSYRSl-C60yhtqhrUw
grg9w6PN5U5s01vos4bauIgIN6lOez1
tz2OHwL5YL3QCHKxNnJV0IM42cH0
du8fIEIbUwYC5jRLqowx1UyaQKQ4W
WaGozdZ9l5qUoeQ7KU.iOPo2BYLK
STjqjB8BevaVgPa5QD7BuP9CieN6u
4_Qeo& dib_tag=se& الكلمات الدالة=sd٪
2Bcard٪2Bsandisk& nsdOptOutParam
=true& QID = 1734704871 & sprefix = SD٪
2Bcard ٪ 2Bsan٪ 2Caps٪ 2C141 & ريال سعودي = 8-8 & ث = 1		بطاقة SanDisk 32 GB Extreme PRO SD ، UHS-I
ذاتية المحاذاة شفةتحمل BrateuanoiiKFL088 مم القطر
برنامج التقطيعUltimaker Curahttps://ultimaker.com/it/software/
ultimaker-cura /?gad_source = 1&
gclid = CjwKCAiAyJS7BhBiEiwAy
S9uNUjnbkNIYNUco6YaZYHcFT
2tqBac23MU4Qx3FaMXjl_UifJ_
k8as3BoCeVkQAvD_BwE		Ultimaker Cura 4.9.0
SpringsYIXISIhttps://www.amazon.it/sspa/click?ie
=UTF8& spc=MTo4NDAzNDQ1MzM
0OTUyODQzOjE3MzQ3MDQ4MD
c6c3BfYXRmOjMwMDM5MDQzMz
kzODAzMjo6MDo6& url=٪2FYIXIS
i-Assortimento-Estensione-Compre
ssione-Dispositivi٪2Fdp٪2FB0DD
T3KTBF٪2Fref٪3Dsr_1_1_sspa٪
3F__mk_it_IT٪3D٪25C3٪2585M
٪25C3٪2585٪25C5٪25BD٪25
C3٪2595٪25C3٪2591٪26crid٪
3D1NT7CA1YJGWK4٪26dib٪3D
eyJ2IjoiMSJ9.br/ 3D1NT7CA1YJGWK4٪26dib٪3Dbr/ eyJ2IjoiMSJ9.. IhFmevq0fXTGGwE
cGvfUxxLOudQqQcPjSGXlWklXO
HY2Ahr2XxWSg6MaNBgZ71N1pQ
h9Wkp5c2ary4Hm2xVi4dTH8Ny4
4- OhlcrTn0G8emvX66Zu7U0LGm
xGYKyKCGxzlhwYC4EnlmTSH_O
JnA5oG-BQzuxFBdCrce0txErCEm
S40xONaaYp2R5yMiPDw2PqsPP
jLmoSCYs4XctxEvAwn_5rp71t0U
QsZNku6-jDiiuh5klpC9DsnjipLFP
unRCbITWnw6wslENLdJtPDOGF
8vbO5WFf7PnUy4BZ7tUPt7I. B6j
eUKwx1_t0sPaxmSHYVbRd1MG
w-kosEYkHuKlPtpQ٪26dib_tag٪
3Dse٪26keywords٪3Dmolle٪2B
YIXISI٪26nsdOptOutParam٪3Dtr
ue٪ 26QID٪3D1734704807٪26spr
efix٪3Dmolle٪2Byixisi٪252Caps
٪252C137٪26sr٪3D8-1-spons٪2
6sp_csd٪3Dd2lkZ2V0TmFtZT1zcF
9hdGY٪26psc٪3D1
محرك متدرجTwotrees 123417HS4401محرك متدرج ثنائي القطب NEMA 17 42 Ncm 1.5 A
محرك متدرجSTEPPERONLINEUL1007AWG6متدرج ثنائي القطب NEMA 17 42 Ncm 1.5 A
تثبيت المحرك السائريوتينوhttps://www.amazon.it/gp/product/
B07D7XH97T / ref = ppx_yo_dt_b_
search_asin_title?ie= UTF8 & psc = 1
الجوز الخيوط M2RS-components281-984
الجوز الخيوط M3RS-components281-984
الجوز الخيوط M4RS-المكونات281-984
الجوز الخيوط M5RS-المكونات281-984
الجوز الخيوط M6RS-المكونات281-984
المجرد - C1 خطالخليةATCCCRL-2730خط الخلايا الظهارية معزول من البروستاتا لذكر فأر بالغ معدل وراثيا مصاب بسرطان غدي
تريبان الأزرقجيبكو ثيرموفيشر15250061
تريبسينجيبكو ثيرموفيشر15400054معقم
40443001 للصدأ ذات رأس ذات رأس ذات رأس الداخلي محرك قوس

المراجع

  1. Patel, T., et al. Multicellular tumor spheroids: A convenient in vitro model for translational cancer research. Life Sci. 358, 123184(2024).
  2. Tanaka, M., et al. Emerging translational research in neurological and psychiatric diseases: From in vitro to in vivo models. Int J Mol Sci. 24 (21), 15739(2023).
  3. De Maria Marchiano, R., et al. Translational research in the era of precision medicine: Where we are and where we Will Go. J Pers Med. 11 (3), 216(2021).
  4. Knowlton, S., et al. Bioprinting for cancer research. Trends Biotechnol. 33 (9), 504-513 (2015).
  5. McGranahan, N., et al. Biological and therapeutic impact of intratumor heterogeneity in cancer evolution. Cancer Cell. 27 (1), 15-26 (2015).
  6. Van Zundert, I., et al. From 2D to 3D cancer cell models-The enigmas of drug delivery research. Nanomaterials. 10 (11), 2236(2020).
  7. Hoarau-Véchot, J., et al. Halfway between 2D and animal models: Are 3D cultures the ideal tool to study cancer-microenvironment interactions. Int J Mol Sci. 19 (1), 181(2018).
  8. Yamada, K. M., et al. Modeling tissue morphogenesis and cancer in 3D. Cell. 130 (4), 601-610 (2007).
  9. Manduca, N., et al. 3D cancer models: One step closer to in vitro human studies. Front Immunol. 14, 1175503(2023).
  10. Wang, L., et al. The 3D revolution in cancer discovery. Cancer Discov. 14 (4), 625-629 (2024).
  11. Benton, G., et al. Multiple uses of basement membrane-like matrix (BME/Matrigel) in vitro and in vivo with cancer cells. Int J Cancer. 128 (8), 1751-1757 (2011).
  12. Benton, G., et al. Matrigel: From discovery and ECM mimicry to assays and models for cancer research. Adv Drug Deliv Rev. 79-80, 3-18 (2014).
  13. Rawal, P., et al. Prospects for 3D bioprinting of organoids. Bio-Design Manuf. 4 (3), 627-640 (2021).
  14. Hou, S., et al. Advanced development of primary pancreatic organoid tumor models for high-throughput phenotypic drug screening. SLAS Discov Adv Sci Drug Discov. 23 (6), 574-584 (2018).
  15. Kane, K. I. W., et al. Determination of the rheological properties of Matrigel for optimum seeding conditions in microfluidic cell cultures. AIP Adv. 8 (12), 125332(2018).
  16. De Stefano, P., et al. Bioprinting of Matrigel scaffolds for cancer research. Polymers. 13 (12), 2026(2021).
  17. Hatzikiriakos, S. G., et al. Role of slip and fracture in the oscillating flow of HDPE in a capillary. J Rheol. 36 (5), 845-884 (1992).
  18. Kalika, D. S., et al. Wall slip and extrudate distortion in linear low-density polyethylene. J Rheol. 31 (8), 815-834 (1987).
  19. Molenaar, J., et al. Modeling polymer melt-flow instabilities. J Rheol. 38 (1), 99-109 (1994).
  20. Valot, L., et al. Chemical insights into bioinks for 3D printing. Chem Soc Rev. 48 (15), 4049-4086 (2019).
  21. Sundaramurthi, D., et al. 3D bioprinting technology for regenerative medicine applications. Int J Bioprinting. 2 (2), 9-26 (2016).
  22. Maloney, E., et al. Immersion bioprinting of tumor organoids in multi-well plates for increasing chemotherapy screening throughput. Micromachines. 11 (2), 208(2020).
  23. Snyder, J. E., et al. Bioprinting cell-laden Matrigel for radioprotection study of liver by pro-drug conversion in a dual-tissue microfluidic chip. Biofabrication. 3 (3), 034112(2011).
  24. Patil, L. S., et al. Toward measuring the mechanical stresses exerted by branching embryonic airway epithelial explants in 3D matrices of Matrigel. Ann Biomed Eng. 50 (9), 1143-1157 (2022).
  25. Lai, V. K., et al. Swelling of collagen-hyaluronic acid co-gels: An in vitro residual stress model. Ann Biomed Eng. 44 (10), 2984-2993 (2016).
  26. Lam, N. T., et al. Fabrication of a Matrigel-collagen semi-interpenetrating scaffold for use in dynamic valve interstitial cell culture. Biomed Mater. 12 (4), 045013(2017).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

تصميم والتحقق من صحة طابعة حيوية بالبثق الحجمي للطباعة الحيوية لمستخلص الغشاء القاعدي القابل للذوبان للبحوث الانتقالية
اتصل بنا
أوصِ بها للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

2026 © حقوق الطبع والنشر MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.