مقالة منهجية

إعطاء التخدير المتطاير ليرقات الزرد للملاحظة السلوكية

DOI:

10.3791/67896

⸱

يونيو 6, 2025

 ,  , 
1Perelman School of Medicine, Department of Anesthesiology and Critical Care, University of Pennsylvania

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يقدم هذا البروتوكول طريقة يمكن الوصول إليها لخلق بيئة محكمة الغلق للغاز لإدارة التخدير المتطاير ليرقات أسماك الزرد للتجارب السلوكية.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تصف هذه الدراسة طريقة فريدة لإعطاء التخدير المتطاير ، مثل الأيزوفلوران والسيفوفلوران ، ليرقات الزرد أثناء التجارب السلوكية. في حين أن أسماك الزرد تقدم العديد من المزايا ككائن حي نموذجي للفقاريات - بما في ذلك السلوكيات المعقدة ، وقابلية التتبع الجيني ، والأجنة الشفافة ، والتطور السريع - فإن استخدامها في دراسة التخدير المتطاير كان محدودا. غالبا ما يتطلب إعطاء التخدير المتطاير أجهزة معقدة أو مرهقة قد لا يمكن الوصول إليها على نطاق واسع ، مما يخلق حواجز أمام الدراسة الدوائية لأدوية التخدير المتطاير في الكائنات الحية النموذجية المائية. تقدم هذه الطريقة تقنية مباشرة باستخدام صفائح سيليكون لاصقة لإنشاء ختم محكم للغاز على ألواح زجاجية مكونة من 96 بئرا. تم إجراء التحقق من الصحة من خلال تقييم الحركة العفوية ، والتي لم تظهر فروق ذات دلالة إحصائية بين الآبار المختومة والمفتوحة على مدى فترة 90 دقيقة. بالإضافة إلى ذلك ، ظل تركيز التخدير مستقرا بمرور الوقت ، كما تم قياسه بواسطة HPLC. تشمل النتائج التمثيلية التحديد التجريبي لقيم التركيز الفعال المتوسط (EC50) للسيفوفلوران. توفر هذه الدراسة نهجا بسيطا ويمكن الوصول إليه للتجارب الدوائية باستخدام التخدير المتطاير ، والتي يمكن تكييفها بسهولة لدراسة العوامل المتطايرة الأخرى ونقاط النهاية التجريبية.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

كانت النماذج الحيوانية غير المائية (الديدان والذباب والقوارض والأرانب والرئيسيات وما إلى ذلك) تاريخيا هي النماذج الأكثر استخداما لدراسة علم الأدوية المخدر. في كل نوع من هذه الأنواع ، تكون التخدير المتطاير (التي تعطى عن طريق استنشاق الغازات) أقل صعوبة بكثير من إعطاء التخدير الوريدي (الذي يتم إعطاؤه إما عن طريق الوريد أو داخل الصفاق)1. بالإضافة إلى التحدي التقني المتمثل في إعطاء الأدوية الوريدية ببساطة ، فإن تحقيق حالة ثابتة من التخدير أسهل بكثير مع العوامل المتطايرة من العوامل الوريدية2.

يمكن إعطاء التخدير الوريدي للأنواع المائية اليرقاتية عن طريق الانتشار من الوسط المائي المحيطبها 3،4 ، وبالتالي فهو أقرب إلى إعطاء التخدير المتطاير للأنواع غير المائية. لسنوات عديدة ، كانت الضفادع الصغيرة (Xenopus laevis) هي النموذج المفضل لدراسة التخدير نظرا لسهولة إعطاء الدواء والحركية الدوائية المستقرة التي تم تحقيقها عن طريق إضافة الحمام البسيط للمخدر إلى مياه البركة الاصطناعية5،6. ومع ذلك ، هناك أمثلة قليلة نسبيا على دراسة التخدير المتطاير في هذا النموذج نظرا لمتطلبات الأجهزة محكمة الغلق التي غالبا ما تكون مصممة لهذا الغرض ويمكن أن تكون مرهقة لاستخدام7،8.

في السنوات الأخيرة ، أصبحت أسماك الزرد نموذجا مفضلا لدراسة التخدير الوريدي بسبب نفس سهولة إعطاء الدواء بالإضافة إلى مزايا أخرى مثل سلوكياتها المعقدة الموصوفة جيدا وتوافر الوحدات التجارية لمراقبة هذهالسلوكيات 9. استخدمت العديد من الدراسات الحديثة وحدات المراقبة المتاحة تجاريا لفحص المركبات النشطة عصبيا ، بما في ذلك التخدير ، باستخدام تنسيقات 96 بئرا و 24 بئرا لقياس سلوك يرقات الزرد4،10،11،12،13،14،15. تعتبر مراحل اليرقات مناسبة بشكل خاص لدراسات علم الأدوية نظرا لقدرتها على تقييم العديد من الاستجابات السلوكية ، وصغر حجمها ، وتوافقها العالي مع الإنتاجية ، والدوائر العصبية المميزةجيدا 9،16،17. ومع ذلك ، فإن أحد القيود المهمة في هذه الدراسات حول التخدير في نموذج الزرد هو الصعوبة النسبية في إعطاء التخدير المتطاير. أدى هذا القيد إلى أمثلة ضئيلة للمقارنة بين العوامل المتطايرة والوريدية4،15،18. تضيف القدرة على دراسة ومقارنة فئتي التخدير بسهولة في نموذج حيواني واحد أداة مهمة لتسهيل دراسة علم الأدوية المخدر في جميع الفصول.

تقليديا ، تتطلب دراسة التخدير الوريدي في الأنواع المائية معدات متخصصة ، وغالبا ما تكون مخصصة ، قد يصعب استخدامها أو قد لا تكون محكمة الغلق بما يكفي لمنع فقدان المخدر طوال مدة التجربة. يقدم الإجراء الموصوف هنا وسيلة بديلة يسهل الوصول إليها لإنتاج مانع تسرب للغاز في غرفة زجاجية مناسبة لمراقبة سلوك يرقات الزرد باستخدام وحدة مراقبة تجارية (انظر جدول المواد).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم إجراء جميع تجارب أسماك الزرد وفقا لبروتوكولات استخدام المعتمدة من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدامه (IACUC). تم الاحتفاظ بأسماك الزرد البالغة في المنشأة المائية بجامعة بنسلفانيا تحت إشراف مختبر الموارد الحيوانية بالجامعة (ULAR). تم تربية أسماك الزرد البرية طويلة الزعانف في Tübingen في المنزل لجميع التجارب وتم الحفاظ عليها في ظل ظروف التربية القياسية مع دورة ضوء / ظلام 13/11 ساعة حتى وصلت إلى 5 أيام بعد الإخصاب (dpf). أجريت التجارب باستخدام التكرارات البيولوجية ، مع براثن مشتقة من أزواج تزاوج متميزة لضمان التنوع البيولوجي الكافي. تفاصيل الكواشف والمعدات المستخدمة في هذه الدراسة مدرجة في جدول المواد.

1. تصنيع صفائح السيليكون اللاصقة

ملاحظة: يمكن الحصول على مكافئات هذه المادة (لوح السيليكون بالإضافة إلى المادة اللاصقة) من مصادر تجارية، ولكن غالبا بتكلفة أكبر وتوافر أقل.

  1. ضع لوح السيليكون 0.5 مم على سطح نظيف ومستو.
  2. افحص الأوراق بحثا عن أي تجاعيد وتجنبها عندما يكون ذلك ممكنا.
    ملاحظة: قد لا تلتصق صفائح السيليكون ذات التجاعيد بشكل كاف بالشريط وقد تؤدي إلى عدم كفاية إغلاق الآبار و / أو ضعف تصور أسماك الزرد.
  3. نظف الملاءات بالكحول بنسبة 70٪ لإزالة أي زيت أو بقايا واتركها تجف.
  4. باستخدام قضيب ، مثل فرشاة الرسم ، ضع طبقة رقيقة ومتساوية من التمهيدي اللاصق على لوح السيليكون. لتجنب الإفراط في التطبيق ، اعمل في أقسام أصغر حيث يجف المحرك اللاصق بسرعة (يضبط في 1-5 ثوان).
    ملاحظة: بدون محرك الالتصاق هذا ، لن يلتصق الشريط بشكل كاف بصفة السيليكون.
  5. بمجرد تطبيق المحرك اللاصق ، قم بمحاذاة الشريط المطلي المزدوج مع لوح السيليكون بحيث يكون دعامة الورق متجها لأعلى.
  6. ضع الشريط تدريجيا على السيليكون باستخدام أسطوانة لتنعيم السطح وإزالة فقاعات الهواء (بعد التطبيق الأولي ، سيساعد العمل على جانب السيليكون لأعلى في تصور فقاعات الهواء وإزالتها).
  7. اسمح للمروج اللاصق بالشفاء الكامل لمدة 24 ساعة على سطح مستو.
  8. قطع السيليكون اللاصق إلى شرائح بعرض 10 مم على الأقل (قطر البئر 7.5 مم بالإضافة إلى التداخل على كل جانب).
    ملاحظة: عند استخدام كل صف آخر من لوحة البئر ، لن يؤثر التباين الأوسع في الشرائط سلبا على الآبار في الصفوف المجاورة ، مما قد لا يجعل التطبيق أسهل فحسب ، بل سيكون ضروريا أيضا لتحقيق ختم حول محيط البئر بالكامل.
    1. تأكد من أن الشرائط طويلة بما يكفي لتغطية عرض صف واحد على الأقل من لوحة البئر.
      ملاحظة: إذا كنت تستخدم لوحة بئر ليست 96 بئرا ، مثل صفيحة 24 بئرا أو 48 بئرا ، فيمكن تعديل أحجام الشريط أو قصها لتناسب الأبعاد المحددة للوحة ، مما يضمن التغطية المناسبة بغض النظر عن حجم اللوحة.

2. إعداد الحلول

ملاحظة: تم إجراء جميع محاليل المخزون والمقايسة لأدوية التخدير المتطايرة قبل التجربة مباشرة لتجنب فقدان تركيز المركبات المتطايرة.

  1. لكل محلول (مخزون أو محلول عمل) ، أضف حجما من المذيبات غير المتطايرة (ماء الجنين E3 ، DMSO ، إلخ) إلى قنينة HPLC أو قارورة تلألؤ عند دمجها مع التخفيف النهائي للتخدير المتطاير ، فإن الحجم الكلي سيملأ القارورة بشكل كاف مع ترك الحد الأدنى من المساحة (انظر الشكل 1 أ).
  2. أضف مخدرا متطارا باستخدام حقنة هاميلتون محكمة الغلق للغاز وأغلق القارورة بسرعة.
    ملاحظة: يمكن استخدام محاليل المخزون في قوارير ذات أغطية حاجز لتسهيل المزيد من التخفيفات عن طريق نقل المحلول باستخدام محاقن محكمة الغلق للغاز.
  3. ثم امزج القوارير (الدوامة ، الصوتنة) حسب الحاجة وقم بتخزينها مؤقتا أثناء تحضير أطباق سمك الزرد.

3. إعداد التجربة السلوكية

ملاحظة: قد تستغرق هذه الخطوة من البروتوكول بعض الممارسة. يوصى بالعمل بدون أسماك أو محاليل تحتوي على مواد ثمينة حتى تشعر بالراحة مع هذه التقنية.

  1. انقل يرقات واحدة من سمكة الزرد (5 dpf) إلى كل صف آخر من اللوحة الزجاجية المكونة من 96 بئر.
    ملاحظة: يسمح ترك كل صف آخر فارغا بتقليل احتمالية تلوث الآبار المجاورة من الامتداد غير المباشر حيث يتم إغلاق الآبار في الخطوة 3.4.
  2. قم بإزالة محلول E3 بعناية من كل بئر. يمكن القيام بذلك صفا واحدا في كل مرة أو على اللوحة بأكملها إذا كان قادرا على العمل بسرعة.
    ملاحظة: تم تقليل المدة التي خرجت فيها اليرقات من المحلول لتقليل الإجهاد المحتمل. يمكن استخدام الإجراءات البديلة بناء على الاحتياجات التجريبية المختلفة ، بما في ذلك الإزالة الجزئية للمحلول فقط قبل إضافة المحلول المحتوي على الدواء لتقليل الإجهاد. يجب تكييف البروتوكول ليناسب احتياجات التجربة ، بما في ذلك وقت التوازن الممنوح للحيوانات للتعويض عن أي إجهاد محتمل ، وكفاءة خلط المحلول ، ودقة تركيزات المحلول المحتوي على الدواء ، إن لم تتم إزالة كل E3 قبل إضافة محلول العمل.
  3. بعد ذلك ، استخدم ماصة نقل لملء كل بئر في الصف بالمحلول التجريبي. احرص على عدم إدخال الفقاعات. املأ كل بئر أكثر من اللازم (الشكل 1 ب).
  4. باستخدام شرائط السيليكون اللاصقة المصنوعة في الخطوة 1 ، اضغط على الشريط لأسفل بسرعة (الشكل 1C). يساعد ذلك على منع تكوين الفقاعات ويمنع الأسماك من الفيضان في الآبار المجاورة.
  5. اضغط بقوة على الجزء العلوي من اللوحة للتأكد من إغلاق كل بئر.
  6. كرر الخطوات من 2 إلى 5 حتى يتم تبادل المحلول ويتم إغلاق الآبار لكل صف آخر من لوحة البئر (الشكل 1 د).
  7. اقلب اللوحة برفق وافحص فقاعات الهواء.
    ملاحظة: سيؤدي وجود فقاعات الهواء إلى حجب تصور حركة سمك الزرد.
  8. ضع اللوحة في وحدة مراقبة السلوك (الجانب اللاصق من السيليكون لأسفل) وقم بإجراء التجربة السلوكية (انظر قسم النتائج للحصول على التفاصيل).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

مقارنة بمراقبة البئر المفتوحة التقليدية
من أجل تقييم ما إذا كان للختم اللاصق أي تأثير على الحركة التلقائية ، تم إجراء مقارنة بين الضوابط في الآبار المفتوحة مقابل الآبار المختومة. كما هو موضح في الشكل 2 أ ، لم يلاحظ أي فرق ذي دلالة إحصائية في الحركة بين هذه المجموعات لمدة ~ 30 دقيقة القياسية المستخدمة في التجارب الموضحة في هذه المقالة. إدراكا منه أن النماذج التجريبية الأخرى قد تحتاج إلى تعرض تجريبي أطول ، تم تنفيذ دورة زمنية مدتها ساعتان ، ولم تكشف عن أي اختلاف إحصائي في ا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

توضح هذه المقالة طريقة لإعطاء التخدير المتطاير بسهولة ، مثل سيفوفلوران ، لسمك الزرد اليرقي ، والذي تم استخدامه لتحديد فعالية التخدير المتطاير في الأسماك البرية. على الرغم من أن هذه التقنية بسيطة من الناحية المفاهيمية ، إلا أنها قد تتطلب ممارسة لضمان صف من الآبار مغلق بشكل كاف وخالي من الفقاعات في إطار زمني قصير لتقليل فقدان العوامل المتطايرة. نظرا لأن هذه الطريقة مخصصة للمركبات المتطايرة ، فإنها لا تتطلب فقط تطبيقا دقيقا لمادة لاصقة السيليكون على لوحة البئر ولكن أيضا إعدادا دقيقا للحلول ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ليس لدى المؤلفين أي تعارض للإفصاح عنه.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تمويل هذا العمل من قبل مؤسسة تعليم وأبحاث التخدير (FAER). تم إنشاء الشكل 1 في BioRender.com.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
96 صفائح زجاجية دقيقةZinsser أمريكا الشمالية3600500"هذه الألواح الزجاجية مصنوعة من زجاج البورسليكات عالي النقاء ومقاوم للحرارة والأسطح مصقولة بالحمض. الألواح مستطيلة في البصمة القياسية للوحة SBS الدقيقة (85 × 127 مم). تم تصميم هذه الألواح الدقيقة للمفاعلات الزجاجية بشكل أساسي للاستخدام مع تطبيقات الكيمياء وهي مقاومة لدرجات حرارة تصل إلى 530 درجة ؛ ج. يمكن تعميمها. يتم تشكيلها من لوح زجاجي متجانس وتتميز بهندسة وشكل موحدين لتوفير درجات حرارة ثابتة من بئر إلى بئر (في حدود 0.2 درجة مئوية نموذجية).
2.0 مل شفافة ، فتحة كبيرة ، قوارير خيط 9 مم   ؛كيمجلاس لايف ساينسزالسيرة الذاتية 1150-1232"مع فتحة أكبر بنسبة 40٪ ، تم تصميم هذه القوارير خصيصا للعمل في أجهزة أخذ العينات التلقائية ذات الذراع الروبوتية. كما أنها تتضمن تصميم Step Fial الفريد الذي يركز بدقة على إدراج حجم محدود في عنق القارورة. "
شريط مطلي مزدوج 3M 9490LEشركة AbbVie24WG90"3M مزدوج المغلفة الشريط 9490LE مع 3M Laminating لاصق 300LSE يوفر قوة رابطة عالية لمعظم الأسطح ، بما في ذلك العديد من البلاستيك منخفض الطاقة السطحية مثل البولي بروبيلين والدهانات المطلية بالمسحوق. يوفر لاصق الأكريليك أيضا التصاق ممتاز للأسطح الملوثة قليلا بالزيت المستخدم عادة مع أجزاء الماكينة. يوفر الشريط المطلي المزدوج 3M 9490LE ميزة إضافية تتمثل في لاصق الترقق 3M 300MP على جانب واحد لتوفير قوة رابطة ممتازة لمجموعة متنوعة من مواد الرغوة والنسيج (6 بوصة × 5 ياردة) "
غرفة المراقبة DanioVisionنولدوسDVOC-0041"DanioVision هو نظام كامل ، مصمم للاختبار عالي الإنتاجية ليرقات سمك الزرد في ألواح متعددة الآبار. ويشمل غرفة المراقبة وبرنامج تتبع الفيديو EthoVision XT الشهير ".
وحدة التحكم في درجة الحرارة DanioVisionنولدوسDVTCU-0011"وحدة التحكم في درجة الحرارة DanioVision هي نظام تدفق: يتدفق الماء بالتساوي تحت لوحة البئر عند درجة الحرارة التي تختارها. درجة الحرارة هي نفسها في جميع أنحاء لوحة البئر ".
برنامج Ethovision XT16نولدوسقاعدة NSE-EV"EthoVision XT هو برنامج تتبع الفيديو الأكثر تطبيقا والذي يتتبع ويحلل سلوك وحركة ونشاط أي ، مسمى كعلامة تجارية من قبل Noldus"
إيزوفلورانبيرامال للرعاية الحرجةNDC # 66794-017-10سائل للاستنشاق ، مخدر استنشاق غير قابل للاشتعال ، يحتوي على 100 مل من الأيزوفلوران. مخزنة في درجة حرارة الغرفة الخاضعة للرقابة 20 درجة مئوية ؛ إلى 25º C
سكوتش لحام لاصق فوري التمهيدي AC79 واضح3 م"62-3916-0860-1 (معرف المنتج) C2103N (دفعة)""تم تصميم 3M Scotch-Weld Instant Adhesive Primer AC79 للاستخدام على اللدائن ذات الطاقة السطحية المنخفضة التي يصعب ربطها ، مثل EPDM والسيليكون والمطاط الآخر. يعد إعداد السطح وتطبيقه أمرا سهلا وأن التمهيدي اللاصق يجف بسرعة للحفاظ على حركة المهام بسرعة.
صفائح سيليكون بسمك 0.5 ممموردين مختلفينغير متاحتم شراء صفائح السيليكون الشفافة من موردين متعددين
Speedball Pop-in Hard Rubber Brayer مع إطار بلاستيكي ، 4 بوصات "كرة السرعة793728"يحتوي Speedball Pop-In Hard Brayer على أسطوانة تنقر لسهولة التنظيف. إطار من البلاستيك من قطعة واحدة مع أسطوانة بعرض 4 بوصات قابلة للفصل. مصنوع من مطاط الصمغ الطبيعي النقي مع لمسة نهائية أرضية. يبلغ عرض البخاخ المطاطي الصلب 4 بوصات مع إطار بلاستيكي قوي ورائع لتطبيق الغراء "
أغطية لولبية SureSTART 9 مم ، تطبيقات عالية الإنتاجية من المستوى 2 ، النوع: غطاء برغي AVCS أسود PP ، سيليكون أبيض / أحمر PTFE حجز 1.0 ممثيرمو ساينتفيك6ASC9ST1B"استخدم أغطية لولبية Thermo Scientific SureSTART مقاس 9 مم مع قوارير لولبية بفتحة 9 مم. يتم تصنيع أغطية الأداء من المستوى 2 واختبارها لضمان انخفاض النزيف والمتانة وقابلية التكرار للنتائج لتحليلات GC-MS و LC-MS الروتينية. اختر من بين أغطية البولي بروبلين المزودة بحاجز سيليكون / PTFE متعدد الأغراض بقيم صلابة مختلفة مصممة لتقليل مشكلات إبرة أخذ العينات التلقائية. تشتمل أغطية AVCS الخاصة بنا على تقنية نظام إغلاق القارورة المتقدمة لضمان الضغط الأمثل للختم عند إغلاق القارورة.
أولتان سيفوفلورانشركة AbbVieNDC # 0074-4456-04سائل متطاير للاستنشاق ، يتم تعبئته في زجاجات ملونة كهرمانية تحتوي على 250 مل سيفوفلوران. مخزنة في درجة حرارة الغرفة الخاضعة للرقابة 15 درجة مئوية ؛ إلى 30º C
قوارير التلألأ السائل Wheaton ، أغطية متصلة بالقوارير ، زجاج ، رقائق معدنية / لب ، 24-400 ، 20 مل   ؛DWK علوم الحياة986561قوارير متلألئة سعة 20 مل تم تحويلها من أنابيب زجاجية من النوع الأول من البورسليكات أو PET أو HDPE. متوفر مع غطاء مرفق.

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Wasilczuk, A. Z., Maier, K. L., Kelz, M. B. The mouse as a model organism for assessing anesthetic sensitivity. Methods Enzymol. 602, 211-228 (2018).
  2. Shortal, B. P., et al. Development and validation of brain target-controlled infusion of propofol in mice. PLoS One. 13, 1-14 (2018).
  3. Halbach, K., et al. Yolk sac of zebrafish embryos as backpack for chemicals. Environ Sci Technol. 54 (16), 10159-10169 (2020).
  4. Bedell, V. M., Meng, Q. C., Pack, M. A., Eckenhoff, R. G. A vertebrate model to reveal neural substrates underlying the transitions between conscious and unconscious states. Sci Rep. 10, 1-10 (2020).
  5. Stetter, M. D., et al. Isoflurane anesthesia in amphibians: Comparison of five application methods. In American Association of Zoo Veterinarians. , Puerto Vallarta, Mexico. 255-257 (1996).
  6. Woll, K. A., Eckenhoff, R. G. High-throughput screening to identify anesthetic ligands using Xenopus laevis tadpoles. Methods Enzymol. 602, 177-187 (2018).
  7. Meyer, H. Zur Theorie der Alkoholnarkose. Arch Exp Pathol Pharmakol. 46, 338-346 (1901).
  8. Downes, H., Courogen, P. M. Contrasting effects of anesthetics in tadpole bioassays. J Pharmacol Exp Ther. 278, 284-296 (1996).
  9. Kalueff, A. V., et al. Towards a comprehensive catalog of zebrafish behavior 1.0 and beyond. Zebrafish. 10, 70-86 (2013).
  10. Abramova, V., et al. Effects of pregnanolone glutamate and its metabolites on GABAA and NMDA receptors and zebrafish behavior. ACS Chem Neurosci. 14, 1870-1883 (2023).
  11. Germann, A. L., et al. Comparison of behavioral effects of GABAergic low-and high-efficacy neuroactive steroids in the zebrafish larvae assay. ACS Chem Neurosci. 15, 909-915 (2024).
  12. Hoyt, H., et al. Photomotor responses in zebrafish and electrophysiology reveal varying interactions of anesthetics targeting distinct sites on gamma-aminobutyric acid type A receptors. Anesthesiology. 137, 568(2022).
  13. Li, F., et al. Characterization of the locomotor activities of zebrafish larvae under the influence of various neuroactive drugs. Annals Trans Med. 6, 173(2018).
  14. McCarroll, M. N., Gendelev, L., Kinser, R. Zebrafish behavioural profiling identifies GABA and serotonin receptor ligands related to sedation and paradoxical excitation. Nat Commun. 10, 4078(2019).
  15. Plasencia, D. M., Rodgers, L. H., Knighton, A. R., Eckenhoff, R. G., White, E. R. Antagonism of propofol anesthesia by alkyl-fluorobenzene derivatives. Sci Rep. 14, 15943(2024).
  16. Dash, S. N., Lipika, P. Flight for fish in drug discovery: A review of zebrafish-based screening of molecules. Biology Lett. 19, 20220541(2023).
  17. Nelson, J. C., Michael, G. Zebrafish behavior as a gateway to nervous system assembly and plasticity. Development. 149, 177998(2022).
  18. Zhang, L., et al. Sevoflurane postconditioning ameliorates cerebral hypoxia/reoxygenation injury in zebrafish involving the Akt/GSK-3β pathway activation and the microtubule-associated protein 2 promotion. Biomed Pharmacother. 175, 116693(2024).
  19. Abdallah, S. J., Thomas, B. S., Jonz, M. G. Aquatic surface respiration and swimming behaviour in adult and developing zebrafish exposed to hypoxia. J Exp Biol. 218, 1777-1786 (2015).
  20. Targ, A. G., Yasuda, N., Eger, E. I. Solubility of I-653, sevoflurane, isoflurane, and halothane in plastics and rubber composing a conventional anesthetic circuit. Anesth Analg. 69, 218-225 (1989).
  21. Yang, X., et al. Drug-selective Anesthetic insensitivity of zebrafish lacking γ-aminobutyric acid Type A receptor β3 subunits. Anesthesiology. 131, 1276-1291 (2019).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة