يعد التقسيم الإجمالي الشامل والموحد للكرات الأرضية غير الورمية أمرا مهما للحصول على أقسام نسيجية مرضية عالية الجودة قابلة للتكرار. وترد هنا مبادئ توجيهية لتقدير الكرات الأرضية غير الورمية للبالغين والجنين. يتم عرض ومناقشة خيارات مختلفة لتقسيم الكرة الأرضية ، بما في ذلك معايير اتخاذ القرارات على أساس الحالة.
مقالة منهجية
إجمالي الكرات الأرضية غير الورمية ، بما في ذلك عيون الجنين
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
يعد تجميع وتقسيم الكرات الأرضية الجنينية والبالغة خطوات حاسمة في التقييم النسيجي المرضي لأمراض العين. يعد التعامل السليم مع العالم أمرا ضروريا للتشخيص الدقيق لحالات مثل الأورام والتغيرات غير الورمية ، بما في ذلك الصدمات والالتهابات والعمليات الجراحية السابقة. يتبع اتجاه الكرة الأرضية فحص خارجي ، وتوثيق الخصائص بما في ذلك الحجم والشكل وأي آفة أو شذوذ مرئي. يجب إيلاء اهتمام خاص لوجود الأورام أو التغيرات المعدية أو التنكسية ، وكذلك علامات الصدمة أو الجراحة السابقة. يتم تسجيل قياسات الكرة الأرضية والهياكل المرتبطة بها ، بما في ذلك القرنية والعصب البصري ، وفي عيون الجنين - التطور التشريحي وفي الوقت المناسب. يعد Transillumination ضروريا للكشف عن الظل ، والذي قد يكون ناتجا عن كتلة أو نزيف بالإضافة إلى زيادة انتقال الضوء في مناطق الضمور ، مثل الورم القولوني.
يتم تثبيت الكرة الأرضية بشكل روتيني في 4٪ بارافورمالدهايد للحفاظ على الأنسجة. بعد التثبيت لمدة 24 ساعة ، يتم تقسيم الكرة الأرضية بشكل منهجي لفحص الهياكل داخل العين ، مثل الغرفة الأمامية ، وحالة العدسة ، والعنبية ، والشبكية ، والجسم الزجاجي ، والعصب البصري. عادة ما يتم تقطيع الكرة الأرضية البالغة على طول المستوى الأفقي أو - اعتمادا على المؤشرات السريرية - المستوى الرأسي / المائل لإنشاء قسم العصب البصري للتلميذ (PO). يمكن أخذ أقسام إضافية من الكالوتيس لتقييم مجالات الاهتمام ، مثل الكتل المشبوهة أو مناطق الضمور. لأغراض البحث ، يمكن النظر في بروتوكولات التثبيت والتقسيم المختلفة.
يتم فحص كل قسم إجمالي وتوثيقه ومعالجته بعناية للفحص المجهري للتأكد من أخذ عينات من أي نتيجة مرضية بشكل كاف. يعد الإجمالي الدقيق والتقسيم أمرا بالغ الأهمية لربط النتائج السريرية والنسيجية ، وتسهيل التشخيص ، وتوجيه قرارات العلاج ، وتحسين نتائج المرضى في النهاية. يضمن توحيد الإجمالي والتقسيم تقييما شاملا لكرة العين ويساهم في تقدم طب العيون.
المقدمة
يعد الفحص الإجمالي وتقسيم كرات العين من الإجراءات الأساسية في أمراض العيون ، مما يوفر رؤى قيمة حول أمراض العين المختلفة والتئام الجروح بعدالجراحة 1. العين ، كعضو عالي التخصص ، عرضة لمجموعة واسعة من التغيرات الفيزيولوجية المرضية و / أو المرضية ، بما في ذلك الأورام (على سبيل المثال ، الورم الميلانيني العنبي ، الورم الأرومي الشبكي) ، والعمليات الالتهابية (على سبيل المثال ، التهاب القزحية ، التهاب باطن المقلة) ، والأمراض التنكسية العصبية (على سبيل المثال ، الجلوكوما ، الضمور البقعي المرتبط بالعمر) 2،3،4. يمكن أن يؤدي التئام الجروح بعد العمليات الجراحية أيضا إلى مضاعفات تهدد الرؤية.
عادة ما يتم استئصال عيون البالغين التي يتم تقييمها في مختبر أمراض العيون لأسباب سريرية ، مثل الورم أو العين العمياء المؤلمة. في معظم البلدان، يقتصر التحري عن عيون المتبرعين من تشريح الجثث على المشاريع البحثية. في المقابل ، عادة ما تكون عيون الجنين وحديثي الولادة عينات تشريح للجثة (باستثناء العيون التي يشتبه سريريا في وجود ورم داخل العين)5،6. وبالتالي ، يتم التحقيق في عيون الجنين وحديثي الولادة فيما يتعلق بالنتائج من التخصصات الأخرى ، مثل علم أمراض الأطفال أو كجزء من تشريح الجثةالشرعي 7. بالنسبة لكل من عيون الجنين والبالغين ، تعد معرفة تاريخ المريض قبل الجمع أمرا بالغ الأهمية لفهم مؤشر التحليل النسيجي المرضي ، والذي له تأثير كبير على طريقة توثيق العين (الصورة) وتقسيمها1،3.
ومع ذلك ، فإن الفحص الإجمالي الدقيق والتقسيم والتوثيق ليس فقط أمرا بالغ الأهمية للتقييم النسيجي المرضي ، والذي يساهم في تشخيص أمراض العين وتشخيصها وإدارتها ، ولكن أيضا لحالات الطب الشرعي (على سبيل المثال ، صدمة الرأس المسيئة أو الجوانب الطبية القانونية) 8،9. أثناء الإجمالي ، يتم إجراء فحص خارجي شامل للكرة الأرضية تحت مجهر تشريح أو مجهر جراحة العيون المهملة ، مع التركيز على ميزات مثل الحجم والشكل وخصائص السطح (الشكل التكميلي S1). يجب إجراء قياسات الكرة الأرضية بأكملها (الأمامية الخلفية والأفقية والرأسية) والقرنية والعصب البصري بعناية بواسطة مسطرة الفرجار وتوثيقها (الشكل 1). تساعد العضلات المائلة والشريان الهدبي الأفقي في توجيه الكرة الأرضية. يمكن أن تكون الغرز المتبقية مؤشرا على إجراء جراحي ولا تحتاج إلى إزالتها أثناء الإصابة. ومع ذلك ، يضع بعض الجراحين خياطة في إحدى عضلات المستقيم أثناء الاستئصال والتي قد تكون مفيدة ليس فقط لإزالة الكرة الأرضية ولكن أيضا للتوجيه (إذا تم الإبلاغ عن التوطين). يعد التوثيق الدقيق لأي آفة أو تغير في اللون أو أي خلل آخر أمرا بالغ الأهمية ، حيث يمكن أن توفر هذه النتائج أدلة مبكرة على الأمراض الأساسية. يعد Transillumination إلزاميا للكشف عن أورام العين أو عيوب النمو مثل الأورام القولونية وتحديد موقع إجراء جراحي سابق.
عادة ما يتم إجراء تقسيم الكرة الأرضية بعد التثبيت في 4٪ بارافورمالدهيد (4٪ PFA) أو 10٪ فورمالين للحفاظ على بنية الأنسجة. يتم إجراء التثبيت الروتيني باستخدام 4٪ PFA لمدة 24 ساعة. بالنسبة للفحص المجهري الإلكتروني ، يمكن استخدام المثبتات البديلة لعينات البحث ، على سبيل المثال ، مثبت كارنوفسكي (بما في ذلك الجلوتارالديهايد) أو 2.5٪ جلوتارالديهايد. لا ينصح بشق أو حقن المثبت لأنه يسبب القطع الأثرية غير الضرورية. ومع ذلك ، لأغراض البحث ، قد يتم فتح الكرة الأرضية للحصول على اختراق أفضل ل PFA ، على وجه الخصوص ، لتثبيت شبكية العين ، ولكن هذا لا ينصح به للعينات الروتينية. فيما يتعلق بعيون المتبرع ، قد تكون متجسسة بشكل إجمالي أو بعد إزالة زر القرنية المتصلبة لبنك العين.
يعتمد اختيار مستوى التقسيم - أفقيا أو رأسيا أو مائلا - على الشك السريري والهياكل التشريحية ذات الأهمية ، بما في ذلك مواقع الجراحة السابقة (على سبيل المثال ، استئصال التربيق للجلوكوما ، عادة في موضع الساعة 12)10. بشكل روتيني ، يتم تقسيم الكرة الأرضية عند خط الزوال الأفقي للحصول على قسم العصب الحدقي البصري (قسم PO) مع القرنية والتلميذ والعدسة والبقعة والعصب البصري في قسم واحد. يمكن أيضا تحقيق قسم أمر الشراء إذا تم إجراء مقطع رأسي أو مائل. ومع ذلك ، في هذا السيناريو ، لن تظهر البقعة في نفس قسم العصب البصري. قسم PO هو المعيار الذهبي لفحص الأنسجة المرضية.
بعد التجميع والتقسيم ، يتم فحص الهياكل داخل العين بدقة وتوثيقها ووصفها (الشكل 1). يجب فحص كل بنية عينية (القرنية ، حالة العدسة ، القزحية ، الجسم الهدبي ، المشيمية ، شبكية العين ، الجسم الزجاجي ، العصب البصري) بشكل منفصل. كلما أمكن ، يجب الحصول على مقطع عرضي للعصب البصري وتقديمه بشكل منفصل. يوفر كل هذا الفحص الأساس لارتباط نسيجي مجهري على الأقل إن لم يكن ارتباطا سريريا مرضيا.
لذلك ، فإن عملية التجميع والتقسيم الدقيقة ذات صلة كبيرة في الممارسة السريرية لأن الكرات الأرضية المنزوة يتم تقديمها للتحليل النسيجي المرضي بعد الصدمات الشديدة أو الأورام الخبيثة المشتبه بها أو الالتهابات المقاومة للعلاج. سيمكن بروتوكول الفحص العياني الموحد أطباء أمراض العيون من تتبع تاريخ الكرة الأرضية لتقديم التشخيصات النسيجية المرضية الأكثر دقة ذات الصلة ليس فقط لعين المريض ولكن أيضا للمرضى في المستقبل. يصف البروتوكول التالي ويوثق التعامل مع عيون الجنين والبالغين (غير الورمية) للتشخيص السريري الروتيني وتحقيقات الطب الشرعي وأساليب البحث.
البروتوكول
تأكد من الالتزام بتعليمات السلامة عند التعامل مع العينات الثابتة بالفورمالين لأنها مهيجة للجلد ومسرطنة وسامة للأجنة11،12،13.
1. التوجيه
- حدد عضلات المستقيم الأربع (الشكل 2 أ).
- حدد العضلة المائلة العلوية من خلال مظهرها الوتري (الشكل 2 ب). يتم إدخاله في الصلبة على السطح الخلفي الصدغي للكرة الأرضية على مقربة من إدخال العضلة المستقيمة العلوية.
- تحديد العضلة المائلة السفلية. يدخل الصدغي السفلي في الصلبة بين العضلة المستقيمة الجانبية والعصب البصري (الشكل 2 ج).
- تحديد الشريان الهدبي الخلفي الطويل (الشكل 2 ب).
ملاحظة: في عيون الجنين ، يعتبر الشريان الهدبي الخلفي الطويل أمرا بالغ الأهمية لتحديد خط الزوال الأفقي لأن العضلات ليست بارزة كما هو الحال في عيونالبالغين 7. - حدد المساحة الجانبية للكرة الأرضية بدقة بناء على الخطوات 1.1.1-1.1.3 (العين اليمنى مقابل العين اليسرى).
2. الإيرادات
- قم بقياس القطر الأمامي الخلفي (قطر AP) وكذلك القطر الأفقي والرأسي بالملم (الشكل 3 أ ، ب).
ملاحظة: بالنسبة لعيون الجنين ، يجب مقارنة قطر AP برسم بياني لتقييم صغر الملتحمة7. - وصف أي تشوهات في الجانب الخارجي للكرة الأرضية بما في ذلك - على سبيل المثال لا الحصر - الندوب والخيوط والمواد الطبية الغريبة (على سبيل المثال ، الشريط المحيط لانفصال الشبكية أو جهاز تصريف الجلوكوما) ، والأجسام الغريبة ، والتشوه (الشكل 4 أ - د).
- قم بقياس القرنية بقطرها الأفقي والرأسي بالملم (الشكل 3 أ).
- وصف جانب القرنية بما في ذلك - على سبيل المثال لا الحصر - الشفافية ، والندوب ، وعلامة رأب القرنية ، والخيوط ، والأوعية الدموية (الشكل 3 أ).
- وصف القزحية (إذا كانت مرئية) فيما يتعلق باللون وتكوين حدقة العين والتشوهات المحتملة. استخدم Transillumination لتقييم عيوب القزحية (المتعلقة بالصدمات أو التشوهات الخلقية).
- قم بقياس العصب البصري للطول والتشوهات (على سبيل المثال ، نزيف في أغلفة العصب البصري) (الشكل 3 ب).
- إذا أمكن ، قم بعمل مقطع عرضي عبر العصب البصري وإرساله بشكل منفصل.
- قم بنقل الكرة الأرضية باستخدام أنبوب LED مع التركيز بشكل خاص على عيوب القزحية والظل الصلبي الذي قد ينتج عن ورم أو نزيف أو مادة غريبة (الشكل 3 ج ، د).
- قم بتوثيق الصور للكرة الأرضية.
3. قسم العينات الروتينية
- ضع قرنية الكرة الأرضية لأسفل (الشكل 5 أ).
- ضع علامة على خط الزوال الأفقي أو مستوى المقطع بقلم (الشكل 5A-C) بحيث يكون القسم قريبا من العصب البصري ويمر عبر القرنية الطرفية. ينطبق هذا أيضا إذا كان القسم رأسيا أو سهميا.
ملاحظة: لا تقطع مجالات الاهتمام ، وبدلا من ذلك تقطع بالقرب منها - وإلا فقد لا يتم تغطيتها في القسم النسيجي حيث تتقلص الأنسجة من خلال مزيد من المعالجة. - قم بتقسيم بعناية بشفرة ميكروتوم على طول الخط المحدد ، ممسكا بالكرة الأرضية باليد الأخرى.
ملاحظة: لا يلزم إزالة المواد علاجية المنشأ ، مثل الشريط المحيط (الشكل 4). - قم بإزالة الكالوت وافحص بعناية بحثا عن التشوهات (الشكل 5 د). تخزينها في الفورمالين أو إرسالها لمزيد من المعالجة النسيجية. إذا كانت الكرة الأرضية مملوءة بزيت السيليكون (المستخدم كسدادة) أثناء جراحة انفصال الشبكية ، فاحرص على المعدات لأنها لزجة جدا.
- بالنسبة للورم الميلانيني العنبي, إزالة الوريد دوامة; في العيون غير الورمية ، لا يتم ذلك بشكل روتيني.
- فحص هياكل العين الداخلية: الغرفة الأمامية. حالة العدسة (فاكيك أو كاذب ، أفاكي ، إعتام عدسة العين ، إعتام عدسة العين ، إعتام عدسة العين الثانوي) ؛ زنبق; الجسم الهدبي المشيمية. شبكية العين المركزية شبكية العين المحيطية; العصب البصري (على سبيل المثال ، ضمور) ؛ الصلبة (قد تكون سميكة في العيون الفثية أو رقيقة في الصدمة أو الورم العنوقي).
- قم بإزالة الكالوت الآخر للحصول على قسم PO مناسب (الشكل 5E والشكل 6 أ) ؛ ضع الكرة الأرضية المفتوحة بعناية مع الفتحة لأسفل.
- أمسك الكرة الأرضية بيد واحدة وقم بتقسيمها في اتجاه مواز (ولكن فوق العصب البصري ومرة أخرى من خلال القرنية المحيطية). يكون الكرة الأرضية أقل استقرارا بمجرد فتحها.
- قم بإزالة الكالوت وافحص بعناية بحثا عن التشوهات. قم بتخزينها في الفورمالين أو إرسالها لمزيد من المعالجة النسيجية (الشكل 6).
- قم بإجراء توثيق الصور لقسم أمر الشراء وإرساله لمزيد من المعالجة النسيجية.
4. قسم عينات الجنين
ملاحظة: هذه ليست سوى تعديلات على البروتوكول الرئيسي الموصوف في الأقسام 1 (الاتجاه) و 2 (الإجمالي) و 3 (قسم العينات الروتينية).
- ضع الكرة الأرضية مع القرنية لأسفل.
- حدد الشريان الهدبي الخلفي الطويل عن طريق ضغط الكرة الأرضية برفق (الشكل 7).
- قم بتشريح الكرة الأرضية أفقيا بالقرب من العصب البصري ، مع الضغط قليلا على شفرة الميكروتوم. تأكد من أن محيط القرنية موجود أيضا داخل القسم.
ملاحظة: لا ينصح بالتشريح بسبب صغر حجم الكرة الأرضية للجنين. - قم بتقييم الهياكل داخل العين بدقة وقم بتوثيقها بالصورة كما هو موضح في الخطوة 3.6.
ملاحظة: يجب إيلاء اهتمام خاص لهياكل الجنين (مثل الأوعية الدموية الجنينية) أو تشوهات النمو (مثل الورم القولوني). - أرسل الجزء الرئيسي من الكرة الأرضية لمزيد من المعالجة.
- أرشفة الكالوت المتبقي في الفورمالين أو إرساله لمزيد من المعالجة.
5. قسم عينات الطب الشرعي
- كن على دراية بسؤال الطب الشرعي قبل التقسيم. في علم أمراض الطب الشرعي ، استعد لتحليل أجزاء من الكرة الأرضية سميا (زجاجيا) أو استخدمها لتقدير الوقت منذ الوفاة (القرنية) 2،14.
- بالنسبة لصدمة الرأس المسيئة (AHT) ، قم بإجراء تشريح أفقي متبوعا بفحص شامل وتوثيق صور لنزيف الشبكية ونزيف غمد العصب البصري. قم بإجراء صبغة حديد (على سبيل المثال ، بقعة بيرل الزرقاء البروسية) لتقييم علامات النزيف المتدهور بالفعل.
ملاحظة: تم توفير بروتوكول أكثر تفصيلا من قبل Gilliland et al. الذين يوصون بإزالة وتحليل العينين ومحتوياتهاالمدارية 15.
هناك العديد من الحالات الأخرى التي تؤدي إلى نزيف الشبكية عند حديثي الولادة بصرف النظر عن AHT7،16،17،18،19،20. - بالنسبة للأسئلة المتعلقة بالجراحة (على سبيل المثال ، التهاب باطنالمقلة 4) ، قم بإجراء تشريح أفقي للكرة الأرضية والتقييم كما هو موضح في القسم 3. بالنسبة للعيون التي لديها تاريخ من استئصال التربيق ، قم بإجراء قسم رأسي بالقرب من موقع الفقاعات (والذي قد يكون مدخلا للبكتيريا).
- الأجسام الغريبة: قياس وتصوير الجسم وموقعه في الموقع أو المساحة الفارغة التي استقر فيها الجسم (تتطلب الأجسام الغريبة المعدنية إزالتها قبل القطع حيث لا يمكن تقسيمها). صف اللون والشكل والاتساق. احتفظ بالجسم الغريب مخزنا حيث قد يتم إعادة التحقيق فيه لأغراض قانونية.
6. الأساليب البديلة
ملاحظة: يمكن استخدام نهج بديل إذا كانت الشبكية بحاجة إلى التحقيق قبل التقسيم10،21،22. يشبه هذا النهج الكرات الأرضية المانحة حيث تمت إزالة أنسجة القرنية المتصلبة لبنك العين.
- استخدم مشرطا واقطعه محيطيا داخل البارس بلانا (الشكل 8 أ).
- قم بإزالة الجزء الأمامي (القرنية ، الحافة الصلبة ، العدسة) ، والتقسيم ، وتقديمه للتقييم الروتيني النسيجي المرضي (الشكل 8 ب).
- تصور شبكية العين وصورتها متعدد الوسائط (قبل و / أو بعد التثبيت) (الشكل 8 ب).
- قم بإزالة كلا الكالوتين لمزيد من المعالجة الروتينية. نظرا لأن الجزء الأمامي قد تمت إزالته بالفعل ، فإن الكرة الأرضية المتبقية غير مستقرة. ومن ثم ، قم بتثبيته بإحكام بيد واحدة أثناء إزالة الكالوت كما هو موضح في الخطوات 3.1-3.4.
- قم بتقييم الهياكل داخل العين بدقة وقم بتصويرها كما هو موضح في الخطوة 3.6.
- قم بإزالة الكالوت الثاني كما هو موضح في الخطوات 3.7-3.10 (الشكل 8 د).
ملاحظة: بالنسبة للعينات البحثية فقط ، هناك طرق أخرى ممكنة21.
7. مزيد من المعالجة
- بعد المعالجة الروتينية وتضمين البارافين ، قم بإعداد أقسام متدرجة بسمك 5 ميكرومتر حتى يصبح العصب البصري والبقعة على القسم.
- حدد بشكل فردي المسافة بين أقسام الخطوة.
ملاحظة: هذه المسافة بين أقسام الخطوة هي بشكل روتيني ~ 250 ميكرومتر في مختبر أمراض العيون لدينا. - إعداد أقسام تسلسلية للكرات البحثية. إذا كانت هناك حاجة إلى بقع كيميائية مناعية ، فقم بتركيب الأقسام على شرائح مغلفة.
النتائج
بعد التوجيه ، يجب أن يكون من الممكن تحديد الجانب للعيون البالغة. ومع ذلك ، غالبا ما يكون هذا مستحيلا لعيون الجنين. من المهم أن تكون الجانبية مهمة للتأكد من إزالة العين الصحيحة وأنها تتطابق مع التقرير. يتم توثيق القياسات قبل التقسيم. على وجه الخصوص ، بالنسبة لعيون الجنين ، يكون التصوير التخطيطي للرسم البياني مفيدا لاستبعاد الحالات الشاذة في حجم العين مثل صغر الملتحمة.
بناء على تاريخ المريض والإضاءة ، يتم التخطيط للتقسيم . عادة ما يتم تقسيم الكرة الأرضية أفقيا ، الأمر الذي يتطلب التحديد الصحيح للمستوى الأفقي كما هو موضح أعلاه. إذا كانت هناك مجالات اهتمام محددة (على سبيل المثال ، الورم القولوني ، أو الآفات غير المتوقعة التي تم تحديدها في transillumination ، أو المواقع الجراحية مثل استئصال التربيق) ، يتم تكييف التقسيم على التوالي. النتيجة المستهدفة من التقسيم هي قسم أمر شراء مناسب (الشكل 5 والشكل 6).
تضعف الكرة الأرضية المقطوعة بشكل محرج الارتباط السريري المرضي الدقيق وتفسير النتائج النسيجية مع تأثير محتمل على متابعة المريض. على سبيل المثال ، أحد أكثر التشخيصات تهديدا التي يجب مراعاتها هو التهاب العين الودي23 وهو التهاب ثنائي ومزمن للورم الحبيبي في العنبية يحتمل أن يؤدي إلى عمى العين المتبقية (العين المتعاطفة). يجب استبعاد هذا الكيان في كل عالم ، وعلى وجه الخصوص ، في العيون العمياء والمؤلمة. نظرا لأن هذا أمر بالغ الأهمية للحفاظ على العين المتبقية ، فإن الأقسام التمثيلية في العالم إلزامية للتقييم ، ويفضل أن تكون أقساما لأمر الشراء.
في حالة إجراء قطع عن طريق الخطأ في القرنية بأكملها بدلا من تقسيم المحيط ، قم بإرسال الكالوتة مع القرنية والجزء الأمامي وقسم الفم الفاشل. يجب إزالة الكالوت الثاني كما هو موضح أعلاه لجعل الكرة الأرضية مناسبة للكاسيت. والجدير بالذكر أن العيون الفثيسية يمكن أن تظهر حؤولها العظمي لظهارة صبغة الشبكية ، مما يجعل من المستحيل تقريبا تقسيم الكرة الأرضية. قم بإزالة كلسات الكرة الأرضية في 5٪ حمض النيتريك لمدة 24 ساعة متبوعا بمحلول الليثيوم أو كبريتات الصوديوم بنسبة 5٪ لمدة 24 ساعة ، وقم بتخزينها في ماء الصنبور لمدة 24-48 ساعة وحاول مرة أخرى قطع الكرة الأرضية. كرر إزالة الكلس حتى يمكن تقسيم الكرة الأرضية. أخيرا ، يجب إجراء التوثيق الضوئي لكل كرة أرضية. هذا ليس فقط لأسباب الطب الشرعي ولكنه مفيد أيضا في حالة حدوث نتائج نسيجية غير متوقعة.
الشكل 1: مخطط انسيابي لإعداد وتوجيه وتقسيم العيون غير الورمية مع سرد الخطوات ذات الصلة في نهج يشبه قائمة التحقق. اختصار: LED = الصمام الثنائي الباعث للضوء. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 2: الاتجاه. يمكن رؤية القرنية بوضوح من وجهة نظر أمامية. (أ) يتم تمييز إدخالات العضلات المستقيمة الأربعة بواسطة رؤوس الأسهم. (ب) العصب البصري (العلامة النجمية) مرئي من الرؤية الخلفية. يمثل الشريان الهدبي الطويل (السهم) خط الزوال الأفقي. الإدخال اللحمي النموذجي للعضلة المائلة السفلية (رأس السهم) مؤقت تقريبا. يتم تمييز اثنين من الأوردة الدوامية بواسطة سهام رفيعة. (ج) يكون الإدخال الوتري للعضلة المائلة العلوية (رأس السهم) متفوقا بين العضلة المستقيمة العلوية والعصب البصري. يتميز الوريد الدوامي بسهم رفيع. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 3: الإجمالي. (أ) قياس القطر الأفقي والرأسي بالملم (الخط المنقط). قياس قطر القرنية ، وعلى سبيل المثال ، قطر رأب القرنية. (ب) قياس القطر الأمامي الخلفي بالملم (الخط الأحمر) وطول العصب البصري (الخط الأخضر). العصب البصري مقطعي (خط منقط) ويتم تقديمه بشكل منفصل لمزيد من المعالجة. (ج) التحويل المنتظم للكرة الأرضية بواسطة ضوء LED. (د) عند الإشعاع ، يظهر ظل ناتج عن ورم مشيمي (سهم). اختصار: LED = الصمام الثنائي الباعث للضوء. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 4: مادة غريبة خارج العين. (أ) كرة أرضية مع شريط / تطويق محيط (سهم ؛ العصب البصري مميز بعلامة النجمة). (ب) بعد التشريح الأفقي ، لا يزال الشريط المحيط متصلا بالكرة الأرضية (الأسهم). (ج) تطبيقات متعددة للمواد الغريبة الخارجية لجراحة انفصال الشبكية التاريخية التي تتكون من صفائح (علامة النجمة) والعديد من الأبازيم الصلبية (السهم). (د) يظهر قسم Hematoxylin & Eosin المقابل الموقع داخل الصلبة للإبزيم (السهم) بالإضافة إلى الصورة السلبية للوحة خارج الصلبة (علامة النجمة). يتم تمييز القرنية باللغتين C و D بسهم رفيع والعصب البصري برأس سهم في D. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 5: التقسيم. (أ) يتم وضع الكرة الأرضية على القرنية لأسفل (نفس العين كما في الشكل 2) و (ب) يتم وضع علامة على مستويات القسم العلوي (الأحمر) والسفلية (الزرقاء). (ج) يمر مستوى المقطع بشكل مثالي عبر القرنية الطرفية / المنطقة الداكنة. (د) بعد إزالة الكالوت العلوي ، يمكن رؤية انفصال الشبكية على شكل قمع. القسم قريب فقط من القرنية المحيطية (السهم) ولكن هذا يكفي أيضا للتحليل. (ه) إزالة الكالوت السفلي (لاحظ القرنية المحيطية على القسم ، السهم) ينتج عن قسم العصب البصري المقصود للبؤبؤ. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 6: أقسام PO والكالوت. (أ) قسم PO ، (ب) متفوق ، و (ج) كالوت أدنى. يتم تمييز pars plicata للجسم الهدبي بواسطة الأسهم في B و C. لا يلزم معالجة Calottes التي لا تحتوي على تفاصيل ذات صلة سريريا ويتم أرشفتها بدلا من ذلك. الاختصار: PO = العصب البصري للتلميذ. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 7: عيون الجنين والميكروفثالم. (أ) عين الجنين العادية ، 21 أسبوعا من الحمل و 10 مم في قطر AP. (ب) يكشف الدفع برفق بالملقط عن الشريان الهدبي الخلفي الطويل (رؤوس الأسهم) ، مما يشير إلى خط الزوال الأفقي. (ج) بعد التقسيم ، يمكن فحص الهياكل داخل العين بما في ذلك الشريان الهيالويدي (السهم). (د) العين المجهرية من شخص بالغ. يتم تمييز القرنية بسهم. (ه) تم تقسيم الكرات الأرضية إلى قسمين؛ لا يمكن تحديد الشريان الهدبي الخلفي الطويل. اختصار: AP = الأمامي الخلفي. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 8: شق إكليلي. يكون الشق الإكليلي مفيدا إذا كان التصوير بعد الوفاة لقاع العين مقصودا. أثناء الإضاءة، يمكن تحديد البارس بلانا للجسم الهدبي على أنه هيكل دائري يشبه النطاق. (أ) باستخدام مشرط ، يتم إجراء شق دائري في منطقة بارس بلانا (الخط المنقط) وإزالة الجزء الأمامي. (ب) يمكن توثيق وتصوير الشبكية والعصب البصري. (ج) ثم يتم فحص الجزء الأمامي بشكل منفصل. (د) القسم الأفقي مع الجزء الأمامي الذي تمت إزالته. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل التكميلي S1: وحدة مجهر تشريح. وحدة عمل مع مجهر جراحة العيون المهملة. (أ) أنبوب LED (سهم) والمعدات اللازمة للتجميع والتقسيم. المواد المطلوبة هي (ب) المسطرة ، مسطرة الفرجار ، الملقط ، و (ج) شفرات الحلاقة الدقيقة / الحلاقة. لتقسيم الكرات الأرضية البالغة ، يوصى باستخدام شفرات ميكروتوم (يمين) ؛ بالنسبة لعيون الجنين أو عينات العين الأخرى ، تكفي شفرات الحلاقة (على اليسار). (د) تشريح المجهر بكاميرا متصلة لتوثيق العينة. الرجاء النقر هنا لتنزيل هذا الملف.
المناقشة
يهدف هذا البروتوكول إلى توحيد الفحص الإجمالي لكرات العين غير الورمية. تركز المبادئ التوجيهية الإجمالية في الأدبيات بشكل أساسي على العيون المصابة بورم داخل العين24،25. تم العثور على بروتوكولات التقسيم ذات الصلة على موقع الأكاديمية الأمريكية لطب العيون26 ، وفي مواقع الجامعات المختلفة ، وعلى موقع الكلية الأمريكية لأخصائيي علم الأمراض ، وكذلك في الكتب المدرسية لأمراض العيون7،10. هناك أيضا بروتوكولات محددة لأغراض البحث ، على سبيل المثال ، مضان الألواح الخفيفة لالأوعية الدموية العينية27،28،29.
على حد علمنا ، لا يوجد توجيه منشور للإجمالي المنهجي للكرات الأرضية غير السرطانية المنزوى. والجدير بالذكر أن إرشاداتنا تهدف إلى تعزيز تقييم عينات الاستئصال ، والتي تختلف عن عيون الورم في أن التركيز الرئيسي للتحقيق قد لا يكون محددا مسبقا. علاوة على ذلك ، عادة ما يكون للعيون غير السرطانية تاريخ طويل في العين ، بما في ذلك الجراحة ، مع تغيرات متعددة داخل العين توضح الفيزيولوجيا المرضية لأمراض العين والتئام الجروح. لا يسمح الأحشاء - تتم إزالة الهياكل داخل العين بينما تبقى الصلبة والعصب البصري في المريض - بتحديد موقع دقيق لنتائج العين.
في الحالات التي يكون فيها الاستئصال مطلوبا لمؤشرات أخرى غير الورم ، فشلت جميع خيارات العلاج الأخرى المتاحة وعادة ما يبلغ المرضى عن عين عمياء ومؤلمة بسبب الجلوكوما الثانوية (على سبيل المثال ، بعد اعتلال الشبكية السكري التكاثري أو انسداد الوريد الشبكي المركزي) ، أو صدمة العين الشديدة ، أو أمراض القرنية المثقبة غير المنضبطة ، أو جراحة انفصال الشبكية المحبطة (التي أصبحت نادرة بسبب تقنيات جراحة الشبكية المحسنة). نظرا لأن طب العيون هو تخصص جراحي عالي التخصص ، فهناك العديد من الخيارات للحفاظ على رؤية المرضى أو على الأقل إبقاء العين في حالة غير مؤلمة والأسباب المذكورة أعلاه للاستئصال نادرة لحسن الحظ. لذلك ، فإن العديد من المرضى الذين يخضعون لعملية الاستئصال لديهم تاريخ من التدخلات الجراحية المتعددة مثل رأب القرنية أو خفض الضغط أو جراحة الشبكية. يعد تتبع تاريخ المريض ، والذي لا يتم ذكره دائما بالتفصيل في نموذج طلب علم الأمراض ، أمرا بالغ الأهمية لاتخاذ قرار بشأن كيفية تقسيم العين.
يعمل الفحص الشامل لعينات الاستئصال على تحسين رعاية المرضى من خلال فهم أفضل لحالات العين الشديدة التي يمكن أن تؤدي إلى هذا الإجراء الجراحي النهائي. يعزز الإجمالي الكافي أيضا العلاقة بين التصوير متعدد الوسائط والنتائج النسيجية ، كما هو موضح في Eagle21. علاوة على ذلك ، فإن الفحص الإجمالي للكرات الأرضية له قيمة تعليمية كبيرة ، لأنه يساعد الطلاب والمقيمين على فهم مدى تعقيد ومدى أمراض العين المختلفة والآثار المترتبة على التدخلات الجراحية بشكل أفضل.
بالنسبة لعيون الجنين ، يساعد الفحص الموحد في التشخيص المورفولوجي الدقيق لتشوهات العين. جنبا إلى جنب مع النتائج الأخرى التي تم الحصول عليها أثناء تشريح جثة الجنين ، فإنه غالبا ما يسمح بتصنيف دقيق للمتلازمة وبالتالي تحسين الاستشارة الوراثية للوالدين فيما يتعلق بخطر التكرار في حالات الحمل اللاحقة.
يعد الوضع الصحيح للعينة خطوة حاسمة في تطبيق هذا البروتوكول. يمكن أن يؤدي الخطأ في هذه المرحلة من الفحص إلى الإضرار بوصف النتائج وتوطينها ، مما يؤدي إلى تقرير غير صحيح. أحد العوامل الرئيسية المقيدة لهذه الطريقة هو الحفاظ على الكرة الأرضية. قد تظهر على العينة التي تترك بدون الفورمالين لعدة ساعات علامات التحلل الذاتي ، مما قد يضر بالتقييم النسيجي المرضي ، بما في ذلك التلوين الكيميائي المناعي1. علاوة على ذلك ، فإن التشوهات المعمارية ، التي غالبا ما توجد في العيون الوهائية ، قد تجعل من الصعب وضع الكرة الأرضية بشكل صحيح وعمل شق دقيق ومتماثل. للتغلب على هذا ، ابحث عن الهياكل التشريحية الرئيسية.
في الختام ، نقترح بروتوكولا منهجيا لفحص شامل للعيون المنزوع ، يهدف إلى تحسين رعاية المرضى من خلال تحسين دقة التشخيص وتوفير الفرص التعليمية. يركز نهجنا على التحديد الصحيح للهياكل التشريحية والتوجه المكاني للعينة ، مما يضمن التقييم الصحيح والتوثيق للتغيرات المرضية. يجب تنفيذ توحيد الفحص الإجمالي للكرات الأرضية غير الورمية في مختبرات علم الأمراض لتحسين أمراض العيون الوصفية والتشخيصية للأغراض السريرية والتعليمية ودعم الدراسات المستقبلية حول الارتباطات السريرية المرضية.
الإفصاحات
مارتينا سي هيرويج كارل هي المؤلفة المشاركة لكتاب "أمراض عيون الجنين وحديثي الولادة" ، Springer 2020. سكرتير الجمعية الدولية لأمراض العيون (ISOP) ؛ عضو في لجنة قسم "أمراض العيون" في الجمعية الألمانية لطب العيون (DOG) ؛ عضو في "لجنة برنامج الاجتماع السنوي" للجمعية لقسم "علم أمراض التشريح (AP)". فرانك جي هولز: أكوسيلا (C ، F ، R) ، ALCON (C ، F ، R) ، Alexion ، Apellis (C ، R) ، شركة Allergan / AbbVie (F ، R) ، باير (C ، F ، R) ، BOEHRINGER INGELHEIM (C) ، CENTERVue (F) ، Ellex (R) ، Genentech / Roche (C ، F ، R) ، GEUDER (C) ، Grayburg Vision (C ، R) ، Kanghong (C ، F) ، Heidelberg Engineering (C ، F ، R) ، LIN BIOSCIENCE (C ، R) ، NightStarX (F) ، نوفارتيس (C ، F ، R) ، أوبتوس (F) ، أوكسوريون (C ، R) ، Pixium Vision (C ، F ، R) ، STEALTH BIOTHERAPEUTICS (C ، R) ، Zeiss (F ، R). المؤلفون الآخرون ليس لديهم تضارب في المصالح للإعلان عنهم. [ج: خبير استشاري؛ و: الدعم المالي؛ R: المستلم]
شكر وتقدير
ودعم هذا العمل صندوق النشر المفتوح لجامعة بون.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| مسطرة الفرجار | ماوسير | خارج السوق | INOX Messchieber 0-200 مم |
| تشريح المجهر أو مجهر جراحة العيون المهمل | م ö ller Wedel | خارج السوق | |
| ملقط | العلوم الجميلة | 11203-23 | إس إس إينوكس |
| هيستوبوند | مارينفيلد ، ألمانيا | DIN ISO 8037-1 | الشرائح المطلية |
| أنبوب LED للإضاءة في غرفة مظلمة | شوت ، ماينز | خارج السوق | كاللر150 |
| شفرة ميكروتوم | شفرات ميكروتوم من الريش | غير متاح | نوع A35 |
المراجع
- Torczynski, E. Preparation of ocular specimens for histopathologic examination. Ophthalmology. 88 (12), 1367-1371 (1981).
- Atreya, A., Ateriya, N., Menezes, R. G. The eye in forensic practice: In the dead. Med Leg J. , (2024).
- Herwig-Carl, M. C., Holz, F. G., Löffler, K. U. Die Geschichte eines Auges – Untersuchung enukleierter Bulbi. Der Ophthalmologe. 117 (12), 1171-1179 (2020).
- Herwig-Carl, M. C., Holz, F., Löffler, K. U. Endophthalmitis aus ophthalmopathologischer Sicht. Klin Monbl Augenheilkd. 239 (7), 867-875 (2022).
- Herwig-Carl, M. C., Loeffler, K. U., Müller, A. M. Bedeutung der Untersuchung fetaler Augen : Ergänzung der Fetobduktion. Pathologe. 38 (4), 231-240 (2017).
- Herwig, M. C., Müller, A. M., Holz, F. G., Loeffler, K. U. Analyse eines ophthalmopathologischen Kollektivs humaner fetaler Augen unter besonderer Berücksichtigung außergewöhnlicher Befunde. Der Ophthalmologe. 107 (11), 1051-1058 (2010).
- Verdijk, R. M., Herwig-Carl, M. C. Fetal and Neonatal Eye Pathology. , Springer International Publishing. Cham. (2020).
- Breazzano, M. P., Unkrich, K. H., Barker-Griffith, A. E. Clinicopathological findings in abusive head trauma: analysis of 110 infant autopsy eyes. Am J Ophthalmol. 158 (6), 1146-1154.e2 (2014).
- Watts, P., et al. Abusive head trauma and the eye in infants and children - clinical guideline update by the royal college of ophthalmologists and the royal college of paediatrics and child health: executive summary. Eye (Lond). 38 (10), 1783-1786 (2024).
- Spencer, W. H. Ophthalmic pathology: An atlas and textbook. , Saunders. Philadelphia, PA. (1985).
- Khoshakhlagh, A. H., Mohammadzadeh, M., Sicard, P., Bamel, U. Human exposure to formaldehyde and health risk assessment: a 46-year systematic literature review. Environ Geochem Health. 46 (6), 206(2024).
- Protano, C., et al. The carcinogenic effects of formaldehyde occupational exposure: A systematic review. Cancers. 14 (1), 165(2021).
- Duong, A., Steinmaus, C., McHale, C. M., Vaughan, C. P., Zhang, L. Reproductive and developmental toxicity of formaldehyde: a systematic review. Mutat Res. 728 (3), 118-138 (2011).
- Ang, J. L., Collis, S., Dhillon, B., Cackett, P. The eye in forensic medicine: A narrative review. Asia Pac J Ophthalmol (Phila). 10 (5), 486-494 (2021).
- Gilliland, M. G. F., et al. Guidelines for postmortem protocol for ocular investigation of sudden unexplained infant death and suspected physical child abuse. Am J Forensic Med Pathol. 28 (4), 323-329 (2007).
- Bhardwaj, G., et al. A systematic review of the diagnostic accuracy of ocular signs in pediatric abusive head trauma. Ophthalmology. 117 (5), 983-992.e17 (2010).
- Herwig, M. C., Müller, A. M., Kuchelmeister, K., Loeffler, K. U. Pre- and intraretinal haemorrhages in a 22-week-old fetus of a mother suffering from HELLP syndrome and factor V Leiden mutation with deep vein thrombosis. Acta. 95 (1), e83-e84 (2017).
- Thau, A., et al. Retinal hemorrhage and bleeding disorders in children: A review. Child abuse Negl. 112, 104901(2021).
- Mattheij, M., et al. Retinal haemorrhages in a university hospital: not always abusive head injury. Acta Neurol Belg. 117 (2), 515-522 (2017).
- Maguire, S. A., et al. Retinal haemorrhages and related findings in abusive and non-abusive head trauma: a systematic review. Eye (London). 27 (1), 28-36 (2013).
- Eagle, R. C. Optical coherence tomography: Clinicopathologic correlations - The 2016 Gordon K. Klintworth lecture. Ocul Oncol Pathol. 4 (4), 203-212 (2018).
- Stockinger, P., et al. Vergleichende In-vivo-/Ex-vivo-Bildgebung des hinteren Augenabschnitts - Version. Der Ophthalmologe. 118 (Suppl 2), 153-159 (2021).
- Agarwal, M., et al. Sympathetic ophthalmia - An Overview. Ocul Immunol Inflamm. 31 (4), 793-809 (2023).
- Albert, D., Syed, N. Protocol for the examination of specimens from patients with uveal melanoma: a basis for checklists. Arch Pathol Lab Med. 125 (9), 1177-1182 (2001).
- Albert, D., Syed, N. Protocol for the examination of specimens from patients with retinoblastoma: a basis for checklists. Arch Pathol Lab Med. 125 (9), 1183-1188 (2001).
- American Academy of Ophthalmology (AAO). , https://www.aao.org/education/image/gross-dissection-of-globe (2025).
- Lu, W., et al. Corrigendum to 'Recent progress in optical clearing of eye tissues' Exp. Eye Res (Nov; 2021) 212 108796. Exp Eye Res. 214, 108896(2022).
- Lu, W., et al. Recent progress in optical clearing of eye tissues. Exp Eye Res. 212, 108796(2021).
- Darche, M., et al. Three-dimensional characterization of developing and adult ocular vasculature in mice using in toto clearing. Commun Biol. 5 (1), 1135(2022).
إعادة الطباعة والأذونات
