دراسة ملامح الترميز للتحفيز الجسدي على الاستجابات العصبية المقفلة بالقلب في القرن الظهري الشوكي للفئران

يعمل الوخز بالإبر أو تحفيز سطح الجسم ، كتقنية علاجية بارزة في إطار الطب الصيني التقليدي (TCM) ، عن طريق تحفيز مناطق معينة على سطح الجسم. يسهل التنظيم متعدد المستويات لوظائف الكائن الحي من خلال تنظيم الوظائف الحشوية عبر المسارات الواردة ، والتكامل المركزي ، والآليات العصبية الصادرة اللاإرادية. من الأمور الأساسية لهذا العلاج مفهوم أن التحفيز المستهدف لنقاط الوخز المحددة تشريحيا يحفز التنظيم الفسيولوجي الجهازي. تدعم الأدلة السريرية المتزايدة دور الوخز بالإبر كطريقة تكميلية في إدارة اضطرابات القلب والأوعية الدموية ، مع فعالية مثبتة في كل من بروتوكولات الوقاية الأولية والعلاج المساعد^1،2.

تنتهي الوافدات الأولية للخلايا العصبية الحسية في الغالب في القرن الظهري الشوكي (SDH) ، وفي المقابل ، تلعب الخلايا العصبية للقرن الظهري الشوكي (SDHNs) دورا مهما في تكامل وتعديل المدخلات الجسدية^3،4،5. علاوة على ذلك ، تتلقى SDHRNs أيضا الوافدين القلبيين وتنقل المعلومات الحشوية إلى الخلايا العصبية السابقة للعقدة الودية للنخاع الشوكي (SPNs) لتعديل القلب والأوعية الدموية⁶. تقع SPNs المقفلة بالقلب في الزاوية الجانبية للجزء الصدري من الحبل الشوكي (T1-T5) ، مع محاور بارزة على العقد العنقية أو الصدرية وبالتالي تعصيب القلب عبر الأعصاب القلبية والوسطى والسفلية. نتيجة لذلك ، يلعب الحبل الشوكي الصدري دورا مهما في تكامل وتعديل المدخلات الجسدية والحشوية ، والتي قد تؤثر بعد ذلك على التحكم في القلب. لذلك من المهم فهم كيف ينظم التحفيز الجسدي وظيفة القلب من خلال تعديل SDHRNs في الجزء الصدري من الحبل الشوكي.

أظهرت الدراسات السابقة أن الوخز بالإبر الكهربائية في PC6 (المنظم في الجزء الشوكي T3 كوحدة بنية ووظيفة متجانسة) يمكن أن يخفف من أعراض نقص تروية عضلة القلب من خلال تعديل الجهاز العصبي اللاإرادي^7،8،9. ومع ذلك ، فإن التزامن الكمي في الوقت الفعلي لتأثيرات الوخز بالإبر على معدل ضربات القلب مع نشاط الجهاز العصبي لم يتحقق بعد. تم توثيق مؤشرات النشاط العصبي اللاإرادي الفوري ومخطط كهربية القلب (ECG) فقط بعد الوخز بالإبر. لا تزال الأبحاث التي تربط SDHNs بالوظائف الفسيولوجية الحشوية نادرة. نظرا للانحناء الفسيولوجي للفقرات الصدرية والمسافة الضيقة بين الأجزاء الفقرية الصدرية المجاورة ، وخاصة T1-T5 ، فإن الوصول إلى هذه المناطق يمثل تحديا ، مما يؤدي إلى أدلة مباشرة ضئيلة لتوضيح آليات العمود الفقري الكامنة وراء الوخز بالإبر في نقطة الوخز بالإبر المتجانسة للعمود الفقري T3 PC6 التي تنظم وظيفة القلب في علاج الأمراض القلبية الوعائية.

لفهم العلاقة بين SDH وتنظيم وظائف القلب بوساطة الوخز بالإبر بشكل أفضل ، يجب تنفيذ التسجيل المتزامن لوظائف القلب والأنشطة العصبية. هنا ، سوف نقدم نهجا عاما للتسجيل خارج الخلية متعددة القنوات في العمود الفقري جنبا إلى جنب مع تسجيل وظائف القلب بالإضافة إلى تحليل SDHRNs المقفلة بالقلب. توفر هذه الطريقة إطارا متزامنا زمنيا لدراسة آليات العمود الفقري الكامنة وراء التغيرات الوظيفية الصدرية الحشوية الناجمة عن الوخز بالإبر.

التزم بروتوكول التجارب على بشكل صارم بمتطلبات المعيار الوطني "المبادئ التوجيهية للمراجعة الأخلاقية لرعاية المختبر" (GB / T 35892-2018) وتمت الموافقة عليه من قبل لجنة الأخلاقيات التابعة للمؤسسة. تم استخدام ذكور فئران Sprague-Dawley (SD) من درجة SPF ، تتراوح أعمارهم بين 6-8 أسابيع ووزنها حوالي 220 جراما ، في هذه الدراسة. تم ارتداء عباءات المختبر والقفازات والأقنعة خلال جميع التجارب. تفاصيل الكواشف والمعدات المستخدمة مدرجة في جدول المواد. في نهاية التجربة ، تم القتل الرحيم للفئران عن طريق التروية القلبية تحت التخدير العميق متبوعا بخلع عنق الرحم.

1. إعداد ما قبل الجراحة

1. قم بتوصيل دائرة جهاز التنفس الصناعي بأنبوب القصبة الهوائية على شكل حرف Y ، مما يضمن واجهة آمنة ومحكمة الإغلاق.
2. تحقق من التهوية المناسبة عن طريق التأكد من تدفق الهواء المستقر وحجم المد والجزر المناسب وإعدادات معدل التنفس على شاشة جهاز التنفس الصناعي.
3. تأكد من عدم وجود ملوثات مكثفة أو جسيمات داخل الأنبوب من خلال فحص جميع الأجزاء بصريا تحت الإضاءة الساطعة.
4. قم بتغذية إشارات تخطيط القلب المضخمة في نفس الوقت في كل من مدخلات مخطط كهربية القلب ومنفذ الإدخال التناظري لنظام تسجيل مصفوفة الأقطاب الكهربائية الدقيقة باستخدام موصل BNC ثلاثي الاتجاهات.
5. قم بتوجيه الإشارات المضخمة من خلال مقسم BNC ثلاثي الاتجاهات لتوصيل المدخلات التناظرية لمخطط كهربية القلب ومنفذ الإدخال التناظري لنظام تسجيل المصفوفة الكهربائية الدقيقة في وقت واحد.
6. قم بإنشاء مشغلات التزامن عن طريق توصيل إخراج TTL لمخطط كهربية القلب بالإدخال الرقمي لنظام تسجيل مصفوفة الأقطاب الكهربائية الدقيقة. باستخدام كبل واجهة BNC إلى Dupont ، ابدأ الاستحواذ المتزامن على كلا النظامين ، والتحقق من المحاذاة الزمنية.

2. التحضير قبل الجراحة

1. التخدير
   1. تحفيز التخدير بنسبة 3-5٪ من الأيزوفلوران عن طريق الاستنشاق ثم إعطاء حقنة داخل الصفاق من البنتوباربيتال الصوديوم (50 مجم / كغ) للفأر المخدر. قم بإعطاء الأيزوفلوران للتخدير بالاستنشاق قبل وضع الأقطاب الكهربائية ، مع الحفاظ على تركيز ~ 1.2٪. المضي قدما فقط إذا قمت بتقييم عمق التخدير عن طريق قرصة إصبع القدم قبل المتابعة.
   2. قم بإزالة الشعر من الرقبة الأمامية والخلفية للفئران.
   3. ضع الجرذ في وضع ضعيف على بطانية دافئة وضع مرهما على عيون الفئران لمنع الجفاف. راقب معدل التنفس وتحقق من استجابات الانسحاب عن طريق الضغط على وسادة القدم بالملقط.

3. التنبيب الرغامي

1. ضع الفئران في وضع ضعيف وقم بتطهير منطقة الرقبة بصبغة اليود.
2. قم بإجراء شق طولي يبلغ حوالي 1 سم على طول خط الوسط للرقبة وتشريح الأنسجة العضلية بصراحة
3. بمجرد تعرض الغدة الدرقية ، افصل الغشاء الرقيق بعناية بين فصين من الغدة الدرقية ، مع الحرص على عدم إتلاف أنسجة الغدة الدرقية. تابع لفضح القصبة الهوائية.
4. افحص "القنية على شكل حرف Y للتأكد من أنها جافة تماما. استخدم مقص زنبركي لعمل شق عرضي في القصبة الهوائية ، متبوعا بإدخال القنية في فتحة القصبة الهوائية. قم بتأمين قنية القصبة الهوائية ب 3-0 خيوط غير قابلة للامتصاص لمنع تسرب الهواء ونزع الأنبوب العرضي.
5. قم بخياطة عضلات الرقبة والجلد بعناية وقم بتوصيل الفئران بجهاز التنفس الصناعي. اضبط معدل التنفس على 85 نفسا / دقيقة وحجم المد والجزر إلى 3.5 مل ، وفقا لوزن جسم الفئران⁷ (الشكل 1 ب).

4. كشف تخطيط القلب

1. أدخل ثلاثة أقطاب كهربائية في جلد الفئران: القطب الموجب في الطرف السفلي الأيسر ، والقطب السالب في الطرف العلوي الأيمن ، والقطب الأرضي في الطرف السفلي الأيمن¹⁰.
2. الحصول على البيانات باستخدام مخطط كهربية القلب (إعدادات المرشح: تمرير منخفض عند 100 هرتز، تمرير عالي عند 1 كيلو هرتز؛ تردد أخذ العينات: 4 كيلو هرتز / ثانية). استخدم برنامج تسجيل تخطيط القلب لتسجيل البيانات وحفظها وتحليلها.

5. قسطرة التامور لإعطاء الدواء براديكينين (BK)

1. ضع الجرذ في وضع ضعيف وقم بتطهير الجلد على الصدر باليود.
2. إجراء بضع الصدر بين الغضاريف الساحلية 1 و 3 في الجزء العلوي الأيسر من الصدر لفضح الغدة الصعترية. قم بتشريح الغدة الصعترية بصراحة على طول خط الوسط لفضح التامور (انظر الشكل 1 ج ، د).
3. استخدم طرف إبرة تشريح زجاجية (قطرها 0.5 مم) لعمل فتحة صغيرة في التامور.
4. أدخل قسطرة سيليكون بطول 10-15 سم مع عدة ثقوب صغيرة في نهايته البعيدة من خلال شق في التامور. ثبت القسطرة في أنسجة جدار الصدر باستخدام الغراء الحيوي.
5. أغلق تجويف الصدر طبقة تلو الأخرى ، مع التأكد من بقاء تنفس الفئران دون عائق (انظر الشكل 1 د).

6. التعرض للحبل الشوكي T3

1. ضع الفئران في وضع الانبطاح وقم بالتطهير الروتيني باليود. قم بعمل شق بطول 8 سم تقريبا على طول خط الوسط للظهر من الفقرات T2 إلى T6.
2. استخدم مقص زنبركي لقطع طبقات الجلد والعضلات ، بما في ذلك العضلة شبه المنحرفة. أدخل ضام بين العضلات لكشف المجال الجراحي بشكل أكبر.
3. افصل بعناية الغدد الدهنية والسبات في الجانب الأمامي من الفقرات الصدرية للفئران ، وتجنب الأوعية الدموية الموجودة أسفل الغدد (انظر الشكل 1 ه).
4. قم بإزالة العضلات المرتبطة بمشبك الرأس والجزء المستقيم من عضلات الرقبة الطويلة ، مما يكشف عن العمليات الشائكة ل T2.
5. قم بإزاحة عضلات العمود الفقري والعمود الفقري لفضح القوس الفقري من T2 إلى T6 (انظر الشكل 1E). استخدم rongeurs لإزالة العملية الشائكة للفقرة T3 ، وبالتالي تعريض الحبل الشوكي T3.
   ملاحظة: أثناء عملية تعريض الفقرات الصدرية ، تأكد من إيلاء اهتمام خاص للحفاظ على العملية الشائكة ل T2 ، لأنها بمثابة النقطة الأساسية لتطبيق القوة للتعرض اللاحق للحبل الشوكي T3.
6. قم بإزالة الأم الجافية والغشاء العنكبوتي ، وقم بتقطير زيت البارافين على سطح الحبل الشوكي للحفاظ على صلاحية الخلايا العصبية الشوكية (انظر الشكل 1F).
   ملاحظة: تنشأ الأوعية الدموية للأنسجة الدهنية البنية للفئران في الصفيحة T3 أو T4 أو T5 وتتوزع مثل الجيوب الأنفية الوريدية. احرص على عدم لمسها ، فقد يتسبب ذلك في فقدان الدم المفرط في الفئران.

7. تثبيت الفقرات الصدرية والإعدادات

1. استخدم مشبك العمود الفقري المخصص لتأمين العمليات المفصلية ل T2 و T6. بلل العضلات المحيطة بالمحلول الملحي للحفاظ على الترطيب.
2. قم بتوصيل مصفوفة الأقطاب الكهربائية بأداة مجسمة وقم بإدخالها عموديا في القرن الظهري للحبل الشوكي في الجزء الشوكي T3 من خلال التلم المتوسط الظهري ، 500 ميكرومتر جانبيا إلى خط الوسط ، على عمق 1,500 ميكرومتر.
3. أدخل القطب المرجعي في عضلة الظهر (انظر الشكل 1G).
4. قم بتشغيل برنامج التسجيل متعدد القنوات خارج الخلية وانتقل إلى ملف | تكوين الأجهزة حدد مصفوفة 32 قناة من قائمة واجهة الجهاز ؛ انقر بزر الماوس الأيمن على مجموعة القنوات المحددة ؛ ثم اختر خصائص من قائمة السياق . تكوين معلمات معالجة الإشارة: ضمن علامة التبويب عامل التصفية ، اضبط مرشاح ممر النطاق (BP) على 250 هرتز - 5 كيلو هرتز؛ في حقل معدل أخذ العينات ، أدخل kHz/s 30؛ قم بتمكين خوارزميات الكشف عن السنبلة عن طريق تحديد المربع المسمى تمكين معالجة سبايك لتنشيط فرز الارتفاع في الوقت الفعلي واستخراج الأحداث المستندة إلى العتبة.
   ملاحظة: تأكد من إزالة شاملة للعضلات والأنسجة المحيطة بالعمليات المفصلية ل T2 و T6 ، خاصة في المنطقة التي يتم فيها تطبيق المشبك الشوكي المخصص لتثبيت العمود الفقري ، لمنع النزوح أثناء التجارب اللاحقة.

8. المحفزات الجسدية و BK

1. استخدم BK (1 ميكروغرام / مل في الماء المقطر) للحث على تحفيز الألم القلبي. حقن 4 ميكرولتر من محلول BK بحقنة دقيقة متصلة بقسطرة سيليكون بعدة فتحات صغيرة¹¹.
2. مراقبة تغيرات معدل ضربات القلب (زيادة أو نقصان) والإفراز العصبي (زيادة أو نقصان) في القرن الظهري للحبل الشوكي T3 في غضون 30 دقيقة من الحقن لتحديد التفاعلات الديناميكية بين الخلايا العصبية للقرن الظهري في الحبل الشوكي الصدري.
3. إجراء الوخز بالإبر اليدوي عند نقطة الوخز بالإبر PC6 (MAPC6) باستخدام معلمة التحفيز 1 هرتز. يقع PC6 (نقطة الوخز بالإبر Neiguan) على بعد 2 مم من المفصل الرسغي على الساعد البطني ، بين العضلات الرأسية المثنية وجذع العصب المتوسط. أدخل الإبر (0.25 مم × 25 مم) في نقاط الوخز بالإبر PC6 على عمق ~ 3 مم. قارن بين التغيرات في النشاط العصبي ووظيفة القلب قبل وبعد المحفزات الجسدية.

9. تحليل البيانات ومعالجتها

1. قم باستيراد البيانات العصبية المسجلة بتنسيق ns6 إلى البرنامج التالي:
   1. تحويل الملفات: انتقل إلى ملف | افتح لتحميل ملف ns6. حدد ملف | حفظ باسم واختر تنسيق .nex5 لإنشاء بيانات قطار سبايك قياسية.
   2. فرز سبايك: قم باستيراد ملفات .nex5 المحولة إلى برنامج التصنيف لتصنيف الخلايا العصبية. فرز أشكال موجات الارتفاع بناء على خصائص شكل الموجة وتحليل المكون الرئيسي (PCA) ، مع تعيين معلمات العتبة عند ±3 SD من ضوضاء خط الأساس.
   3. بعد ذلك ، قم بتنفيذ التعليمات البرمجية ذات الصلة لتصفية الإشارات وتصنيفها.
2. تحليل SDRNs المقفلة بالقلب.
   1. مع أخذ الموجة R كحدث مرجعي ، احسب عدد عمليات إطلاق الخلايا العصبية خلال نافذة 0.2 ثانية قبل وبعد كل موجة R.
   2. بعد حساب موجات R على فترات 50 مللي ثانية ، قم بإنشاء رسم بياني لحدث الحلقة. تطبيع الرسم البياني (أي طرح متوسط معدل التفريغ في 0.2 ثانية قبل وبعد حدث الموجة R) للحصول على توزيع معدل التفريغ لنشاط كل خلية عصبية أثناء ضربات القلب.
   3. تقييم الدلالة الإحصائية من خلال اختبار التقليب مونت كارلو¹² ، الذي تم تنفيذه مع 1,000 تكرار مختلط. احصل على توزيع معدل إطلاق النار وفاصل الثقة للخلايا العصبية في عملية ضربات القلب العشوائية عن طريق التوزيع العشوائي 0.2 ثانية من الوقت قبل وبعد كل موجة من ضربات القلب R (النطاق ± 0.1 ثانية). إذا تجاوز توزيع إطلاق ضربات قلب الخلية العصبية (أكبر من أو أقل من) فاصل الثقة البالغ 95٪ لتوزيع معدل إطلاق النار لعملية ضربات القلب العشوائية ، فحدد الخلايا العصبية على أنها خلية عصبية مقفلة بالقلب (انظر الملف التكميلي 1).

باتباع البروتوكول أعلاه ، تم الكشف عن T3 SDHNs ، مع إعطاء براديكينين (BK) أو الوخز بالإبر الجسدية لمناطق التامور / الوخز بالإبر. حدد هذا التحقيق ملامح تنشيط الخلايا العصبية المنبهة (النوع / التردد) وتغيرات تخطيط القلب الكهربائي المتزامنة (ECG) أثناء المدخلات الحشوية المحسبة للألم ، وتطبيق BK ، والتعديل الحسي الجسدي.

يوضح الشكل 2 أ شريحة عرضية من الحبل الشوكي T3 للفئران. على الجانب الأيسر ، يوضح توزيع الصفائح المميزة. يعرض الجانب الأيمن مناطق برتقالية تمثل توزيع صبغة Dil بعد فترة حضانة مدتها 10 دقائق. تم لصق قطب مصفوفة ، مشرب بصبغة ديل ، على المعالج الدقيق لجهاز تجسيمي. ثم تم إدخال الأقطاب الكهربائية عموديا في القرن الظهري للحبل الشوكي ، 500 ميكرومتر جانبيا إلى التلم المتوسط الخلفي في الجزء T3 ، على عمق 1,500 ميكرومتر ، مع تعديلات العمق التي تم إجراؤها وفقا لوزن جسم الفئران. بعد فترة تسجيل مدتها 15 دقيقة ، تم إجراء التروية وجمع الأنسجة ، حيث سجلت الأقطاب الكهربائية إشارات من الصفيحة الأولى إلى الثامنة من الحبل الشوكي للفئران. يعرض الشكل 2B-D المخططات النقطية والأشكال الموجية وتحليل المكون الرئيسي (PCA) والارتباط الذاتي للخلايا العصبية المسجلة من القناة 19. يوضح الشكل 2F ، G بيانات مماثلة لثلاث خلايا عصبية مسجلة من القناة 11. تشير البيانات من هاتين القناتين إلى تصنيف واضح للخلايا العصبية ، مما يوفر بيانات أصلية لتحليل الارتباط اللاحق.

تظهر الأعمدة الزرقاء العدد التراكمي لتصريفات الخلايا العصبية خلال إطار زمني معين ، مطروحا بمتوسط القيمة. يوضح الشكل 3A تسجيل خط الأساس (BL) لمدة 60 ثانية. تظهر الخلايا العصبية في القناة 17c والقناة 21a وجود خلايا عصبية مقفلة بالقلب في T3 SDHNs ، مما يظهر تصريفات دورية مميزة استجابة لاختلافات تخطيط القلب. يوضح الشكل 3 ب تأثير تطبيق BK على التامور في الأذين الأيسر على T3 SDHNs ، جنبا إلى جنب مع مثال على الخلايا العصبية المقفلة بالقلب. أظهرت الخلايا العصبية للقناة 17c انخفاضا كبيرا في قفل القلب بعد إعطاء BK. كما هو موضح في المنطقة المظللة الخضراء في الشكل 3C ، بعد إدارة MAPC6 ، هناك مجموعة متسقة من الخلايا العصبية التي تظهر إطلاقا دوريا حول الموجة R في دورات إطلاق النار لكل من ظروف BL و MAPC6. هذا النمط أكثر انتظاما من إطلاق النار الذي لوحظ بعد تطبيق BK. في المقابل ، في الشكل 3D ، يكون نمط إطلاق الخلايا العصبية بعد MAPC6 أقل وضوحا. وبالتالي ، يمكن ل MAPC6 تحسين وتيرة إطلاق الخلايا العصبية المرتبطة بالقلب في القرنية الظهرية الشوكية T3 ، وبالتالي الحفاظ على وظيفة القلب في ظل الظروف المرضية. يوضح الشكل 3E ، F أن تردد تفريغ T3 SDHNs التي يتم تنشيطها بواسطة BK انخفض بعد تحفيز الوخز بالإبر لنقطة الوخز بالإبر PC6. على العكس من ذلك ، زادت نسبة تردد إطلاق النار للخلايا العصبية الشوكية T3 التي تم تثبيطها بواسطة BK بشكل كبير بعد تحفيز الوخز بالإبر لنقطة الوخز بالإبر PC6.

ومن المثير للاهتمام ، أن القناة 21a تم تحديدها على أنها خلية عصبية مقفلة بالقلب تظهر تصريفات دورية ومنتظمة على وجه التحديد استجابة للموجة P ، والتي تمثل بدء إزالة الاستقطاب الأذيني بواسطة العقدة الجيبية الأذينية (SA) ، والفاصل الزمني PR ، مما يشير إلى التأخير في العقدة الأذينية البطينية. على الرغم من عدم وجود تغيير كبير في الموجة P في مخطط كهربية القلب ، إلا أن تطبيق BK ينتج عنه تركيز ثلاث مجموعات من الخلايا العصبية بين كل موجة P و Q على مخطط كهربية القلب ، مما يدل على وجود علاقة أوثق مع الموجة P (كما هو موضح في المنطقة المظللة الأرجوانية في الشكل 3 ب). تعد الموجة P على مخطط كهربية القلب مؤشرا مهما يعكس طبيعية موجات الانكماش الأذيني ، وتمثل الموجة P الناتجة عن عقدة SA عملية إزالة الاستقطاب الأذيني ، وبالتالي تم التحقق من تأثير BK على الأذينين. ومع ذلك ، بعد إدارة MAPC6 ، كان هناك نمط مميز في إطلاق الخلايا العصبية فيما يتعلق بموجات R و T. بعد الوخز بالإبر ، عادت الخلايا العصبية إلى نمط عنقودي مرتبط بموجة P ، مما يشير إلى أن الوخز بالإبر يمكن أن يعالج أمراض القلب المرضية عن طريق تعديل إيقاع الخلايا العصبية الجسدية والحشوية في نفس الجزء من القرن الظهري الشوكي.

الشكل 1: الإجراء الجراحي ل T3 SDH. (أ) جهاز التنفس الصناعي. (ب) تنبيب القصبة الهوائية في الفئران. (ج) الغدة الصعترية وتشريح القلب. (د) أنبوب الغدة الصعترية في التامور. (ه) T2-8 فقرات صدرية بعد الإزالة. (و) النخاع الشوكي T3. (ز) مشابك الفقرات الشوكية المعدلة. (ح ، أنا) التثبيت الموضعي لمشبك العمود الفقري. (ي، ك) رسم تخطيطي للتحفيز الجسدي والحشوي. أثناء التسجيل ، كانت الفئران في أوضاع ضعيفة وانبطاح. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 2: تم تسجيل الخلايا العصبية للقرن الظهري الشوكي T3. (أ) التحقق من صحة وضع القطب: قسم الحبل الشوكي المستعرض يوضح مسار زرع مسبار السيليكون ذو 32 قناة. داخلي: أطلس الحبل الشوكي للفئران Paxinos المعدل مع حدود الصفيحة المعمارية الخلوية (I-X) متراكبة للتسجيل المكاني. تصور الرسوم البيانية القناة (B ، E) القناة 19 والقناة 11 النقطية والأشكال الموجية ، (D ، G) تجميع PCA ومخطط الكتلة ، و (C ، F) الارتباطات الذاتية. تظهر الأنماط المتماثلة مركزيا الموضحة في اللوحات C و F أنماط إطلاق النار المميزة للخلايا العصبية المسجلة على الخلايا العصبية في القناة 19 والقناة 11. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 3: تأثير تطبيق BK المحلي على التامور على T3 SDHNs ومثال على الخلايا العصبية المقفلة بالقلب. (أ) توضح الخلايا العصبية في القناة 17c والقناة 21a وجود الخلايا العصبية المقفلة بالقلب في T3 SDR. (ب) التغييرات في درجة القفل بعد إعطاء BK في غضون 30 دقيقة. (C ، D) مثال الخلايا العصبية المقفلة بالقلب MAPC6 لمدة دقيقة واحدة وبعد MAPC6 لمدة دقيقة واحدة. (E ، F) التغيير في نسبة التردد للخلايا العصبية التي تستجيب ل BK بعد MAPC6. تمثل أشرطة الخطأ متوسط ± التسويق عبر محرك البحث (N = 6). *< P 0.05 مقارنة ب BL. #P < 0.05 ، # #P < 0.01 ، مقارنة ب BK. تم استخدام اختبار t المزدوج. الاختصارات: BL = خط الأساس. BK = براديكينين. MAPC6 = الوخز بالإبر اليدوي في نيغوان (PC6). الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الملف التكميلي 1: تحليل نشاط الخلايا العصبية المقفلة بتخطيط القلب. في السطر 70: تعديل النطاقات الزمنية في الحالة = {[t1_start ، t1_end] ، [t2_start ، t2_end] ، ...}. ضبط تسميات المرحلة التجريبية في السطر 71: title: {'baseline','EA1','EA2'}; لتتماشى مع النطاقات الزمنية المحددة في الحالة. الرجاء النقر هنا لتنزيل هذا الملف.

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإعلان عنه.